总糖含量测定实验——葡萄糖标准曲线(实验结果)
生物化学实验报告示范-3,5-二硝基水杨酸法测定葡萄糖标准曲线
实验二3,5-二硝基水杨酸比色定糖法定制葡萄糖标准曲线马铃薯总糖含量测定实验目的1. 熟悉并掌握7200型分光光度仪的结构及工作原理和操作使用方法；2. 掌握分光光度法测定物质含量的基本操作步骤及微机绘制标准曲线的操作方法；3．掌握3,5-二硝基水杨酸比色定糖法测定还原糖（葡萄糖）的原理及方法；4．掌握3,5-二硝基水杨酸比色定糖法测定马铃薯总糖含量测定的原理与方法。
实验原理1. 3,5-二硝基水杨酸比色定糖法测定还原糖（葡萄糖）的及标准曲线定制原理3,5-二硝基水杨酸在强碱溶液中与还原糖在沸水浴中加热反应后被还原成棕红色的氨基化合物，该有色物质在540nm 处有最大吸光度，且在一定浓度范围内（一般OD值在0.2～0.8范围内线性较好），还原糖的量与反应液的颜色强度（吸光度OD值）呈线性关系，利用分光光度仪，以分析纯葡萄糖为还原糖测定的标准品，在540nm处按梯度依次测定各葡萄糖浓度对应的反应液的吸光度（OD值）大小，通过微机处理数据，定制葡萄糖标准曲线，确定出3,5-二硝基水杨酸比色定糖法测定还原糖的线性回归方程；2. 3,5-二硝基水杨酸比色定糖法测定马铃薯总糖含量测定的原理先将马铃薯去皮，经机械粉碎，过滤和清水漂洗，烘干制成马铃薯淀粉；再精确称取干燥恒重后的马铃薯淀粉加酸水解为还原糖，经中和定容，配制成马铃薯总糖含量测定的待测液（即样品液）；再以标准曲线测定的加样操作方法，测定出样品待测液的吸光度大小，将测定的吸光度大小代入其回归方程，即可计算出样品待测液的显色浓度，根据稀释倍数关系，计算出以还原糖的量表示的马铃薯总糖的量，并测定出马铃薯总糖百分含量。
该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰较少。
实验操作1. 3,5-二硝基水杨酸比色定糖法定制葡萄糖标准曲线（1）葡萄糖标准溶液的配制：（2mg/mL）准确称取2000mg分析纯的葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），用少量蒸馏水溶解后定容至1000mL，冰箱保存备用（2）葡萄糖标准曲线定制加样操作及测定结果纪录（详见表1）按表1进行实验操作，在沸水浴中准确反应20min，取出后立即用冷水冷却，加蒸馏水定容至25mL，摇匀，用lcm的比色杯于540nm处测光密度值。
生化实验二--果蔬中总糖及还原糖含量的测定
一、目的 掌握总糖和还原糖含量的测定方法。 学习分光光度计的原理和操作方法。
二、原理 总糖是指样品中的还原单糖及在本实
验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽 糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。
多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的 多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，再 利用还原糖的性质进行测定，这样就可分别求 出总糖和还原糖的含量。
蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。 其原理：糖类在较高温度下可被硫酸脱水成糠 醛或糠醛衍生物，再与蒽酮缩合成蓝色化合物， 在620nm处有最大吸收。
三、实验器材
1、植物材料 2、吸管（1.0mL×2、5.0mL×2、
0.1mL×2 、0.2mL×2 、0.5mL×2 ） 3、试管（1.5cm×15cm×7） 4、分光光度计 5、水浴锅、电炉 6、电子分析天平 7、容量瓶（100mL×1）、玻璃漏斗 8、量筒、研钵、三角烧瓶
×0.9①×100%
① 乘0.9是为了从测定出的总糖水解成的单糖中扣除 水解时所消耗的水量。
式中：
W（还原糖）：还原糖质量分数（%） W（总糖）：总糖质量分数（%） C1：还原糖的质量浓度（mg/mL） C2：水解后还原糖的质量浓度（mg/mL） V1：样品中还原糖提取液的体积（mL） V2：样品中总糖提取液的体积（mL） m：样品质量
四、实验试剂
1、蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000mL体积分数为 80%的硫酸中，当日配制使用。 2、标准葡萄糖溶液（0.1mg/mL）：称取100mg 葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1000mL（可加几 滴甲苯作防腐剂）。 3、6mol/L HCl溶液 4、20% NaOH溶液：称取20g NaOH固体，溶于 蒸馏水并稀释至100mL。
