小鼠肝癌原位移植模型的建立及其研究意义

合集下载

建立小鼠肿瘤模型的研究进展

建立小鼠肿瘤模型的研究进展

建立小鼠肿瘤模型的研究进展摘要:建立一种理想的肿瘤动物模型对研究肿瘤的发病、治疗和预防有重大的意义。

其中小鼠肿瘤模型具有生长周期快、易获得、易操作等优点被基础实验研究所广泛采用,如何选择和建立一个合适的小鼠肿瘤模型对肿瘤的整个研究有着举足轻重的作用。

关键字:肿瘤,动物模型,小鼠肿瘤,是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病。

对肿瘤的研究一般都是在人类疾病动物模型的基础上展开的。

建立一个完全反映人类疾病的动物模型比较困难,但可依据不同的实验目的选择相应的动物实验模型。

1.实验动物的选择可用作肿瘤模型的动物有很多,小鼠肿瘤模型作为其中一种常用模型主要因为有以下几个优点。

(1)易获得,常用的肿瘤模型小鼠通常采用SPF级小鼠,SPF级小鼠一般医学院校及研究所都能买到。

(2)生长周期短,一般小鼠肿瘤模型两周左右就能长大,能大大缩短实验周期。

(3)易操作,小鼠的动物实验操作一般简便,因此可适当增加组内样本数量,使实验数据更具说服力。

2.理想的建立肿瘤模型应具备的条件(1)肿瘤生长的过程应与人类肿瘤生长过程相似,做到尽可能复制出与人类肿瘤相同的模型。

(2)制作模型的方法简单易行。

(3)动物模型的重复性要好,要能满足实验的多次重复试验结果稳定性好。

(4)采用的建模方法对实验人员和环境无危害或危害较小。

3.肿瘤来源的选择现在世界上保有近500种的动物移植瘤,但常用于筛药的不到40种,多数为小鼠肿瘤,其次是大鼠和仓鼠移植瘤,包括小鼠L1210淋巴白血病,P1534淋巴白血病,艾氏腹水瘤,Friehd病毒白血病,肉瘤180,白血病P388,Lewis肺癌,腺癌755,白血病615,Walker-256,吉田肉瘤,肉瘤45,Liol淋巴瘤,Dunning 白血病,Wagner癌肉瘤,白血病L5170Y,P1798淋巴肉瘤,LPC-1浆细胞瘤,淋巴瘤8,B16或Cloadman黑色素瘤,Ridaway骨肉瘤,Gardner 淋巴肉瘤,肉瘤37,P315白血病,Mur hy-sturm淋巴肉瘤,Jensen肉瘤,Geurin氏癌,仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。

小鼠肝癌模型的建立及PTP1B表达的研究

小鼠肝癌模型的建立及PTP1B表达的研究

小鼠肝癌模型的建立及PTP1B表达的研究肝癌是目前世界上最常见的癌症之一,而小鼠肝癌模型是研究肝癌病理生理学、分子遗传学等方面的重要工具。

本文将介绍小鼠肝癌模型的建立过程及PTP1B表达的研究。

1. 小鼠肝癌模型的建立小鼠肝癌模型可以通过许多方法进行建立,其中最常用的是化学诱导法、基因改造法和放射性物质诱导法。

本文将着重介绍化学诱导法建立小鼠肝癌模型的过程。

首先,选择适合的小鼠品系进行实验,一般选择C57BL/6J品系的雄性小鼠。

然后,通过口服或注射的方式给小鼠灌服化学致癌物质二甲基亚硝胺(DMN)、二乙二酸氮氫鈉(DEN)或对二氯苯胺(2-AAF)等化学物质,导致肝脏发生损伤和炎症反应,进而促进肝癌的发生。

此后,可根据肝癌的形态特征、肿瘤大小和数量、肿瘤组织学特征等指标对小鼠进行肝癌诊断。

2. PTP1B表达的研究PTP1B是一种酪氨酸磷酸酶,在正常情况下具有负调控胰岛素和胰高血糖素信号通路的作用。

PTP1B在多种人类肿瘤中发挥着重要的作用,如乳腺癌、前列腺癌和肝癌等。

因此,对PTP1B在肝癌发生发展中的作用进行深入研究具有重要意义。

通过小鼠肝癌模型可以获得不同发展阶段的肝癌组织标本,可用于研究PTP1B的表达情况。

目前主要采用免疫组织化学、Western blot、实时荧光定量PCR等技术手段进行测定。

研究结果显示,肝癌组织中PTP1B的表达显著升高,与肝癌细胞增殖和转移相关。

另外,PTP1B抑制剂等新型治疗手段的出现为治疗肝癌带来了新的机遇。

通过对PTP1B的研究,不仅可以深入了解肝癌的发生发展过程,还可以为肝癌的治疗提供新思路和策略。

总之,小鼠肝癌模型的建立和PTP1B表达的研究对于肝癌相关研究具有重要的意义。

未来还需要进一步加强肝癌发生机制和新型治疗手段的研究,为肝癌的预防和治疗提供更有效的手段。

原位移植法建立肝脏H22肝癌细胞移植瘤小鼠模型

原位移植法建立肝脏H22肝癌细胞移植瘤小鼠模型

World Journal of Cancer Research 世界肿瘤研究, 2015, 5, 15-20Published Online January 2015 in Hans. /journal/wjcr/10.12677/wjcr.2015.51003Orthotropic Transplantation to EstablishH22 Hepatocellular Carcinoma Model in MiceChen Han1,2, Hengxiao Wang1,2*, Zhaoxia Wang31Department of Immunity, Institute of Basic Medicine, Shandong Academy of Medical Sciences, Ji’nan2School of Medicine and Life Sciences, University of Jinan-Shandong Academy of Medical Sciences, Ji’nan3Department of Pathology, Institute of Basic Medicine, Shandong Academy of Medical Sciences, Ji’nanEmail: *wanghengxiao@Received: Nov. 24th, 2014; revised: Dec. 22nd, 2014; accepted: Dec. 30th, 2014Copyright © 2015 by authors and Hans Publishers Inc.This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY)./licenses/by/4.0/AbstractObjective: To establish a liver orthotropic transplantation tumor model with H22 cells, for the further development of the related experimental study. Methods: A certain number of H22 cells were directly injected in the left lobe of the liver in C57BL/6 mice, establishing a transplanted tu-mor model of hepatocellular carcinoma in situ. Results: After 7 days of surgery, the liver surface appeared irregular size nodules, nodules increased with the prolongation of time increases, the late abdominal organs appeared invasion, adhesion, ascites was increased. Histopathological ex-amination of liver tumor tissues and adjacent tissues of cancer showed that liver orthotropic transplantation tumor formation rate was 100%, no spontaneous regression. Conclusions: Ortho-tropic injection of H22 cell established orthotropic transplantation tumor formation in the liver, and the tumor formation time was relatively short, tumor formation processes associated with organ metastasis and ascites. This model was reasonable to simulate the pathological and physio-logical body of liver cancer in human, and could satisfy the requirement of research on liver can-cer.KeywordsHepatocellular Carcinoma, Orthotropic Transplantation, Experimental Animal Models原位移植法建立肝脏H22肝癌细胞移植瘤小鼠模型韩琛1,2,王恒孝1,2*,王朝霞3*通讯作者。

