荧光分光光度计使用
荧光分光光度计使用操作注意事项 光度计操作规程
荧光分光光度计使用操作注意事项光度计操作规程荧光分光光度计也被称作（荧光光谱仪），是一款利用惰性气体氩气作载气，将气态氢化物和过量氢气与载气混合后，导入加热的原子装扮置。
原子荧光光谱分析法具有设备简单、灵敏度高、光谱干扰少、工作曲线线性范围宽、可以进行多元素测定等优点。
在地质、冶金、石油、生物医学、地球化学、材料和环境科学等各个领域内获得了广泛的应用。
作为一款专业测量分析物质的设备，为避开荧光光谱仪在使用过程中显现分析误差，需要注意以下几点：1.在打开荧光光谱仪的主机之前，需要调整其设备各性能数值，比如需要先开氩气钢瓶总阀并将出口压力调至规范区域内，否则会导致仪器欠压报警并对荧光光谱仪的正常工作造成影响。
2.需要安装需测的元素灯，再打开仪器，开启设备后等仪器自检结束，再检查看元素灯有没有亮，然后取下排风罩，将调光器放在原子化器上，旋转元素灯座的可调螺钉，调整元素灯光斑中心至对光器横线与竖线的交叉点，便完成对元素灯的安装调整。
3.在使用荧光光谱仪的过程中应保持试验室通风情形良好，并对废液桶进行适时处理，以保持废液排放正常。
4.在荧光光谱仪完成测试后，需要对其进行适时清理，避开因残留异物导致下次检测显现错误。
5.在对荧光光谱仪清洁完后，依照规定操作对各开关进行关闭，并进行相应的存放操作。
6.定期对荧光光谱仪进行检修保养，适时清洁荧光光谱仪中的异物，避开其对设备造成损坏。
由于资料有限，因而上述（荧光光谱仪）操作注意事项并不全面，在实际进行操作的过程中，建议咨询相关专业技术人员，并查阅相应使用说明书。
原子吸取分光光度计有效的样品处理技术原子吸取分光光度计样品要被吸喷雾化后才能被分析，为了使测量的结果有代表性，必需要保证样品均匀的分布在溶液中。
所以有很多样品必需要经过前处理才能拿来测定，而不同的样品有不同的前处理方法，同一样品也有多种的前处理方法，选择不同方法的依据就是便利快捷、同时又要尽量削减样品的用量，削减有效成分的流失。
紫外、荧光分光光度计说明
一、设备名称：RF-5301PC荧光分光光度计；二、使用原理1、荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。
荧光是光致发光，任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱，发射波长总是大于激发波长。
荧光激发光谱是通过测定荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱，反映不同波长激发光引起荧光的相对效率。
荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光，是荧光强度对发射波长的关系曲线，表示在所发射的荧光中各种波长相对强度。
由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长，可用它来鉴定荧光物质。
有些发荧光的物质其荧光强度与物质的浓度成正比，故可用荧光分光光度法测定其含量。
在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
利用某些物质受激发出的荧光，其光强度与该物质的含量成一定函数关系的性质而制成的。
三、组成结构光源、光件、样品池、检测器、数据处理器1、荧光分光光度计图RF5301PC荧光分光光度计主要是由激发光源、激发单色器、样品池、发射单色器、检测器以及数据处理系统几部分组成1. 光源：为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。
2．激发单色器：置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
3．发射单色器：置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。
筛选出特定的发射光谱。
4．样品室：通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。
测量液体时，光源与检测器成直角安排；测量固体时，光源与检测器成锐角安排。
F-380荧光分光光度计使用与维护保养标准操作规程
F-380荧光分光光度计使用细则（以维生素C检测为例）
步骤：
1. 电源：将电源插头分别插入插座
2.仪器权限：
2.1 打开电脑电源，从“CF-X”进入界面（“CF-X”代表设备编号）。
2.2 打开所用软件快捷键，
登录权限角色“实验员”用户“***”，进入工作站软件。
3.操作：
3.1设置方法：
3.1.1 点击上方-测量方法
3.1.2 通用-光度测定
3.1.3 定量：选择线性拟合
3.1.4 仪器：激发波长-350 nm；激发狭缝：5 nm
发射波长-430 nm；发射狭缝：2.5 nm
3.1.5 校准：输入所配标准曲线的浓度
3.1.6 标曲测量：标曲空白-采集背景
标曲样品-扫描-确定-继续以这种方式扫描-确定3.1.7 样品测量：样品空白-采集样品背景-确定
样品-确定
3.2数据保存：点击“文件”→“保存”按钮，可保存测量结果。
存储路径为：特医食品→成品→润能特殊医学用途配方食品→批号（20201201）→检项（维生素C）
3.3 数据打印：点击“文件”→“打印”按钮。