冬枣、柚子、梨：取滤液5mL用蒸馏 水定容至100mL。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告总糖的测定实验报告引言：总糖是指食物中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。
在食品工业中，准确测定食物中的总糖含量对于产品质量的控制和消费者的健康至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定某种食品中的总糖含量，并探讨不同测定方法的准确性和可行性。
实验原理：总糖的测定方法有很多种，常用的有显色法、酶解法和高效液相色谱法。
本实验采用显色法进行总糖的测定。
该方法是利用总糖与酚酞反应，生成红色络合物，通过比色测定络合物的吸光度来确定总糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备：将待测样品加入适量的蒸馏水中，充分溶解。
2. 酚酞溶液制备：将适量的酚酞溶解于蒸馏水中，制备成0.5%的酚酞溶液。
3. 反应体系制备：取适量的样品溶液和酚酞溶液混合，加入适量的硫酸，使反应体系呈酸性。
4. 反应与显色：将反应体系加热至沸腾，保持沸腾2-3分钟，使反应充分进行。
然后冷却至室温，观察溶液颜色的变化。
5. 吸光度测定：使用分光光度计，在波长为520nm处测定反应体系的吸光度。
6. 标准曲线绘制：取一系列不同浓度的葡萄糖溶液，按照上述步骤进行显色反应，并测定吸光度。
根据吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。
7. 总糖含量计算：根据样品的吸光度值，利用标准曲线得出样品中总糖的含量。
结果与讨论：通过实验测定，得到了待测食品中总糖的含量为X g/100g。
这个结果表明该食品中含有较高的总糖含量，可能对于某些人群来说，摄入过多的该食品可能会导致健康问题。
总糖的测定方法中，显色法是一种简便、快速的方法。
然而，该方法对于一些特殊的食品样品可能会产生干扰，导致测定结果不准确。
因此，在实际应用中，需要根据不同的食品样品选择合适的测定方法。
此外，本实验中使用了葡萄糖作为标准物质，绘制了标准曲线。
标准曲线的制备对于准确测定样品中总糖的含量至关重要。
在实际应用中，可以根据需要选择其他合适的标准物质，并制备相应的标准曲线。
结论：通过本实验，我们成功测定了某种食品中的总糖含量，并探讨了不同测定方法的准确性和可行性。
还原糖和总糖的测定
生物化学综合实验报告题目：3，5—二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖姓名：学号：同组成员：分院(系）：专业班级：指导教师:完成日期：年月日1。
实验目的用比色法测定山芋中还原糖和总糖含量2。
实验原理先用已知浓度的葡萄糖标准溶液与DNS反应测其分光度，制得标准曲线，在测山芋中糖与DNS反应后的分光度A从而得其总糖和还原糖含量。
3。
实验仪器和试剂试剂：1g/L葡萄糖标准液、3,5-二硝基水杨酸、6mol/L HCl，6mol/L NaOH仪器:25，100ml容量瓶、1，5ml吸量管、50ml移液管、100ml 量筒、试管、滴管、离心管、玻璃棒、洗耳球、100ml容量瓶、比色皿离心机、分光光度计、恒温水箱4。
实验步骤一、取六只比色管向其中加入葡萄糖标液0、0。
2、0。
4、0.6、0。
8、1.0毫升在加入蒸馏水2。
0、1.8、1。
6、1。
4、1.2、1.0毫升，最后向其中各加入DNS试剂1。
5毫升混合均匀后100摄恒温水浴5min，冷却后加入蒸馏水至25ml刻度线，用1号样调零，测其分光度，制得标准曲线。
二、还原糖提取：取3g山芋粉，加入30ml水，搅匀后在50摄水中保温20min，离心，取滤液,用100ml容量瓶定容得还原糖待测液.总糖提取：取0.2克山芋粉，加入试管中吸取5ml HCL溶液，8ml蒸馏水搅匀,100摄下恒温水浴30min，冷却,NaOH调节PH至中性,离心,滤液用100ml容量瓶定容，得总糖待测液.测定时取5支比色管分别加入还原糖0、1。
0、1。
0、0、0毫升，总糖0、0、0、0.5、0。
5毫升,蒸馏水2。
0、1。
0、1。
0、1。
5、1。
5毫升,DNS试剂1.5毫升100摄恒温水浴5min后冷却，稀释至25毫升用一号管调节分光度为0，测总糖和还原糖的分光度.5数据处理葡萄糖标准曲线表管号0 1 2 3 4 5 含糖总量（mg）0 0.2 0。
4 0。
6 0。
8 1 葡萄糖标液(ml）0 0.2 0.4 0。
还原糖和总糖的测定
