实验二 细菌、放线菌的形态观察PPT课件
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细菌、酵母菌、霉菌和放线菌接种方法和形态观察
注意：由于实验内容较多，所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可，黑体字部分自己看一下。
由于11-13周为教学质量检查周，督导随时可能来查，所以预习报告还是要写。
细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察一、微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 基本原理将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。
接种的关键是严格进行无菌操作。
常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。
3 实验材料3.1 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物3.2 培养基：营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板3.3 试剂：5ml无菌生理盐水试管3.4 仪器与其他用品酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。
4 操作步骤4.1 斜面接种法斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。
操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行。
4.1.1准备工作将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在外侧，接种管在内侧，斜面向上管口对齐，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。
4.1.2接种环灭菌右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。
镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍。
4.1.3拔管塞和烧烤试管口用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
4.1.4接种环冷却和取菌将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，待冷却后再从斜面上刮取少许菌苔取出。
教学课件-放线菌的形态观察.
形瓶口上塞上棉塞。
实验操作
❖ 4、包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外
包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔 注明培养基名称、组别、配制日期。
❖ 5、灭菌 将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压
蒸汽灭菌。
实验操作
❖ 6、搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试
配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的 试剂中，在加热养基的原始PH,如果偏酸，用滴管
向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时 用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用 1mol/LHCI进行调节。
❖ 3、分装和加塞 将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥
培养基配方
❖高氏一号培养基配方如下：
可溶性淀粉
20g
NaCI
0．5g
KNO3
1g
K2 HPO4 ．3H2 O
0．5g
MgSO4 ．7 H2 O 0．5g
FeSO4 ．7 H2 O 0．01g
琼脂
15～25g
水
1000ml
pH
7.4～7.6
实验材料
❖１、溶液与试剂 可溶性淀粉， NaCI ， KNO3 ， K2 HPO4 ．3H2 O MgSO4 ．7 H2 O ， FeSO4 ．7 H2 O， 琼脂，1mol/LNaOH, 1mol/LHCI。
放线菌的形态观察 ——高氏一号培养基
基本原理
❖ 高氏一号培养基是用来培养和观察放线菌形态特 征的合成培养基。如果加入适量的抗菌药物，则 可用来分离各种放线菌。
❖ 此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分 已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生 沉淀。因此，混合培养基成分时，一般是按配方 的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将两种 或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
实验操作
❖ 4、包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外
包一层牛皮纸，其外再用一根麻绳扎好。用记号笔 注明培养基名称、组别、配制日期。
❖ 5、灭菌 将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压
蒸汽灭菌。
实验操作
❖ 6、搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷却至500C左右，将试
配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的 试剂中，在加热养基的原始PH,如果偏酸，用滴管
向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌，并随时 用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之，用 1mol/LHCI进行调节。
❖ 3、分装和加塞 将配制的培养基分装入试管内，在试管口或锥
培养基配方
