【遗传学课件】第17章
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胰岛细胞、骨髓、酶移植
• 第二节 遗传病的基因治疗 • 一、基因治疗的概念和策略 • 基因治疗(gene therapy)：运用DNA重组技术设法
修复患者细胞中有缺陷的基因，使细胞恢复正常功能 而达到治疗遗传病的目的。
• 体外法、体内法 • 基因置换（基因原位替换）、基因修正（纠正突变碱
基）、基因修饰（基因补充）、基因失活（反义技术、 核酶技术、基因敲除技术）、免疫调节、自杀基因、 耐药基因
• 五、基因治疗的未来
米微粒介导法 • 生物学方法：
• 受体介导的基因转移、同源重组法 • （2）病毒载体介导的基因转移 • （五）转导细胞的筛选与鉴定 • （1）利用基因表达产物筛选法（选择性培养基） • 同时转染标记基因、正常基因导入基因缺陷型受体细
胞、目的基因和标记基因分别转染 • （2）运用分子生物学方法鉴定 • PCR （探针）原位杂交、Southern杂交和斑点杂交 • （六）外源基因的表达及检测 • 流式细胞仪、RT-PCR、Nouthern杂交、免疫组化
• （1）冠心病的基因治疗 VEGF基因 • （2）高血压的基因治疗 血管紧张素原mRNA的反义寡核苷酸 • （3）高脂血症的基因治疗 LDL-R基因 • （4）心肌及肢体缺血的基因治疗 VEGF基因 • （5）防治血栓形成的基因治疗 • （6）心功能不全的基因治疗
• （三）免疫缺陷病的基因治疗
• 四、基因治疗当前面临的问题 • （一）基因治疗运用到临床需要解决的问题 • （1）寻找更多可供利用的基因 • （2）设计定向高效的载体 • （3）导入基因的高效持续表达 • （4）导入基因表达的可控性 • （5）靶细胞的选择和细胞移植技术 • （6）获得性疾病和遗传性疾病的基因治疗，都需要更
理想的动物模型。 • （7）基因转Hale Waihona Puke Baidu中潜在的副作用和免疫反应
• （二）基因治疗在医学实践中进展仍较缓慢的原因
• 基础研究和临床试验的加强、长期安全性、有机体的 复杂性和内环境的自我调节、伦理道德
• （三）社会伦理问题 • 导入目的基因的长期弊端、插入宿主基因组的安全性、
造成社会对人类差异的低接受度、社会效益不公平
型疱疹病毒HSV • （2）非病毒载体 • 裸露DNA、脂质体载体、DNA阳离子多聚物载体、
多肽导向载体系统、人类人工染色体、嵌合载体
• （四）目的基因导入靶细胞的转移方法 • （1）非病毒载体介导的基因转移 • 物理方法： • DNA直接注射法、电穿孔法、微粒子轰击法 • 化学方法： • 磷酸钙沉淀法、DEAE-葡聚糖法、脂质体载体法、纳
• 二、基因治疗的基本程序
• （一）目的基因的选择和制备
• （二）靶细胞的选择 • 生殖细胞、体细胞 • 外周血T淋巴细胞、皮肤成纤维细胞、 • 造血干细胞、骨髓前体细胞 • （三）基因治疗的载体 • （1）病毒载体 • RNA病毒：反转录病毒RV 如Mo-MLV、慢病毒 如
HIV • DNA病毒：腺病毒AV、腺病毒相关病毒AAV、单纯
第十七章 遗传病的治疗 第一节 遗传病的常规治疗方法 一、外科手术矫正畸形 二、生化代谢水平的治疗 （1）饮食控制 禁其所忌 （2）补充疗法 补其所缺 （3）转移疗法 去其所余 （4）抑制疗法
直接抑制酶活性、竞争性抑制受体 （5）平衡清除法
清除血液底物使组织沉积物进入血液 三、器官移植（包含细胞、组织移植）
• 三、重要疾病的基因治疗 • （一）癌症的基因治疗
• （1）针对抑癌基因的治疗 p53基因 • （2）针对抗血管生成因子的治疗 血管内皮生长因子VEGF的抗
体 • （3）肿瘤免疫基因治疗 细胞因子基因 • （4）自杀基因治疗 HSV-tk基因编码胸苷激酶
