绕线虫培养条件的优化

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土壤食细菌线虫的分离和富集培养方法

土壤食细菌线虫的分离和富集培养方法

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工厂化循环水养殖设备中的线虫分离和昆虫饵料生产技术研究

工厂化循环水养殖设备中的线虫分离和昆虫饵料生产技术研究

工厂化循环水养殖设备中的线虫分离和昆虫饵料生产技术研究在工厂化的循环水养殖设备中,线虫分离和昆虫饵料生产技术是关键的环节。

线虫是养殖过程中的一种重要饵料资源,可以为养殖动物提供高蛋白、高营养的食物。

而昆虫饵料则具有良好的营养成分和生长特性,能够作为鱼类、鸟类等养殖动物的理想饲料。

线虫分离是工厂化循环水养殖设备中的一项关键技术。

线虫主要通过发育和繁殖,以及适应环境得以生存和繁衍。

在养殖循环水中,随着时间的推移,线虫的数量会逐渐增加,若不进行分离则会出现过度繁殖和过高密度的情况,从而导致养殖环境的不稳定和养殖效果的下降。

因此,线虫分离技术是必要的。

目前,常用的线虫分离技术主要有筛选法、诱杀法和离心法。

筛选法是通过筛网或滤网将线虫从养殖水中分离出来,适用于较大尺寸和活动能力较强的线虫。

诱杀法是通过添加诱杀剂,诱使线虫聚集在诱杀剂上,从而方便分离。

离心法是利用离心机的离心力将线虫从养殖水中分离出来,适用于较大尺寸和较重的线虫。

与线虫分离相比,昆虫饵料的生产技术相对复杂。

昆虫饵料的生产过程分为培养昆虫和收获昆虫两个阶段。

在培养昆虫阶段,需要提供适宜的生长环境包括温度、湿度、光照等条件,以及适量的饲料。

常用的昆虫饲料包括麦麸、酒糟、菜渣等,这些饲料能够为昆虫提供充足的营养,促进其良好生长。

在收获昆虫阶段,需要进行昆虫分离和粉碎等处理,以获得适合鱼类和鸟类等养殖动物食用的昆虫饵料。

昆虫饵料的生产技术目前主要有传统手工生产和自动化生产两种方式。

传统手工生产方式较为简单,但劳动强度大、效率低,且生产过程中易受环境因素和人为因素的影响,难以控制质量和数量。

自动化生产方式是近年来兴起的一种生产方法,它利用机械设备和自动化控制技术,实现了昆虫饵料的规模化生产和品质控制。

自动化设备包括昆虫孵化箱、喂食装置、温湿度控制装置、收获装置等,通过合理的系统设计和生产流程,实现昆虫饵料的高效、稳定和可控生产。

工厂化循环水养殖设备中的线虫分离和昆虫饵料生产技术的研究具有重要的意义。

线虫研究相关技术

线虫研究相关技术

(2)液浸渍法:各供试提取物以蒸馏水(含φ<2%的丙酮)配制成试验设置浓度的 溶液,取1.5 mL溶液加入24孔细胞板内,然后用胶头滴管加入供试松材线 虫50~100条,每孔作为1次重复,每处理4次重复,对照为蒸馏水(含φ<2% 的丙酮),置25℃培养箱处理24、48和72 h后,在光学显微镜(4×)下检查线 虫死亡数.以虫体发直、拨针拨动不活动的虫体放人清水24h后仍不能恢复 活动的确定为死亡状态,按下式计算校正死亡率。 (马伏宁 等,2009) 校正死亡率 = (处理组死亡率 − 对照组死亡率) (1 − 对照组死亡率) × 100%
相关文献: 马伏宁,万树青,刘序铭,赵凤. 黄皮种子中杀松材线虫成分分离及活性测定. 华南农业 大学学报.2009,30(1):23-26 刘晟,张敏,顾玲,等.22种中草药提取物杀根结线虫活性.农药,2009,48(8): 598-602 赵卫星,张楠,孙治强,高玉红.大豆荚壳杀根结线虫成分的分离及其对抗氧化酶活性的影 响. 天然产物研究与开发.2008,20:793-796 闫磊.种植物提取物对马铃薯茎线虫的活性与有效组分分离 . 山东农业大学拌器中根碎片同溶液一并倒入孔径为 75 μ m(200 目 )、 26pm(500目)组筛内,用自来水冲洗75μ m网筛上的根碎片,以便尽可能在 孔径26μ m网筛上回收线虫卵, 将孔径26μ m网筛内的线虫卵收集于烧杯中, 定容,并在体式显微镜(带有底光源)下计数。 2.杀线虫活性测定 (1)测定各萃取物对南方根结线虫的杀虫活性。方法如下:将各组分减压浓缩 后用少量丙酮(低于1%)溶解,滴加少量吐温-80(低于0.1%)乳化,加蒸馏水 配制成100μg/mg的药液,取1mL用J2悬浮液(100头线虫/mL)稀释2.5倍, 置于(28± 1)℃的培养箱内,分别于24、48 h后观察皿的存活情况,统计线虫 的存活数、死亡数,计算校正死亡率。以清水为对照,每个处理 3次重复, 线虫死亡记数标准参照文献,即线虫僵直不动的为死虫,呈弯曲蠕动状态 为活虫。 杀线虫活性的评价标准按Chandravadana等的方法进行。 (赵卫星 等, 2006)。 线虫校正死亡率 % = (处理线虫死亡率 − 对照线虫死亡率) (1 − 对照死亡线虫率) × 100

