免疫学检验-免疫检验的质量控制PPT优选课件

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移植免疫监测
器官移植后,患者需要接受免疫抑制治疗以防止排斥反应。通过监测免疫功能和相关抗体,有助于评估患者的免疫状态和移植效果。
02
CHAPTER
免疫检验基础知识
抗原是指能够刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答的物质,包括外源性抗原和内源性抗原。
抗原
抗体是指机体在抗原刺激下产生的具有高度特异性的蛋白质分子,能够与相应抗原结合,发挥免疫效应。
通过检测T细胞增殖和转化能力,评估机体的细胞免疫功能。
通过检测细胞因子表达水平,了解机体的免疫应答状态。
通过检测免疫细胞的杀伤、吞噬、释放细胞因子等功能,评估机体的免疫功能。
利用基因芯片等技术对免疫相关基因的表达水平进行检测,了解机体的免疫应答机制。
基因表达谱分析
通过制备针对特定抗原的单克隆抗体,用于免疫学检测和免疫治疗。
通过检测炎症因子(如IL-1、IL-6、TNF等)的水平,了解机体的炎症反应状态。
通过检测自身抗体(如类风湿因子、抗核抗体等)的水平,了解机体的自身免疫状态。
04
CHAPTER
常见免疫检验项目及解读
总结词
乙肝两对半检测是常见的免疫检验项目之一,用于检测乙型肝炎病毒的抗原和抗体。
详细描述
乙肝两对半检测包括乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)的检测。通过检测这些抗原和抗体,可以了解个体是否感染了乙型肝炎病毒,以及感染阶段和免疫状态。
01
免疫组学技术
利用免疫组学方法,研究免疫细胞和分子的功能和相互作用,为免疫疾病的诊断和治疗提供新思路。
02
生物信息学
结合生物信息学技术,对免疫相关基因和蛋白质进行大数据分析,挖掘免疫相关疾病的发病机制和潜在治疗靶点。

免疫检测技术ppt课件

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各实验室操作不规范,质量难以保证。有学者认为ELISA 技术已逐步走向退化,可能会逐步退出临床实验室。
• 化学发光免疫测定法出现于20世纪90年代初,是一种新
型标记免疫测定技术
• 化学发光是在常温下由化学反应产生的光的发射。其机
制为某些化合物(发光剂或发光底物)可以利用一个化
学反应产生的能量使其产物分子或反应中间态分子上升
• 标记物及其类别 • 常见三大免疫标记检测原理
• 随着基础免疫学研究的深入和现代免疫学
理论的建立,使大量免疫学检测技术被不 断地创新、发明;在临床疾病诊治的应用 中也不断地推陈出新。目前应用免疫学原 理检测的检验项目占到三级综合医院检验 科全部检验项目的1/4,医疗收入约占1/
• 三大常使用标记物质
土元素,需要外在的稳定光源照射,光的波长产生stoke位移,并
有一个时间滞后以化便学于发检光测波长改变后的光子时数间量分。辩荧光
标记物 酶-发光底物、发光剂
稀土离子,如铕
稳定性
稳定性非常好
影响被标记物的生物活性与免 疫活性
灵敏度
灵敏
稍高于化学发光
反应体系
接近中性
酸性,易引起蛋白质变性
包被技术
不透明微量孔壁吸附, 提高分析灵敏度,降低

• 标准曲线有效期短,必须每次定标,造成浪费 • 操作步骤很难自动化 • 反应时间长,出报告时间长
• 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,加入酶
标抗原或抗体、酶反应的底物后,底物被酶催化 变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量 直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或 定量分析
1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫测定方法(ELISA),这种 非放射标记免疫测定在临床检验,特别是感染性疾病的诊断中取得了 广泛应用。 缺点 ➢试剂制备困难 ➢操作步骤复杂,耗时长 ➢影响因素多,质量控制难以保证 ➢最后测定的是颜色的光密度,其精密度、敏感性、可检测范围远不 如发光免疫技术

临床免疫学检验技术PPT(共64页)