1.样品中还原糖的提取：称取 5g 左右的平菇，用碾碎装置碾碎，再用研钵研磨，将渣和 汁全部转移到 100ml 的三角瓶中，用水冲洗碾碎装置和研钵，所得液体并入三角瓶中，置于 500C 的恒温水浴中保温 30min， 使还原糖浸出。 10000rpm 离心 2min。 将液体全部转入 100ml 的容量瓶中，用蒸馏水洗涤三角瓶，并转入容量瓶中定容。得到还原糖的待测液。 2. 显色：取三支具有 25ml 刻度的试管，编号，按下表所示的量，精确加入待测液和试 剂。 将各管摇匀， 在沸水浴中加热 5min， 取出冷却到室温， 以蒸馏水定容至 25ml， 混匀后， 在 540nm 波长下，测定各管的消光值。
1
还原糖的测定---3,5-二硝基水杨酸比色法
标准曲线测定结果：
管号 1 0 0 2 10 0.087 3 20 0.263 4 30 0430 5 40 0.598 6 60 0.752 7 80 0.883
葡萄糖含量 （ug） OD 值
葡萄糖标准曲线表
1 0.8 0.6 OD值 0.4 0.2 0 0 -0.2 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 葡萄糖mg y = 0.770x - 0.031 R² = 0.995
管号 还原糖测定液（ml） 蒸馏水（ml） 3,5-二硝基水杨酸试剂（ml） 参比管 0 0 2 1.5 还原糖测定管号 1 2 0 1.5 2 2 0 1.5
还原糖% =
查曲线所得含糖 mg 数 × （提取液总体积/测定时取用体积） 样品 mg 数
× 100
2
总糖的测定----3,5-二硝基水杨酸比色法
1.样品中总糖的提取：称取 5g 左右的平菇，先用碾碎装置碾碎，再用研钵研磨，将渣和
汁全部转移到 100ml 的三角瓶中，用水冲洗碾碎装置和研钵，所得液体并入三角瓶中，加入 20ml 6mol/L 的 HCl 及 30ml 的蒸馏水， 置于沸水浴中保温 1h。 待三角瓶中的水解液冷却后， 用 PH 试纸检测， 以 6mol/L NaOH 中和至中性。 10000rpm 离心 2min。 将液体全部转入 250ml 的容量瓶中，用蒸馏水洗涤三角瓶，并转入容量瓶中定容。得到总糖的待测液。 2.显色： 取三支具有 25ml 刻度的试管， 编号， 按下表所示的量， 精确加入待测液和试剂。 将各管摇匀，在沸水浴中加热 5min，取出冷却到室温，以蒸馏水定容至 25ml，混匀后，在 540nm 波长下，测定各管的消光值。
还原糖和总糖含量的测定(3,5 一二硝基水杨酸比色法)
还原糖和总糖含量的测定（3，5 一二硝基水杨酸比色法）还原糖和总糖含量的测定（3，5一二硝基水杨酸比色法）还原糖和总糖含量的测定（3，5一二硝基水杨酸比色法）作者：佚名文章来源：生物化学实验技术点击数：2132更新时间：2021-5-1311:29:24一、目的植物体内的还原成糖，主要就是葡萄糖、果糖和麦芽糖。
它们在植物体内的原产，不仅充分反映植物体内碳水化合物的运转情况，而且也就是呼吸作用的基质。
还原成糖还能够构成其他物质例如有机酸等。
此外，水果蔬菜中糖量的多少，也就是始终如一其品质的关键指标。
还原成糖在有机体的新陈代谢中起至着关键的促进作用，其他碳水化合物，例如淀粉蔗糖等，经水解也分解成还原成糖。
通过本实验，掌控还原成糖定量测定的基本原理，练比色定糖法的基本操作，热悉分光光度计的采用方法。
二、原理各种单糖和麦芽糖就是还原成糖，蔗糖和淀粉不为还原成糖。
利用溶解度相同，可以植物样品中的单糖、双糖和多糖分别抽取出，再用酸水解法并使没还原性的双糖和多糖全盘水解班莱班县还原性的单糖。
在碱性条件下，还原糖与3，5一二硝基水杨酸共热，3，5一二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原成糖则被水解成糖酸及其他产物。
一定范围内，还原成糖的量与棕红色物质颜色厚薄的程度成一定的比例关系，540nm波长下测量棕红色物质的消光值，收信标准曲线并排序，便可以分别谋出来样品中还原成糖和总糖的含量。
三、仪器、试剂和材料1.仪器（1）刻度试管：25mlx11（2）离心管或玻璃圆柱形x2（3）烧杯：1oomlx1（4）三角瓶：100m1x1（5）容量瓶：100mlx3（6）刻度液体：1mlx1，2m1x4,10mlx1（7）恒温水浴（8）沸水浴（9）离心机（过滤法不用此设备）（10）电子顶载天平（11）分光光度计2.试剂（1）1mg/ml葡萄糖标准液：准确称取100mg分析纯葡萄糖（预先在80℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转移到100ml的容量瓶中，以馏水定容至刻度，摇匀，冰箱中保存备用。
葡萄糖的测定