根结线虫活体染色条件的优化

根结线虫活体染色条件的优化

根结线虫活体染色条件的优化高英健;王绍辉;郑雨杭;张琴林;侯钰颖;李萌;李鸿信;方天一;吕伟兴;赵文超【摘要】[目的]为了提高根结线虫的成活率.[方法]以番茄和南方根结线虫为试验材料,对根结线虫二龄幼虫(J2)进行荧光标记,改进标记溶液浓度,进行染液浓度梯度和染色时间的筛选,确定最佳的染液浓度和染色时间,在保证线虫有效标记的前提下,不影响线虫的活力和致病性,深入了解线虫的行为.[结果]FITC:0.025 mg/mL、0.25%间苯二酚、15 mol/L章鱼胺盐酸盐缓冲液浓度下标记3h,线虫可以保持活力,入侵植株.[结论]该方法降低了染液浓度,缩短了染色时间,减少试剂用量,增加了线虫的存活率.【期刊名称】《北京农学院学报》【年(卷),期】2019(034)002【总页数】4页(P19-22)【关键词】异硫氰酸荧光素;间苯二酚;章鱼胺盐酸盐;根结线虫【作者】高英健;王绍辉;郑雨杭;张琴林;侯钰颖;李萌;李鸿信;方天一;吕伟兴;赵文超【作者单位】北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206;北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206【正文语种】中文【中图分类】S432根结线虫(Root-knot Nematode, RKN)是植物根系内寄生线虫,包括爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica),南方根结线虫(Meloidogyne incongnita),花生根结线虫(Meloidogyne hapla Chitwood)和北方根结线虫(Meloidogyne hapla)等,第二阶段幼虫(J2s)从土壤中的卵孵化,必须找到合适的宿主,机械穿透植物根部,并迁移到维管束组织以完成其生命周期,给生产带来很大的损失[1]。

昆虫病原线虫培养及应用

昆虫病原线虫培养及应用

昆虫病原线虫培养及应用
线虫是一类世界性的昆虫病原体,它们可以损害不同种类的植物,引起重大农业损失。

研究线虫病原体对防治昆虫病害具有重要意义。

线虫培养是研究线虫病原体的基础,也是这些病原体保护、利用的前提。

线虫培养是指在一定条件下培养线虫病原体,使其在实验室里获得良好的生存能力和繁殖能力。

线虫培养通常分为两步:初始培养和维持培养。

初始培养时,首先挑选适当的线虫病原株,将其放置在适宜的实验条件下,如温度、湿度、光照、营养成分等,使其能够得到良好的生长发育;维持培养就是维持上述实验条件,不断地更换营养液,以保证线虫病原体的正常表现。

线虫培养有一定的风险,包括病原体传播、环境污染等,所以应在实验室采取较严格的安全措施,确保病原体不会外溢。

此外,还要遵守实验室安全规定,按照明确的流程使用相关仪器设备,以确保实验过程的安全有效。

开展线虫培养,可以帮助人们更好地了解昆虫病原体,有助于防治昆虫病害。

但培养的线虫病原体并不总是能完全模拟野外的自然环境,因此,实验室培养的情况下,需要结合外源信号,如植物素、病原体调控因子等,使线虫病原体能够正常发挥其病原生理效应,实现病原精准控制。