采用直接注射法制作BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤模型探讨

采用直接注射法制作BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤模型探讨

采用直接注射法制作BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤模型探讨摘要目的:培养小鼠BNL肝癌细胞,采用直接注射法制作BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤,为后续实验奠定基础。

方法:小鼠BNL肝癌细胞体外培养,将调整好的对数生长期的肝癌细胞直接注射到小鼠肝脏,15日后解剖实验小鼠取下肝左叶,4%多聚甲醛固定、常规组织包埋、切片及HE染色后镜下观察。

结果:实验小鼠在肝脏左叶均可以见到肿瘤生长,HE染色示肝细胞肝癌。

结论:直接注射法制作BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤模型可操作性强,成癌率高且周期短,值得推广使用。

标签:BALB/c小鼠;肝癌;原位移植瘤;前言肝癌是世界范围内发病率第五,死亡率第三的癌症,而在我国肝癌死亡率居恶性肿瘤死亡率的第二位[1 2]。

所以早期发现、早期诊断、早期治疗是肝癌防治的关键。

因此,如果能够建立一个类似人肝癌的理想模型,从而积极的用于癌症的相关研究,将会对肝癌药物的临床实验治疗具有深远的意义。

建立肝癌的模型临床报道较多,但采用培养好的肝癌细胞直接注射在小鼠肝脏上制作肝癌原位模型在临床上是比较常见的[3]。

查阅文献发现BALB/c小鼠属于近交系的小鼠,此类小鼠的成瘤率高,而且容易饲养,因此我们探索了采用直接注射法[4]建立BALB/c小鼠肝癌原位移植瘤的方法。

1 实验材料与方法1.1 实验动物健康雌性BALB/c近交系小鼠,6周龄,体重18±2g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,合格证号:SCXK(京)2009-0007,饲养于贵阳中医学院中心实验室动物房。

1.2 实验试剂胎牛血清、DMEM高糖购自美国Gibco公司,青链霉素混合液、0.25%的胰蛋白酶购自美国Hyclone公司。

1.3 实验方法和步骤1.3.1 细胞培养将购买的小鼠BNL肝癌细胞株培养于浓度为15%的DMEM 高糖培养基中,37度,5%的CO2培养箱中常规培养,细胞生长到一定程度用0.25%的胰蛋白酶进行消化,继续传代培养,最终达到实验要求的细胞浓度。

疾病小鼠模型系列之肝癌篇

疾病小鼠模型系列之肝癌篇

疾病小鼠模型系列之肝癌篇前面疾病模型专题已经为大家介绍了肺癌及胃癌小鼠模型,今天是疾病模型专题第三讲,小编将为大家介绍肝癌相关的小鼠模型。

近年来,肝癌的发病率在全球呈上升趋势。

根据美国癌症学会官方期刊发表的《2018年全球癌症统计数据》报告显示[1],肝癌发生率高居恶性肿瘤第六位,是导致癌症相关死亡的第四大疾病(Fig.1)。

其中,中国的肝癌病例数占全世界总数的55%,肝癌已经成为我们的国家病。

Fig.1 排名前10的癌症在全球范围内的发病和死亡占比诱导肝癌发生的相关因素特别多,诸如:病毒,化学致癌物,酒精等,但其确切的发病机制目前尚不清楚。

因此,建立与人类肝癌生物学特性相近的动物模型,对于肝癌发病机制的研究以及药物开发具有重要的现实意义。

首先我们一起来了解肝癌基本知识!肝癌的分类肝癌主要分为原发性及继发性两种。

●原发性肝癌:肝细胞或肝内胆管细胞发生的癌肿,为我国常见恶性肿瘤之一。

原发性肝癌根据不同的组织类型分为:肝细胞肝癌(HCC)和肝内胆管细胞癌(ICC),其中HCC最为常见,约占70-85%。

●继发性肝癌:又称为转移性肝癌,其他脏器的肿瘤细胞经过血液、淋巴或直接侵入肝脏引发的肿瘤。

肝癌的发展进程肝癌的发生是一个多阶段逐渐演变恶化的过程,从最初的肝炎到肝硬化,再到最后的肝癌,是一个多步骤的发展过程[2]。

Fig.2 肝损伤不同阶段(图片来自于网络)由于不同病因会引发不同基因的改变,导致肝癌具有异质性(Fig.3)[3],因此肝癌模型不具有普遍性。

接下来,小编就目前常用的肝癌模型进行综述,供广大研究者进行参考。

Fig.3 常见的肝癌模型病理图(a.DEN诱发的肝癌; b. DEN+CCl4诱发的肝癌;c.Mdr2肝特异性敲除引发的肝癌;d.Tak1肝特异性敲除引发的肝癌; e.Pten肝特异性敲除引发的肝癌;f.原位注射肿瘤细胞引发的肝癌)常见的肝癌动物模型01 01诱发性肝癌模型许多化学致癌剂达到足够的剂量及时间可诱发动物形成肿瘤。

不同方法建立小鼠肝癌原位移植瘤模型差异性的探讨

不同方法建立小鼠肝癌原位移植瘤模型差异性的探讨

不同方法建立小鼠肝癌原位移植瘤模型差异性的探讨潘蕊;喻锟;张海亮;郑永仁;赵笑雨;唐钧泽;吴健铭;程欣【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2024(32)3【摘要】目的比较肿瘤细胞注射和肿瘤组织块移植方法建立小鼠肝癌原位模型的差异,为小鼠肝癌原位模型的建立提供技术参考。

方法取健康雄性KM小鼠,随机分为4组:A组注射小鼠肝癌H22细胞;B组注射腹水型肝癌H22细胞;C组采用小鼠肝癌组织块移植法;D组肝部注射生理盐水作为假手术组。

定期观察各组小鼠活动情况、体重变化。

记录4组小鼠的生存时间。

观察各组小鼠肝部成瘤状况、肿瘤程度、与腹腔脏器粘连程度和转移情况,并进行B超成像,检测血清中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)、异常凝血酶原(des-gamma-carboxyprothrombin, DCP)的浓度及苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。