临床免疫学检验技术PPT(共64页)
临床免疫学检验技术
• 江西省胸科医院:熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验,用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验(enzy发展,放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验, 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程, 极大地提高了免疫学检验的灵敏度,拓展 了免疫学检测范围,从检测免疫相关物质 (抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等)到检测体液中的微量物质(激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等)。
三、酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体,读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶(HRP)、 碱性磷酸酶(AP)等,HRP常用的底物有 邻苯二胺(OPD)或四甲基联苯胺 (TMB),碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯(P-NPP)作为底物,产物为黄色的 对硝基酚,在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子,用于判断机体细胞免疫功 能状况。

免疫学实验的质量控制PPT课件

免疫学实验的质量控制PPT课件

非患者 FP(假阳性) TN(真阴性) FP+TN
合计 TP+FP
FN+TN
TP+FP+FN+TN TP
5/4—/202——1 —————————T—P+精—F选Np—pt课—件×—最1新0—0%———————————13
诊断特异性
概念 非患者(正常人与无关疾病的患者)中用 此试验得到阴性结果的百分率。
真值 真值是在大多数情况下无法确切知道
的数值。根据1976年国际临床化学会 (IFCC)公布的有关质控的规定,真值是 指采用一组最可靠的参考方法测得的近似 真实的数值。
定值 是指标定的质控材料的已知值。
5/4/2021
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三、与质控有关的重要术语
决定性方法
是指经过彻底研究未发现任何不精密 和不准确因素的方法。在分析某被测物时 是所有测定方法中具有最高准确度的方法。 国际公认的决定性方法很少,并且其设备 昂贵及技术操作复杂。
(1)Reproducibility: 不同操作者用同一方法对同一标本在不同时
间内重复检测结果的差别。 (2)Repeatability:
用同一方法对同一标本在同一时间重复检测 结果的差别。 意义 5/4/2021 不涉及被测物精选质ppt的课件最真新 值,差别越小,方9法
准确度
概念 :表示测量结果与真值的一致程度, 是测量结果中系统误差与随机误差的综 合。
概述
定义:
质量控制(quality control,QC)是利用 现代科学管理的方法和技术检测分析过程中 的误差,控制与分析有关的各个环节,确保 实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保 证。
5/4/2021

免疫质控ppt课件

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2.S/CO值≥±3S为失控。
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免疫质控的特点
影响ELISA检测的因素很多。检测时,阴阳性对照物、质 控物和标本同时同板进行检测。检测完成后要对空白孔、 阴阳对照孔、质控物进行即刻审核,判定是否在控,该 板结果可否发出。
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即时审核规则
Uranus AE200(所有项目数据自动换算自动传输): 设空白1孔,阴、阳性对照各2孔,室内质控1孔
与阴性对照相关的计算值
如 HBsAg CO=2.1N
与阴阳性对照相关的计算值 如 HBcAb CO=1/2(N+P)
“灰区”(可疑结果的含义) 把定量分析的正常值范围引入定性分析建 立
灰区概念,即将CO 值上下的一段区域定为阳性可疑,需重复实验或换 试剂重测以确定其阴阳性,如仍落在灰区范围内则报告“+”(阳性)
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梅毒抗体检测采用的方法:
TP(ELISA)、梅毒明胶凝集法(TPPA)、梅毒血球凝集法 (TPHA)、TRUST(非特异性)
本室质控原则:先用ELISA试剂在Uranus AE200上
检测,若阳性标本应即时用TPPA复查,进一步确认后发 出报告。
TP (ELISA)CUT-OFF值=2.1N x (N-阴性对照,OD值不到0.05 按0.05算)。通常CO值为0.105
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定性酶免疫测定的CUT-OFF值
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ELISA检测的“钩状”效应“HOOK EFFECT”
一步法和二步法均存在,只是前者出现的更早
些,大多数是高值低吸光度,很少阴性结果。
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质量控制血清
质控血清是已知靶值的血清,在每次的常 规检验中加入一份或数份,通过所得结果 来了解本次检验的情况。质控血清检验的 结果如能控制其误差在一定范围内,就说 明该检验没有发生不允许的误差。如果出 现超过允许误差范围的异常结果,提示该 检验不合格,应寻找原因,纠正后,重检 待测标本。因此质控血清在质控工作中起 重要作用。