浓度（μg/mL）吸光度00100.026200.08400.183600.307800.3791000.535处理方式样品质量(g)吸光度1浓度(μg/mL)体积(mL)0.2%酶 1.00160.34268.301886791000.3%酶 1.00310.22746.603773581000.4%酶 1.0220.2143.396226421000.5%酶 1.00190.20241.886792451000.5%碱 1.00180.37875.0943********.0%碱 1.00170.40680.377358491001.5%碱 1.00150.44186.981132081002%碱 1.00180.35871.320754721000.5%酸 1.00140.29659.622641512501.0%酸 1.00150.33867.547169812501.5%酸 1.00140.592115.47169812502%酸 1.00130.2754.71698113250脱脂处理 1.002 1.016195.4716981250水浴加热1.00170.681132.2641509250处理方式样品质量(g)吸光度1浓度(μg/mL)体积(mL)0.2%酶 1.00170.31162.452830191000.3%酶1.00210.27255.09433962100对比酶处理取已经处理好的麦麸1克置于烧杯中，加80mL沸蒸馏水，放入沸水浴，不时摇动，提取3→取出立即合并滤液→冷却至室温，用蒸馏水定容至100mL或250mL →取滤液1mL，沿管壁加入0.1%蒽酮试剂5mL，立出，立即放置于冰浴中迅速冷却，并在暗处放置20分钟，用1cm比色皿，以零号管为参比，于620cm波长葡萄糖标准曲线数据酶处理碱处理酸处理0.4%酶 1.00170.20843.018867921000.5%酶 1.00170.19740.943396231000.5%碱 1.00190.36773.018867921001.0%碱 1.00180.37474.339622641001.5%碱 1.00170.41982.830188681002%碱 1.00170.35971.509433961000.5%酸 1.00150.29158.679245282501.0%酸 1.00170.33366.603773582501.5%酸 1.00140.48495.0943********%酸 1.00130.20542.45283019250脱脂处理 1.0022 1.045200.9433962250水浴加热 1.00170.76147.1698113250处理方式总糖百分含量总糖百分含量总糖百分含量平均值0.2%酶0.681927780.62346840.6526980950.3%酶0.464597480.54978880.5071931620.4%酶0.424620610.42945860.4270396050.5%酶0.418073580.40873910.4134063450.5%碱0.749594130.7288040.7391990391.0%碱0.802409490.74206050.7722350031.5%碱0.868508560.82689620.8477023612%碱0.711926080.71388070.7129034110.5%酸 1.48848216 1.464784 1.4766330591.0%酸 1.68615002 1.6622685 1.6742092521.5%酸 2.88275659 2.3740348 2.6283957182%酸 1.36614854 1.0599428 1.213045682脱脂处理 4.87703838 5.0125573 4.944797828水浴加热3.30099209 3.6730012 3.486996634碱处理酸处理对比酶处理碱处理酸处理对比酶处理含量（g）总糖百分含量0.0068301890.6819277830.0046603770.4645974840.0043396230.4246206110.0041886790.4180735850.0075094340.7495941270.0080377360.8024094890.0086981130.8685085580.0071320750.711926080.01490566 1.4884821630.016886792 1.686150020.028867925 2.8827565940.013679245 1.3661485350.048867925 4.8770383760.0330660383.300992087含量（g）总糖百分含量0.0062452830.6234684060.0055094340.54978884提取30分钟→取出立即过滤，残渣用蒸馏水反复洗涤并过滤，管壁加入0.1%蒽酮试剂5mL，立即摇匀，放入沸水浴中加热10分钟，取以零号管为参比，于620cm波长测定吸光度，得出奇吸光度。
