高效液相色谱仪操作规程U

合集下载

液相色谱仪(UV)检定操作规程

液相色谱仪(UV)检定操作规程
3.3.1.2.方法二
制备60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液,按紫外分光光度法,用1cm石英比色皿分别在235nm±5nm、257nm±5nm、313nm±5nm、350nm±5nm四个波段处,以0.005mol/L硫酸为空白,测定各波长处60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液的吸收度,各波长重复测量三次。
3.5.2.色谱条件:
色谱柱:C18
流动相:甲醇
流速:1ml/min
波长:254nm
进样量:20ul(定量环)
3.5.3.操作步骤:将仪器各部份联接好,以甲醇为流动相,开机,待基线稳定后,将上述配制好的对照品溶液进样,记录色谱图。
3.5.4.按下式计算最小检测浓度:
Cl=2·Nd·C/H
式中:Cl:最小检测浓度(g/ml);
10min
1ml/min
50%
50%
13min
1ml/min
50%
50%
15min
1ml/min
25%
75%
18min
1ml/min
25%
75%
20min
1ml/min
0
100%
23min
1ml/min
0
100%
25min
1ml/min
100%
0
3.6.4.结果计算:
式中:
--第i段梯度误差(%);
12个月
定性、定量测量重复性误差
12个月
Nd:基线噪声峰-峰高,mm;
C:对照品溶液浓度(g/ml);
H:标准溶液的色谱峰高,mm。
3.5.5.结果判断:对照品溶液的峰高应大于或等于两倍基线噪声峰高,即最低检测浓度应低于4×10-8g/ml(萘的甲醇溶液)。

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程

目的:建立高效液相色谱仪的标准操作程序,以使操作者正确使用。

范围:本文件适用于高效液相色谱仪的标准操作。

职责:质量管理部QC化验员负责本文件的起草、修订及实施。

程序:1接通电源,打开电脑。

按LC-20AT 上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键,接通电源。

接通柱温箱的电源,并设置柱温箱温度为40℃。

2 双击电脑桌面上“LC Solution”,点击“1”进入采集窗口。

3 点击“Advanced”进行高级设置。

在“Pump”项中选择“Flow”模式;流速设置为0.5ml/min,泵压0~1.5MPa;在“Detector A”中选择“Analytical”模式,柱温设置为40℃。

设置完成后点击保存图标。

4 点击“Download”下载该方法。

5 将LC-20AT上旋钮“Draw”逆时针旋转180°,按Purge键,仪器自动清洗泵头,约3分钟后听到提示音(轻微长鸣声)后,顺时针旋转“Draw”180°至原位。

6 按LC-20AT上“Pump”键启动泵。

7 点击“R Flow ON/OFF”图标,系统开始运行,约20—30分钟后,点击“Balance RID (Detector A)”平衡系统。

8 基线平稳后,点击“◇”进行样品信息设置,设置完成后点击“确定”。

9 在进样器中吸入样品后插入手动进样口,将进样阀手柄调至“Load”位置,迅速将样品注入液相色谱仪,再将进样阀手柄调至“Inject”位置,开始采集数据。

10 分析完成后,点击红色的“〇”停止分析。

11 分析不同样品时,可重复“8-10”的操作,直至所有的样品均分析完毕。

12 所有的样品均分析完毕后,将流动相换成水继续运行至基线平稳,将色谱柱及系统中残留的物质清洗干净。

13 点击“R Flow ON/OFF”图标,系统停止运行,关闭采集页面。

按LC-20AT上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键,关闭电源。

U3000高效液相色谱仪操作规程及封面

U3000高效液相色谱仪操作规程及封面

省产品质量监督检验检验研究院仪器设备操作规程(cg———2016)设备编号()仪器名称U3000 液相色谱仪操作规程编制审核批准2016 年月日U3000高效液相色谱仪操作规程一基本原理U3000高效液相色谱系统由:①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。

使用高效液相色谱时,液体待检测物由流动相带入色谱柱,通过压力在色谱柱中移动,由于试样中各组分在色谱柱固定相与流动相间分配或吸附特性的差异,不同的物质组分顺序离开色谱柱,经检测器检测得到不同的色谱峰信号,依据组分的保留时间和响应值(峰面积或峰高)进行定性和定量分析。