结果 A组、B组、C 组小鼠造模操作时间分别为(3.36±0.44)min、(3.30±0.41)min、(5.68±0.65)min。

建模第25天,A组、B组、C组小鼠成瘤率均100.0%,A组腹腔重度粘连率为40.0%,B组腹腔重度粘连率为60.0%,C组与D组均未出现重度腹腔粘连。

A组、B组、C组小鼠腹水出现率分别为40.0%、100.0%、0.0%;腹壁瘤出现率分别为30.0%、60.0%、0.0%。

B组小鼠还存在肝转移情况(40.0%)。

B超成像、血清AFP和DCP水平检测、组织病理学检查结果显示,与D组小鼠相比,A组、B组、C 组小鼠肝边缘均不光滑,回声欠均匀,可见稍低回声包块;保持AFP、DCP高分泌;存在大量炎症细胞与肿瘤细胞。

结论在第25天时,3种方法均可以建立肝癌原位移植模型,其中,相较于肝癌组织块移植,肿瘤细胞注射具有操作简单、肝内存在多个转移结节的特点。

而肝癌组织块移植相较于肿瘤细胞注射,则具有对腹腔等脏器影响较小等特点。

小鼠肝癌原位移植模型的建立及其意义的研究

小鼠肝癌原位移植模型的建立及其意义的研究

小鼠肝癌原位移植模型的建立及其意义的研究项亮亮;侯杰;王婕;焦成斌【摘要】目的:探讨用肝癌H22细胞建立小鼠肝癌原位移植模型.方法:将肝癌H22细胞注入小鼠腹腔内,建立异位移植模型;抽取腹水中癌细胞接种于小鼠肝实质内,建立原位移植模型.结果:移植后10d可扪及肿瘤生长,模型成功率94.4%;晚期自发转移率79.4%,腹水产生率35.3%,无自发消退;移植瘤保持甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原(DCP)高分泌及γ-氨基酰转氨酶(γ~GT)同工酶阳性的特点;模型平均自然生存期28d.结论:小鼠肝癌原位模型成功率高,易于制作,生物学特征符合模拟人类肝癌在体内发生发展的全过程,可成为今后人类研究肝癌的重要动物模型.【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2015(038)006【总页数】2页(P48-49)【关键词】肝癌;H22细胞;原位移植模型;小鼠【作者】项亮亮;侯杰;王婕;焦成斌【作者单位】佳木斯大学附属第一医院普外二科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院普外二科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院普外二科,黑龙江佳木斯154003;佳木斯大学附属第一医院普外二科,黑龙江佳木斯154003【正文语种】中文【中图分类】R735.7肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,因其发病率高、恶性程度高、死亡率高,素有“癌中之王”的称号[1]。

目前已有大量研究为肝癌临床的治疗提供基础依据,而肝癌动物模型一直是肝癌临床与基础研究工作的重要工具。

目前有关人肿瘤转移模型大多是用裸大鼠、裸小鼠,动物肿瘤则多数是用Wistar或SD大鼠建立的,而用小鼠建立原位肿瘤移植模型国内外报道较少。

小鼠作为一种更经济,易饲养,易获得的实验研究载体,在发挥其普遍应用性方面有着重大的作用。

小鼠肝癌原位移植模型作为一种新型的动物模型是否能更好地模拟人肝癌在体内发生、发展、侵袭及转移的过程,本实验将研究报道如下。

基于小鼠模型的肝纤维化和原发性肝癌研究

基于小鼠模型的肝纤维化和原发性肝癌研究

基于小鼠模型的肝纤维化和原发性肝癌研究肝纤维化和原发性肝癌是两种疾病,它们都与肝脏健康密切相关。

肝纤维化是一种进程性疾病,它的发生是由于各种因素导致的肝细胞受损,细胞死亡后,会形成纤维组织。

这个过程是逐渐发展的,细胞死亡和纤维组织增加,对肝脏的正常功能造成严重影响,最终进展成肝硬化。

原发性肝癌是一种恶性肿瘤,它发生在肝细胞或肝内纤维组织细胞。

这种疾病常常是由于慢性肝病引起的,如乙型肝炎、丙型肝炎和酒精性肝病等。

总的来说,研究肝纤维化和原发性肝癌,可以从肝脏健康和疾病预防角度出发,为肝脏及其他相关疾病的治疗奠定基础。

作为一种重要的动物模型,小鼠模型已被广泛应用于肝纤维化和原发性肝癌的研究。

从肝纤维化的角度来看,小鼠模型可以被用来研究诸如非酒精性脂肪性肝病(NASH)和肝炎病毒感染等因素对肝纤维化的作用。

例如,在 NASH 模型中,小鼠被喂养高脂饮食使其体内脂肪积聚,模拟人类的肥胖症,这种情况下,肝细胞会被困扰并逐渐受损,这些变化直接促进了肝纤维化和肝硬化的发展。