总糖和还原糖的测定
总糖和还原糖的测定（3,5—二硝基水杨酸法）实验报告前言糖在我们日常生活中随处可见，我们吃的米饭、水果、零食中或多或少都含有一些糖类。
同时，糖也是我们维持机体运动所必不可少的物质，没有了它，就没有了能量的来源。
我们这次便走进实验室探索糖类的奥秘。
本次实验我们将用3,5—二硝基水杨酸法测定总糖和还原糖中的含糖量。
本次实验中，我们除了要掌握还原糖和总糖的测定基本原理还要学习比色法测定还原糖的操作方法以及分光度法测定的原理和方法。
首先，让我们一起来了解一下它们的测定方法吧。
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法3、学习分光光度法测定的原理和方法二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。
实验五可溶性总糖的测定(精)
管号 1
葡萄糖 0
标准液 （ml）
蒸馏水 1
（ml）
葡萄糖 0
含量 （μg）
2
3
4
5
6
7
0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8
0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2
10 20 30 40 60 80
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0ml， 加完后一起浸于沸水浴中，准确煮沸10分钟取 出，用流水冷却，室温放置10分钟，在620nm 波长下比色。以标准葡萄糖含量作横坐标，以 吸光值作纵坐标作标准曲线。
三、仪器、试剂和材料
１、仪器 分光光度计；电子天平；三角瓶；大管；试管架； 漏斗；容量瓶；试管；水浴锅 ２、试剂 葡萄糖标准液；浓硫酸； 蒽酮试剂：0.2g蒽酮溶于100mL浓硫酸中当日配制 使用。 ３、材料 小麦
四、操作步骤
１、葡萄糖标准曲线的制作 取７支大试管，按下表数据配制一
系列不同浓度的葡萄糖溶液：
可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)
一、目的
掌握蒽酮法测定可溶性糖含量 的原理和方法。
二、原理
强酸可使糖类脱水成糖醛，生成的糖醛或羟 甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糖醛的衍生物， 呈蓝绿色，该物质在620nm处有最大吸收。在10 －100μg范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量 成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在３ 0μg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖 之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比 较合适。
２、植物样品中可溶性糖的提取
将小麦剪碎至２mm以下，准确称取１克， 放入50三角瓶中，加沸水25ml，在水浴中加盖 煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集在50ml容 量瓶中，定容至刻度。吸取提取液２ml置另一 50ml容量瓶中，以蒸馏水稀释定容不，摇匀测 定。
应用不同方法测定发酵液中的糖含量
0.5
1
0.359
1
1
0.364
1.5
1
0.372
2
1
0.385
2.5
1
0.377
3
1
0.378
从表 3 看出，在测定发酵液总糖含量时，当 DNS 添加量 大于 1.5 mL 时，对结果的影响虽然不大，但浪费大，当小于 1.5 mL 时，还原糖过量，使得测定结果偏低，所以应选择 DNS 添加量为 1.5 mL。
5
1
1
1
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6
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0.8
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1.5
7
1.4
0.6
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1.5
8
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1.4
1.6
1.5
2.1.2 发酵液中总糖的水解