二操作前准备1.1流动相的配制:1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。

1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜(0.45um)还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。

1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。

1.2对照品供试品处理:1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品,用适当的溶剂(最好采用流动相或流动相的主成分)进行充分溶解(也可借助超声波进行超声溶解),使其浓度为0.1~1mg/mL(根据检测结果再适当调节溶液的浓度)。

1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜(0.45um)还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。

1.3色谱柱的选择:根据样品的性质选择适当的色谱柱。

三操作顺序1.开机2.1打开UPS(不间断电源)电源,打开仪器接线板电源开关;2.2打开电脑显示器电源,打开电脑主机电源(POWER),启动电脑;2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源;2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。

2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标(工作站主程序)。

2.6在左下方点击仪器,则在右边会自动显示该仪器控制面板。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪(HPLC)是一种重要的分析仪器,广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。

为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果,需要遵守以下操作规程:1. 准备工作a. 首先,确保色谱仪及其附件的电源已接通,并确认仪器处于正常工作状态。

b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质,并确认管路连接正常。

c. 检查流动相液位是否正常,并调整泵的流速和梯度程序参数。

2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化,以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。

b. 选择合适的进样方式(自动或手动),并根据进样方式调整进样器的参数。

3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口,并注意不要损坏色谱柱。

b. 设置进样体积和进样速度等参数,并进行一次空白进样以清洗进样器。

4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏,并根据需要更换。

b. 根据实验需要选择合适的色谱柱,并注意记录色谱柱的批号和使用次数。

5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温,并使用温度控制系统保持恒定。

b. 注意避免温度突变和波动,以保证分析结果的准确性和重复性。

6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器,如紫外-可见光检测器(UV-Vis)、荧光检测器、电导检测器等。

b. 设置检测器的参数,如波长、增益和灵敏度,并进行基线校准。

7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统,并设置采集参数,如采样率、数据类型和运行时间等。

b. 对采集到的数据进行处理和分析,如峰识别、定量分析和峰面积计算。

8. 清洗和维护a. 实验结束后,关闭色谱柱和进样器的阀门,并用溶剂清洗色谱柱和进样器,以防止堵塞和降低杂质残留。

b. 清洗完成后,注意关闭色谱仪的电源,并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。

总结:高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。

遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果,提高实验效率。

高效液相色谱仪的操作规程

高效液相色谱仪的操作规程

高效液相色谱仪的操作规程
说明:高效液相色谱仪应安装在有强力通风的实验室中,实验室的高处和低处应设置两个通风口,以利于低沸点和高沸点有机溶剂蒸汽的排放,以保证实验室工作
人员的安全。

一.目的:提供通用的高效液相色谱仪的操作规程
二.范围:适用于侨昌化学有限公司高效液相色谱仪的操作
三.操作规程
1.准备好用作流动相的各种溶剂,经过滤(通过≤0.5um的滤膜)、脱气后,按比例配好
置于储液罐中。

梯度洗脱时,每种溶剂置于一个储液罐中,将溶剂过滤器插入储液罐底部,
2.将选用的高效液相色谱柱安装在流路中,拧紧连接的柱接头。

3.检查并连接好电路,将检测器输出信号线与数据处理系统连接好。

4.打开高压输液泵电源开关,调节色谱流动相流量 1.0ml/min。

(对内径 4.6mm、柱长
10—25cm色谱柱,填充5—10um填料,柱前压约6—15MPa)。

5.PURGE,冲洗泵头3-5MIN
6.开泵,平衡色谱柱系统。

7.打开可变波长紫外吸收检测器电源,调节好检测波长,排除吸收池中的气泡,待检测器
输出的基线稳定后,就可进行分析。

8.检测
9.若使用折光指数检测器,打开电源后,首先确定检测器温度,待恒温后,再选定待测的
折光指数间隔,待基线稳定后可进行分析。

10.如欲进行梯度洗脱,可由梯度控制单元设定欲进行的梯度洗脱程
序,进样后就可按梯度洗脱程序进行分析。

11.分析结束后,继续用流动相清洗进样阀和检测器约10—20min。

12.依次关闭检测器、梯度洗脱装置,高压输液泵的电源。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1.开关机顺序●开机顺序:打开LC各单元电源-控制器电源-电脑-LC-Solution工作站,开机后能听到“哔”声。