药物GCV(TK基因表达)→细胞死亡
• （二）心血管疾病的基因治疗
• 第二节 遗传病的基因治疗 • 一、基因治疗的概念和策略 • 基因治疗(gene therapy)：运用DNA重组技术设法
修复患者细胞中有缺陷的基因，使细胞恢复正常功能 而达到治疗遗传病的目的。
• 体外法、体内法 • 基因置换（基因原位替换）、基因修正（纠正突变碱
基）、基因修饰（基因补充）、基因失活（反义技术、 核酶技术、基因敲除技术）、免疫调节、自杀基因、 耐药基因
• 五、基因治疗的未来
米微粒介导法 • 生物学方法：
• 受体介导的基因转移、同源重组法 • （2）病毒载体介导的基因转移 • （五）转导细胞的筛选与鉴定 • （1）利用基因表达产物筛选法（选择性培养基） • 同时转染标记基因、正常基因导入基因缺陷型受体细
胞、目的基因和标记基因分别转染 • （2）运用分子生物学方法鉴定 • PCR （探针）原位杂交、Southern杂交和斑点杂交 • （六）外源基因的表达及检测 • 流式细胞仪、RT-PCR、Nouthern杂交、免疫组化
• （1）冠心病的基因治疗 VEGF基因 • （2）高血压的基因治疗 血管紧张素原mRNA的反义寡核苷酸 • （3）高脂血症的基因治疗 LDL-R基因 • （4）心肌及肢体缺血的基因治疗 VEGF基因 • （5）防治血栓形成的基因治疗 • （6）心功能不全的基因治疗
• （三）免疫缺陷病的基因治疗
• 四、基因治疗当前面临的问题 • （一）基因治疗运用到临床需要解决的问题 • （1）寻找更多可供利用的基因 • （2）设计定向高效的载体 • （3）导入基因的高效持续表达 • （4）导入基因表达的可控性 • （5）靶细胞的选择和细胞移植技术 • （6）获得性疾病和遗传性疾病的基因治疗，都需要更
理想的动物模型。 • （7）基因转Hale Waihona Puke Baidu中潜在的副作用和免疫反应
• （二）基因治疗在医学实践中进展仍较缓慢的原因
• 基础研究和临床试验的加强、长期安全性、有机体的 复杂性和内环境的自我调节、伦理道德
• （三）社会伦理问题 • 导入目的基因的长期弊端、插入宿主基因组的安全性、
造成社会对人类差异的低接受度、社会效益不公平
型疱疹病毒HSV • （2）非病毒载体 • 裸露DNA、脂质体载体、DNA阳离子多聚物载体、
多肽导向载体系统、人类人工染色体、嵌合载体
• （四）目的基因导入靶细胞的转移方法 • （1）非病毒载体介导的基因转移 • 物理方法： • DNA直接注射法、电穿孔法、微粒子轰击法 • 化学方法： • 磷酸钙沉淀法、DEAE-葡聚糖法、脂质体载体法、纳
• 二、基因治疗的基本程序
• （一）目的基因的选择和制备
• （二）靶细胞的选择 • 生殖细胞、体细胞 • 外周血T淋巴细胞、皮肤成纤维细胞、 • 造血干细胞、骨髓前体细胞 • （三）基因治疗的载体 • （1）病毒载体 • RNA病毒：反转录病毒RV 如Mo-MLV、慢病毒 如
HIV • DNA病毒：腺病毒AV、腺病毒相关病毒AAV、单纯
第十七章 遗传病的治疗 第一节 遗传病的常规治疗方法 一、外科手术矫正畸形 二、生化代谢水平的治疗 （1）饮食控制 禁其所忌 （2）补充疗法 补其所缺 （3）转移疗法 去其所余 （4）抑制疗法
直接抑制酶活性、竞争性抑制受体 （5）平衡清除法
清除血液底物使组织沉积物进入血液 三、器官移植（包含细胞、组织移植）
• 三、重要疾病的基因治疗 • （一）癌症的基因治疗
• （1）针对抑癌基因的治疗 p53基因 • （2）针对抗血管生成因子的治疗 血管内皮生长因子VEGF的抗
体 • （3）肿瘤免疫基因治疗 细胞因子基因 • （4）自杀基因治疗 HSV-tk基因编码胸苷激酶
药物GCV(TK基因表达)→细胞死亡
• （二）心血管疾病的基因治疗