取发酵液 0.5 mL 置于 50 mL 容量瓶中，加 6 mol/L 的盐 酸溶液 2 mL，在沸水浴中加热 15 min 水解，冷水冷却后加 6 mol/L 氢氧化钠溶液 1.8 mL，并定容至 50 mL[3]，得总糖水 解液。 2.1.3 发酵液中总糖的测定
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告一、实验目的总糖是指样品中还原糖和非还原糖的总和。
本次实验的目的是掌握总糖测定的原理和方法，学会使用相关仪器和试剂进行准确的测定，并通过实验数据的处理和分析，得出样品中总糖的含量。
二、实验原理总糖的测定通常采用蒽酮比色法。
糖类在浓硫酸的作用下，可脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色复合物。
在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，通过比色法可以测定出样品中总糖的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器分光光度计恒温水浴锅电子天平容量瓶（100ml、50ml、25ml）移液器移液管（1ml、2ml、5ml、10ml）具塞刻度试管（25ml）玻璃棒漏斗滤纸2、试剂蒽酮试剂：称取 02g 蒽酮溶于 100ml 浓硫酸中，当日配制使用。
葡萄糖标准溶液（100μg/ml）：准确称取 01g 无水葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至 1000ml。
样品溶液：将待测样品经过适当处理后，制成一定浓度的溶液。
四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制取 6 支 25ml 具塞刻度试管，分别编号为 0、1、2、3、4、5。
按表 1 加入葡萄糖标准溶液和蒸馏水。
｜试管编号|0|1|2|3|4|5|｜｜｜｜｜｜｜｜｜葡萄糖标准溶液（ml）｜0|02|04|06|08|10|｜蒸馏水（ml）｜10|08|06|04|02|0|｜葡萄糖含量（μg）｜0|20|40|60|80|100|向各试管中迅速加入 5ml 蒽酮试剂，摇匀后立即放入沸水浴中加热10min，取出后用流水冷却至室温，在 620nm 波长下，以 0 号管为空白对照，测定各管的吸光度值。
以葡萄糖含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品溶液的制备称取适量的样品，经过粉碎、研磨等处理后，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
若样品溶液中含有较多杂质，可先用滤纸过滤。
3、样品溶液的测定吸取 1ml 样品溶液于 25ml 具塞刻度试管中，加入 4ml 蒸馏水，再迅速加入 5ml 蒽酮试剂，摇匀后立即放入沸水浴中加热 10min，取出后用流水冷却至室温。
糖类测定
1.糖蜜成分分析1.1糖蜜中总糖、蔗糖及还原糖含量分析1.1.1总糖含量的测定——苯酚-硫酸法苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，己糖反应产物在490nm处（戊糖及糖醛酸反应产物在480nm）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
1.1.1.1 试剂：浓硫酸(分析纯，95.5%)6%苯酚(临用前配制) 标准葡萄糖1.1.1.2 实验方法与实验结果①标准曲线的制定准确称取标准葡萄糖20mg于500mL容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8mL，并以水补充总体积至2.0mL，然后加入6%苯酚1.0mL及浓硫酸5.0mL，静置10min，摇匀，室温放置20min后于490nm 测光密度，以2.0mL水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标1为光密度值，得标准曲线，如图②样品含量测定吸取样品液1.0mL，按上述步骤操作，测光密度，以标准曲线计算多糖含量。
③实验结果表1 糖蜜中的总糖含量甘蔗糖蜜524甜菜糖蜜4431.1.2 蔗糖含量的测定——Roe比色法六碳糖与浓盐酸作用产生羟甲基糠醛，但酮糖比醛糖产生的羟甲基糠醛的量要多得多（1-1.5%酮糖与20%醛糖所产生的轻甲基糠醛量相等）。
此羟甲基糠醛在一定条件下和酚类化合物一间苯二酚形成鲜红色。
此反应在一定条件下为酮糖所特有，所以可作为酮糖测定的依据。
样液中若同时存在果糖、葡萄糖或麦芽糖等不影响蔗糖的测定。
其测定范围在40-360μg。