免疫学检验质量控制

免疫学检验质量控制

“即刻法”的具体计算方法
先将测定值从小到大排列 计算X和S。 计算SI上限和SI下限值。 将SI上限、SI下限值与SI值中的数字比较。
当SI上限值和SI下限值<n2S时,表示“在控” 当SI上限和SI下限有一值处于n2S和n3S值之间时,表示处于 “告警”状态 当SI上限和SI下限有一值>n3S时,属“失控”。 数值处于"告警"和"失控"状态应舍去
质评计划的组织和设计 邀请书的发放 质控品的选择和准备 与参加者的沟通 报告的发放 结果的核对
质控品的包装和运输
检测结果的接受
检测靶值的确定
检测结果的录入
参加者的工作流程
接受质控品 按规定的日期进行检测 结果申报 收到评价结果
决定是否采取纠正措施
评估采取措施的效果
EQA质评样本
样本特征与患者样本应尽量一致 样本浓度与试验的临床应用相适应 在样本发放的条件下稳定 不存在不可避免的传染危险性
免疫检验质量控制中常用统计学方 法的选择 定性免疫检验 定量免疫检验
定性免疫检验质量控制
定性免疫检验的方法很多,主要有沉淀试验、凝集试
验、荧光免疫试验和酶免疫试验等,测定结果的判定 为阴性或阳性,此类测定的质控要点是测定下限。 已知的弱阳性质控:每次测定都应至少带一个已知的 弱阳性对照,从而有助于判断临床标本的检测结果是
可能会妨碍给出不同结果的改良方法的发 展。由于质评标本的靶值是建立在现有的 最常用的方法试剂的基础上,如靶值为所 有参评实验室的修正均值或参考实验室的 均值等,这样对于可能测定性能更优的改 良方法,用此靶值来评价的话,质评结果 有可能较差,这样就妨碍这种新的方法在 实验室的应用。
在不同的EQA程序中,对实验室的评价有 可能不同。由于不同的外部机构,其所发 标本的类型、浓度、数量或评价方法可能 会有所差异,因此,同一个实验室参加不 同外部机构组织的室间质量评价,评价的 结果很有可能会不一样。

临床免疫检验的质量保证PPT医学课件

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Pm=
Pm<5%为失控。此时,阴性标本可以发出报告,所有阳 性标本在查清原因后重做。
根据二项式分布的概率计算
如果一个实验室检测HBsAg,平常病人结果的阳性率为 10%,即p=0.1, 在某一次检测19个样本出现5个阳性结果, 14个阴性结果,则检测过程中是否存在污染的可能性可通 过下述方法计算。即计算在19个样本中出现至少5个阳性结 果的概率,此时的概率为1-(获得0个或1个或2个或3个或4 个阳性结果的概率)即:
本章小结
分析前质量保证包括检验项目的申请、患者的准 备、标本的采集、运送、接收和保存等。
分析中的质量保证包括实验室环境条件、仪器设 备维护校准、试剂方法的性能验证、标准操作程序的 建立、人员培训、标本前处理、室内质量控制、室间 质量评价和实验室间比对等,其中室内质量控制和室 间质量评价是质量保证的重要方面。
本章小结
临床上绝大部分开展的免疫学检验,都是仅能作为 筛查试验或诊断试验,阳性结果仅代表在检测中发生了 抗原抗体的阳性反应,但阳性反应可能是真阳性,也可 能是假阳性,也就是说存在一定比例的假阳性可能。由 于免疫检验方法学的这一局限性,在免疫检验的分析前 、分析中和分析后质量保证中,都涉及到与其他检验项 目不同的特点,突出表现在检验项目的申请(分析前) 和结果的报告与解释(分析后)两个方面。
是对实验室操作和实验方法的回顾性评价,而不是用 来决定实时的测定结果的可接受性。
通过参与EQA,实验室可对自己的实验操作进行纠正, 从而起到自我教育的作用。
第五节 分析后的质量保证
重点提示
结果的报告与解释 检验后标本的保存与处理 咨询服务
结果的报告
基本信息 ①患者的姓名、性别、年龄; ②送检科室或单位名称; ③标本采集时间和实验室接收标本时间;④标本的编号或 条码;⑤检测项目;⑥标本类型;⑦检测方法和主要设备 等。