总之,线虫培养是研究昆虫病原体的基础,在调查病原体的病原组成和野外流行状况的基础上,应用线虫培养技术,可以实现对病原体的有效控制,从而降低昆虫给农作物带来的损失。

一种番茄根结线虫人工培养和保存的优化方法

一种番茄根结线虫人工培养和保存的优化方法

一种番茄根结线虫人工培养和保存的优化方法作者:刘丽颜世翠姚良同丁延芹杜秉海来源:《山东农业科学》2012年第11期摘要:根结线虫病在世界范围内对粮食蔬菜水果产量影响严重,其人工培养具有依赖寄主植物的局限性。

从山东省泰安市房村镇的日光温室中采集被根结线虫侵染严重的番茄根系,用机械捣碎-过筛喷淋法从根系样品中分离根结线虫和卵,以牡丹根腐病镰刀菌(Fusarium solani)制作二重培养基,分别接种根结线虫悬液与卵悬液培养。

结果显示,接种线虫悬液与卵悬液的平板分别在第三周与第四周线虫密度达到最高峰,培养基中虫口密度分别为2 300头/ml与2 000头/ml。

置培养平板于15℃条件下存放,5个月后培养基内仍有可供继代繁殖的活虫体。

该优化后的方法脱离了寄主植物束缚,简化了培养过程,具有高效繁殖和长期保存根结线虫的优点。

关键词:根结线虫;人工培养;牡丹根腐病镰刀菌;优化方法中图分类号:S436.412.2+9 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2012)11-0117-04An Optimized Artificial Culture and Preservation Methodfor Tomato Root-knot NematodesLiu Li, Yan ShiCui, Yao LiangTong, Ding YanQin, Du BingHai*(College of Life Science, Shandong Agricultural University /Shandong Key Laboratory ofAgricultural Microbiology, Taian 271018, China)Abstract Root-knot nematodes seriously decreased the production of crops, fruits and vegetables worldwide, and its artificial culture relied heavily on host plants. In this study, the tomato roots infected by root-knot nematodes were adopted from greenhouse of Fangcun Town,Taian City, Shandong Province, and the root-knot nematodes and eggs were separated by the method of mechanical beating-sifting spray and inoculated to double medium of Fusarium solani. The density of root-knot nematodes was about 2 300 per mini liter medium when inoculated with root-knot nematodes for three weeks and about 2 000 when inoculated with eggs for four weeks. Live root-knot nematodes could still be obtained after 5 months, if the culture plate was preserved at 15℃. This optimized method was independent of host plants, processed more simply, could obtain large quantity of root-knot nematodes in short time and preserve for long time.Key words Root-knot nematode; Artificial culture; Fusarium solani; Optimized method根结线虫(Meloidogyne spp)是一类广泛分布在世界各地的植物根系定居性内寄生线虫[1]。

杀松材线虫细菌的分离、鉴定及其培养条件研究

杀松材线虫细菌的分离、鉴定及其培养条件研究

杀松材线虫细菌的分离、鉴定及其培养条件研究王方; 王林松; 马怡; 关腾腾; 张廷婷; 李荣贵【期刊名称】《《微生物学杂志》》【年(卷),期】2019(039)003【总页数】7页(P22-28)【关键词】松材线虫; 细菌; 杀线虫活性; 鉴定; 培养条件【作者】王方; 王林松; 马怡; 关腾腾; 张廷婷; 李荣贵【作者单位】青岛大学生命科学学院山东青岛266071【正文语种】中文【中图分类】Q939.96松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)是一种常见的松树寄生虫,通过松墨天牛等媒介昆虫传播,进而引发松材线虫病,也称松树萎蔫病(Pine wilt disease, PDA)[1]。

寄主主要包括黑松、赤松、马尾松等松属植物。

被松材线虫感染的松树,针叶呈黄褐色或红褐色,整株干枯死亡[2]。

松材线虫病在墨西哥、美国、加拿大、日本、韩国等国均有发生[3-4]。

1982年在我国南京市中山陵首次被发现,随后在山东、安徽、广东、浙江等地形成几个疾病中心,并向四周扩散,使这些省的局部地区发生并流行成灾,导致大批松树枯死,给安徽、浙江两省带来的经济损失高达5亿~7亿元[5]。