1.1.2.1试剂A：间苯二酚溶液，0.1g间苯二酚用6mol/L盐酸溶液溶解后定容至100mL；B：10mol/L盐酸，量取83.5mL浓盐酸（比重1.19）注入蒸馏水中，并稀释到100mL，冷却；C： 2mol/L氢氧化钠，准确称取8.0g氢氧化钠，用蒸馏水溶解后定容至100mL；D：蔗糖标准溶液（1mg/mL），精确称取0.1g恒重蔗糖（90℃烘至恒重），以蒸馏水溶解并定容至100mL。
总糖实验报告范本
总糖实验报告范本一、实验目的：通过测定不同水果中的总糖含量，比较不同水果的营养价值，了解不同水果中糖的含量和种类的差异。
二、实验原理：总糖是由果糖、葡萄糖和蔗糖等简单糖组成的混合糖。
本实验利用加入硝酸铜试剂，将果糖、葡萄糖和蔗糖在低浓度下氧化，生成具有特殊吸光度的络合物。
通过比色法测定光密度的变化，可以定量测定总糖的含量。
三、实验步骤：1.准备不同种类的水果样品，如苹果、橙子、香蕉和葡萄等，并将它们洗净、切碎备用。
2.取适量切碎的水果放入石磨中，加入适量无氧水，磨碎成果泥。
3.取10g果泥，加入50mL无氧水中，搅拌均匀后滤过，收集滤液。
4.将50mL滤液转移到量筒中，加入25mL硝酸铜试液，摇匀，并静置20分钟。
5.制备测定组：向6个比色管分别加入0mL、0.5mL、1mL、1.5mL、2mL和2.5mL葡萄糖标准溶液，然后用无氧水分别定容至相同体积。
6.将硝酸铜试液与果泥滤液混合之后，将混合液分别加入预先准备好的6个比色管。
7.通过比色计测定不同比色管的吸光度，记录测定结果。
四、实验数据处理：1.根据不同葡萄糖标准溶液的吸光度和浓度之间的关系，绘制标准曲线。
2.通过测定水果样品的吸光度，利用标准曲线确定不同水果中总糖的含量。
五、实验结果和分析：按照上述步骤测定了苹果、橙子、香蕉和葡萄等不同水果中的总糖含量。
测得的结果如下表所示：水果种类总糖含量（g/100g）苹果12.3橙子10.8香蕉17.6葡萄19.2通过数据分析，得知葡萄的总糖含量最高，苹果和橙子的总糖含量较低，而香蕉的总糖含量居中。
六、实验结论：通过本实验可以得出以下结论：1.不同水果中的总糖含量存在差异，葡萄和香蕉的含糖量较高，苹果和橙子的含糖量较低。
2.葡萄和香蕉的方式含有较多的果糖和葡萄糖，而苹果和橙子的总糖主要为蔗糖。
这些结果表明，根据人们的个人需求和健康状况，可以选择适合自己的水果来满足身体对糖分的需求。
七、实验心得：通过本次实验，我掌握了测定总糖含量的方法和步骤。
南京大学生化实验一：总糖和还原糖含量的测定
总糖和还原糖含量的测定实验报告实验目的:植物体的还原糖，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。
它们在植物体的分布，不仅反映植物体碳水化合物的运转情况，而且也是呼吸作用的基质。
还原糖还能形成其他物质如有机酸等。
此外，水果蔬菜中糖量的多少，也是坚定其品质的重要指标。
还原糖在有机体的代中起着重要的作用，其他碳水化合物，如淀粉蔗糖等，经水解也生成还原糖。
通过本实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，练习比色定糖法的基本操作，热悉分光光度计的使用方法。
实验原理：1.还原糖还原糖是具有还原性的糖类的统称。
分子中含有游离醛基或者酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。
如葡糖糖、果糖、半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等。
2.美拉德反应美拉德反应广泛分布于食品工业中的非酶褐变反应：还原糖与氨基酸/蛋白质在加热时发生的一系列复杂反应，生成棕/黑色的大分子物质，同时还产生具有不同气味的中间体分子，包括还原酮、醛和杂环化合物，为食物提供诱人可口的风味和诱人的色泽。
3.还原糖的测定方法：3,5-二硝基水酸法在波长540nm下，一定浓度围，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，可利用标准曲线法测定样品中的还原糖含量。
利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量来对总糖进行测定。
mbert-Beer定律A=lg(I 0/I)=lg（1/T）=KClA：吸光度I0：入射光强度I：透射光强度T：透光度（透射比）K：比例常数l：溶液厚度实验仪器，试剂与材料：1.实验仪器：UV2600紫外可见分光光度计2.实验试剂：（1）1.0mg/ml标准葡萄糖（2）3,5-二硝基水酸（DNS试剂）（3）6mol/L HCl（茜配置）（4）6mol/L NaOH（茜配置）（5）碘-碘化钾溶液3.实验材料：市售面粉。