❖高氏一号培养基配方如下：
可溶性淀粉
20g
NaCI
0．5g
KNO3
1g
K2 HPO4 ．3H2 O
0．5g
MgSO4 ．7 H2 O 0．5g
FeSO4 ．7 H2 O 0．01g
琼脂
15～25g
水
1000ml
pH
7.4～7.6
实验材料
❖１、溶液与试剂 可溶性淀粉， NaCI ， KNO3 ， K2 HPO4 ．3H2 O MgSO4 ．7 H2 O ， FeSO4 ．7 H2 O， 琼脂，1mol/LNaOH, 1mol/LHCI。
放线菌的形态观察 ——高氏一号培养基
基本原理
❖ 高氏一号培养基是用来培养和观察放线菌形态特 征的合成培养基。如果加入适量的抗菌药物，则 可用来分离各种放线菌。
❖ 此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分 已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生 沉淀。因此，混合培养基成分时，一般是按配方 的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将两种 或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
认识细菌和放线菌-教学课件
细菌的个体十分微小， 直径一般只有1微米左右 （1米=106微米）。只有 用高倍显微镜或电子显微 镜才能观察到细菌的形态 和结构。
放 大 数 百 倍 后
放 大 一 千 倍 后 放 大 数 万 倍 后 放 大 数菌的形态 观察下列细菌图片，你能说出细菌有哪几种形态吗？ 球形 杆形 螺旋形
葡萄球菌
大肠杆菌
幽门螺旋菌
链球菌
双歧杆菌
霍乱弧菌
细菌的结构 观察细菌细胞的结构示意图，对照课本相关内容， 说出细菌细胞各部分的结构名称。
荚膜
细胞壁 细胞膜 细胞质 拟核
基 本 结 构
鞭毛
细菌的结构 观察动物细胞、植物细胞、细菌细胞的结构示意图， 填写下表；比较并说出细菌细胞与动植物细胞的相同和不 同之处。
80×24＝1280
我们要注意饮食卫生，饭前便后洗手，勤剪指甲， 勤洗澡，勤换衣物，按时刷牙„„
你知道吗？ 下过雨后，常常能闻到 “泥土的芳香”，但那到底 是土壤中的什么物质散发出 来的味道呢？ 土壤特有的泥腥 味，主要来源于放线 菌的代谢产物。
放线菌的分布
放线菌在自然界分布广泛，主要以孢子或菌丝状态 存在于土壤、空气和水中，尤其是含水量低、有机物丰 富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。
DIY 制作细菌的结构示意图
巧手制作， 创意无限！
第13章 土壤里的生物
谢 谢！
细胞膜
细胞核
细胞质
细胞壁 细胞膜 叶绿体 细胞核 液泡 细胞质
细胞壁 细胞膜 细胞质 拟核
动物细胞 基 本 结 构 细胞膜 细胞质 细胞核
植物细胞 细胞壁 细胞膜 细胞质 细胞核 液泡 叶绿体
细菌细胞 细胞壁 细胞膜 细菌没有 细胞质 叶绿体，怎样 拟核 生活呢？
实验二细菌、放线菌的形态观察
（2）区别营养菌 丝、气生菌丝、孢 子丝
四、实验方法和步骤
3. 气生菌丝、孢子丝的活体观察
将培养皿盖打开，选择菌丝和孢子丝生长较薄的部 位，直接用低倍镜和高倍镜观察。
4．气生菌丝、孢子丝的印片观察
载玻片—滴1滴美兰染液—盖玻片印片—印片面向下 置于美兰中—吸去多余染液—镜检（用油镜观察）— —维护还原显微镜。
五、 思 考 题
1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注 明名称和放大倍数。 2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？ 3、放细菌的菌体为何不易挑取？
文档名
THE END!THANK YOU !
四、实验方法和步骤
1、细菌简单染色
取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定 —染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形 状、大小、排列方式）
葡萄球菌
四、实验方法和步骤
2、放线菌菌落 形态观察
（1）表面形状 大小、颜色、边缘 、紧密程度等。
（2）区别营养菌 丝、气生菌丝、孢 子丝
四、实验方法和步骤葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、 灰色链霉菌等。
2、器材
显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、 香柏油、碱性染料番红、结晶紫等。
四、实验方法和步骤
1、细菌简单染色
取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定 —染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形 状、大小、排列方式）
二、细菌染色的基本原理
细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜 下不易识别，必须对它们进行染色。细菌常 用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中 性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带 负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染 色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体 着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明 的对比，在显微镜下更易于识别。
四、实验方法和步骤
3. 气生菌丝、孢子丝的活体观察
将培养皿盖打开，选择菌丝和孢子丝生长较薄的部 位，直接用低倍镜和高倍镜观察。
4．气生菌丝、孢子丝的印片观察
载玻片—滴1滴美兰染液—盖玻片印片—印片面向下 置于美兰中—吸去多余染液—镜检（用油镜观察）— —维护还原显微镜。
五、 思 考 题
1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注 明名称和放大倍数。 2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？ 3、放细菌的菌体为何不易挑取？
文档名
THE END!THANK YOU !