由于松材线虫的毁灭性危害,该虫已被列为对内、对外的重要检疫对象。

松萎蔫病的发生与松材线虫及其媒介昆虫都有十分紧密的联系。

因此,防治松材线虫对控制松萎蔫病起着非常重要的作用[6]。

目前,对松萎蔫病的防治主要采用化学防治法,即采用高效的化学杀虫剂,主要有氨基甲酸酯类(如杀线威、涕天威、克百威等)、有机磷酸酯类(如噻唑磷、灭线磷、克线威等),线虫容易对这些广谱性合成药物产生抗药性,并且这些杀虫剂多为高毒、剧毒或是高残留的农药,给人类、环境、微生物、水资源等造成严重污染,所以化学杀虫剂的应用受到了很大的限制[7-8]。

随着人们环保意识的提高,从自然界中寻找安全、高效、低毒、环境友好的新型生物杀虫剂已经成为研究热点。

微生物是生物资源的重要组成部分,是很多活性物质的天然宝库。

红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化

红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化

李美茹,杨烁烁,张洪琛,等.红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化[J].江苏农业科学,2020,48(17):191-194.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2020.17.038红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化李美茹,杨烁烁,张洪琛,张天悦,吴兴华,张会会(廊坊师范学院生命科学学院/河北省动物多样性重点实验室,河北廊坊065000) 摘要:以红线虫(Limnodrilushoffmeisteri)为材料,采用0.01mol/LEDTA-2Na的0.9%NaCl溶液为浸提液提取有抑菌活性的多肽,以料液比、时间、pH值对红线虫抗菌肽提取条件进行3因素3水平正交试验优化提取工艺,并对处理结果进行多重比较。

试验结果表明,红线虫抗菌肽对大肠杆菌没有抑菌效果,对金黄色葡萄球菌有一定抑制效果;影响浸提效果的主要因素为料液比,次要因素为浸提时间和pH值,提取的最优处理组合:料液比1g∶15mL,浸提时间8h,浸提液pH值为7.2。

关键词:红线虫;抗菌肽;抑菌效果;大肠杆菌;金黄色葡萄球菌 中图分类号:Q516;S188 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2020)17-0191-03收稿日期:2019-10-10基金项目:廊坊师范学院校级项目(编号:LSLY201404)。

作者简介:李美茹(1974—),女,河北秦皇岛人,硕士,副教授,从事多肽分离纯化研究。

E-mali:lmrdyx@163.com。

抗菌肽(antimicrobialpeptides)是许多生物自身合成的小分子碱性多肽[1],最早被诱导并纯化的抗菌肽是惜古比天蚕(Hyalophoraceropia)产生的昆虫抗菌肽———天蚕素[2],昆虫抗菌肽因其种类和品种繁多、分布广泛而被研究得最多[3]。

抗菌肽具有很多特性,如杀菌谱广、耐热[4-5],对真菌、细菌、病毒有抑杀作用,对病原虫以及异常增殖细胞有杀伤作用[6],不易产生耐药性,可以中和内毒素,不会导致脓毒症等特性[7]。

线虫培养和繁殖

线虫培养和繁殖

线虫生长培养基(Nematode Growth Medium,NGM)的配制1)称取蛋白胨(peptone)2.5g,琼脂20g,NaCl 3g,置于洁净2000mL玻璃三角瓶,加入蒸馏水975ml,120℃高压蒸汽灭菌30min,之后置于55℃水浴锅中冷却。