第21章免疫检测的质量控制ppt课件

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统计学质控的特点
检验误差有两类:一是系统误差,一是随机误差。 系统误差通常表现为质控物测定均值的漂移,是由
操作者所使用的仪器设备、试剂、标准品或校准物 出现问题而造成的,这种误差可以通过前述的措施 方法加以控制,是可以排除的。 随机误差则表现为测定SD的增大,主要是由实验操 作人员的操作等随机因素所致,其出现难以完全避 免和控制。
室内质量控制〔Internal Quality Control,IQC) 由实验室工作人员,采取一定 的方法和步骤,连续评价本实验室工作的可靠 性程度。
室间质量评价 (External Quality Assessment, EQA) 为客观比较一实 验室的测定结果与靶值的差异,由外单 位机构客观地评价实验室的结果,发现 误差并校正结果
稀释标本 改变标记抗体 用变性IgG预先封闭标本中RF 测抗原,可加入还原剂如2-巯基乙醇去除RF 使用特异的鸡抗体IgY作为标记或固相抗体
补体干扰
固相抗体和标记二抗可抗体分子发生变构,从 而其Fc段的补体C1q结合位点被暴露出来,这 样C1q就成为一个中介物将二者交联起来,从 而出现假阳性结果。
建议采用真空采血管及蝶形针具,以免 直接接触血液。采集容器最好为一次性 无菌密闭容器。
标本采集时间及患者准备
激素和治疗药物 感染性病原体抗原、抗体 肿瘤标志物 特定蛋白
内源性干扰因素
类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、 自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物小分子、总蛋 白浓度等
类风湿因子干扰的排除
重复性条件(repeatability conditions) 是指在短的间隔时间内,在同一实验室对 相同的测定项目使用同一方法和同一仪器 设备,由相同的操作者获得独立的测定结 果的条件。
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• Ⅱ型超敏反应是由抗体IgG、IgM引起。存 在于细胞(靶细胞)膜表面的抗原与相应 抗体结合后通过激活补体、免疫调理作用 及 ADCC作用,最后破坏了靶细胞,引起 Ⅱ型超敏反应性疾病。Ⅱ型超敏反应又称 为溶细胞型或细胞毒型超敏反应。
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Ⅱ型超敏反应的发生机制
(一)抗原 引起Ⅱ型超敏反应的抗原主要分两类: 1、细胞表面固有的抗原成分 2、吸附于组织细胞上的外来抗原、半抗原或抗原 抗体复合物。 (二)抗体为IgG或IgM
Ⅲ型超敏反应的发生机制
• 中等大小可溶性免疫复合物的形成 • 中等大小可溶性免疫复合物的沉积
1、毛细血管通透性增加 2、局部血液动力学因素的作用 • 免疫复合物沉积引起的组织损伤 1、补体的作用 2、以中性粒细胞浸润为主的炎症 3、血小板聚集加重局部充血水肿
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常见的Ⅲ型超敏反应性疾病
• 其他TAA
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第四节 常见肿瘤的免疫诊断及应用原则
肿瘤标志物的检测及临床意义
• 临床常规检测的肿瘤标志物 1、AFP 2、CEA 3、前列腺酸性磷酸酶(PAP)和前列腺特异性抗 原(PSA)
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第三十章 移植免疫及其免疫检测
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第一节 引起排斥反应的靶抗原
第一课件网网站
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第三节 常见免疫球蛋白增殖病
• 多发性骨髓瘤 • 巨球蛋白血症 • 重链病 • 轻链病 • 良性单克隆丙种球蛋白血症
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第四节 免疫球蛋白异常增生常用的免疫检 测
• 血清区带电泳 • 免疫电泳
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• 主要组织相容性抗原 • 次要组织相容性抗原 • 其他组织相容性抗原
1、ABO抗原系统 2、组织特异性抗原
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第二节 排斥反应的种类及发生机制
• 超急性排斥反应 • 急性排斥反应
根据排斥反应的病理特点,急性排斥反应又分 急性体液排斥反应和急性细胞排斥反应: 1、急性体液排斥反应 2、急性细胞排斥反应 • 慢性排斥反应
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(三)组织损伤机制 1、激活补体 2、免疫调理作用促进吞噬细胞破坏靶细胞 3、NK细胞发挥ADCC作用破坏靶细胞
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常见的Ⅱ型超敏反应性疾病
• 输血反应 • 新生儿溶血症 • 自身免疫性溶血性贫血 • 药物过敏性血细胞减少症