（选择合适的打印机进行打印）
3.4 关机：点击“文件”→“关机”，提示“是否确定终止联机？”，选择“是”，则关灯并退出
分析软件。
关灯后冷却5分钟，再关闭荧光分光光度计主机电源。
荧光分光光度计的操作流程
荧光分光光度计操作流程荧光分光光度计是一种用于测量物质荧光发射和吸收的仪器。
它通过激发样品中的分子发生电子跃迁，然后测量这些分子返回基态时所发射的荧光强度，从而确定样品中特定物质的含量。
以下是荧光分光光度计的操作流程步骤：步骤一：准备工作1.打开荧光分光光度计电源，并确保仪器正常启动。
2.检查仪器是否连接到电脑或其他数据采集设备，以便记录和保存实验数据。
3.清洁测量室并检查样品池是否干净，如果有杂质应先清洗。
步骤二：校准仪器1.进行荧光分光光度计的校准，以确保仪器测量结果的准确性和可靠性。
2.根据仪器使用说明书选择适当的参考物质（例如标准溶液）进行校准。
3.将参考物质放入样品池中，并在仪器上设置相应参数（例如激发波长、发射波长和积分时间）。
4.进行校准测量，并记录校准曲线。
步骤三：设置实验参数1.根据实验需要，确定激发波长和发射波长，并在仪器上进行设置。
2.设置积分时间，以确保荧光信号能够充分积累并获得准确的测量结果。
步骤四：样品处理1.准备样品溶液，并将其转移到荧光透明的样品池中。
2.确保样品池中无气泡或杂质，以避免对测量结果产生干扰。
3.根据实验需要，可以对样品进行稀释或前处理，以提高测量灵敏度和准确性。
步骤五：测量荧光信号1.将样品池放入仪器的样品室中，并关闭仪器的盖子以避免外界干扰。
2.启动荧光分光光度计并开始测量。
3.仪器会自动激发样品并记录返回的荧光信号。
4.测量完成后，仪器会显示荧光强度值或荧光曲线图。
步骤六：数据分析和处理1.将测量得到的荧光强度值或荧光曲线导出到电脑或其他数据处理软件中。
2.进行数据分析，例如计算样品中目标物质的浓度或比较不同样品之间的荧光强度差异。
3.根据实验需要，绘制荧光谱图、浓度曲线等图表以可视化展示结果。
步骤七：清洁仪器1.测量完成后，及时清洁样品池和仪器表面，避免样品残留对下次实验产生干扰。
2.关闭荧光分光光度计电源，并进行必要的维护和保养。
以上就是荧光分光光度计的操作流程步骤。
高等仪器分析实验-荧光分光光度计的使用
高等仪器分析实验(荧光分光光度计的使用)实验目的1．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步荧光光谱2．掌握荧光定量分析方法实验原理荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。
荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的测量。
从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。
从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。
荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。
只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。
与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很强，谱峰重叠现象比较普遍。
为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。
同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。
同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。
扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。
扫描未知样品的荧光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。
对比不同位置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。
再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。
扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。
否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。
仪器操作流程荧光分光光度计的操作指南
仪器操作流程荧光分光光度计的操作指南操作指南荧光分光光度计是一种用于测量样品的荧光光谱和荧光强度的仪器。
准确的操作流程能够确保测量结果的准确性和重现性。
本操作指南将介绍荧光分光光度计的基本操作流程，以帮助您正确地操作该仪器。
一、准备工作1. 检查仪器：确保仪器运行正常，灯泡、滤光片和样品池等部件是否齐全、完好，无破损或损坏。
2. 清理仪器：使用干净的软布轻轻擦拭仪器表面，以去除灰尘和污垢。
二、打开仪器1. 打开电源开关，待仪器运行稳定。
2. 检查仪器显示屏是否正常显示。
三、选择测试模式1. 根据实验需求，选择适当的测试模式：荧光光谱或荧光强度测量。