●关机顺序:与开机顺序相反,即先关闭LC-Solution工作站-控制器-LC各单元电源2.流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的,所用的水必须是双重蒸馏水。

流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。

水和有机相所用的微孔滤膜不同,有机相(如甲醇)的过滤用F膜,水用水膜。

●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。

3.工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标,选择“operation”项并单击,在弹出窗口后按OK进入工作站。

●首先打开A、B泵上的排空阀(open方向旋转180度)。

然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟,然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min,BCONC 0%,并设置合适的检测波长,柱温,停止时间。

在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。

●分析方法的保存:选择file-save method file as-取名保存文件●系统的启动:点击“instrument on/off”键开启系统(此时泵开始工作。

4.进样准备●观察基线及柱压,待基线平直(-5~80mv),压力稳定(0.5Mpa内)时方可进样。

5. 进样●点击助手栏中的“single start”键,弹出对话框,在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。

●填完后点击“start”,出现触发窗口,进样,仪器开始自动采样分析。

6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键,打开数据处理窗口。

●打开文件搜索器,定位至数据文件所在文件夹,选择文件的类型,双击文件名即可打开数据文件(此时可以查看峰面积、保留时间等参数)。

高效液相色谱仪使用与操作规程

高效液相色谱仪使用与操作规程

4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正
常。
第二步、开 机
接通电源,依次开启不间断电源、四 元泵、自动进样器、柱温箱、检测器,待 泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、
主机,最后打开色谱工作站。
一)参数设定
1、 波长设定: 2 、流速设定: 3 、流动相规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积
的流动相。
检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如
超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按检查管路后再操
作。
观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声
二、样品
1、采用过滤或离心方法处理样品,
确保样品中不含固体颗粒; 2、用流动相或比流动相弱(若为反
相柱,则极性比流动相大;若为
正相柱,则极性比流动相小)的 溶剂制备样品溶液,尽量用流动
相制备样品液;
3、手动进样时,进样量尽量小,使 用定量管定量时,进样体积应为 定量管的3~5倍;
第四步、注意事项
人的方法及实验结果;
3、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒, 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针
筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;
4、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过 滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗
四、出现肩峰或分叉
1.样品体积过大
1.用流动相配样,总的样品体积小于第一峰 的15% 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结不锈钢失效 2.采用较弱的样品溶剂 3.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1.目的规范高效液相色谱分析仪的使用和维护。

2.范围高效液相色谱的使用和维护。

3.系统组成本系统由2487检测器(2414检测器),1515输液泵(1525输液泵),717自动进样器及EMPOWER系统组成。

4.程序4.1 流动相和样液制备4.1.1 过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.45μm的过滤器过滤。

4.1.2 保持储液瓶的清洁普通的溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子。

应用HPLC级的水或溶剂清洗,不能在清洗过程中留下污迹。

4.1.3 保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂,水也应达到HPLC级,同样也要使用高纯度的缓冲液。

将流动相过滤、脱气后,用封口膜及时封好待用。

将待测的液体样品经0.45μm的水相滤膜过滤后,滤液备用。

4.2 开机按照检测器、柱温箱、自动采样器、泵、计算机的顺序,依次接通电源。

每次使用示差折光检测器进行样品分析时,需要提前打开,预热稳定。

4.3 高压输液泵的操作4.3.1 液相色谱系统泵的流速在0.1-10.0ml/min之间,要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,流动相的过滤和流动相的脱气。

下面列出预防泵故障的注意事项:(1)用高质量的试剂和HPLC级溶剂;(2)过滤流动相和溶剂;(3)脱气;(4)工作时使用泵头的排水孔不停的用10%甲醇/水的混合溶剂冲洗柱塞杆;(5)不让水和腐蚀性溶剂滞留在泵中;(6)定期更换垫圈;(7)加润滑油。