而在肝炎病毒感染模型中,科学家会给小鼠注射肝炎病毒,导致小鼠患上肝炎,随着肝脏细胞被破坏,纤维组织也会开始聚集形成,从而造成肝纤维化和肝硬化的发展。

这些模型的使用,可以模拟人类的病理过程,并有助于科学家理解人类肝疾病发生的机制,提供治疗方案。

肝癌是一种严重的恶性肿瘤,它的研究也使用了小鼠模型。

小鼠模型可以模拟人类肝癌的发展,例如带有特定基因突变的小鼠特别容易发生肝癌,这与人类的基因突变一样。

利用CRISPR-Cas9技术可以在小鼠体内改变某些基因的序列,从而形成肝癌。

在小鼠体内研究肝癌发展及肿瘤治疗的线索,可以为人类的治疗提供宝贵的信息和启示。

此外,研究人员还可以使用小鼠模型研究化疗、放疗和免疫治疗等方法,发现最佳治疗方案,提高治疗效果。

总之,小鼠模型已成为肝纤维化和原发性肝癌研究中不可或缺的工具,其使用大大推动了这个领域的发展。

但我们也要注意,在使用小鼠模型的过程中,必须严格控制伦理道德,保证实验的科学性,并尽量追求缩小和预测小鼠模型与人类疾病之间的差异,帮助人类的预防和治疗。

小鼠模型在肿瘤免疫研究中的进展与意义

小鼠模型在肿瘤免疫研究中的进展与意义
研究发现,在小鼠上 过 表 达 某 些 致 癌 基 因 或 者 敲 除某些抑 癌 基 因 可 导 致 肿 瘤 的 发 生 。 [18] 例 如 Trp53 的缺失诱导了淋巴瘤,小 鼠 乳 腺 肿 瘤 病 毒 启 动 子 控 制 的 Erbb2 转 基 因 诱 导 了 乳 腺 腺 癌,由 Eμ 控 制 的 vAbl癌基因诱导了浆细胞瘤IgH 基因 相 关 的 增 强 子, 以及在 Vav启动子控制下表 达 的 Bcl2 转 基 因 诱 导 了 滤泡性淋巴瘤。这些 例 子 说 明,实 体 癌 和 血 液 系 统 肿 瘤都处于免疫监视下。有 研 究 表 明,即 使 是 完 全 转 化 的恶性细胞也可能使抑癌 基 因 失 活,这 意 味 着 使 抑 癌 基因重新活化可 导 致 肿 瘤 消 退 。重 [19-20] 要 的 是,这 种 影响可能需要免疫监视 系 统,例 如 肝 细 胞 癌 中 p53 的 重新激活 导 致 被 固 有 免 疫 效 应 物 清 除 的 恶 性 细 胞 衰老。
究 恶 性 细 胞 与 免 疫 细 胞 之 间 的 关 系 。 恶 性 肿 瘤 的 各 种 小 鼠 模 型 奠 定 了 肿 瘤 免 疫 学 的 基 础 ,指 导 了 免 疫 监 视 、免
疫平衡和免疫逃逸理论的形成,故构建 动 物 模 型 在 研 究 中 起 到 至 关 重 要 的 作 用。本 文 就 近 年 来 有 关 肿 瘤 免 疫
immunecellscanbestudied.Various mouse modelsof malignanttumorshavelaidthefoundationfortumor immunologyandguidetheformationofimmunesurveillance,immunebalanceandimmuneescapetheory,so

H22昆明鼠肝癌原位模型的建立

H22昆明鼠肝癌原位模型的建立

鼠 中有 9 5只造模成功 , 2 2只小鼠 出现肝癌右叶转移。结论 : H 2 2昆明 鼠肝癌原住模 型成功率 高, 成本低 , 值得推 广 , 是非 常理
想 的研 究 肝 癌 的 实验 动 物 模 型 。
关 键 词 :H 2 2 ; 肝癌 ; 原位模型 ; 动 物 实验
中图分类号 : R 7 3 5 . 7 文献 标 识 码 : A 文章编 号 : 1 0 0 8— 0 1 0 4 ( 2 0 1 5 ) 0 1— 0 0 7 8— 0 2
肝膈 面实 质 内 , 退 出针 头 , 轻压针眼, 取 灼 红 的铁 丝
展、 侵袭 及转 移 的过程 , 具有 极 高 的基 础及 临 床应用 价值 , 尤其值 得 提 出的是在 本实 验造 模过 程 中 , 笔者 充 分发 挥 了肿瘤 外科 的优 势 , 采 用无 瘤操 作原 则 , 有 效 的避 免肿 瘤 细胞 逃 逸及 种植 , 与 以往 的各 种 造模
方法 比较 , 有效 的避 免 了肿 瘤 细 道 , 以 防止 肿 瘤 细胞 逃 逸 , 发 生 腹 腔种 植 , 将肝 左 叶轻 轻 送 回腹 腔 , 查 无 活 动 性 出血 , 取 1号丝 线 分 别 缝 合 腹 白线 及 皮 肤 , 再 次消毒 , 术 毕。

7 8・
黑龙江医药科学 2 0 1 5年 2月第 3 8卷第 1期
H 2 2昆 明 鼠肝 癌 原位 模 型 的建 立①
侯 杰, 罗 兰, 焦成 斌 , 杨彦 民 , 何其 勇 , 张 晓丽 , 刘伟 新
( 佳 木斯 大学附属 第一 医院普外二科 , 黑龙江 佳 木斯 1 5 4 0 0 3 )
白色 , 质硬 , 造模 成功 , 成瘤率为 9 5 % 。病 理 学 观察

如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定

如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定

如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定小鼠肿瘤模型的建立及鉴定是癌症研究中非常重要的一步,可以用于研究肿瘤的发生机制、治疗策略以及评估新的抗癌药物。

下面将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立及鉴定的方法并提供一些实用的技巧。

肿瘤模型建立的方法主要包括人工移植方法、化学物质诱导方法和遗传工程方法。

一、人工移植方法:1.将人类肿瘤细胞、移植物肿瘤组织或细胞株移植到小鼠体内,可以通过裸鼠或免疫缺陷小鼠模型建立人类肿瘤模型。

当细胞或组织取出并经过相关处理后,通过给小鼠注射或将其移植到小鼠体内,研究人类肿瘤的生长和发展。

2.移植人体肿瘤片段。

3.使用免疫缺陷小鼠模型,如裸鼠、严重联合免疫缺陷小鼠等,可以接受外源组织移植而不会引发排斥反应。

二、化学物质诱导方法:1.化学物质诱导肿瘤模型是通过给予小鼠致癌物质或诱导剂来诱发肿瘤发生。

2.应遵循相关伦理原则使用易获得且时间成本低的致癌物质。

3.诱导剂可通过各种途径给予小鼠,如口服、皮下注射、腹腔注射等。

4.对于使用化学物质诱导的肿瘤模型,需要在给药期间和给药后对小鼠进行定期观察和血液检测,以评估肿瘤的发生和发展情况。

三、遗传工程方法:1.遗传工程方法可利用转基因技术将特定肿瘤相关基因引入小鼠体内,例如,通过敲除或激活肿瘤抑制基因或癌基因等,产生特定类型的肿瘤模型。

2.通过基因敲除、敲入或点突变技术,可改变小鼠体内特定基因的表达水平,以模拟人类肿瘤的发生和发展。

确定小鼠肿瘤模型建立成功后1.观察和检测小鼠是否出现明显的肿瘤体积增大和质地变硬等症状。

2.定期观察小鼠的体重变化,以评估肿瘤对小鼠健康状况的影响。

3.使用体重表、肿瘤质量表等测量工具定期测量肿瘤体积,以评估肿瘤生长速度。

4.进行组织学检测,通过活体组织活检或解剖后进行病理学检测,以确定肿瘤种类和分级。

5.对肿瘤样本进行免疫组织化学染色、分子生物学检测等,以确定肿瘤的分子特征。

总结:建立和鉴定小鼠肿瘤模型是一项复杂的工作,需要专业的知识和技术支持。

两种方法建立小鼠原位肝癌模型的比较

两种方法建立小鼠原位肝癌模型的比较

两种方法建立小鼠原位肝癌模型的比较摘要】目的比较建立小鼠原位肝癌模型的两种方法的优劣。

方法分别采用肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法建立小鼠原位肝癌模型,对两组小鼠肝脏的成瘤情况进行比较。

结果两组小鼠均能在短期内成瘤,且成瘤率高。

结论尾静脉高压水流动力学注射法比原位注射细胞法更容易操作,小鼠存活率高,肝脏成瘤更均匀。

【关键词】原位肝癌模型高压水流动力学注射【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)14-0382-02原发性肝细胞肝癌是我国乃至全球范围内的研究热点,而原位肝癌小鼠模型是进行原发性肝细胞肝癌基础研究和临床研究的重要工具。

