生物检测技术基本知识和基本技能

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八、试剂配制与保存
危险药物分类存放的原则及存放要求： ①易挥发药品：远离热源火源，于避光阴凉处保存，通风良好，
不能装满。 ②腐蚀性液体：放于底下，以免不慎跌下，洒出发生烫伤事故。 ③发生有毒气体或烟雾的药品：存于通风橱中，并在其中量取。 ④剧毒药品：锁上。 ⑤致癌药品：有致癌药品的明显标志，锁上。 ⑥互相作用的药品：隔离存放。 ⑦特别保存的物品：
生物检测涉及到生物化学技术、免 疫学技术、分子生物学和细胞生物学等 技术，这些技术大都用到很多有毒的、 易爆的、高温的及放射性的等化学试剂， 而且操作过程也十分严格，为了保证实 验过程中人身安全、仪器安全及实验结 果准确，因此需要学习这些基本知识和 技能。
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二、人员防护
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二、人员防护
1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着连体衣、 隔离服或工作服。
2、气瓶内气体不可用尽，以防倒灌。
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五、安全用气
3、高压灭菌锅使用注意事项： ⊙应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和
日常维护。 ⊙每次使用前，检查水位，加入蒸馏水到正常水位线。 ⊙在打开盖子前，确认压力已归于“0/npa”以下 。 ⊙所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具
有良好热渗透性的容器中；灭菌器柜腔装载要松散， 以便蒸汽可以均匀作用于装载物。 ⊙高压灭菌液体时，由于取出液体时可能因过热而沸 腾，一定要选择慢排气，且要小心，以防被烫伤。 ⊙应当注意保证高压灭菌器的安全阀没有被高压灭菌 物品中的纸等堵塞。
生物细菌毒素污染：生物实验室的通风设备设计不完善或实验过程个人 安全保护漏洞，会使生物细菌毒素扩散传播，带来 污染，甚至带来严重不良后果。
放射性污染：同位素标记探针
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六、实验室废液处理
化学类废物： 一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道，经
空气稀释排出。大量的有毒气体必须பைடு நூலகம்过与氧充分 燃烧或吸收处理后才能排放。
2、手上有水或潮湿，请勿接触电器用品或设备，严 禁使用水槽旁的电器插座，防止漏电或触电。
3、必须掌握实验室的仪器，设备的性能和操作方法， 严格按操作规程操作。设备用毕，一定要关闭电源 开关，拔掉电源插座。
4、电器插座请勿接太多插头，以免电流负荷过大， 引起火灾。
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五、安全用气
1、使用气瓶时，严格按照说明书上的正确顺 序打开，开启气门时应站在气压表的一侧， 不能对准总阀，以防阀门冲出，使用完毕， 按顺序关闭阀门。
金属钠、钾等碱金属，贮于煤油中。黄磷，贮于水中。 吸潮物、易水解物，贮于干燥处，封口应严密。易氧化易分 解物，存于阴凉暗处，用棕色瓶或瓶外包黑纸盛装。但双氧 水不要用棕色瓶（有铁质促使分解）装，最好用塑胶瓶装外 包黑纸。 ⑧放射性物品未经幅射物质管理部门批准，不得存放使用！
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九、实验记录与实验报告
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七、器材的清洗与使用
②塑料器材： 多为一次性使用的，也有反复使用的。
自来水浸泡冲洗→晾干→3%HCl或2%NaOH溶液浸泡过 夜→自来水冲洗→双蒸水冲洗3次→晾干→紫外线照射灭菌
③橡皮器材：
自来水浸泡冲洗→洗衣粉加热煮沸10min →蒸馏水煮沸2 次（每次15min）→单蒸水冲洗3次→晾干→紫外线照射灭 菌
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二、人员防护
12、除了高温以外，液氮、强酸、强碱、强氧化剂、 苯酚等物质都会灼伤皮肤，应注意不要接触，尤其 防止溅入眼中。
酸
5%NaHCO3
甘油
碱 大量水冲洗 饱和硼酸或3%醋酸 大量水冲洗
酚
用浸了甘油和酒精
饱和硫酸
混合液（7：3）的
钠溶液湿 敷
棉花除去污物
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二、人员防护
13、如果有毒物溅入口中，而没有下咽，应立即吐出，用大量 清水冲洗口腔。如吞下毒物应立即送医院。如吸入有毒气体， 应立即移至室外空气新鲜的地方，解开衣领，不能进行人工 呼吸。有毒试剂，如溴化乙锭，聚丙烯酰胺，具有致癌危险， 要戴手套和口罩操作。
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七、器材的清洗与使用
2、使用 常见的有：量筒、烧杯、试管、容量瓶、
培养皿、移液管、移液器、干燥箱、离心机、 天平、酶标仪、高压灭菌锅、超净工作台、 电泳仪、PCR仪、光学显微镜等。
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八、试剂配制与保存
1、称量 固体试剂用玻璃纸，在托盘天平和电子天平上
称取。 液体试剂或母液根据需求量的大小，用移液器、
移液管或量筒量取。 2、配制
试剂配制中的溶剂一般为蒸馏水，特殊试剂或 非水为溶剂的试剂要注明清楚。蒸馏水的水质必须 符合规定，无污染。
将水加入试剂，用玻璃棒或磁力搅拌，耐高温 稳定的试剂也可以加热助溶。
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八、试剂配制与保存
3、灭菌 一般的化学试剂、培养基或其它试剂，
要用高压灭菌锅湿热灭菌20-30min。 活性物质，如酶液、细胞培养液、维生
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二、人员防护
5、严禁穿着实验室防护服离开实验室，（如 去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、员工休 息室和卫生间）。