处于良好操作状态的泵,应该使色谱图上的基线平稳,保留时间的重复性良好。

等度洗脱时压力波动小于±2%。

梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。

4.3.2 常规准备工作包括:开通电源,溶剂脱气,泵头及溶剂管路除气泡及泵的启动。

4.3.3 接通系统电源,仪器各单元进行自检,数秒后通过,接受操作指令。

4.3.4 流动相脱气方式:超声波脱气10min。

4.3.5 系统中气泡的排除,泵启动时,调节所需要的通道流速为1ml/min,该通道调节为100%。

高效液相色谱法标准操作规程

高效液相色谱法标准操作规程

一、目的:建立高效液相色谱法标准操作规程,确保检验人员正确操作。

二、适用范围:适用于高效液相色谱法的测定。

三、职责:检验员负责本操作规程的执行。

四、正文:1 定义及概述:1.1 高效液相色谱系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法,注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并依次进入检测器,由积分仪或数据处理系统和处理色谱信号。

2 仪器与用具:高效液相色谱仪、进样器、电脑、试液瓶(1000ml)。

3 试液与试药:色谱甲醇、超纯水等。

4 对仪器的一般要求和色谱条件。

4.1高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。

色谱柱内径一般为3.9-4.6mm,填充剂粒径为3-10um。

超高效液相色谱仪是适应小粒径(约2um)填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。

4.2 色谱柱4.2.1反相色谱柱以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。

常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等;常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。

4.2.2正相色谱柱用硅胶填充剂,或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。

常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。

氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。

4.2.3离子交换色谱柱用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。

有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。

4.2.4手性分离色谱柱用手性填充剂填充而成的色谱柱。

4.2.5色谱柱的内径与长度,填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量,填充的致密及均匀程度等均影响色谱柱的性能,应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。

4.2.6温度会影响分离效果,品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温,应注意室温变化的影响。

为改善分离效果,可适当提高色谱柱温度,但一般不宜超过60℃。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程1 溶剂输送泵操作1.1 安装后的准备1.1.1 在烧杯中装入大约100mL异丙醇,在烧杯中放入吸滤器,将一段SUS 管的一端连接在泵出口,而另一端放入烧杯中。