目前原位肝癌模型主要采用化学诱导法(DEN),但是该方法建立模型成瘤的时间比较长,大概需要6-8个月,导致研究的周期很长。

本文尝试了两种比较快速地建立小鼠原位肝癌模型的方法--肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法,并对这两种方法建立的小鼠模型进行了比较。

1 实验材料及方法1.1 实验动物与试剂C57BL/6小鼠7-8周,雄性,20只,购自上海斯莱克实验动物有限公司。

Hepa1-6细胞株购自中科院上海细胞库。

DMEM高糖培养基,胎牛血清,购自上海英潍捷基公司。

水合氯醛、碘伏购自国药集团。

注射器,手术器械、缝合线、针领自苏州大学材料供应中心。

1.2 方法1.2.1 细胞悬液制备 Hepa 1-6在37℃、5 % CO2 的细胞培养箱中培养,取对数生长期细胞,0.25%胰蛋白酶消化后,收集于15mL离心管中,用PBS调整细胞悬液浓度至5×107/mL用于原位注射细胞法,每只小鼠注射20uL。

用PBS调整细胞悬液浓度至5×105/mL 用于尾静脉高压水流动力学注射法每只小鼠注射2mL。

1.2.2 小鼠分组 20只7-8周龄的C57BL/6雄性小鼠分为2组,第1组10只进行肝脏原位注射细胞建立模型,第2组10只采用尾静脉高压水流动力学注射的方法建立模型。

小鼠肝脏移植模型研究及其临床应用

小鼠肝脏移植模型研究及其临床应用

小鼠肝脏移植模型研究及其临床应用肝脏移植是一种重要的治疗肝脏疾病的手段,但由于供体缺乏和排斥反应等问题,其临床应用受到了一定的限制。

为了更好地研究肝脏移植模型并探索其临床应用,科学家们运用小鼠作为模型进行了大量研究。

一、小鼠肝脏移植模型的建立小鼠肝脏移植作为一种动物实验模型,是用来研究肝脏疾病治疗和肝功能重建的有效手段。

研究人员运用小鼠同种、异种肝脏移植,成功模拟了肝脏移植术后肝移植组织修复、排异反应等生理过程,为肝脏移植的临床应用提供了重要参考。

在小鼠肝脏移植的模型建立中,需要进行供体与受体小鼠的筛选、肝脏获取和获取后的处理等多个步骤。

在特殊条件下,肝脏移植后的小鼠可以成功存活,而且肝脏移植后的组织修复和新陈代谢状态也得到了良好的恢复。

二、小鼠肝脏移植模型的应用和相关研究小鼠作为肝脏移植模型,极大地拓展了肝脏移植的研究领域。

基于小鼠肝脏移植模型,研究人员开展了关于肝脏移植的多个研究领域,例如肝脏再生、免疫学、肝细胞发育以及治疗肝脏疾病等。

小鼠肝脏移植模型也得到了广泛的应用。

例如,在研究肝脏造血干细胞分化和身份确定等方面,小鼠肝移植模型得到了广泛应用。

此外,小鼠肝脏移植还被用于评估局部和全身免疫反应,并为临床移植中的免疫抑制药物开发提供了基础。

不过,小鼠肝脏移植模型也存在一些不足。

例如,小鼠的生理结构与人类不同,导致肝脏移植效果需要配合其他调控手段才能发挥最大的治疗效果。

三、小鼠肝脏移植模型在临床应用中的前景小鼠肝脏移植模型研究的热潮给人们带来了极大的期待,希望能有效地促进肝脏移植的临床应用。

目前,小鼠肝脏移植模型已被广泛地应用于肝脏移植相关的新药研究、肝脏再生等领域。

未来,随着相关研究的深入推进,小鼠肝脏移植模型有望实现与临床应用更好的衔接,推动肝脏移植技术的发展。

综上所述,小鼠肝脏移植模型的建立和研究具有重要意义,为肝脏移植的临床应用提供了理论基础和参考。

虽然小鼠肝脏移植模型研究存在一些不足,但随着相关研究的深入探索,相信小鼠肝脏移植模型的临床应用前景会更加广阔。

小鼠 Lewis肺癌原位模型的建立

小鼠 Lewis肺癌原位模型的建立

小鼠 Lewis肺癌原位模型的建立李宁;张晓晔;蒋中秀;刘洋;李雪娇【摘要】目的:利用Matrigel与Lewis制备细胞混悬液注射于小鼠左肺内,建立小鼠Lewis肺癌原位模型,评价其肿瘤生长情况、转移情况,以期建立更稳定、更接近于人肺癌生长情况的小鼠肺癌原位模型。