2. 使用仪器面板上的选择钮或相关命令设置仪器工作模式。
四、设置仪器参数1. 设置激发波长：根据需要，在仪器面板上或相关命令中设置激发波长。
2. 设置发射波长：根据需要，在仪器面板上或相关命令中设置发射波长。
3. 设置积分时间：根据样品的荧光强度，确定适当的积分时间。
4. 设置滤光片：根据实验需求，选择适当的滤光片。
5. 设置温度：如需要稳定的温度环境，设置合适的温度参数。
五、样品处理1. 准备样品：根据实验要求，制备需要测量的样品。
2. 使用无尘纸轻轻擦拭样品池，确保样品池表面干净无污垢。
3. 将样品注入样品池中，保持样品池盖密封。
六、开始测量1. 点击仪器面板上的开始测量按钮，或输入相关命令以开始测量。
2. 仪器将自动进行激发和发射光源的控制，同时记录测量数据。
七、数据处理1. 根据实验要求选择适当的数据处理方法。
2. 对荧光光谱测量结果进行波长校正、基线校正等处理操作。
3. 对荧光强度测量结果进行数据分析、结果计算等操作。
八、保存数据1. 将测得的数据保存至计算机或其他存储设备中。
2. 如需要，可以在仪器面板上导出数据以备将来使用。
九、关闭仪器1. 停止测量操作。
2. 关闭仪器电源开关。
操作荧光分光光度计需要仔细的步骤和耐心，确保操作准确无误，以获取可靠的测量结果。
荧光分光光度计操作规程
荧光分光光度计操作规程
一、开机
1、确保分光光度计与个人电脑是通过随机配带的USB数据线连接
2、将电脑打开，打开荧光分光光度计的电源开关。
3、检查表示氙灯是否被点着及仪器处于工作状态的批示灯是亮的。
4、双击桌面上荧光分析软件快捷图标。
5、等待程序初始化，系统将自检，如果出现错误提示，立即关闭荧光分光光度计，过15
分钟再重新启动。
二、关机
1、选择文件菜单里的“关闭”命令，点击“是”终止联机。
2、出现是否关机的图示，点击“是”关灯并退出荧光分析软件。
3、等氙灯充分冷却后再关荧光分光光度计。
三、操作
1、创建一个分析方法
从工具菜单中，选择配置命令来设置分析条件。
扫描类型选择波长扫描，根据标准再设定扫描模式、数据模式、发射波长、激发波长等参数。
2、测量样品
选择好测量方法后，进入波长测量界面，将样品入入指定的样品槽，点击菜单工具－扫描进行测量或点击扫描按钮进行测量，如果中途暂停测量，点击工具条上的停止按钮。
扫描完毕后，图谱处理窗口或打印窗口将会自动弹出。
峰值表将显示峰数、峰的起始位置、峰的终止位置、峰高值、谷位置、谷值、半峰宽等信息。
3、谱图处理
对样品和标准按照同样的方法进行处理，并对数据结果进行打印。
原子荧光分光光度计的使用与维护
原子荧光分光光度计的使用与维护
一、原子荧光分光光度计的使用
原子荧光分光光度计主要由激发光源（辐射源）、原子化系统、分光系统及 检测系统四部分组成。
原子荧光分光光度计的一般操作步骤包括以下几个： （1）开启计算机、打开分光光度计主机，运行操作软件。
（2）仪器进入初始化。
（3）进行仪器条件的设置。
（4）进行测定参数的设置。
（5）预热30min后，打开氩气，测量。
测量完成后，贮存文件或打印报告。
（6）运行仪器清洗程序。
关闭载气，放松泵管。
（7）测试完毕后，在系统指定的出口退出系统；先关闭分光光度计主机电 源，再关闭电脑，切断总电源。
（8）罩上仪器罩，打扫室内卫生，填写使用记录。
二、原子荧光分光光度计的使用日常维护
（1）实验室温度保持在15℃～30℃，湿度保持在45%～70%之间，最好是恒 温恒湿。
（2）所用试剂均应为优级纯，且需现用现配，不能过夜使用。
所用的水应 为严格意义上的重蒸水。
（3）在仪器测量前，一定要开启载气。
（4）一定要注意各泵管无泄漏，定期向泵管和压块间滴加硅油。
（5）实验时注意在气液分离器中不要有积液，以防溶液进入原子化器。
（6）测试结束后，一定要运行仪器清洗程序。
（7）更换元素灯时，一定要在主机电源关闭的情况下。
不得带电插拔元素 灯。
（8）元素灯预热必须是在进行测量时点灯的情况下才能达到预热稳定的作 用，只打开主机，元素灯虽然也亮，但起不到预热稳定的作用。
荧光分光光度计使用
一、开机先开启计算机，在开启F-7000主机电源，Xelamp和Run灯均显绿色。
二、主机自动初始化双击桌面荧光图标，主机自动初始化。
初始化结束后仪器预热15-20分钟。
三、测试步骤点击扫描界面右侧“method”选择模式：1）在“general”选项中的“measurement”选择二维(一般不用改)还是三维（3-D scan）2）在“instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数仪器参数：“Scan Mode”：Emission(发射)，Excitation(激发)，Synchronous（同步）。
扫描参数：EM WL设置发射波长，EX Start WL，EX End WL设置起始和终止波长，注意“Report”中的“Data Start/End”与“instrument”一致。
灯电压一般是400。
3）在“monitor”选项中设置纵坐标数值，便于读图。
四、扫描测试放入样品，盖上盖子，点击界面右侧“measure”，进行扫描例1、测A的室温荧光和同步荧光（215nm，260nm）（1）将吸收池洗净，加入BSA2.5ml，测空白BSA的发射荧光和同步荧光。