1.1.2 将排液管的一端连接到排液管接口上,另一端放入废液瓶中。

1.1.3 打开电源ON,显示初始屏幕。

1.1.4 逆时针方向转动排液阀180度,打开排液阀。

按purge键,泵开始运行,指示灯亮。

1.1.5 冲洗完毕后,按一次func键,进入流速设定状态,并且设定流速1mL/min。

1.1.6 将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底,关闭排液阀。

1.1.7 按pump键,泵启动,指示灯亮。

大约3--5分钟后,再按pump键,泵停止运行,指示灯灭,完成操作准备。

1.2 运行的检查1.2.1 开始运行前务必确保:储液瓶中装有流动相,并且吸滤器已经放入储液瓶中。

排液管的另一端已经放入废液瓶中。

1.2.2 将排液阀旋钮逆时针方向旋转180度,打开排液阀。

1.2.3 按CE 键返回到初始屏幕。

按pump键,泵大约以1ml/min的流速运行(指示灯亮)。

1.2.4 观察流动相流出排液管大约10秒钟。

在此期间,流动相应连续流出并且无气泡出现。

1.2.5 再按pump或purge键,泵停止运行,指示灯灭。

1.3 上面两步完成后仪器进入工作状态。

2 紫外—可见检测器操作2.1 按下电源开关,打开仪器,将发生如下情况。

2.1.1 显示板上所用光点及指示灯亮。

自动检查内存,瞬间显示控制程序的版本号。

2.1.2 预热大约20sec,仪器的单色器找到其初始位置(大约1分钟)。

2.1.3 (使用氘灯的亮线(656nm)自检波长的准确性(大约10 sec)。

2.1.4 如果没有检查出错误,显示正确信息,几秒钟后,由初始屏幕代替原信息2.1.5 如果自检没有错误,屏幕显示正确,此时可以进行操作。

为初始状态,将显示初始屏幕。

2.2 设定测定波长2.2.1 按CE键。

高效液相操作规程

高效液相操作规程

高效液相操作规程一、目的本操作规程旨在规范高效液相色谱(HPLC)的使用流程,确保实验的准确性和重复性,同时保障操作人员的安全。

二、适用范围本规程适用于所有使用高效液相色谱仪进行分析的实验室人员。

三、操作步骤1. 准备工作a. 确保所有使用的试剂纯度符合要求,且无污染。

b. 检查并清洁色谱柱,保证无残留物影响分析结果。

c. 根据实验要求准备流动相,并调整至适当比例。

2. 仪器开机a. 打开电源,预热仪器至工作温度。

b. 检查并确保所有管道连接正确无漏液现象。

c. 启动色谱软件,进行系统自检。

3. 样品准备a. 根据实验要求,准确称量并溶解样品。

b. 通过适当方式(如过滤或离心)去除样品中的不溶物。

4. 样品注射a. 使用适当的注射器抽取样品。

b. 打开注射口,准确注射样品,然后封闭注射口。

5. 分析运行a. 根据实验方法设置流动相流速、柱温等参数。

b. 启动分析程序,实时监控色谱图谱。

c. 记录并保存分析数据。

6. 结束操作a. 关闭分析程序,停止流动相输送。

b. 清洗系统,包括色谱柱和注射器。

c. 关闭仪器电源,清理工作台面。

四、注意事项1. 在操作过程中应穿戴适当的实验室防护装备。

2. 避免直接接触有毒或腐蚀性的试剂和样品。

3. 定期对仪器进行维护和校准,确保分析结果的准确性。

4. 遇到任何异常情况,应立即停止操作并报告给实验室负责人。

五、安全措施1. 熟悉并遵守实验室安全规程。

2. 操作过程中应使用防护眼镜、实验服和手套。

3. 对于易挥发或有毒溶剂,应在通风良好的环境下操作。

4. 紧急情况下,立即启动紧急冲淋设备,并寻求医疗救助。

六、记录与报告1. 记录所有操作参数和样品分析结果。

2. 对于任何偏离标准操作的情况,应详细记录并报告。

3. 定期对操作记录进行审核,以优化操作流程和提高分析质量。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品,准确测定目标化合物的含量,并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。

二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化,启动色谱仪软件。

2. 调整流速,进样量等参数,使得实验条件符合要求。

3. 将样品通过移液管注入色谱柱中,注意避免样品泡沫和气泡的产生。

4. 设置色谱条件,如梯度洗脱,流速等,启动色谱分析。

5. 记录实验数据和结果,并进行数据处理和分析。

6. 清洗色谱仪,保持设备清洁。

四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时,要严格按照操作步骤进行,严禁随意更改参数。

2. 在进行样品进样时,要小心操作,避免产生气泡和样品泡沫。

3. 在进行色谱分析时,注意梯度洗脱条件的设置,保证分析结果准确。

4. 在实验结束后,及时清洗色谱仪,保持设备干净。

五、实验结果
根据实验数据和结果,可以得出目标化合物的含量和纯度,并进行结果的解释和分析。

通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习,使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧,能够准确进行样品分析,为科研工作的开展提供了重要的技术支持。

高效液相色谱仪使用与操作规程(学生用PPT培训课件

高效液相色谱仪使用与操作规程(学生用PPT培训课件
高效液相色谱仪使用与操作 规程(学生用ppt培训课件
目录
• 高效液相色谱仪简介 • 高效液相色谱仪的安装与调试 • 高效液相色谱仪的使用步骤 • 高效液相色谱仪的维护与保养 • 安全注意事项 • 高效液相色谱仪的发展趋势与展

01
高效液相色谱仪简介
定义与特点
定义
高效液相色谱仪是一种分离和分 析复杂混合物中各组分的仪器, 广泛应用于化学、制药、食品、 环保等领域。
检测器技术升级
发展高灵敏度、高稳定性和高可 靠性的检测器,提高检测精度和
可靠性。
应用领域拓展
新药研发
高效液相色谱技术在药物分析、药物代谢和药物 动力学等领域发挥重要作用。
环境监测
用于检测水体、土壤和空气中的污染物和有害物 质,为环境保护提供有力支持。
食品安全
用于检测食品中的农药残留、添加剂、毒素等有 害物质,保障食品安全。
确保实验室环境干燥、 清洁,避免仪器受潮 或落尘。
操作时应避免剧烈振 动仪器,以防损坏内 部组件。
仪器安全
定期检查仪器管路是否漏液,若 有漏液应及时处理。
仪器应放置在通风橱内,以防气 体泄漏对实验人员造成危害。
仪器使用完毕后应关闭所有电源, 并按照仪器说明书进行保养。
数据安全与保密
操作过程中避免无关人员靠近 仪器,以防误操作导致数据丢 失或损坏。
仪器保养与校正
01
02
03
04
定期对仪器进行全面检查,包 括泵、进样阀、色谱柱和检测
器等部件。
根据仪器使用情况,适时清洗 或更换泵内滤网、色谱柱和检
测器。
按照厂家推荐,使用专用工具 和材料进行保养和校正。
定期对仪器进行性能验证,确 保其准确性和可靠性。