四、实验方法和步骤
1、细菌简单染色
取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定 —染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形 状、大小、排列方式）
葡萄球菌
四、实验方法和步骤
2、放线菌菌落 形态观察
（1）表面形状 大小、颜色、边缘 、紧密程度等。
（2）区别营养菌 丝、气生菌丝、孢 子丝
四、实验方法和步骤葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、 灰色链霉菌等。
2、器材
显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、 香柏油、碱性染料番红、结晶紫等。
四、实验方法和步骤
1、细菌简单染色
取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定 —染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形 状、大小、排列方式）
二、细菌染色的基本原理
细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜 下不易识别，必须对它们进行染色。细菌常 用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中 性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带 负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染 色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体 着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明 的对比，在显微镜下更易于识别。
放线菌形态的观察和霉菌的湿室培养.ppt
分布：含水量较低、有机物丰富、呈微碱性的土壤中。 估计每克土壤中约含放线菌孢子107个。
应用：放线菌对人类最突出的贡献就是它能产生大量的、 种类繁多的抗菌素。放线菌还是酶类、维生素的生产菌； 有的放线菌有固氮能力；放线菌在自然界物质循环中也 起着重要作用，由于它们具有较强的分解复杂有机物的 能力，对于土壤肥力的提高也有重要作用。
观察放线菌各部分菌丝的形态特征，并按要求绘制放线菌 的形态图
进行霉菌湿室培养的制作 巩固显微镜油镜的使用
实验原理
Actinomycetes是一类具有丝状分 枝的单细胞，主要以外生孢子的 形式繁殖，革兰氏阳性，与细菌 同属原核微生物。放线菌菌菌落 中的菌丝常从一个中心向四周辐 射状呈放射状生长，并因此而得 名。放线菌有特殊的土霉味。
Exercise three
放线菌形态的观察 和霉菌的湿室培养
制作者：黄海婵（hhc@） Tel:0571-88320921 or 0571-88320057
目的要求
实验原理
实
验 内
实验材料
容
观察放线菌链霉菌的形态
实验程序
制作霉菌湿室培养`
思考题
目的要求
学习并掌握观察放线菌形态的基本方法：印片法和插片法
注意分界面两侧菌丝形态的 差异
观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找 到适当视野，更换高倍镜观察。
如果用0.1%美蓝对培养后的盖玻片进行 染色后观察，效果会更好。
实验程序Ⅲ（观察放线菌链霉菌的形态——印片法）
❖ 倒平板
一人做一块印 片进行观察
取融化并冷却至大约50C的高氏I号琼脂约20mL倒平板，凝固备用。
危害：只有极少数放线菌对人类构成危害，某些 Actinomyces（放线菌属）菌种引起动物放线菌病（皮 肤、脑、肺和足部感染），某些Nocardia（诺卡氏菌属） 引起人和动物的诺卡氏菌病；还有少数放线菌能引起植 物病害。
实验二、细菌革蓝氏染色、放线菌形态观察
的培养基中取一小块菌放于载玻片上，然后取一盖玻片盖 上后轻轻压一下后、再放上一片滤纸压一下，再观察。
印片法：取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔
上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢固定。
上：孢子丝
右上、右下：基内菌丝 和气生菌丝
2. 结果 革蓝氏染色阳性：深紫色 革蓝氏染色阴性：浅红色