2)依次加入5mg/ml胆固醇(乙醇溶解,不灭菌)1ml,高压灭菌的1M MgSO4,1M CaCl2,1M KPO4缓冲液(pH6.0)各1ml,摇匀即可。

1M KPO4缓冲液的配置方法为:称取108.3g KH2PO4 和35.6g K2HPO4,溶于1000mL蒸馏水中,调节pH值到6.0即可。

1.3 倒板1)倒平板在无菌条件下进行,应保证倒入每个无菌培养皿(直径6cm)的培养基量基本一致,否则平板的厚薄相差太大将会影响观察。

也可以用移液器分装8-9ml到每一个培养皿中,保证每个平板厚度基本一致。

2)将倒好的平板在室温下放置1~2天,一方面可以检验是否有污染,一方面让水汽晾干,之后可倒置于4℃保存备用。

1.3 菌液测试菌液测试:因为OP50菌株是无抗性的,所以在大批量铺菌前需进行菌液测试的。

1)将扩增好的OP50菌液摇匀,用移液器吸取约20uL至NGM平板中,用三角玻棒推开,每瓶菌液测试4-6个平板。

2)将铺好的平板倒置,于37℃过夜培养。

整个过程严格无菌操作!3)如果确认无污染后,在超净台中将菌液分装到无菌离心管中,约15mL/管,4℃保存。

4)若测试板上长出大量杂菌(菌落突起,色泽亮丽),需重新摇菌。

1.4铺菌可以用两种方法给NGM平布铺菌:涂板法和滴板法。

涂板法:将菌液倒入无菌一次性培养皿(直径6cm)中,用三角玻棒蘸取菌液,铺在平板上,蘸一次铺一个。

铺10个培养皿,三角玻棒须蘸上酒精灼烧一次,防止污染培养皿里的母液。

注意三角玻棒不样碰到培养皿的内壁,整个过程无菌操作。

滴板法:准备高压灭菌后的无菌玻璃吸管,在酒精灯上来回移动灼烧后稍晾凉,从分装的菌液中直接吸取菌液,悬空滴在NGM平板的中央,可滴1-3滴,这种方法可以避免使用三角玻棒接触培养基,污染的概率比较小,缺点是这样得到的菌苔边缘非常厚。