（2）不将吸收池拿出，再加入A储备液5μl，搅拌30s（均匀搅拌30次），之后静置2min30s再测量。
以此类推。
例2、测A的30℃的发射荧光（1）将恒温水浴锅加水升温，用胶皮管连接恒温水浴锅和荧光主机，并循环，整个测量过程在荧光主机中进行，维持温度不变，测量过程同上。
五、数据保存测试完之后，会在桌面左下角弹出一个框，将其最大化，点击工具栏的Data—report弹出一个新文件，点击文件—副本另存为，标好文件名并存到目标文件夹中即可。
最后u 盘拷数据时，注意u盘先格式化，避免病毒侵入电脑。
六、关机先关闭F-7000主机，之后关闭计算机。
原子荧光分光光度计操作规程
原子荧光分光光度计操作规程一、仪器准备1.打开仪器电源，检查所有仪器连接线是否牢固，确保仪器正常工作。
2.打开冷却系统，让冷却系统达到适当的温度，确保仪器正常工作。
3.准备标准样品和待测样品，并将它们放置在样品架上。
二、启动仪器1.打开软件，启动仪器。
2.进入仪器控制界面，选择合适的工作模式和参数设置。
3.等待仪器进行预热，直到其稳定工作。
三、进行背景校正1.在没有放置任何样品的情况下，进行背景校正。
2.打开背景校正程序，在预设的工作模式下进行背景校正。
3.完成背景校正后，保存数据并关闭背景校正程序。
四、测量标准样品1.选择标准样品，并将其放置在样品架上。
2.打开样品测量程序，在预设的工作模式下进行测量。
3.完成测量后，保存数据并关闭样品测量程序。
五、测量待测样品1.将待测样品置于样品架上。
2.打开待测样品测量程序，在预设的工作模式下进行测量。
3.完成测量后，保存数据并关闭待测样品测量程序。
六、数据处理1.将测得的各个样品的荧光信号进行处理。
2.根据标准样品和待测样品的荧光信号，计算出样品中金属元素的浓度。
3.将数据记录在实验数据记录表上。
七、清洁和维护1.关闭仪器电源，断开所有连接线。
2.清洁仪器的外表面，保持仪器整洁。
3.按照仪器的维护手册进行定期的维护工作，保证仪器的正常工作。
以上就是原子荧光分光光度计的操作规程，通过按照以上步骤进行操作，可以获得准确的测试结果，并确保仪器的正常工作和长期稳定性。
务必遵守操作规程，以提高实验准确性和仪器的使用寿命。
实验一 荧光分光光度计的使用
实验一 荧光分光光度计的使用一、实验目的1.通过实验强化对荧光分光光度法的理解。
2.了解荧光分光光度计的结构和使用方法。
二、实验原理荧光分析法适宜一定强度的激发光经第一单色器分光，选择最佳波长的光去激发液池内的荧光物质。
该物质发出的荧光可射向四面八方，但通过液池后的激发余光是沿直线传播的。
为了准确的进行荧光测定，检测器不能直接对准光源通常在液池的一边，与激发光成直角关系。
1. 荧光激发光谱：将激发荧光的光源用单色器分光，连续改变激发光波长，固定荧光发射波长，测定不同波长激发光下物质溶液发射的荧光强度)(F ，作λ-F 光谱图称激发光谱。
从激发光谱图上可找到发生荧光强度最强的激发波长ex λ，选用 ex λ可得到强度最大的荧光。
2.荧光发射光谱：选择ex λ作激发光源，用另一单色器将物质发射的荧光分光，记录每一波长下的 F ，作 λ-F 光谱图称为荧光发射光谱。
荧光发射光谱中荧光强度最强的波长为em λ。
ex λ与 em λ一般为定量分析中所选用的最灵敏的波长。
三、仪器与试剂1.仪器：Cary Eclipse 型荧光分光光度计2.试剂：核黄素试剂四、实验步骤1.试剂配制：取适量核黄素加水配置成溶液。
将溶液加入荧光比色皿，再将比色皿放入荧光分光光度计中。
2.测定（1）荧光发射光谱打开程序，单击set up，跳出一个窗口，单击Emission，则Excitation 固定，设为350nm。
再将扫描波长设定为400~600nm。
狭缝定为5，单击OK，等Start变绿灯时单击，仪器扫描出图，此为荧光发射光谱。
如下图。
（2）荧光激发光谱打开程序，单击set up，跳出一个窗口，单击Excitation，则Emission 固定，设为370nm。
再将扫描波长设定为200~500nm。
狭缝定为5，单击OK，等Start变绿灯时单击，仪器扫描出图，此为荧光激发光谱。
如下图。
五、注意事项1.荧光比色皿四面均透光，用手拿取时应拿棱边，避免碰到透光面。
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书
操作指南荧光分光光度计使用方法说明书一、简介荧光分光光度计是一种用于测量荧光物质的仪器，可用于快速、准确地分析和检测样品中的荧光强度。
本说明书将详细介绍荧光分光光度计的使用方法，以及操作步骤和注意事项。
二、仪器准备1. 根据实验需要，选择适当的荧光分光光度计，并确保其完好无损。
2. 将荧光分光光度计放置在平稳的台面上，并接通电源。
3. 检查仪器的各个部件是否干净，如有污物或尘埃应及时清理。
三、样品制备1. 根据实验要求，选择合适的样品进行测量。
2. 准备样品溶液，确保其浓度适中，以免超出荧光分光光度计的检测范围。
3. 将样品置于透明的石英或玻璃样品池中，并确保其表面光滑，无气泡和杂质。
四、仪器设置1. 打开荧光分光光度计，并启动相关软件。
2. 选择适当的检测波长范围，并设置荧光激发波长和荧光发射波长。
3. 对于荧光强度的测量，可以选择适当的增益和积分时间。
4. 确保荧光分光光度计的设置与所需测量结果一致。
五、测量操作1. 将样品池放置在仪器的样品舱中，并确保其固定。
