衣原体、立克次体、支原体、螺旋体、放线菌
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衣原体、立克次体、支原体、螺旋体、放线菌大多数真菌不需要复杂的营养就能生长,最常用的为沙氏培养基。
结核分枝杆菌在培养前针对标本应做适当的前处理,如痰可做4%H2SO4或4%NaOH处理20~30min,除去杂菌再接种于罗氏培养基,37℃5%~10%CO2培养,定时观察,至4~8周。
解脲脲原体:
主要引起非淋菌性尿道炎,应采集尿液标本。1954年Shepard首先从非淋球菌尿道炎(NGU)患者的尿道分泌物中分离获得,因其菌落细小,故曾称为T支原体(T-mycopiasmas)。
肺炎支原体的致病性主要引起人的原发性非典型性肺炎,经呼吸道传播,无泌尿道感染。
而解脲脲原体可以经性接触传播,并可以通过垂直传播感染新生儿
支原体:
菌落培养3~10天可形成直径为0.2~0.5mm大小的菌落,用低倍镜观察,菌落呈“荷包蛋”样,即中央部分较厚,不透明,向下长入培养基内,周边为一层薄薄的透明颗粒区。是一类无细胞壁、呈高度多形态性,能通过除菌滤器,在人工培养基上能生长繁殖的最小原核型微生物。支原体“草莓”状,反复传代后呈“荷包状”菌落。
支原体因无细胞壁,对作用于细胞壁的抗生素,如青霉素、头孢菌素等不敏感,常在培养基中加入青霉素类药物,以抑制标本中杂菌的生长。
肺炎支原体:
主要引起支原体肺炎,应采集痰液标本。
诊断→症状重(高热、咳嗽)而胸部体征少(双肺无干湿啰音,仅有散在哮鸣音),加上左肺叶弥散性间质性肺炎的X线表现,最可能为肺炎支原体肺炎。支原体对作用于核糖体,抑制或影响蛋白合成的抗生素如四环素、红霉素等敏感。
肺炎支原体可从口腔、呼吸道分离到,主要通过飞沫传播,是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。
衣原体:
是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。抵抗力弱,不耐热,加热50℃经30分钟或56~60℃5~10分钟可杀死,但耐寒,在冰冻条件下可存活数年。对多种抗生素敏感。微生物检验,沙眼衣原体的包涵体中含有糖原,碘染色可以着色。鸡胚培养是间接检测法。
尿道分泌物Giemsa染色观察衣原体包涵体,对感染有诊断意义,简单易行。细胞培养和动物培养时间长,不适合早期珍断。
①为专性细胞内寄生的微生物,绝大多数能在6~8日龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖,并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒。
衣原体有原体和网状体两种形态结构不同的颗粒。1)原体在细胞外较为稳定,无繁殖能力,但有高度的感染性。
2)网状体又称始体,空泡内以二分裂方式繁殖、聚集,构成各种形状的包涵体。
②原体呈球形或椭圆形,外有胞壁,内含致密的核质,为成熟的
衣原体。姬姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定,无繁殖能力,但有高度的感染性。
③当衣原体的原体与易感细胞接触时,通过细胞的吞饮作用进入细胞,形成吞噬小泡。原体在泡内变软,增大为网状体。约8小时后,网状体在空泡内以二分裂方式繁殖、聚集,构成各种形状的包涵体。(原体→吞噬小泡(8h后)→网状体→包涵体)
④肺炎衣原体经呼吸道传播,引起肺炎、支气管炎、咽炎等,因痰标本对培养细胞有毒性作用,故取咽拭标本或支气管肺泡灌洗液较好
⑤沙眼衣原体沙眼亚种可引起沙眼、包涵体结膜炎、非淋菌性尿道炎和性病淋巴肉芽肿。
⑥鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽感染,由感染该衣原体的鸟类等动物的粪便污染环境,以气溶胶形式传给人。(人畜共患病原体)
⑦感染感染性尿道综合征多由沙眼衣原体、单纯疱疹病毒或淋球菌引起。以尿频、尿急、尿痛,多次尿培养均为阴性为主要特点。
立克次体:
①是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物,结构与革兰阴性菌非常相似。立克次体血清学检查宜取三份血清标本(初入院、第2周和恢复期),滴定效价在1 : 160以上者为阳性,有4倍以上增长者则更具有诊断意义。形态以球杆状或杆状为主,革兰染色呈红色,吉姆萨染色呈紫色或蓝色。
②流行性斑疹伤寒的病原体为普氏立克次体,其传播媒介是人
虱 (人虱普式流行性)
③地方性斑疹伤寒的病原体为莫氏立克次体(又称斑疹伤寒立克次体),其传播媒介是鼠虱、鼠蚤
(虱蚤地方性)
④恙虫病的病原体为恙虫病立克次体,其传播媒介是恙螨 (患者腋窝黑色焦痂,加上外斐试验阳性,可确诊为恙虫病。)
⑤Q热的病原体为Q热柯克斯体,其传播媒介是蜱。(蜱Q)
⑥鸡胚是培养立克次体的极好宿主。
在鸡卵黄囊或细胞内培养的贝纳柯克斯体均可有芽胞形成,用芽胞染色法可着色,但不含吡啶二羧酸。贝纳柯克斯体有荚膜,约20nm厚, 呈绒毛状。
外斐反应 :
①Q热、立克次体痘及罗沙利马体感染为阴性外,其他为阳性结果。
②立克次体的脂多糖成分与变形杆菌菌体抗原有共同成分,可引起交叉反应。
根据这一原理,用变形杆菌0抗原代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应来检测抗体,可辅助诊断斑疹伤寒与恙虫病。
肥达试验可辅助诊断肠热症(伤寒和副伤寒)
外斐试验可辅助诊断某些立克次体病(斑疹伤寒、恙虫病)
抗“O”试验可辅助诊断风湿热
冷凝集试验可辅助诊断支原体肺炎。
罗沙利马体是巴通体属。
其他立充次体有:斑疹伤寒、斑点热、悉虫病和Q热立克次体,分离多用动物接种;
埃立克体细胞培养
噬菌体、病毒均无细胞结构,支原体、细菌L型均无细胞壁,衣原体有完整的细胞壁。
立克次体、衣原体及一些螺旋体需在活细胞中生存。支原体可以在无活细胞的培养基上生存。
以复制方式繁殖、只含有一种类型的核酸、无细胞壁、对抗生素不敏感均为病毒的特点。
细菌可在人工培养基中生长,而立克次体为专性细胞内寄生物。
能在人工培养基上生长、可形成芽孢为细菌的特点;可以独立生活,生活周期分两个阶段为衣原体的特点。
衣原体含两类核酸,有独特的发育周期,对多种抗生素敏感;
病毒只含一种类型的核酸,对抗生素不敏感,无核糖体,为非细胞型微生物。
只在专性活细胞内寄生为衣原体和病毒的共同特征。
有细胞壁和核糖体、有DNA和RNA两种核酸、二分裂繁殖、对抗生素敏感为立克次体与细菌的共同特征。
立克次体与病毒的共同点是严格细胞内寄生。
螺旋体与细菌的不同点为运动方式特殊