次氯酸钠消毒剂对绕线虫的灭活动力学研究

次氯酸钠消毒剂对绕线虫的灭活动力学研究

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绕线虫培养条件的优化_邹联沛

绕线虫培养条件的优化_邹联沛

第16卷第5期2010年10月上海大学学报(自然科学版)JOURNALOFSHANGHAIUNIVERSITY(NATURALSCIENCE)Vol.16No.5Oct.2010doi:10.3969/j.issn.1007-2861.2010.05.021 收稿日期:2010-07-12基金项目:上海市科委世博专项基金资助项目(07DZ05804);水体污染控制与治理科技重大专项资助项目(2008ZX07421-004);上海市重点学科建设资助项目(S30109)通信作者:丁国际(1955~),男,教授,博士生导师,博士,研究方向为水污染控制、微生物学.E-mail:gjding@shu.edu.cn绕线虫培养条件的优化邹联沛1, 周文琪2, 张明德3, 蔡云龙3, 穆 莉1, 丁国际1(1.上海大学环境与化学工程学院,上海200444;2.上海城市水资源开发利用国家工程中心有限公司,上海200082;3.上海市自来水市南有限公司,上海200002)摘要:对分离自饮用水的绕线虫(Plectussp.)进行培养条件优化的研究.结果表明,温度和pH值对绕线虫的生长影响显著,光照对绕线虫的生长影响较小.采用生菜蛋黄(lettuceeggs,LE)培养基培养绕线虫时,最佳培养条件如下:温度25℃,pH=6和无光照.关键词:饮用水;绕线虫;光照中图分类号:X501 文献标志码:A 文章编号:1007-2861(2010)05-0553-04 OptimizingtheCultureConditionofPlectussp.ZOULian-pei1, ZHOUWen-qi1, ZHANGMing-de2, CAIYun-long2, MULi1, DINGGuo-ji1(1.SchoolofEnvironmentalandChemicalEngineering,ShanghaiUniversity,Shanghai200444,China;2.ShanghaiMunicipalWaterResourceDevelopmentandUtilizationNationalEngineeringCenterCo.,Ltd.,Shanghai200082,China;3.ShanghaiMunicipalWaterworksSouthCo.,Ltd.,Shanghai200002,China)Abstract:TheoptimalcultureconditionofPlectussp.separatedfromdrinkingwaterwasstudied.TheresultsshowedthattemperatureandpHhadsignificanteffectonthegrowthofPlectussp.,butilluminationconditionhadlesseffectonthegrowthofPlectussp.TheoptimalcultureconditionforPlectussp.was25℃,andpH=6,withoutilluminationwithlettuceeggs(LE)culturemedium.Keywords:drinkingwater;Plectussp.;illumination 近年来,饮用水中微型动物污染问题受到了高度关注,其中线虫由于其较高的检出率和抗氯消毒能力尤其受到关注[1].绕线虫(Plectussp.)是饮用水中检出率较高的一种线虫,其运动完全依靠纵向肌肉的伸缩来完成,具有很强的穿透性.绕线虫能够穿透饮用水常规处理工艺中的砂滤层,进入供水系统.此外,绕线虫体表光滑坚韧的角质层不仅能抵抗消毒剂带来的损伤,还能保护其体内的细菌免受消毒剂的影响[2-3].饮用水中的绕线虫不仅可能造成饮用水感官质量的下降,还给人体健康带来潜在的致病风险[4].以绕线虫为对象的灭活实验需要大量的实验对象,为此,本研究探讨了不同温度、pH值、光照等条件下绕线虫的生长特性,以期通过优化绕线虫的培养条 上海大学学报(自然科学版)第16卷 件,在较短时间内得到大量的绕线虫,以满足今后绕线虫灭活实验的需求.1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 绕线虫用孔径为50μm的尼龙过滤网过滤自来水,将滤网上的截留物用无菌水冲洗至60mm的培养皿中.在体视显微镜下,用移液枪将培养皿中的绕线虫移入另一个灭菌的60mm培养皿中,用无菌水洗去绕线虫表面带有的杂质.重复此步骤两次后得到实验所需绕线虫.绕线虫的形态学特征是口部有刚毛,具备完整的消化道,尾部末梢有明显的吐丝器(spinneret),吐丝器与绕线虫尾部的三个单细胞尾腺通过管道相连[5].1.1.2 生菜蛋黄(lettuceeggs,LE)培养基绕线虫的培养基为LE培养基[6].LE培养基的制作方法如下:称取30g(湿重)洗净的生菜,用榨汁机榨取生菜液.将鸡蛋煮熟,称取蛋黄15g,加无菌水捣碎.将蛋黄液与生菜液混匀,用蒸馏水定容至1L后加热沸腾30min,冷却至室温后将pH值调至7.配制好的培养基经灭菌处理30min后,放入冰箱中保存.使用前,用功率为800W的超声波处理20min.1.2 培养方法在直径为60mm的培养皿中加入培养基和绕线虫后,将培养皿置于恒温培养箱中培养绕线虫.每天定时在体视显微镜下观察培养皿中绕线虫的生长情况和数量变化.每3d补充30μL培养基和适量无菌水,以确保绕线虫的正常生长.1.3 计算方法用比生长速率常数μ评价绕线虫的生长特性[7].μ=(lnNt-lnN0)/Δt,其中N0和Nt分别表示指数生长期开始时和结束时绕线虫的种群密度,Δt表示指数生长期的时间.μ值越大,表明生长的速度越快.2 结果与讨论2.1 温度对绕线虫生长的影响当pH=7时,不同温度条件下绕线虫的种群密度变化如图1所示.当温度为20和25℃时,绕线虫的种群密度增长较快;15和30℃时,绕线虫种群密度的增长趋势比较平缓;35℃时,绕线虫种群密度维持在初始水平.可见,温度对绕线虫的生长影响很大.适宜绕线虫生长的温度范围约在20~25℃之间,最佳温度为25℃.有研究表明,高温对绕线虫生长的抑制作用明显[6],类似的结论在有关温度对轮虫生长特性影响的研究中也有所体现[8-9].