方法将处于对数生长期的Lewis 肺癌细胞混悬于Matrigel中,接种于C57BL/6近交系小鼠左肺内。

分别于第4、7、10、13、16天各处死5只小鼠,观察其局部成瘤率、肿瘤生长情况、中位生存期及肿瘤转移情况,并对各阶段小鼠行肺部,肝脏,肾脏,脾脏病理切片检查。

结果术后第7天解剖的5只小鼠中,3只小鼠肺上可见小的瘤结节形成,其余2只肺上未见肉眼成瘤,行病理HE染色检查在显微镜下可见2只小鼠肺脏有小的瘤结节形成。

术后第10天以后处死的所有小鼠肺上均有肉眼成瘤,术后第13天,所有小鼠肺原位成瘤并伴有血性胸腔积液、胸腔内转移。

术后第25天,有1只小鼠出现上述转移的同时还出现了心包膜转移及肾脏远处转移。

5只小鼠生存期分别为17 d、20 d、22 d、22 d、25 d,小鼠中位生存期为21.2 d(17~25 d)。

成瘤率100%。

结论利用Matrigel法成功建立小鼠Lewis肺癌原位模型,稳定性好,成瘤率高,并具有远处转移的特性,更接近于人肺癌的发生、发展过程。

%Objective To establish a mouse model of orthotopic Lewis lung carcinoma using Matrigel, to evaluate the tumor growth and metastasis, and to provide a more stable mouse model of orthotopic lung cancer, which is more similar to human lung cancer.Methods Logarithmic phase of cultured Lewis lung cancer cells were suspended in Matrigel, vac-cinated into the left lung of inbred C57BL/6 mice.Five mice were killed on the 4th, 7th, 10th, 13th, and 16th days, re-spectively, and to observe the mediansurvival, tumor formation rate, tumor growth, and metastasis.Pathological changes of the mouse lung, liver, kidney and spleen were examined.Results In 5 mice killed on the 7th postoperative day, small tumor nodules were observed on the lung in three mice and no tumor was visible by gross inspection in the other two mice, but small tumor nodules were observed under the microscope.For all the mice killed on the 10th postoperative day, tumors were visible to the naked eye on the lung of all the five mice.On the 13th day, orthotopic tumor was observed on the lung with bloody pleural effusion and pleural metastasis in all the five mice.On the 25th day, in addition to the pleural metasta-sis, one mouse had pericardial metastasis and renal metastasis.The survival periods of the 5 mice were 17 d, 20 d, 22 d, 22 d, and 25 d, respectively, with a median survival period of 21.2 d (17-25 d), and the tumor formation rate was 100%.Conclusions Mouse models of orthotopic Lewis lung carcinoma is successfully established using injection of tumor cells suspended in Matrigel.This model is more similar to the growth of human lung cancer, with good stability, high tumor formation rate and characteristics of distant metastasis, therefore, is worthy of further application.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】5页(P79-83)【关键词】小鼠;肺癌;动物模型;Matrigel;Lewis细胞【作者】李宁;张晓晔;蒋中秀;刘洋;李雪娇【作者单位】中国医科大学附属盛京医院,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院,沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院,沈阳 110004【正文语种】中文【中图分类】Q95-33目前,在肺癌的动物实验中,大多使用小鼠皮下种植肺癌细胞系,在皮下形成肺癌肿瘤结节的动物模型,如孙秋艳等[1]用体外培养的Lewis细胞悬液注射于小鼠左侧腋下,形成皮下肿瘤;Xu等[2]应用A549肺癌细胞悬液加入等量的Matrigel 中,注射至裸鼠的皮下组织亦可形成肿瘤模型。

观察肝癌的实验报告

观察肝癌的实验报告

个人劳务服务合同协议书这是小编精心编写的合同文档,其中清晰明确的阐述了合同的各项重要内容与条款,请基于您自己的需求,在此基础上再修改以得到最终合同版本,谢谢!个人劳务服务合同协议书甲方(服务提供方):【姓名】乙方(服务接受方):【姓名】鉴于甲方具备提供专业劳务服务的技能和经验,乙方愿意接受甲方提供的劳务服务,经双方友好协商,特订立本合同,以便共同遵守。

第一条 劳务内容1.1 甲方同意向乙方提供以下劳务服务:【具体劳务内容】1.2 甲方应按照乙方的要求,提供质量合格、符合约定的劳务。

第二条 劳务地点2.1 甲方应在乙方指定的地点提供劳务服务。

第三条 劳务时间3.1 甲方应按照乙方的要求,在约定的时间内完成劳务服务。

第四条 劳务报酬4.1 乙方应支付给甲方的劳务报酬为【金额】。

4.2 乙方支付劳务报酬的方式为:【支付方式】。

第五条 保密条款5.1 甲方应对在提供劳务过程中获得的乙方商业秘密、技术秘密等保密信息予以保密。

第六条 违约责任6.1 甲乙双方应严格按照本合同的约定履行各自的权利和义务,如一方违约,应承担违约责任。

第七条 争议解决7.1 对于因履行本合同而产生的任何争议,双方应首先通过友好协商解决;协商不成的,任何一方均有权向合同签订地人民法院提起诉讼。

第八条 其他约定8.1 本合同自双方签字(或盖章)之日起生效,有效期为【期限】。

8.2 本合同一式两份,甲乙双方各执一份。

甲方(服务提供方):【姓名】乙方(服务接受方):【姓名】签订日期:【日期】请根据您的实际情况,修改和完善上述合同内容,以确保合同的合法性和有效性。

如有需要,请咨询专业律师意见。

祝您合同顺利!。

小鼠原发性肝癌模型的研究进展

小鼠原发性肝癌模型的研究进展

小鼠原发性肝癌模型的研究进展单鹏;宁厚法【摘要】原发性肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,但其发生和发展的机制尚未完全阐明.近年来,各种肝癌小鼠模型的出现在一定程度上促进了肝癌的研究进展,小鼠模型在研究肝癌的病理生理学机制、细胞和分子改变及侵袭和远处转移机制等方面为寻找新的治疗靶点及预防措施等提供了重要的理论依据,故小鼠模型成为研究肝癌的基础工具,同时也成为新药物动物实验的检测工具.研究中模型的建模方法和特点是研究者重点考虑的因素,以便对结果进行分析和总结.因此根据不同的研究目的,掌握正确的建模方法及各种模型之间的优缺点显得尤为重要.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2018(024)020【总页数】6页(P4010-4015)【关键词】原发性肝癌;小鼠模型;化学诱导;移植;转基因【作者】单鹏;宁厚法【作者单位】潍坊医学院医学影像学系,山东潍坊 261053;潍坊医学院医学影像学系,山东潍坊 261053【正文语种】中文【中图分类】R735.7原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)是常见的恶性肿瘤,是导致癌症死亡的第二大原因[1]。

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)或丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染引起的肝硬化和酒精性肝损伤是引起PHC的主要原因,其他原因包括由肥胖和2型糖尿病等代谢性疾病转化而来的非酒精性脂肪性肝炎以及黄曲霉毒素感染等[2]。