waters高效液相操作规程

waters高效液相操作规程

Waters 高效液相操作规程1. 简介高效液相色谱(High-performance liquid chromatography,HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。

Waters 公司是高效液相色谱仪器和耗材的主要供应商之一,本文将介绍 Waters 高效液相操作规程,以确保用户能正确、高效地操作 Waters 高效液相色谱仪器。

2. 仪器准备在进行高效液相色谱操作之前,首先需要准备好仪器。

以下是准备步骤:2.1 仪器检查检查仪器是否处于正常工作状态,确保所有液体泵、进样器、检测器等部件均正常联通。

2.2 操作软件启动启动 Waters 高效液相色谱仪器的操作软件,并连接仪器。

确保软件能够正常与仪器通讯。

2.3 样品准备根据分析目的,准备好待测样品溶液,并根据需要进行适当稀释或前处理。

3. 方法设置3.1 选择方法根据分析目的选择合适的方法。

在 Waters 高效液相色谱仪器操作软件中,点击“Method”(方法)选项卡,选择已有方法或新建方法。

3.2 参数设置根据分析需求设置方法参数,包括流速、柱温、分析时间等。

在操作软件的方法设置界面中进行参数设置。

3.3 样品进样选择进样器类型(自动或手动),设置进样体积和进样方式。

将样品溶液注入进样器,并进行相关设置。

4. 色谱柱操作4.1 切换柱根据需要,选择合适的色谱柱,并确保柱已经连通到色谱系统中。

4.2 柱平衡对于新柱,需要首先进行柱平衡。

在操作软件中选择柱平衡功能,根据提示进行操作。

5. 运行实验5.1 实验开始确认实验条件设置正确后,点击操作软件中的“Run”按钮,开始实验运行。

5.2 监控运行在实验运行过程中,密切监控柱压、流速和检测器信号等参数,确保实验正常进行。

5.3 数据记录实验运行结束后,保存实验数据。

点击操作软件中的“Save”按钮,选择保存路径和文件名。

6. 仪器关闭6.1 实验结束实验完成后,点击操作软件中的“Stop”按钮,停止实验运行。

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程1目的建立高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程,为了使操作者操作高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)更规范,保证结果更精确。

2范围适用于高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程。

3职责操作者。

4程序4.1开机4.1.1打开Allianee电源开关,仪器进入自检状态。

4.1.2打开检测器,“STATUS”闪烁,4分钟后“LAMP”亮,仪器正常。

4.1.3点击menu/Status进入“STATUS”界面,按direactfunction,选择dryprime后,选择“A/B/C/D”四个泵,点击“Enter”,管道快速充满液体。

4.1.4打开电脑,点击“Empower”登陆,输入帐户“system”,密码“manage”,进入“EmpowerPro”。

4.1.5在配置系统中新建一项目。

4.1.6点击“运行样品”,选择“项目”,3分钟后仪器进入运行界面。

4.2样品检测4.2.1点击“编辑”,编辑仪器方法并保存方法名。

4.2.2点击“新建方法组”,编辑方法组名。

(要求方法组与仪器方法同名)4.2.3标识样品名、进样品/进标准品、样品位置、进样体积、运行时间后,于“file”中保存参数4.2.4点击“准备”,仪器显示“准备进样”后,点击进样。

4.2.5点击鼠标右键,选择“波长”和“正好运行时间”,保存参数4.3数据处理4.3.1点击“浏览项目”,于“进样”栏中双击所选的样品名,进入“通道”栏,双击所选的样品名,进入样品数据主窗口4.3.2选择波长,点击“提取色谱”后,积分或以处理方法向导处理数据,保存处理方法后,于“file”“保存”中保存“全部”。

