溶血性贫血实验室检查(2)

1.血浆游离血红蛋白 (plasma free hemoglobin,FHb)
破坏
Hb
血管内
血浆Hb
游离Hb 结合珠蛋白
参考值: <40mg/L
血管内溶血: PNH 蚕豆病
2.血清结合珠蛋白 (haptoglobin,Hp)
血清结合珠蛋白
(肝合成的a2-糖蛋白)
临床意义
结合
血管内FHb
运输
肝实质细胞清除
1. 抗人球蛋白试验 ( Coombs’ test) 【原理】红细胞的膜电位使两个红细胞间保持一定
距离。不完全抗体IgG分子较小，无法连接两个 邻近的红细胞而只能和一个红细胞抗原相结合。 用正常人血清免疫家兔，获得抗人球蛋白血清。 抗人球蛋白是完全抗体，可与多个红细胞表面不 完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集 现象，称为抗人球蛋白试验阳性。 直接抗人球蛋白试验：检测红细胞表面结合有不 完全抗体。 间接抗人球蛋白试验 ：检查血清中有无游离的不 完全抗体。
血管内有大量红细胞破坏，血浆中的游离血红蛋白 量超过1000mg/L时出现酱油色尿
【结果判定】阴性 【临床意义】溶血时阳性
6.血浆高铁血红素清蛋白试验 （methemalbumin test）
血浆中游离血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，接着分 解为高铁血红素，后者与白蛋白结合形成高铁血 红素白蛋白
【结果判定】阴性 【临床意义】见于各种原因所致的严重血管内溶血
2.红细胞孵育渗透脆性试验
【原理】 37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增 加，ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性 增高
【参考值】 未孵育 50%溶血4.0~4.45 g/L 孵育 50%溶血4.65~5.9 g/L
【意义】 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血
异常血红蛋白的检测
1.血红蛋白电泳 (hemoglobin electrophoresis) HbA2 增加, β-轻型地中海贫血 HbF 增加, β-重型地中海贫血
2.胎儿血红蛋白HbF测定(fetal hemoglBaidu Nhomakorabeabin test) 酸洗脱检查(acid elution test)
(五) 自身免疫性溶血的检验
溶血度<1%。
【临床意义】
1） 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 （G-6PD）缺乏症、 蚕 豆病溶血增加，加葡萄糖、ATP溶血部分纠正。
2）丙酮酸激酶缺乏症加葡萄糖不能纠正，加入ATP 能纠正。
（四）异常血红蛋白的检测
血红蛋白电泳检测 【参考值】正常成人电泳图谱显示4条区带，最多的
是HbA, 少量HbA2，再后为两条两更少的红细胞内 的非血红蛋白成分（NH1、NH2）。 【临床意义】有异常血红蛋白区带见于海洋性贫血、 异常血红蛋白病
开始溶血：0.42%～0.46%（4.2～4.6g/L）NaCL 完全溶血：0.28%～0.34%（2.8～3.4g/L）NaCL 【临床意义】
（1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症（开始 溶血5.2g/L，甚至在6.8g/L即开始溶血） （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫 血、缺铁性贫血
(二) 红细胞膜缺陷的检验
红细胞渗透脆性试验 红细胞孵育渗透脆性试验 自身溶血试验及纠正试验
1. 红细胞渗透脆性试验
【原理】是测定红细胞对不同浓度低渗氯化钠溶血 的抵抗能力。主要取决于红细胞表面积与体积之 比。 表面积大而体积小，对低渗盐水抵抗力大（即脆 性较小）。反之，抵抗力较小（即脆性较大）。 【参考值 】
（二） RBC内酶缺陷的检测
1.高铁血红蛋白还原试验 (methemoglobin reducing test)
2.变性珠蛋白小体生成 (Heinz body formation generation test)
3.G6PD荧光斑点试验和活性测定
【参考值】正常人轻微溶血，溶血度 <3.5%；加葡 萄糖、ATP溶血明显纠正，
◦ 见于DIC、机械性微血管病变、烧伤、输血、PNH
血管外溶血：RBC在单核-吞噬细胞系统吞噬或破坏
◦ AIHA，遗传性球形细胞增多症
一、溶血性贫血的筛查检测
（一）、溶血性贫血的筛查试 验
1. RBC寿命测定 51Cr同位素标记 参考值：25~32天 半衰期<15天，说明有溶血存在
溶血性贫血的筛选检查
肾脏
Hb尿
尿含铁血黄素
4.尿含铁血黄素试验 （Rous test）
肾小管上皮细胞吸收血红蛋白，代谢成含铁血黄素。 当细胞脱落至尿中，铁离子在酸化的低铁氰化钾 溶液中生成蓝色的 铁氰化铁，显微镜下尿沉渣可 有深蓝色物质出现，即为阳性。
【结果判定】阴性 【临床意义】见于慢性血管内溶血，如PNH
5. 血红蛋白尿测定（hemoglobinuria）
溶血性贫血 的实验室检查
溶血性贫血定义
各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加 速，骨髓代偿造血功能不足时所发生的一类贫血叫 溶血性贫血。
指骨髓代偿能力足以补偿红细胞的损耗而不出现贫 血时称溶血性疾患。
溶血性贫血的分类
按发病机制分类
1. RBC内在因素（遗传性/获得性）
RBC膜缺陷：遗传球、PNH RBC酶缺陷：G-6PD缺乏症 珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋
（三）红细胞内酶缺陷的检验
1. 自身溶血试验及纠正试验 【原理】细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
G-6PD、丙酮酸激酶），葡萄糖酵解障碍，不能 提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时， 不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减 少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。 在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物， 看溶血能否纠正。
白病
2. RBC外在因素（获得性）
免疫性溶贫: AIHA 、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相 关抗体
机械损伤性：DIC 、 TTP、人造瓣膜 感染：疟疾 物理因素：灼伤 毒素：蛇毒 脾亢: 单核巨噬细胞功能亢进
溶血性贫血的分类
按溶血发生部位分类（RBC破坏场所）
血管内溶血：RBC在血管内破坏
各种溶血(血管内和血管外) 都明显下降
【参考值】：0.7～1.5 g/L 【临床意义】： Hp减少，提示溶血存在，血管内溶血时显著减低 Hp增加，提示急慢性感染、恶性肿瘤、创伤、风湿性关节炎、SLE
等
3.尿含铁血黄素(Rous test)
PNH
(血管内溶血)
4. 血红蛋白尿
RBC
游离Hb
与结合珠蛋白结合