由于PHC发病原因复杂且缺乏明确的诊断标志物,大部分患者就诊时已为进展期,错过根治性治疗机会,且肝功能较差和对化疗药物的抵抗,往往预后较差[3-4]。

因此迫切需要寻找新的PHC早期诊断标志物和有效治疗靶点。

目前,上述因素引起PHC的机制、信号途径和分子表达各不相同,目前仍然在研究中。

至今仍没有单一的肿瘤模型能够反映PHC各方面的特性[5]。

由于小鼠身体较小、寿命较短、生理和分子特性以及完全测序的基因组与人类相似,其成为研究肿瘤最好的模型[6]。

裸鼠的肿瘤移植模型研究

裸鼠的肿瘤移植模型研究

裸鼠的肿瘤移植模型研究肿瘤是一种常见的疾病,也是医学研究的一个重要领域。

随着科学技术的不断发展,人们对肿瘤的认识也在不断深入。

其中,裸鼠的肿瘤移植模型研究是一种常用的实验手段。

一、裸鼠是什么裸鼠是一种没有毛发的实验小动物,通常被用来进行肿瘤移植研究。

这种小动物一般来自人工培育的遗传变异株,因为它没有毛发,所以被称为裸鼠。

这种小动物体型小、活力强,非常适合作为实验对象。

二、肿瘤移植模型的意义肿瘤移植模型是一种通过将人类肿瘤细胞移植到裸鼠体内来模拟肿瘤生长和发展的实验方法。

这种实验方法能够为生物医学研究人员提供宝贵的研究材料,用于发现和开发新的抗肿瘤药物和治疗方法。

同时,肿瘤移植模型还能够为临床医学研究提供重要的参考,帮助医生们更好地了解肿瘤生长和发展的规律,找到控制肿瘤的有效方法。

三、裸鼠肿瘤移植模型的基本步骤1. 建立肿瘤细胞株首先,需要建立一种稳定的肿瘤细胞株。

一般来说,肿瘤细胞株可以从患者的体内或者文献报道中获取,然后通过培养和筛选,筛选出能够稳定生长的肿瘤细胞株。

2. 准备裸鼠裸鼠一般都需要进行体表消毒和饲养管理等操作。

在进行实验前,需要将裸鼠的体表消毒,避免外来细菌对实验结果的影响。

此外,裸鼠的饲养、环境、温度、湿度等也需要进行精心管理,确保实验的准确性和有效性。

3. 移植肿瘤细胞将准备好的肿瘤细胞接种到裸鼠的体内,一般是通过皮下注射或者腹腔注射的方式进行。

移植后,需要观察肿瘤的生长和发展情况,并及时进行处理、剖解和测量等操作。

四、裸鼠肿瘤移植模型的优缺点优点:1. 易于建立:裸鼠的肤色和体毛特征明显,容易观察,建立肿瘤移植模型相对容易。

2. 可控性强:通过各种手段可以有效控制实验的变量,确保实验结果的可靠性和准确性。

3. 结论可靠:通过对裸鼠肿瘤移植模型的研究,可以得到比较可靠的实验结论,从而为后续的研究提供重要参考。

缺点:1. 模拟程度低:由于裸鼠与人体存在较大的生物学差异,因此在某些肿瘤特征的模拟程度上会存在一定的局限性。

最新 肝癌转基因小鼠模型研究进展-精品

最新 肝癌转基因小鼠模型研究进展-精品

肝癌转基因小鼠模型研究进展HBV感染动物模型的发展对理解病毒复制、疾病发病机理,尤其是对鉴定HBV感染治疗的候选药物是很重要的。

下面是小编搜集整理的相关内容的论文,欢迎大家阅读参考。

摘要:肝细胞癌是全球范围内的恶性肿瘤,由于其进展迅速、易于复发转移,早期诊断和有效治疗一直是临床难题,对于肝癌的发病机制也亟待进一步阐明。

利用基因工程手段构建的肝癌转基因小鼠模型,为肝癌发病机制研究和药物筛选提供了宝贵的研究材料。

结合经典研究与近年进展,对常用肝癌转基因小鼠模型的构建方法、模型特点、特别是应用研究状况进行了分类介绍,并展望了未来发展的方向。

关键词:肝细胞癌;转基因;小鼠模型引言:1.肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是一种致死率很高的恶性肿瘤,2012年全球范围内发病率位居肿瘤第五位,死亡率高居肿瘤第二位[1]。

严峻的临床诊治形势对HCC发生及转移机制研究提出迫切需求,HCC相关机制的深入阐释对HCC早期诊断、药靶研发及治疗预后具有重要意义。

但HCC致病因素多,病程复杂,涉及通路广,因此研究难度较大,其发生发展机制目前尚不完全清楚。

2.动物模型作为重要的研究手段,在HCC发生发展机制研究中发挥了不可或缺的作用。

化学诱导、原位异位移植及转基因等方法在目前HCC动物模型构建中较为常用。

转基因动物模型与其他常用HCC动物模型相比,在研究特殊基因在HCC发生过程中的作用或不同基因间的相互作用,以及与肝脏特异性致癌物之间的关系中具有独特优势,迅速成为新的研究热点。

本文将对近年来常用的HCC转基因小鼠模型进行分类介绍,并对其在HCC相关机制研究及药物筛选中的应用进行综述,旨为相关领域研究者提供参考。

一、HCC转基因动物模型概况转基因动物模型是通过基因工程方法导入或敲除动物体内特定基因,从而影响动物性状表达并产生稳定遗传修饰的动物模型。

1982年,Gordon等[2]首次利用显微注射法成功构建转基因小鼠,此后转基因动物模型得到快速发展和广泛应用。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

现代肿瘤医学2017 年 9 月第 25 卷第18 期MODERN ONCOLOGY,Sep. 2017, VOL. 25, NO. 182883 •小鼠肝癌原位移植模型的建立及其研究意义赵方,胡明道,陈鹏Establishment of orthotopic transplantation model of mice liver cancer and its significanceZ h a o F a n g,H u M in g d a o,C h e n P e n gHepatopancreatobiliary Surgery Department1,The Second Affiliated Hospital of Kunming Medical University,Yunnan Kunming650101 , China.【Abstract 】Objective:To establish the orthotopic transplantation model of hepatocellular carcinoma in mice,laythe foundation for studying the mechanism of invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma.Methods:The micehepatoma cell line H22 was cultured in vitro and the cell concentration was adjusted to 1x l〇7/ml.The cells were in­oculated into the peritoneal cavity of the mice,and the intraperitoneal culture was carried out.After three times,theascites tumor cells were collected and washed with normal saline and 50 j j l I of H22 cells were injected into the leftlobe of the mouse liver with a50 j j l I micro-syringe,and the mice were sacrificed after14 days.To observe the tumorformation of liver in mice and observe the tumor tissue by histopathological method.Results:The naked eye could beseen as a good tumor nodules,tumor formation rate,pathological identification of liver cancer.Conclusion :The modelof orthotopic transplantation of hepatocellular carcinoma in mice was successfully established,which provided the ex­perimental basis for the subsequent study of immune escape and invasion and metastasis of liver cancer.【Key words 】mice,H22 cells,orthotopic transplanted liver cancer modelModem Oncology2017,25(18) :2883 -2885【摘要】目的:建立小鼠的肝癌原位移植模型,为研究肝癌的侵袭转移机制奠定基础。

方法:体外培养小鼠肝癌细胞株H22细胞并进行传代,调整细胞浓度为1x107/m l,接种到小鼠腹腔,进行腹腔传代培养,腹腔传代3次后,收集腹水瘤细胞,用生理盐水洗涤2遍,调整细胞浓度为2 x l07/m l,用50 |j d的微量注射器无菌开腹直视下向小鼠肝脏左叶注人50 |j d的H22细胞,术后常规饲养,14天后人道主义处死小鼠,解剖观察小鼠肝脏肿瘤形成情况,病理组织学方法鉴定肿瘤组织。

结果:肉眼可见肿瘤结节形成良好,成瘤率高,病理鉴定为肝癌。

结论:成功建立了小鼠的肝癌原位移植模型,为后续研究肝癌的免疫逃逸和侵袭转移提供了实验基础。

【关键词】小鼠;H22细胞;肝癌原位移植模型【中图分类号】R735.7 【文献标识码】A D O I:10. 3969/j.issn.1672 -4992. 2017.18.006【文章编号】1672 -4992 - (2017)18 -2883 -03原发性肝癌,其中大多数是肝细胞癌(hepatocellular car­cinoma,HCC),现在是全世界第二大癌症死亡原因⑴。