4.4打印报告4.4.1于所选“浏览项目”结果栏中,选择已处理好的数据(如果没有,点击更新),点击右键,选择预览报告。

4.4.2选择报告方法,确定后,进入报告预览状态。

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程

高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。

安装好色谱柱。

二、检查供电电源是否稳定,各部件连接是否牢固。

三、开启仪器检测器和泵电源,待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后,开启
仪器工作站,即双击桌面上图标LCwin1.0。

四、点击工作站中控制采集,点击开启,待仪器自检通过后,进入仪器控制采
集界面。

五、依次用甲醇、甲醇:水=2:8、流动相进行冲洗色谱系统,每次更换更换溶
液时,均需拧开放空阀,选择菜单泵下的快速冲洗模式,选定合适的时间进行冲洗,赶走泵内气泡。

确定泵内无气泡后,停止冲洗模式,关闭放空阀。

六、更换换上流动相后,按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。

待色谱
设备达到平衡状态(柱压稳定,工作站基线稳定,一般需30-40min)后,即可进样分析。

七、分析完毕后,流动相中存在缓冲盐等溶剂,需先用甲醇:水=2:8,进行冲洗
至少30min,再用甲醇冲洗,待柱压降至正常值(依色谱柱而定,即柱压稳定后),停泵。

柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。

八、样品分析应做好原始纪录,内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。

九、仪器如出现故障,应及时报告专业维修单位或专职维修人员,未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。

十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。

仪器室内应配备二氧化碳灭
火器,分析人员应能正确操作使用。

U3000高效液相色谱仪操作规程及封面

U3000高效液相色谱仪操作规程及封面

U3000高效液相色谱仪操作规程及封面第一章绪论1.1编写目的本操作规程的目的是为了规范和指导U3000高效液相色谱仪的使用,保证实验室成员能够正确有效地操作仪器,获得准确可靠的实验结果。

1.2适用范围本操作规程适用于U3000高效液相色谱仪的使用者。

1.3安全注意事项1.3.1操作前检查仪器电源是否正常,地线是否入地良好。

1.3.2仪器操作需戴好实验手套,以免对操作人员造成伤害。

1.3.3仪器操作时需注意化学品的毒性和腐蚀性。

1.3.4在进行一些实验操作前,需事先测定溶剂的pH值。

1.3.5离开仪器时,关闭电源并断开电源线。

第二章仪器准备工作2.1开机操作2.1.1检查电源、电源线是否连接正常。

2.1.2打开仪器电源开关,待仪器启动完成后进入下一步操作。

2.2仪器检查2.2.1检查进样器是否安装正确。

2.2.2检查流量计、压力计是否正常。

2.2.3检查溶剂瓶是否已加满溶剂。

2.3校准仪器2.3.1进行空气校正和流量校正。

2.3.2校准UV检测器和荧光检测器。

第三章样品准备与进样3.1样品准备3.1.1按照实验需要将样品制备好。

3.1.2不同样品需使用不同的溶剂进行稀释。

3.2进样准备3.2.1将样品注射到进样器中。

3.2.2调整进样量和进样方式。

第四章仪器操作4.1开始分析4.1.1设置分析条件:流速、柱温、波长等。

4.1.2选择合适的柱和检测器。

4.2进行分析4.2.1打开仪器操控软件,点击开始分析。

4.2.2实时监测色谱图,记录实验数据。

4.3实验结束4.3.1点击停止按钮结束分析。

4.3.2关闭仪器,清洗仪器各部件。

第五章紧急故障处理5.1仪器故障分类5.1.1仪器无法启动。

5.1.2仪器无法进行分析。

5.1.3色谱图异常。

5.2故障排除方法5.2.1仪器无法启动:检查电源和电源线连接是否正常。

5.2.2仪器无法进行分析:检查润滑油和溶剂是否已用尽。

5.2.3色谱图异常:检查柱是否老化或损坏。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

赛默飞世尔(原戴安)
液相色谱操作规程-U3000
一、操作前准备:
1.1流动相的配制:
1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。

1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜(0.45um)还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。

1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。

1.2对照品供试品处理:
1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品,用适当的溶剂(最好采用流动相或流动相的主成分)进行充分溶解(也可借助超声波进行超声溶解),使其浓度为0.1~1mg/mL(根据检测结果再适当调节溶液的浓度)。