2. 启动测量程序，等待荧光分光光度计自动调零，并进行基线校准。
3. 点击“开始测量”按钮，荧光分光光度计将开始对样品进行荧光强度的测量。
4. 在测量过程中，避免移动或震动荧光分光光度计，以免影响测量结果的准确性。
5. 测量完成后，保存并导出测量结果，同时进行数据分析和处理。
六、注意事项1. 使用荧光分光光度计时，应注意仪器的安全操作规范，避免误操作和事故发生。
2. 在进行测量前，确保仪器已经预热至稳定状态，并检查仪器的各项参数是否正常。
3. 使用前应按照仪器说明书正确安装和更换相关部件，确保仪器正常运行。
4. 在放置样品池时，要注意不要碰撞到仪器或其他物体，以免破坏样品池和仪器。
5. 维护仪器的干净卫生，避免污物或尘埃对测量结果的影响，定期清洁仪器的各个部件。
6. 使用后进行仪器的关机和断电操作，并妥善保管仪器和相关配件，以免损坏或丢失。
荧光分光光度计原理和使用方法
荧光分光光度计原理和使用方法
荧光分光光度计是一种用于分析荧光的仪器，它可以测量物质吸收荧光时产生的发光强度。
其基本原理是将样品在特定波长下激发，使其发生荧光，然后通过荧光的发射波长来确定样品的化学成分和浓度。
荧光分光光度计的使用方法如下：
1. 准备样品：准备好需要分析的样品溶液，并将其置于荧光分光光度计的样品池中。
2. 设置激发波长：根据样品的特性和需要分析的化学物质，选择适当的激发波长。
3. 设置荧光检测波长：根据需要分析的物质和荧光特性，选择适当的荧光检测波长。
4. 调整荧光分光光度计参数：根据荧光信号强度和需要分析的物质，调整荧光分光光度计的增益、滤波器等参数。
5. 测量荧光信号：启动荧光分光光度计，测量样品的荧光信号强度。
6. 分析荧光信号：根据荧光信号的强度和波长，分析样品的化学成分和浓度。
荧光分光光度计应用广泛，可以用于分析生物分子、环境污染物、食品添加剂等多种化学物质。
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荧光分光光度计操作步骤
荧光分光光度计操作步骤荧光分光光度计是一种用于分析化学荧光光谱的仪器。
它能够测量物质在特定激发波长下的荧光发射光谱，并可对荧光强度进行定量测量。
其操作步骤如下：一、仪器检查步骤1. 仪器打开：先将仪器上的电源打开。
打开久了需要30秒的时间，在此期间，显示界面上应该看到一行高亮的文字，“Warming up”，说明仪器正在升温，不要操作仪器，待升温结束后进行操作。
步骤2. 清洁：待升温结束后，检查仪器是否有灰尘，如有，应用精细纤维布将荧光分光光度计的探头进行清理。
步骤3. 稳固水平：检查仪器是否水平，如不水平，请调整仪器位置，确保仪器稳固水平。
二、準备工作步骤1. 真空：将样品、荧光探针、所用电极等全部准备妥当，在开始操作前，应首先开启荧光分光光度计上的真空泵，让仪器完全真空，否则将导致读数不太正。
步骤2. 取得标准曲线：按照实验的要求取得标准曲线。
标准曲线可以测定出样品浓度与荧光强度之间的关系，用于后续分析测量。
三、参数设置步骤1. 激发波长与发射波长：根据荧光产生物的性质，分别设置荧光激发波长和测量荧光发射波长。
这两个参数是荧光分光光度计测量荧光的关键参数之一。
步骤2. 光强度：设置荧光激发光强度与荧光发射光强度。
荧光分光光度计使用激发光束与测量光束。
光强度参数设置直接影响荧光测量的灵敏度。
若荧光发射信号偏低，需增加激发光束和测量光束的光强度，并重新调节参数。
四、样品检测步骤1. 加样：准备好测量的样品，按照实验操作要求将样品加入荧光探针中。
同时将电极接入到样品，以确保仪器能够顺利读取信号。
步骤2. 调节波长：根据实验要求测量荧光信号，依照实验操作步骤逐渐调节荧光分光光度计上的荧光探头的激发波长和发射波长。
逐渐改变荧光激发波长和荧光发射波长，寻找到荧光信号最大的点，并记录下相应的值。
步骤3. 进行测量：找到荧光信号最大的波长后，可以将荧光光度计上的样品罩盖，开始正式测量，记录下样品的荧光信号强度。
荧光分光光度计的操作技巧和样品准备要点
荧光分光光度计的操作技巧和样品准备要点一、引言荧光分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测定物质的荧光强度和荧光发射光谱。
操作技巧和样品准备是保证实验结果准确可靠的关键因素。
本文将介绍荧光分光光度计的操作技巧和样品准备要点，帮助读者更好地使用这一仪器进行实验研究。
二、荧光分光光度计的操作技巧1. 仪器预热和校准在进行荧光分光光度计实验之前，首先要对仪器进行预热和校准。
预热可以提高仪器的稳定性和准确性，一般需要预热15-30分钟。
校准可以确保仪器的参数设置正确，在操作中获得准确的结果。
2. 选择合适的荧光探针和波长范围根据实验要求和样品特性，选择适合的荧光探针和波长范围。
荧光探针的选择应考虑其发射波长、荧光强度和化学稳定性等因素。
波长范围的选择应根据荧光探针的特性及其在固体、液体或气体等不同相态的应用。
3. 确定光束直径和测量范围根据样品的尺寸和光束直径，确定合适的测量范围。
如果样品较小，应选择较小的光束直径，以避免测量误差。
如果样品较大，应选择适当的光束直径，以保证测量的准确性和灵敏度。
4. 调节荧光强度和增益在进行实验前，应先调节仪器的荧光强度和增益，使其适应样品的荧光强度范围。