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第三节 Ⅲ型超敏反应
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(二)标准品和质控品的基本条件 三、实验室的环境、设施和设备 四、免疫测定方法在疾病临床诊断中应用价值的评 价 1、诊断的敏感性、特异性和诊断效率 2、阳性和阴性预测值 3、ROC曲线
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第二十五章 超敏反应性疾病及其免疫检测
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第二节 Ⅱ型超敏反应
• 体液免疫水平检测 • 细胞免疫水平检测 • 补体水平的检测 • 急性时相反应物质的检测
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第五节 常见的组织或器官移植
肾脏移植
• 组织配型在肾脏移植中的应用 • 肾移植受者的疗效监测
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谢谢您的聆听与观看
THANK YOU FOR YOUR GUIDANCE.
标准品即含量确定的处于一定基质中其特性明 确的物质,这种物质通常是纯品,可分为第一、 第二和第三等三个等级。一级标准品数量有限, 可使用10至20年,其为冻干品,内含载体蛋白。 通常国际标准品(international standard,IS) 为一级标准;国家标准品则为二级标准,可溯源 至一级标准,二级标准可用来维持校准。三级标 准品则通过与二级标准的对比而来,为通常使用 的商品校准品。
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第三节 排斥反应的预防与治疗
组织配型
• HLA配型 • HLA交叉配型与预存抗体的检测 1、淋巴细胞交叉配合试验 2、T细胞淋巴细胞毒性交叉配型 3、B细胞淋巴细胞毒性交叉配型 4、流式细胞法交叉配型 5、自身交叉配型
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移植物与受体的预处理
• 移植物的预处理 • 受体的准备
• 系统性红斑狼疮(SLE) • 类风湿性关节炎(RA)
T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病
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第二十七章 免疫增殖性疾病及其Βιβλιοθήκη 疫检测2020/10/18
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第二节 免疫增生性疾病的免疫损伤机制
• 浆细胞异常增殖 • 正常体液免疫抑制 • 异常免疫球蛋白增生所造成的病理损伤
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第二十四章 免疫检验的质量控制
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第二节 质量保证、室内质控和室间质 评之间的关系
临床实验室 常规免疫检验的 步骤很多,基本 上可分为标本收 集、实验室测定 过程和结果报告 及其解释等(图 24-3)。
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第三节 免疫检验的质量控制原则
一、标准化操作及流程 二、标准品和质控品的应用 (一)标准品和质控品的分类
• 局部免疫复合物病 • 全身性免疫复合物病
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第四节 Ⅳ型超敏反应
IV型超敏反应的发生机制 常见的Ⅳ型超敏反应性疾病
• 传染性迟发型超敏反应 • 接触性皮炎
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第二十六章 自身免疫性疾病及其免疫检测
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自身抗体-免疫复合物引起的自身免疫性疾病
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免疫抑制措施
(一)免疫抑制剂的应用
• 化学性免疫抑制剂 • 生物性免疫抑制剂 (1)细胞性多克隆抗体 (2)细胞性单克隆抗体 (3)细胞因子的单克隆抗体 (4)某些融合蛋白 (5)反义寡核苷酸 • 某些中草药
(二)免疫耐受的诱导
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第四节 排斥反应的免疫检验
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第二十九章 肿瘤免疫及其免疫检验
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肿瘤相关抗原
肿瘤相关抗原(tumor associated antigen, TAA),是指非肿瘤细胞所特有的抗原成分,也少 量地存在于正常细胞,但在肿瘤发生的机体可异常 表达。TAA包括癌胚胎抗原和分化抗原两种类型。
• 胚胎抗原 • 分化抗原
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