3. 放线菌的观察
基内菌丝（substrate mycelium）：也称营养菌丝，生长于培养基内，主
要功能是吸收营养物质和排泄代谢废物，营养菌丝一般无隔膜，内含有许多核质体， 直径约为0.2-0.8μm，但长度差别很大。色浅、较细。
气生菌丝（aerial mycelium）：营养菌丝发育到一定时期，长出培养基外伸
实验二、细菌革蓝氏染色、放线菌形态观察
基本概念： 革蓝氏染色（Gram staining） 革蓝氏染色阳性（Gram Positive） 革蓝氏染色阴性（Gram Negative） 基内菌丝（substrate mycelium） 气生菌丝（aerial mycelium） 孢子丝（sporophore）
放线菌的基本特点
¾分枝丝状体，原核微生物 ¾革蓝氏染色阳性反应 ¾不运动 ¾大部分腐生菌，少数寄生菌，也有致病菌 ¾ 抗生素的主要产生菌 ¾ 许多酶和维生素的产生菌 ¾甾体转化、石油脱蜡、污水处理 ¾某些与植物共生固氮
放线菌的菌丝
1、营养菌丝 匍匐生长于培养基内，吸收营养，也称基内菌丝。一般无
隔膜，直径0.2-0.8 μm，长度差别很大，有的可产生色素。
[实验目的]
1. 学习细菌革兰氏染色原理和方法 2. 学习放线菌培养观察方法 3. 观察细菌形态及运动（活体观察）
[实验材料] 1. 菌种
印片法：取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔
上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢固定。
上：孢子丝
右上、右下：基内菌丝 和气生菌丝
2. 结果 革蓝氏染色阳性：深紫色 革蓝氏染色阴性：浅红色
3. 放线菌的观察
基内菌丝（substrate mycelium）：也称营养菌丝，生长于培养基内，主
要功能是吸收营养物质和排泄代谢废物，营养菌丝一般无隔膜，内含有许多核质体， 直径约为0.2-0.8μm，但长度差别很大。色浅、较细。
气生菌丝（aerial mycelium）：营养菌丝发育到一定时期，长出培养基外伸
实验二、细菌革蓝氏染色、放线菌形态观察
基本概念： 革蓝氏染色（Gram staining） 革蓝氏染色阳性（Gram Positive） 革蓝氏染色阴性（Gram Negative） 基内菌丝（substrate mycelium） 气生菌丝（aerial mycelium） 孢子丝（sporophore）
放线菌的基本特点
¾分枝丝状体，原核微生物 ¾革蓝氏染色阳性反应 ¾不运动 ¾大部分腐生菌，少数寄生菌，也有致病菌 ¾ 抗生素的主要产生菌 ¾ 许多酶和维生素的产生菌 ¾甾体转化、石油脱蜡、污水处理 ¾某些与植物共生固氮
放线菌的菌丝
1、营养菌丝 匍匐生长于培养基内，吸收营养，也称基内菌丝。一般无
隔膜，直径0.2-0.8 μm，长度差别很大，有的可产生色素。
[实验目的]
1. 学习细菌革兰氏染色原理和方法 2. 学习放线菌培养观察方法 3. 观察细菌形态及运动（活体观察）
[实验材料] 1. 菌种
2.2 放线菌
放线菌属，丝状菌落 （ × 18000）
小 单 孢 菌 属
2.3 蓝细菌（蓝藻，蓝绿藻）
• 是一类含有叶绿素a、具有放氧性光合作 用的原核生物。过去也称为蓝藻或蓝绿藻。 • 蓝细菌与藻类的最大区别：无叶绿体、无 真核、有70S核糖体，细胞壁中含有肽聚 糖，对青霉素和溶菌酶敏感等。
2.3.1 蓝细菌
菌落质地硬而且致密，菌落小而不广泛延伸。 菌落表面呈紧密的绒状或坚实、干燥多皱。
接种针难以挑取，有时可挑碎，有时可将整 个菌落挑起。 基内菌丝和孢子常有 颜色，使得菌落的正 反面颜色常不一致。
放线菌的菌落特征
A：诺尔斯氏链霉菌 B：皮疽诺卡氏菌 C：酒红指孢囊菌 D：游动放线菌 E：小单胞菌 F：皱双孢马杜拉放线菌
肺炎支原体
本章小结
原核生物的共同特征是细胞细小，核的结构原 始，无核膜包裹，细胞壁含独特的肽聚糖，细 胞内无细胞器分化，无有丝分裂。 通过革兰氏染色可把所有原核生物区分为G+和 G-两大类，并能揭示其在结构、生理、遗传、 生态等特性上的不同，故此染色法具有重要的 理论和实践意义。 原核细胞的共同结构有细胞壁（支原体例外）、 细胞质膜、细胞质、核区和各种内含物等，部 分种类的细胞壁外还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽 孢等特殊构造。芽孢高度耐热，在理论与实践 上均很重要。
（3）可有效去除氮、磷，可作水体富营养化的指示生物。
（4）有的蓝细菌是污染水体中发生“赤潮”及“水华”的原凶