荧光强度过高或过低都会影响结果的准确性，因此需要根据具体情况进行调整。
5. 控制样品浓度和体积在进行样品测量时，要控制样品的浓度和体积。
样品浓度过高会导致光谱发散或光强不稳定，影响结果的准确性。
同时，样品的体积也应控制在适当范围内，以确保测量结果的稳定性和重复性。
三、样品准备要点1. 样品的提纯和稳定在进行荧光分光光度计实验之前，需要对样品进行提纯和稳定处理。
提纯可以去除杂质和干扰物，确保测量结果的准确性。
稳定处理可以增强样品的稳定性，避免在实验过程中发生变化。
2. 选择合适的溶剂和pH值在溶解样品时，应选择合适的溶剂和pH值。
溶剂的选择应考虑样品的溶解度和荧光性质，以及实验所需的浓度和灵敏度。
pH值的调节可以影响样品的荧光强度和稳定性，应根据样品的特性进行合理的选择。
使用荧光分光光度计进行荧光测量的方法
使用荧光分光光度计进行荧光测量的方法荧光分光光度计是一种重要的光学仪器，在科学研究和实验室测试中被广泛应用。
它通过测量样品发出的荧光来确定样品的成分、结构和特性。
本文将介绍使用荧光分光光度计进行荧光测量的方法，包括光源选择、样品准备、测量条件调节和数据分析等方面。
首先要选择合适的光源。
荧光分光光度计通常使用氙灯、汞灯或激光等光源，这些光源具有较高的亮度和稳定性，能够提供足够的光功率。
在选择光源时，要考虑到样品的荧光强度和检测的灵敏度。
对于具有较强荧光的样品，可以选择较强的光源；而对于荧光较弱的样品，则需要选择较灵敏的光源。
其次是样品的准备。
样品的准备对于荧光测量结果的准确性和可重复性至关重要。
首先要将样品溶解或悬浮在适当的溶剂中，以确保样品的均匀性。
如果样品是固体物质，可以将其研磨成粉末或切割成薄片，以增加荧光的激发和发射效率。
对于生物样品或有机化合物，可以选择适当的染料或标记物来增强荧光信号。
此外，还需要注意避免样品受到光线和温度的影响，在测量前要进行光学调节和样品稳定化处理。
调节测量条件是使用荧光分光光度计进行荧光测量的关键步骤之一。
在测量之前，需要调节仪器的参数，以获得最佳的测量效果。
首先是选择适当的激发光波长。
激发光波长应与样品吸收光波长匹配，以充分激发样品中的荧光分子。
其次是选择适当的发射光波长。
发射光波长应与样品的荧光发射峰匹配，以提高测量信号的强度和稳定性。
此外，还需要调节激发光和发射光的强度和滤波器的选择，以降低背景噪声和增加信号噪比。
在完成测量后，需要对得到的数据进行分析。
荧光分光光度计可以提供样品的荧光强度、荧光发射光谱和荧光寿命等信息。
对于荧光强度的测量，可以根据荧光信号的大小来评估样品的含量或浓度。
某些样品具有特定的荧光光谱，可以通过对荧光发射光谱的分析来确定样品的成分和结构。
至于荧光寿命的测量，则可以研究样品的动力学过程和光物理特性。
这些数据的分析可以借助计算机软件或专门设备进行，以获得更准确和可靠的结果。
荧光分光光度计使用说明 光度计常见问题解决方法
荧光分光光度计使用说明光度计常见问题解决方法荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。
其能供应包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。
其能供应包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。
通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。
荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190～650nm，发射波长扫描范200～800nm。
可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。
荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。
荧光分光光度计使用说明：开机时，请先开氙灯电源，再开主机电源。
每次开机后请先确认一下一起两边排热风扇工作正常，以确保仪器正常工作，发觉风扇有故障，应停机检查。
主机工作时顶部排热器温度很高,切勿触摸,以免受伤.氙灯点亮后需确定时间稳定，故进行精密测试应在30分钟以上。
当氙灯未能触发，并连续发生“吱吱”高频声或“叭叭”打火声时，请立刻关掉氙灯电源，稍后数秒重新触发。
请尽量削减不必要的氙灯触发次数，避开氙灯在高压下反复触发。
封闭氙灯电源后，若要重新使用，请等待60秒以后重新触发。
运行未知浓度的样品测试时，灵敏度设置请从低位向高围（0—7）渐渐设置，当灵敏度较高时（>3），为了保护光电倍增管，请拥护勿将强光置进样品室内。
当（仅当）操纵者错误操纵或其他干扰引起微机错误时，应当立刻关断主机电源，重新启动，但无须关断氙灯电源。
单色器内用螺丝紧固处不得松动，光学器件和仪器运行环境需保护清洁。
清洁仪器外表时,请勿使用乙醇乙MI等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩.比色皿保持清洁。
荧光分光光度计使用注意事项
荧光分光光度计使用注意事项荧光分光光度计是一种用于测量物质的荧光强度的仪器，广泛应用于生物医学、环境科学和材料科学等领域。
正确使用荧光分光光度计对于获得准确可靠的实验结果至关重要。