1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜(0.45um)还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。

1.3色谱柱的选择:根据样品的性质选择适当的色谱柱。

二、开机:
2.1打开UPS(不间断电源)电源,打开仪器接线板电源开关;
2.2打开电脑显示器电源,打开电脑主机电源(POWER),启动电脑;
2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源;
2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。

2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标(工作站主程序)。

2.6在左下方点击仪器,则在右边会自动显示该仪器控制面板。

2.7旋开泵上的排液阀(两圈以上);设置A通道为100%,点击“冲洗”,然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”;(默认冲洗5分钟);然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡;排完气泡后关闭排液阀;
2.8设置流动相的比例及流速后,点击“马达”。

此时泵自动会以设置的流速进行运行。

2.9在控制面板“柱温箱”控制框中,设置准备分析样品所使用的柱温箱温度。

3.0清洗进样器:依次执行灌注注射器,清洗缓冲环,外部清洗针。

三、样品分析:
3.1建立仪器方法:
3.2建立处理方法及报告模板(此步骤可以省略,直接调用以前的):
3.3建立序列:
3.4打开氘灯(待系统压力稳定后约15min后再开灯):在控制面板“Detector”控制框中,选中“紫外灯”选框,及“可见灯”选框(如果波长在可见范围)。

3.5在控制面板“UV”控制框中,设置波长,采集频率(10HZ),时间常数(0.5s);点击“监视基线”,选中通道1并确定。

3.6待基线稳定后,点击“监视基线”,点击确定,关闭查看基线。

3.7点击左下方“数据”,并选中要分析的序列,然后点击“开始”启动样品表进行分析(如果序列里有完成的样品,则会变成继续,点继续;如果该序列还在队列中则会显示删除,点击删除后在点击继续);
3.8样品全部检测结束后,如果不再分析样品应立即关掉氘灯,延长氘灯使用的寿命
四、数据处理:
4.1处理标准曲线;
4.2打印标准曲线;
4.3打印样品报告。

五、关机:
5.1冲洗色谱柱(如果使用了缓冲盐,首先使用10%甲醇水溶液冲洗色谱柱30分钟,然后使用纯甲醇冲洗色谱柱30分钟)。

5.2关闭泵马达,断开连接,关闭工作站。

5.4关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。

5.5关闭计算机。

关闭UPS电源或稳压电源。

六、注意事项:
6.1溶剂泵的使用注意事项:
(1)使用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转会磨损柱塞、缸体和密封环,最终产生漏夜。

(2)防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其他任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体颗粒。

流动相过滤,可采用滤
膜(0.2um或0.45um)等滤过。

(3)输液泵的工作压力不能超过规定的最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏夜。

(4)流动相应该先脱气,以免在泵内产生气泡,影响流量的稳定性,如果有大量的气泡,泵就无法正常工作。

(5)溶剂泵长期不用时,用甲醇以1.0ml/min冲洗各个通道。

(6)泵的清洗液要勤换。

(7)每次开启泵之前要排除管道中是气泡。

(8)流动相由无机盐溶液转换有机溶剂前要用90%去离子水清洗管路。

(9)转换不同流动相时注意两者是否容易混合或者发生反应。

(10)长期不用或运输前要到空清洗液瓶。

6.2色谱柱的使用注意事项:
(1)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因
此在调节流速时应该缓慢进行,进样阀的转动不能过缓。

(2)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产厂家指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会迅速降低柱效。

(3)选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。

有时可以在进样器前连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析之前
被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被破坏。

(4)避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。

保护柱一般是有相似固定相的短柱,也
有用浸透限制固定相短柱。

保护柱可以经常更换。

(5)保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。

绝对禁止将缓冲液留在柱内静置过夜或更长时间。

6.3检测器的使用注意事项:
(1)长时间检测池中无流动相流动时,关闭检测器氘灯。

(2)不要将物品或其他仪器档住检测器的散热孔。

(3)检测器安装的位置应没有震动,温度变化不大,避免阳光直射。

(4)在关灯命令发出后,再次开灯须等待5分钟以上的时间。

否则灯会因为过热而损坏。

相关文档
最新文档