电子显微镜技术和在病理诊疗上的作用培训课件
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定程度损伤 透射电子
用衰减器改变扫描线圈电流，进 行放大率调节
调整中间镜电流改变放大率
入射电子束直径决定图像分辨率。
加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度
加速电压、透镜缩小率、电源稳定度
等影响分辨率
及像差决定电子电束子斑显直微径镜技术和在病理诊疗上的
6
作用
本图片来自中科科仪
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
肿物做活检。光镜:增大的淋巴结,结构紊乱,但仍残留滤泡
与淋巴窦,窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞,
直径约20 μm。核圆,卵圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞
及嗜酸性粒细胞。电镜:大细胞排列疏松、无连接、胞质
宽广,见有似网球拍或柄的双膜结构(Birbeck 颗粒) ,证明光
镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞(图1) 。诊断为淋巴结
电子显微镜主要分为两种类型：一种是观察样品 内部超微结构的透射电子显微镜，另一种是揭示 样品表面形貌的扫描电子显微镜。
电子显微镜特征：电镜与光镜的区别
扫描电镜与透射电镜比较：（见下表）
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
5
作用
扫描电镜和透射电镜比较
项目
扫描电镜
透射电镜
分辨本领 发大倍数 加速电压 图像特点 样品制备 样品尺寸 样品损伤
电子显微镜技术和在病理 诊疗上的作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
2
作用
（一）概念
电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微术
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
3
作用
概念
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
9
作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
10
作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
电子显源自文库镜技术
电镜精密仪器
样品制备技术
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
4
作用
1、电子显微镜 ：是用电子束成像的显微镜，电子 显微镜是一种高精密度的电子光学仪器，它具有较 高分辨率本领和放大倍数，是观察和研究物质微观 结构的重要工具。
发明背景：它是在发现电子束具有波动性质及利 用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发 明出的。
12
作用
三．电子显微镜技术在病理诊断上的作用
（一）电镜检查起决定性作用 （二）电镜检查起参考和修正作用 （三）电镜检查起验正作用
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
13
作用
三．电子显微镜技术在病理诊断上 的作用
（一）电镜检查起决定性作用：电镜发现特异性超微结构 信息做出最后病理诊断。
例：男,39 岁,发现右侧颈部无痛肿物1 年余,花生米大,取
15
临床与实验病理学杂志;2002 ;15（5） 作用
（二）电镜检查起参考和修正作用：电镜获得的信 息对光镜结果予以补充或修正,最终做出最后病理诊 断。
例：男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊 断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大,再次淋巴结( 颌下) 活检病理诊断为恶性淋巴瘤(免疫母细胞型) 。电镜: 瘤细胞大、多边形或不规则形,核质比大,核膜弯曲,不规则 或奇特的内陷,核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质 突,胞质内核糖体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发育不 良的桥粒样连接(图2) 。最后病理诊断为颌下淋巴结转移
7
作用
本图片来自中科科仪
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
8
作用
2、样品制备
透射电镜样品制备的常用方法：包括超薄切片、冷冻复型、 负染色等。
扫描电镜样品制备：比透射电镜样品制备简单。除保存样品 表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，而不需包埋和 切片。制备方法与透射电镜样品制备方法一样 。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
样品成像信 号
发大倍数调 节
决定分辨率 因素
70～100 Å 20～40万倍 1～50 KV 景深长、三维立体结构 固定-脱水-临界点干燥-喷涂金属 1cm3 光斑直径只有几十埃的电子束在 样品上扫描，对样品损伤极小 二次电子、背散射电子
2Å 100万倍 几十千伏～几百千伏 景深小、两维平面结构 固定-脱水-包埋-超薄切片-重金属染色 50～100nm切片 大约1μm直径电子束打到样品上，造成一
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
18
作用
图3 慢性迁延性乙型病毒性肝炎:滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原 管状体。EM ×8 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏电,子张显洁微茹镜技等术.2和3在5例病理疑诊难疗病上的理标本的电镜诊断价值 . 19 临床与实验病理学杂志;2002 ;15（5作）用
癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。此例电镜有确诊价值。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
16
作用
图2 转移癌:瘤细胞大、长圆形,胞核大、梭形,核膜不平滑,显著增大的核质比质膜 间有桥粒样连接,胞质含少许欠发达的细胞器,网栏状大核仁,两团染色质间颗粒。EM ×10 000
注：临图床片与取实自验张病瑞理祥学,齐杂洁志敏;20,电0张子2洁显;1微茹5镜（等技5.术）2作3和5用在例病疑理难诊疗病上理的标本的电镜诊断价值 .
17
（三）电镜检查起验正作用：超微结构信息进一步 证实、丰富了光镜的组织学诊断
例：男,30 岁,肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽未见典型碎 屑样坏死,但不除外活动性变化。电镜见肝细胞大,疏松,细 胞周围间隙加大,有微绒毛化,滑面内质网增生,内含管状体, 肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶 ,周围有淋巴细胞浸润。最后电镜诊断:慢性迁延性乙型病 毒性肝炎有轻微活动(图3) 。电镜有确诊价值。
朗格汉斯细胞组织细胞增生症。电镜诊断具有独特的确诊
价值。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的 作用
14
图1 朗格汉斯细胞组织细胞增生症:见双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。 EM ×10 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏, 张电洁子显茹微等镜.2技35术例和疑在难病理病诊理疗标上本的的电镜诊断价值 .