本文将介绍荧光分光光度计的使用注意事项，以帮助读者正确使用该仪器并避免常见的操作失误。
使用荧光分光光度计前，应确保仪器处于正常工作状态。
检查仪器的电源是否连接稳定，仪器是否处于待机模式，以及仪器的各个部件是否完好。
如发现异常情况，应及时联系维修人员进行处理，以免影响实验的进行。
接下来，正确选择荧光分光光度计的波长范围。
荧光分光光度计通常具有可调节的波长范围，不同的荧光染料在不同的波长范围内发射荧光。
因此，在进行荧光测量时，应根据待测样品的荧光特性选择合适的波长范围，以确保获得准确的荧光强度值。
在样品测量之前，必须进行基线校正。
基线校正是为了消除仪器背景荧光的影响，以使实验结果更加准确。
通常，将不含待测物质的溶液作为空白对照组，进行基线校正。
在进行基线校正时，应确保空白溶液与待测样品使用相同的溶剂和容器，以消除由于溶剂和容器对荧光强度的影响。
在进行样品测量时，应注意调节荧光分光光度计的增益和积分时间。
增益和积分时间的选择会直接影响荧光信号的强度和稳定性。
一般来说，当荧光强度较高时，可以选择较低的增益和较短的积分时间，以避免信号过度饱和；而当荧光强度较低时，可以选择较高的增益和较长的积分时间，以提高信号的检测灵敏度。
在样品测量过程中，应注意避免光源的干扰。
荧光分光光度计通常使用激发光源来激发样品发射荧光，而光源的选择和设置会对测量结果产生影响。
在选用激发光源时，应选择适当的光强和波长，以确保能够充分激发待测样品的荧光发射。
同时，在设置光源时，应避免光源与样品之间的干扰，例如，光源的位置和角度应使得样品能够充分接收激发光，而不受到其他光源或反射光的影响。
荧光分光光度计的维护也是非常重要的。
在使用完毕后，应及时清洁仪器的各个部件，以防止样品残留对下一次实验的干扰。
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工作原理
荧光产生的原理
荧光的定义：某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的光。
荧光产生的原理：化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。
荧光化合物的两种特征光谱
1. 荧光激发光谱，就是通过测量荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱，它反映了不同波长激发光引起荧光的相对效率。
2. 荧光发射光谱，如使激发光的波长和强度保持不变，而让荧光物质所产生的荧光通过发射单色器后照射于检测器上，扫描发射单色器并检测各种波长下相应的荧光强度，然后通过记录仪记录荧光强度对发射波长的关系曲线，所得到的谱图称为荧光光谱。
物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。
当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。
荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，以及由于在液面附近溶液会吸收激发光，使发射光强度下降，导致发射光强度与浓度不成正比，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。
荧光发射的特点：可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能，发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。
溶液荧光光谱通常具有的特征：
(1) 斯托克斯位移：在溶液荧光光谱中，所观察到的荧光的波长总是大于激发光的波长。
(2) 荧光发射光谱的形状与激发波长无关。
(3) 荧光发射光谱的形成与吸收光谱的形状有镜像关系
荧光的猝灭：荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱甚至猝灭，这是由于激发态分子的电子不能回复到基态，所吸收的能量无法以荧光的形式发射。
一些化合物有天然的荧光猝灭作用而被用作猝灭剂，以消除不需用的荧光。
因此荧光物质的保存应注意避免光(特别是紫外光)的直接照射和与其他化合物的接触。
荧光效率：荧光分子不会将全部吸收的光能都转变成荧光，总或多或少地以其他形式释放。
荧光效率是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率，与发射荧光光量子的数值成正比。
荧光效率=发射荧光的光量分子数(荧光强度)/吸收光的光量子数(激发光强度)
发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。
各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱)，即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。
选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰波长，且测定光波量接近于最大发射光波峰时，得到的荧光强度也最大。
测量原理
稀溶液IF=2.303φFI0εc b,
其中，I0为激发光强度;If为荧光强度;
φf为荧光效率; b为液池厚度;