6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。 7、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、
化妆和处理隐形眼镜。 8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。 9、在实验室内用过的防护服不得和日常服装
放在同一柜子内。
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三、安全用水
1、实验过程中注意蒸馏水和双蒸水的制备过程及储 存，防止水被污染，同时保持仪器的正常运转和安 全。
2、用水完毕关闭水龙头。若实验室停水，一定要关 闭水龙头。
3、用水要远离电源开关以及用电设备，以防漏电。
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四、安全用电
1、实验室内的电气设备的安装和使用管理，必须符 合安全用电管理规定。
第1讲
生物检测技术 基本知识和基本技能
黄雅琴
hyaqin@
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基本内容
一、学习本节课的必要性 二、人员防护(重点) 三、安全用水 四、安全用电 五、安全用气 六、实验室废液处理 七、器材的清洗与使用 八、试剂配制与保存 九、实验记录与实验报告 十、课堂总结
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一、为什么要学习生物检测 基本知识和技能
素及抗生素等的配制需要通过在超净台上过 滤灭菌。
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八、试剂配制与保存
4、试剂的保管 ①所有药品都有明显标签，标明药品名称、质量规格及配制日
期；最好还有危险性质的明显标志。标签日久会受腐蚀气体 损坏，甚至全部剥落，如果不及时换新标签，就会变成无名 物，有误用的危险。 注上生产日期或配制日期，对於易变 质物可以正确判定应否销毁。 ②分类存放，互相作用药品不能混放，必须隔离存放。易燃物、 易爆物及强氧化剂只能少量存放。 ③贮存室或药柜必须保持整齐清洁。 ④经常检查药品瓶子或其他包装完整情况，标签是否完整，有 无其他危险潜伏。 ⑤无名物、变质物要及时清理销毁。 ⑥分子生物学试剂一般要低温冰箱保存，必要时要冷冻保存， 为了避免反复冻融，一般分装成小管储存。
2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其 他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时， 应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除， 随后必须洗手。
3、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开 实验室工作区域前，都必须洗手。
4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工 紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具） 或其他防护设备。
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七、器材的清洗与使用
1清洗 ①玻璃器材：
初次使用：新的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先 用肥皂水洗刷再用自来水洗净，然后浸泡在1%-2%盐酸溶 液中过夜（不少于4h），再用自来水冲洗，最后用蒸馏水 冲洗3次，在烘箱内烘干备用。
已使用过：先用自来水洗刷附着的试剂、蛋白质等物质，再选 用大小合适的毛刷蘸取洗衣粉，将器材内外（特别是内壁） 细心刷洗，用自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗3次，烘箱内烘 干备用。需要灭菌的器材，用牛皮纸或报纸包装好，于 121℃高压蒸汽灭菌21min，取出于烘箱内烘干备用。
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六、实验室废液处理
放射性废弃物 ：
一般实验室的放射性废弃物为中低水平放射性废弃物， 将实验过程中产生的放射性废物收集在专门的污物桶内，桶 的外部标明醒目的标志，根据放射性同位素的半衰期长短， 分别采用贮存一定时间使其衰变和化学沉淀浓缩或焚烧后掩 埋处理。 1.放射性同位素的半衰期短(如：碘131、磷32等)的废弃物， 用专门的容器密闭后，放置于专门的贮存室，放置十个半衰 期后排放或者焚烧处理。 2.放射性同位素的半衰期较长(如：铁59、钻60等)的废弃物， 液体可用蒸发、离子交换、混凝剂共沉淀等方法浓缩，装入 容器集中埋于放射性废物坑内。
结实验结果，写出实验报告。记录实验现象 的所有细节，最好用图表的形式概括实验结 果，对于反馈的结果，可以进一步思考，再 做实验进行更深层次的研究探讨。
十、课堂总结 作业：如何做好人员防护？
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六、实验室废液处理
化学性污染
有机物污染
有机试剂污染：有机溶剂
有机样品污染：如农药、苯并(α)芘、黄曲霉毒素、 亚硝胺等。
无机物污染：强酸、强碱的污染，重金属污染，氰化物污染等。其中 汞、砷、铅、镉、铬等重金属的毒性不仅强，且有在人体 中有蓄积性。
生物性污染
生物废弃物污染：检验实验室的标本，如血液、尿、粪便、痰液和呕吐 物等；检验用品，如实验器材、细菌培养基和细菌阳 性标本等。
14、实验室的辐射，主要是紫外线、X射线、放射性同位素等。 其中，紫外线常用于实验室和超净工作台的灭菌，但人体长 期反复接受紫外线照射，会导致皮肤灼伤，视力下降，甚至 诱发皮肤癌和白内障。特别是8-15周龄的发育期婴儿，受到 了强辐射，会增加先天性畸形的概率。
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二、人员防护
15、如果发生触电，迅速切断电源，如果触电是由断裂、掉下 的电线或漏电的电器造成的,可以用干燥的物品,如木棒、扁 担等,把电线挑开,或把电器推开。切断电源之前千万不能用 手去拉伤者,否则救护者自己也会触电。切断电源后,要一面 通知医生前来救治,一面立即查看触电者的情况。在等待医 生到来的时间里,应进行胸外心脏按压和口对口人工呼吸。 心肺复苏抢救要争分夺秒,不能犹豫迟疑,不能坐等,也应避免 不必要的搬运病人,在医生到来之前就应开始抢救措施。