2017 年1月,美国癌症协会发表2017年癌症统计[2],统计显示,过去25年来美国总的癌症死亡率下降了 25% ,肝癌的死亡 率却仍在上升。

据统计,中国每年超过30万人死于HCC,占【收稿日期】2〇17_〇3-28【修回日期】2017-04-20【基金项目】云南省科技厅应用基础研究面上项目(编号:2014FB194)【作者单位】昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科一病区,云南 昆明650101【作者简介】赵方(1987 -),男,河南信阳人,在读硕士研究生,主 要从事普通外科临床工作。

E - mail:29〇7665〇0@ qq.com【通讯作者】陈鹏(1975 -),男,四川西昌人,副教授,博士,主要从事肝胆胰外科临床工作。

E -mail:398〇3i m@qq.全球肝癌死亡人数的一半左右[3'4]。

肝癌恶性程度高,预后 极差,手术切除目前仍是治疗肝癌的有效方法,但远期疗效 仍欠佳,目前世界上各国都积极开展对肝癌的研究,其中肝 癌的动物模型对肝癌的治疗研究具有重要作用,而小鼠肝癌 原位移植保留了原有的肝癌组织结构特点,有和原肿瘤更为 相近的生长环境和生物学特点,能够很好的模拟肝癌细胞的 免疫逃逸和侵袭转移能力,因此建立一种简单有效的小鼠原 位移植肝癌模型,能为肝癌的免疫逃逸和侵袭转移能力研究 提供良好的工具[5]。

1材料与方法1.1实验材料清洁级BALB/c小鼠,20只雄性,5 ~6周龄,体重20 ~ 22 g,购于北京华阜康生物科技有限公司,实验小鼠合格证号 SCXK(京)2014 - 0004,饲养环境控制:空气新鲜,环境清洁,湿度50% ~60% ,温度18 T: ~22 T:左右,噪音小于85分 贝,普通饲料和饮水。

肝癌H22细胞株,购于上海拜力生物 技术有限公司。

DMEM培养基(高糖)、10%胎牛血清购于美M G ito 公_。

4%水合氯醛射器、剪刀、嶽子、爱惜康非吸收缝合钱、缝针猶于甚明援料大学.第二附崴朦50 0 薇量注射器购于 StJE Analytical scifliiee 〇 1.2实验方法1.2.1 H 22细胞的培养与传代将冻存于液氣罐中的肝痛H 2.2细胞在37 T 永浴铖•快速解:冻,加人冻存液3倍体积 的D :K EM 寧养液,1 500离心5 .njift ,:弃上奪,无.菌PBS缓冲液稀释爲计数,将混匀细胞转移人培养瓶中,利用37冗、5% C 〇2细胞培养_进行堉养,隔天迸行_液,镜下观 察,视野中若见细胞形态饱满,细胞成长符合预大小相 当,汇合度达8〇% 时。

胃:进行传代,按照]迸行.,每 次传代以3天为靈^传代培养H 22肿瘤细胞数远大于1 x 1〇7。

绘制肿瘤细胞生长爾辑,育心收集处"f i f :数赛:的肿痕 细胞,爾生理盐水洗綠细胞2次,调整细胞浓度为1 x 107/ mU 75嗪酒精棉球稱毒.B ALB /e .小鼠腹部,于每只小鼠接种 0.1 ml ,接种2只,每天观察小鼠腹部变化,均7 ~ 10天,腹水 太量形成,:颈稚脱臼繁錄死小鼠,在无爾环境下,75■酒精消 毒小鼠腹萍皮肤,:甩一次性5 m l _射器抽取小鼠腹水,无菌 PBS 場冲液调整钿胞浓度为1 :X lOVml ,取0. 1 ml 接种夷薄. 二代小鼠腹腔,约7 ~ 10天特腹水形成后,重复操作,如此腹 水传代》次爾__实验。

收集BALB /c 小鼠腹水的H 22 肿瘤细胞,用生理盐水洗涤细胞2次,调整细胞浓度为2 x lQVml ,取2 m l _爭EP 管中放置冰锻中备思P1.2.2小鼠肝癌原位移植健康BALB/c 小鼠2〇只术翦 禁食10小时_,禁水4小时,4%7长食氯醛以0.1 .m l /10 g :剂量 腹腔麻醉小鼠,小鼠仰卧固定,常规消毒皮肤,铺巾,予上腹 K 轉鮮作1腦盡右的切电麗层切开皮肤、腹膜,息f t 理盐水浸湿:的纱•麓乎書C fF 方,轻轻挤馬肋弓两侧,使小•2884■鼠肝左叶暴露于湿纱布上,用50卜1儀釐注;射器猎肝叶长轴 方向与肝面平行20°'角进针,进针g 平行推移0. 5 cm 左右 将H 22细胞缓傷注人50 0。

退出针头,用棉签轻汪针眼,同 时用烧红的铁丝封闭针眼,针眼周围用酒精棉球轻轻擦拭, 以除去少量漏也的胂瘤细胞,防治肿瘤细胞逃逸,将肝聽轻 轻回纳腹腔,_无活动性出血后>用1暑丝线遂雇缝合處壁, 再次濟毒皮肤,术闭^术后禁食禁水4 h ,4 h :g :给予0. 3势的 蔗糖水.,12 11后正.常进食进水。

1.2.3模型观察包括肿瘤移植的成功率.、肿瘤的太小等。

14天M 人道主义处死小鼠,:解射取出肝脏,游标卡尺测量每 具小鼠肿瘤长径(a )和短轻(:b ),按查式:脉瘤体积X )/ x 0.. 5计靠肿瘤大小[6],分离肿瘤组织并称重,分别_取肿瘤组 织标本和3E 常肝组织雜率用4%甲醛固定2 d 后做病理學检 测,常规取材、脱水、石猎包埋、制片,HE 染色,光学显1镜:下 观察。

2 结果 2.1造模情况术層其中1只小鼠麻醉未苏難死亡=,K 余小鼠术后春状齋,良好,飼养过程中未出现死_亡:,术I f 伤H 愈:合,良好未..出 现惑染等。

10天绝右_小鼠中上旗可扪及0.5 右的实性瘤块,14天后人道主义处死小鼠,解荆取出肝脏,肉眼可風 肿瘤结节形成明显(图1A 和B ),其余小鼠肝脏均长出肿瘤, 且辨瘤形成良好,存箝率_成瘤率分别为95%和100%。

相关文档
最新文档