ε和c分别为发光物质的摩尔吸光系数和摩尔浓度。
技术指标：
波长扫描范围：220-900nm
波长精度：±1.5nm;
狭缝范围：0.15-20nm
信噪比：S/N比150以上(水拉曼峰测定，狭缝5nm)
最高扫描速度：5，500nm/min
操作规程
1. 开机
a. 确认所测试样液体或固体，选择相应的附件。
b. 先开启仪器主机电源，预热半小时后启动电脑程序RF-530XPC，仪器自检通过后，即可正常使用。
2. 测样
(1) spectrum模式
a. 在“Acquire Mode”中选择“Spectrum”模式。
·对于做荧光光谱的样品，“Configure”中“Parameters”的参数设置如下：
“Spectrum Type”中选择Emission;给定EX波长;给定EM的扫描范围(最大范围
220nm—900nm);设定扫描速度;扫描间隔;狭缝宽度，点击“OK”完成参数的设定。
·对于做激发光谱的样品，“Configure”中“Parameters”的参数设置如下：
“Spectrum Type”中选择Excitation;给定EM波长;给定EX的扫描范围(最大范围
220nm—900nm);设定扫描速度;扫描间隔;狭缝宽度，点击“OK”，完成参数的设定。
b. 在样品池中放入待测的溶液，点击“Start”，即可开始扫描。
c. 扫描结束后，系统提示保存文件。
可在“Presentation”中选择“Graf” “Radar” “Both Axes Ctrl+R”来调整显示结果范围;在“Manipulate” 中选择“Peak Pick”来标出峰位，最后在“Channel”中进行通道设定。
d. 述操作步骤对固体样品同样适用。
(2) Quantitative模式
a. 在“Acquire Mode”中选择“Quantitative”模式。
b. “Configure”中“Parameters”的参数设置如下：
Method 选择“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中选择“1st和“No” ;给定EX、EM波长;设定狭缝宽度，点击“OK”，完成参数的设定。
c. 在样品池中放入装有空白溶液的比色皿后执行“Auto Zero” 命令校零点。
d. 点击“Standard”模式，制作工作曲线。
e. 将样品池中的空白溶液换成一系列的已知浓度的样品标准溶液进行测量，执行“Read”命令，得到相应的荧光强度，系统根据测量值自动生成一条“荧光强度-浓度”曲线。
f. 在“Presentation” 中选择“Display Equation”，得到标准方程。
将此工作曲线“Save”为扩展名为“.std”的文件。
g. 工作曲线制备完毕，即可进入未知样的测量，选择进入“Unknown”模式，将样品池中的已知浓度标准溶液换成待测样品溶液，执行“Read”命令，即可得到相应的荧光强度和相应的浓度。
将此“Save”为扩展名为“.qnt”的文件。
(3) Time Course模式
a. 在“Acquire Mode”中选择“Time Course”模式。
b. “Configure”中“Parameters”的参数设置如下：
给定EX、EM波长;设定狭缝宽度;设定反应时间;读取速度;读取点数;
点击“OK”，完成参数的设定。
c. 在样品池中放入装有空白溶液的比色皿后执行“Auto Zero” 命令校零点。
d. 将样品池中的空白溶液换成待测溶液，点击“Start”，即可开始扫描。
扫描结束后，即可得到荧光强度对时间的工作曲线。
e. 将此工作曲线“Save”为扩展名为“.TMC”的文件。
3. 关机
退出软件后关毕主机。
注意事项
a. 请注意爱护液体比色皿，特别是测试有机样品的同学请在测量完毕后用有机溶剂清洗，干燥后再放入盒子中，否则会造成比色皿表面严重污染，影响透光度。
b. 固体样品池仅剩一个，测试完毕请物归原处。
测试完毕请注意登记，关闭仪器。
分子吸收、荧光、磷光辐射跃迁
无辐射跃迁——去活化过程
处于激发态分子不稳定，通过辐射或非辐射跃迁等去活化过程返回至基态。
这些过程包括：
1)振动弛豫
在液相或压力足够高的气相中，处于激发态的分子因碰撞将能量以热的形式传递给周围的分子，从而从高振动能层失活至低振动能层的过程，称为振动弛豫。
2)内转换
对于具有相同多重度的分子，若较高电子能级的低振动能层与较低电子能级的高振动能层相重叠时，则电子可在重叠的能层之间通过振动耦合产生无辐射跃迁，如S2-S1;T2-T1。
定性分析
任何荧光都具有两种特征光谱：激发光谱与发射光谱。
它们是荧光定性分析的基础。
1)激发光谱
改变激发波长，测量在最强荧光发射波长处的强度变化，以激发波长对荧光强度作图可得到激发光谱。
激发光谱形状与吸收光谱形状完全相似，经校正后二者完全相同!这是因为分子吸收光能的过程就是分子的激发过程。
激发光谱可用于鉴别荧光物质;在定量时，用于选择最适宜的激发波长。
2)发射光谱
发射光谱即荧光光谱。
一定波长和强度的激发波长辐照荧光物质，产生不同波长的强度的荧光，以荧光强度对其波长作图可得荧光发射光谱。
由于不同物质具不同的特征发射峰，因而使用荧光发射光谱可用于鉴别荧光物质。
使用荧光光度计检测荧光信号时，比色皿使用完毕要用有机溶剂清洗干净，防止比色皿污染导致测量值不准确，此外实验结束后，要将清洗好的比色皿干燥后再保存。