实验步骤：1.还原糖的提取准确称取0.20g面粉，加蒸馏水约3ml，在研钵中磨成匀浆。
，转入三角烧瓶中，用约30ml蒸馏水冲洗研钵2~3次，洗出液也转入三角烧瓶中。
总糖含量的测定
实验二总糖含量的测定一、目的：1.掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2.学习植物可溶性糖的一种提取方法。
二、原理：糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。
该物质在620 nm处有最大吸收，在150 µg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器、试剂和材料1.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等2.试剂：(1)葡萄糖标准液：l00 µg/ml(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓 H2SO4中。
当日配制使用。
3.材料：淀粉四、操作步骤1.葡萄糖标准曲线的制作取7支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：管号 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液（ml）0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8 蒸馏水（ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2 葡萄糖含量（µg）0 10 20 30 40 60 80 在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0m1，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸l0 min取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作出标准曲线。
2.植物样品中总糖的提取：精确称取0.5g，置于50 ml三角瓶中，加水15 m1，盐酸10ml，沸水浴20min，定容至100ml，得提取液。
取10ml滤液定容至100ml3.测定吸取1 ml已稀释的提取液于试管中，加入4.O ml蒽酮试剂，平行三份；空平均值在标白管以等量蒸馏水取代提取液。
食品中总糖测定的综述
食品中总糖测定的综述食品中总糖测定的方法与评价摘要:目的研究食品中总糖测定的各种方法，比较各种方法使用条件及展望发展。
对各种方法原理、操作步骤、结果处理等比较，针对不同的食品中总糖的定量分析要求快速决定检测最优检测方法。
展望主要的化学检测方法，对实际操作提供科学具体的理论分析方法。
关键词:糖糖的测定蒽酮比色法铁氰化钾法斐林试剂法 1.糖的概述糖类化合物是自然界存在最多、具有广谱化学结构和生物功能的有机化合物。
它是为人体提供热能的三种营养素中最主要的、最廉价的营养素。
糖也是食品工业主要原料和辅助材料，是大多数食品的主要成分之一，包括糖、寡糖和多糖。
糖泛指单糖、双糖和糖醇。
单糖是碳水化合物的最基本的组成单位，有葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖、阿拉伯糖和木糖。
双糖包括蔗糖、麦芽糖、乳糖等。
糖醇如木糖醇、甘露糖醇、山梨醇等。
寡糖是由3,9个单糖通过糖苷键连接而形成的的，包括异麦芽低聚糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖等。
多糖是由许多单糖浓缩而形成的高分子化合物，如淀粉、纤维素、果胶、[1] 黄原胶等。
糖的主要功能是提供热能。
每克葡萄糖在人体内氧化产生4千卡能量，人体所需要的70%左右的能量由糖提供。
此外，糖还是物质代谢的碳骨架，为蛋白质、核酸、脂类的合成提供碳骨架。
细胞的骨架。
纤维素、半纤维素、木质素是植物细胞壁的主要成分，肽聚糖是原核生物细胞壁的主要成分。
细胞间识别和生物分子间的识别。
细胞膜表面糖蛋白的寡糖链参与细胞间的识别。
一些细胞的细胞膜表面含有糖分子或寡糖链，构成细胞的天线，参与细胞通信。
对于食品中糖的测定方法有很多，主要物理法、化学法、酶法、色谱法、电泳法、生物传感器等，物理法包括相对密度法、折光法和旋光法等。
可用于测定糖液的浓度、谷物中淀粉及粗纤维含量等。
化学法是应用最为广泛的常规分析方法，主要包括斐林氏法、高锰酸钾法、碘量法、铁氰化钾法、蒽铜比色法等。
食品中还原糖、蔗糖、淀粉和果胶物质等的测定多采用化学分析发，但所测得的多糖类物质的总量，不能确定糖的组分及每种糖含量。