用衰减器改变扫描线圈电流，进 行放大率调节
调整中间镜电流改变放大率
入射电子束直径决定图像分辨率。
加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度
加速电压、透镜缩小率、电源稳定度
等影响分辨率
及像差决定电子电束子斑显直微径镜技术和在病理诊疗上的
6
作用
本图片来自中科科仪
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
肿物做活检。光镜:增大的淋巴结,结构紊乱,但仍残留滤泡
与淋巴窦,窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞,
直径约20 μm。核圆,卵圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞
及嗜酸性粒细胞。电镜:大细胞排列疏松、无连接、胞质
宽广,见有似网球拍或柄的双膜结构(Birbeck 颗粒) ,证明光
镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞(图1) 。诊断为淋巴结
电子显微镜主要分为两种类型：一种是观察样品 内部超微结构的透射电子显微镜，另一种是揭示 样品表面形貌的扫描电子显微镜。
电子显微镜特征：电镜与光镜的区别
扫描电镜与透射电镜比较：（见下表）
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
5
作用
扫描电镜和透射电镜比较
项目
扫描电镜
透射电镜
分辨本领 发大倍数 加速电压 图像特点 样品制备 样品尺寸 样品损伤
电子显微镜技术和在病理 诊疗上的作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
2
作用
（一）概念
电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微术
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
3
作用
概念
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
9
作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
10
作用
电子显微镜技术及在病理诊断上的作用
一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
电子显源自文库镜技术
电镜精密仪器
样品制备技术
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
4
作用
1、电子显微镜 ：是用电子束成像的显微镜，电子 显微镜是一种高精密度的电子光学仪器，它具有较 高分辨率本领和放大倍数，是观察和研究物质微观 结构的重要工具。
发明背景：它是在发现电子束具有波动性质及利 用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发 明出的。
12
作用
三．电子显微镜技术在病理诊断上的作用
（一）电镜检查起决定性作用 （二）电镜检查起参考和修正作用 （三）电镜检查起验正作用
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
13
作用
三．电子显微镜技术在病理诊断上 的作用
（一）电镜检查起决定性作用：电镜发现特异性超微结构 信息做出最后病理诊断。
例：男,39 岁,发现右侧颈部无痛肿物1 年余,花生米大,取
15
临床与实验病理学杂志;2002 ;15（5） 作用
（二）电镜检查起参考和修正作用：电镜获得的信 息对光镜结果予以补充或修正,最终做出最后病理诊 断。
例：男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊 断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大,再次淋巴结( 颌下) 活检病理诊断为恶性淋巴瘤(免疫母细胞型) 。电镜: 瘤细胞大、多边形或不规则形,核质比大,核膜弯曲,不规则 或奇特的内陷,核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质 突,胞质内核糖体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发育不 良的桥粒样连接(图2) 。最后病理诊断为颌下淋巴结转移
7
作用
本图片来自中科科仪
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
8
作用
2、样品制备
透射电镜样品制备的常用方法：包括超薄切片、冷冻复型、 负染色等。
扫描电镜样品制备：比透射电镜样品制备简单。除保存样品 表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，而不需包埋和 切片。制备方法与透射电镜样品制备方法一样 。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
样品成像信 号
发大倍数调 节
决定分辨率 因素
70～100 Å 20～40万倍 1～50 KV 景深长、三维立体结构 固定-脱水-临界点干燥-喷涂金属 1cm3 光斑直径只有几十埃的电子束在 样品上扫描，对样品损伤极小 二次电子、背散射电子
2Å 100万倍 几十千伏～几百千伏 景深小、两维平面结构 固定-脱水-包埋-超薄切片-重金属染色 50～100nm切片 大约1μm直径电子束打到样品上，造成一
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
18
作用
图3 慢性迁延性乙型病毒性肝炎:滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原 管状体。EM ×8 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏电,子张显洁微茹镜技等术.2和3在5例病理疑诊难疗病上的理标本的电镜诊断价值 . 19 临床与实验病理学杂志;2002 ;15（5作）用
癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。此例电镜有确诊价值。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的
16
作用
图2 转移癌:瘤细胞大、长圆形,胞核大、梭形,核膜不平滑,显著增大的核质比质膜 间有桥粒样连接,胞质含少许欠发达的细胞器,网栏状大核仁,两团染色质间颗粒。EM ×10 000
注：临图床片与取实自验张病瑞理祥学,齐杂洁志敏;20,电0张子2洁显;1微茹5镜（等技5.术）2作3和5用在例病疑理难诊疗病上理的标本的电镜诊断价值 .
17
（三）电镜检查起验正作用：超微结构信息进一步 证实、丰富了光镜的组织学诊断
例：男,30 岁,肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽未见典型碎 屑样坏死,但不除外活动性变化。电镜见肝细胞大,疏松,细 胞周围间隙加大,有微绒毛化,滑面内质网增生,内含管状体, 肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶 ,周围有淋巴细胞浸润。最后电镜诊断:慢性迁延性乙型病 毒性肝炎有轻微活动(图3) 。电镜有确诊价值。
朗格汉斯细胞组织细胞增生症。电镜诊断具有独特的确诊
价值。
电子显微镜技术和在病理诊疗上的 作用
14
图1 朗格汉斯细胞组织细胞增生症:见双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。 EM ×10 000
注：图片取自 张瑞祥,齐洁敏, 张电洁子显茹微等镜.2技35术例和疑在难病理病诊理疗标上本的的电镜诊断价值 .