蓝细菌造成无锡太湖水华
2.4 古细菌
古生菌是一群具有独特的基因结构或系统发育 生物大分子序列的单细胞原核生物；
多生活在地球上极端的生境或生命出现初期的 自然环境中，营自养和异养生活；
具有特殊的生理功能，如在超高温、高酸碱度、 高盐及无氧状态下生活； 具有独特的细胞结构，如细胞壁骨架为蛋白质 或假胞壁酸，细胞膜含甘油醚键；以及代谢中的 酶作用方式既不同于细菌又不同于真核生物。
《放线菌多样性》课件
基因组结构
放线菌基因组通常为环状染色 体，含有重复序列和可变数量 的染色体。
基因组功能
放线菌基因组具有多种功能， 包括抗生素合成、环境适应、
营养获取等。
放线菌的进化关系
系统发育树
根据16S rRNA基因序列构建的系统发育树 显示放线菌之间的进化关系。
进化机制
放线菌的进化机制包括基因突变、基因重组 、基因水平转移等。
《放线菌多样性》ppt课件
目录
• 放线菌简介 • 放线菌的多样性 • 放线菌的生物活性 • 放线菌的分离与鉴定 • 放线菌的基因组学与进化 • 展望与未来研究方向
01
放线菌简介
放线菌的定义与分类
放线菌是一类具有分支状菌丝 的革兰氏阳性细菌，通常在固 体培养基上形成辐射状气生菌 丝。
根据其生理生化特性，放线菌 可分为数十个属，其中链霉菌 属是最常见的。
02
放线菌的多样性
放线菌的物种多样性
物种多样性
放线菌是微生物中的一大类群， 包括许多不同的物种。这些物种 在形态、生理和生态特征上各不
相同，呈现出丰富的多样性。
分类学研究
为了更好地了解放线菌的物种多 样性，需要进行深入的分类学研 究，包括形态学、生理学和分子
生物学等方面的研究。
生物地理学
放线菌的物种多样性也表现在它 们的地理分布上，不同地区的放 线菌群落存在差异。生物地理学 研究有助于了解放线菌的分布规
放线菌的分布与生态
放线菌广泛分布于各种环境，如土壤 、水体、空气等，尤其在土壤中最为 丰富。
放线菌与人类关系密切，一方面能够 产生多种有用的次生代谢产物，另一 方面也能引起一些植物和动物病害。
放线菌在生态系统中扮演着重要的角 色，能够降解有机物、转化金属元素 和产生天然产物等。
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四、实验方法和步骤
（2）区别营养菌 丝、气生菌丝、孢 子丝
四、实验方法和步骤
3. 气生菌丝、孢子丝的活体观察
将培养皿盖打开，选择菌丝和孢子丝生长较薄的部 位，直接用低倍镜和高倍镜观察。
4．气生菌丝、孢子丝的印片观察
载玻片—滴1滴美兰染液—盖玻片印片—印片面向下 置于美兰中—吸去多余染液—镜检（用油镜观察）— —维护还原显微镜。
五、 思 考 题
1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注 明名称和放大倍数。 2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？ 3、放细菌的菌体为何不易挑取？
一、实验目的及要求
1. 掌握细菌的制片和染色技术 2. 掌握放线菌形态观察方法 3. 熟练油镜的使用方法
二、细菌染色的基本原理
细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜 下不易识别，必须对它们进行染色。细菌常 用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中 性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带 负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染 色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体 着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明 的对比，在显微镜下更易于识别。
1、菌种
三、实 验 材 料
金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、 灰色链霉菌等。
2、器材
Байду номын сангаас
显微镜、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、 香柏油、碱性染料番红、结晶紫等。
四、实验方法和步骤
2、放线菌菌落 形态观察
（1）表面形状 大小、颜色、边缘 、紧密程度等。
（2）区别营养菌 丝、气生菌丝、孢 子丝