植物组织培养作业答案

(1)什么是植物组织培养?

是指通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体explant），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。

(2)什么是"外植体"?

无菌条件下，离体培养于人工培养基上，用于达到某种培养目的的原始植物材料(3)按照外植体的不同，植物组织培养可以分成几类?

1、植株培养

2、器官培养（胚，花药，子房，根、茎和叶）

3、组织培养（各种组织、愈伤组织）

4、原生质体培养

5、细胞培养（愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团)

(4)植物组织培养有哪些特点?

1、植物基础学科研究的良好系统

2、生物技术的基础

3、经济高效，管理方便，利于自动化

4、技术含量好、实验误差小，人工控制能力强

5、生长周期短、生长速度快、试验重复性好

6、试验材料经济、来源单一

7、需要设备复杂、投入资金多、电能消耗大；对人员技术水平要求高，对试验场要求也较高，不能代替田间试验。

(5)你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么?

1、单倍体育种：通过花药培养，从小孢子获得单倍体植株，染色体加倍后获得正常二倍体植株，这是一条育种的新途径。

2、胚培养、子房培养、胚珠培养：为了克服远缘杂交的不亲和性，可采用胚、子房、胚珠培养和试管受精等手段。

3、突变体的选择和应用：由于植物的单细胞培养成功，可以用这个方法诱发单细胞进行突变，通过筛选所需要的突变体，然后使细胞分化成植株，再通过有性世代使遗传性稳定下来，这是从细胞水平来改造植物的一种途径。

4、体细胞杂交和遗传工程,通过异种原生质体的相互融合（即体细胞杂交）为植物育种工作开阔新的途径，培育新品种。

5、通过组织培养可以做到植物快速繁殖.

6、通过组织培养可以进行无病毒植株的培育。

7、用组织培养可以生产的化合物有强心苷、吲哚生物碱、黄连素、辅酶Q10等次生代谢物.

8、人工种子的研究

9、植物种质资源的保存 .

(6)因地制宜建一个组织培养实验室，需要哪些分实验室?各分室的作用是什么?

1、准备室的设置及配备：器具的洗涤、干燥、消毒

2、配置室：进行药品的配置、保存、分装

3、灭菌室：培养基及使用器具的消毒与灭菌

4、缓冲间：隔离接种室与外界，防止灭菌室直通接种室，控制污染气流和控制压差的作用，以保证接种室的洁净度。

5、接种室：进行材料的接种，内置超净工作台或接种箱。外设缓冲间, 放置拖

鞋、工作服、工作帽

6、培养室：将接种的材料进行无菌培养生长的场所

7、观察室：室内放有解剖镜、显微镜，可行培养材料的组织学、细胞学观察、照相等

(7)组织培养中，pH值起什么作用?如果pH值过高或过低会有什么后果?

答：pH值直接影响培养材料对营养的吸收，因此影响到新梢的生长、繁殖；植物在自养条件下可以调节体内酸碱度，但在立体条件下则失去自行调节能力。pH 值过高，会使培养基过硬；pH值过低，则琼脂不能凝固。

(8). 常见的培养基种类有哪些？各有何特点？专为什么材料的培养而设计的？

答：常见的培养基有如下五类：1、MS培养基，特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液，专门为培养烟草细胞而设计。2、B5培养基，主要特点是含有较低的铵，因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用，专门为培养大豆根细胞而设计。3、White培养基，特点是无机盐数量较低，适于生根培养，专门为培养番茄根尖而设计。4、N6培养基，特点是成分简单，KNO3 和（NH4）2SO4含量高，专门为水稻等禾谷类植物花药培养而设计。5、KM-8P培养基，特点是有机成分较复杂，专门为原生质体培养设计。

(9).培养基的成分主要包括有哪些？

答：培养基的成分主要包括碳源（包含糖类）、氮源、水、无机盐、生长因子等营养成分，还要用琼脂作为凝固剂。

(10).培养基中常用的植物激素有哪些？各有何作用？

答：培养基中常用的植物激素有生长素类包括2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）、6-苄基嘌呤（6BA）等，作用是促进植物的生长；

细胞分裂素类包括KT、BA、ZT等，作用是促进细胞分裂，促进发育；

赤霉素常用的是GA3，可刺激叶和芽的生长；

脱落酸具有有阻遏赤霉酸及细胞分裂素促进生长的作用。

(11).外植体的选择需注意哪些问题？什么季节取材最好？

答：外植体的选择需注意：植物的种植选择、外植体的增值能力、外植体的大小、外植体的年龄和着生部位、取外植体的季节和时间和木本材料的特殊性。春夏季取材最好。

(12).在组织培养过程中，常用的灭菌方法有哪些？

答：常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类。1、物理方法：如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；2、化学方法：是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。

(13).何谓外植体褐变？产生褐变的主要原因？如何防止减轻褐变现象的发生？

答：外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。原因是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致。防止减轻褐变现象的发生应注意：选择合适的外植体；合适的培养条件；使用抗氧化剂；连续转移。

(14).试管苗有哪些特点？移栽应注意哪些方面？

答：试管苗特点有：无根毛，根与苗的输导组织不相连；叶的角质和蜡质层不发达，容易蒸腾失水，无表皮毛，保水和反光能力差，叶细胞结构疏松，叶气孔突出、张大，叶存在排水孔等形态解剖特点。生理功能方面：①根的生理功能低，吸水能力弱；②叶片表面极易散失水分；③气孔不能关闭；④叶光和能力较低，CO2固定能力差等特点。移栽要注意：①水分的平衡（不要失水过多）；②温度和光照（不能太高）；③光和能力逐步形成或加强。

(15)为什么说植物器官培养是组织培养的一个最重要的方面?

答：植物器官培养是指离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。以器官作为外植体进行离体培养，进行的植物种类最多，应用的范围也最广，所以说植物器官培养植物组织培养中最主要的一个方面。

(16)植物脱毒培养的意义是什么？

答：植物脱毒培养的意义在于：1、去除病毒危害，提高作物品质与产量采用生物、物理、化学等途径防治病毒病收效甚微，甚至毫无成效。而通过组织培养的方法可以脱除严重患病毒植物的病毒种类，提高产量和质量。2、减少环境污染，有利于保护环境，栽培去病毒植物可减少药剂的使用。

(17)简述植物茎尖脱毒和热处理脱毒的原理与方法

答：（1）茎尖培养脱毒原理是感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低，生长点则几乎不含或含病毒很少。方法：微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱毒和珠心组织培养脱毒。

（2）热处理脱毒是当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，不能生成或生成病毒很少，以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的。热处理的方法有温汤浸渍处理法和热空气处理脱毒法。(18)脱毒植物鉴定方法有哪几种？

答：脱毒植物鉴定的方法包括指示植物法，抗血清鉴定法和电子显微镜检查法。