图1 不同温度条件下绕线虫种群生长状况Fig.1 ChangeofpopulationdensityofPlectussp.culturedunderdifferenttemperatures 不同温度条件下绕线虫比生长速率常数的变化如图2所示.在20和25℃条件下,绕线虫在对数增长期的生长速度相对较快,比生长速率分别为0.266和0.367d-1.在15和30℃条件下,绕线虫的生长速率相对较慢,分别为0.130和0.120d-1.对各温度条件下比生长速率常数进行相关性分析,结果显示,温度对绕线虫种群增长存在显著影响(P< 0.05).此外,对不同温度条件下比生长速率常数进行多项式拟合,得到的曲线如图2所示.绕线虫比生长速率常数值(Y,d-1)与温度(X,℃)之间的关系为Y=-1.0378+0.1151X-0.0025X2,P<0.01.图2 不同温度条件下绕线虫的比增长速率常数Fig.2 SpecificgrowthrateofPlectussp.culturedatdifferenttemperatures·554· 第5期邹联沛,等:绕线虫培养条件的优化2.2 pH值对绕线虫生长的影响通过考察温度为20℃时,不同pH值对绕线虫种群密度的影响可知,pH值也是影响绕线虫生长的重要因素(见图3).当pH值为8和9时,绕线虫增长缓慢.在偏酸性条件下,即pH值为5和6时,绕线虫生长速度最快.当pH值为8和9时,培养进行到第15d时,绕线虫种群密度分别为3.7和1.8N/mL;而当pH=6,培养进行到第15d时,绕线虫种群密度达到最高的13.9N/mL.由此可知,绕线虫在中性和偏酸性条件下生长较好,在其他pH值条件下,绕线虫的生长明显受到抑制.图3 不同pH值条件下绕线虫种群生长状况Fig.3 ChangeofpopulationdensityofPlectussp.culturedatdifferentpHvalues 图4为通过计算得到的不同pH值条件下绕线虫的比生长速率常数.当pH值为5,6和7时,绕线虫在对数生长期的生长速度相对较快,比生长速率分别为0.430,0.475和0.440d-1.当pH值为8和9时,绕线虫的比生长速率明显变慢,分别为0.305和0.257d-1.丁国际等[6]的研究结果同样表明,当pH=6时,绕线虫的比生长速率最大;当pH>7时,绕线虫生长缓慢.由此可见,绕线虫在中性和偏酸性条件下生长较好;在偏碱性条件下,绕线虫的生长明显受到抑制.对各pH值条件下比生长速率进行相关性分析可以发现,pH值对绕线虫种群生长存在显著影响(P<0.01).对不同pH值条件下比生长速率进行多项式拟合,结果如图4所示.拟合得到的绕线虫比生长速率常数值(Y,d-1)与pH值(X)之间的关系式为Y=-0.3522+0.2723X-0.0230X2,P<0.05.2.3 光照对绕线虫生长的影响图5为不同光照条件下绕线虫的种群生长情况.由图可知,无光照时绕线虫的生长最好,种群密度可达24.8N/mL;半天光照时绕线虫的最高种群密度接近无光照,但比全天光照时有所提高.图4 不同pH值条件下绕线虫的比生长速率常数Fig.4 SpecificgrowthrateofPlectussp.atdifferentpHvalue图5 不同光照条件下绕线虫种群生长情况Fig.5 ChangeofpopulationdensityofPlectussp.withtheculturetimeunderdifferentilluminationcondition 图6为通过计算得到的不同光照条件下绕线虫的比生长速率常数.可以看出,绕线虫的比生长速率从大到小依次为无光照>半天光照>全天光照.在无光照条件或半天光照条件下,绕线虫的生命活动较为活跃;而在全天光照条件下,绕线虫的生长速度有所下降.对不同光照条件下比生长速率常数进行相关性分析,结果表明,比生长速率之间无显著差异(P>0.05).因此,光照条件对绕线虫生长的影响不大.3 结 论(1)当温度为25℃时,绕线虫生长速度最快,其比生长速率常数达到0.367d-1;温度低于15℃·555· 上海大学学报(自然科学版)第16卷图6 不同光照条件下绕线虫的比生长速率常数Fig.6 SpecificgrowthrateofPlectussp.underdifferentilluminationcondition或高于30℃均不利于绕线虫的生长繁殖.(2)绕线虫在中性和偏酸性条件下生长较好.在偏碱性条件下,绕线虫的生长明显受到抑制.(3)无光照条件下绕线虫的生长速度接近半天光照条件,略高于全天光照条件,因此,光照条件对绕线虫的生长影响不大.参考文献:[1] LOCASA,BARBEAUB,GAUTHIERV.Nematodesasasourceoftotalcoliformsinadistributionsystem[J].CanadianJournalofMicrobiology,2007,53(5):580-585.[2] CHANGSL,BERGG,CLARKENA,etal.Survivalandprotectionagainstchlorinationofhumanenteric pathogensinfree-livingnematodesisolatedfromwatersupplies[J].AmericanJournalofTropicalMedicineandHygiene,1960,9(2):136-143.[3] BICHAIF,PAYMENTP,BARBEAUB.Protectionofwaterbornepathogensbyhigherorganismsindrinkingwater:areview[J].CanadianJournalofMicrobiology,2008,54(7):509-524.[4] WHO.Guidelinesfordrinking-waterquality[M].3rded.Geneva:WorldHealthOrganization,2008:212-213.[5] THORPJH,COVICHAP.EcologyandclassificationofNorthAmericanfreshwaterinvertebrates[M].2nded.NewYork:AcademicPress,2001:255-295.[6] 丁国際,徐開欽,稲森悠平,等.水道水から分離された線虫類の殖特性[J].水環境学会誌,1996,19(8):629-636.[7] 宋健,林建群,金燕,等.以比生长速率时间曲线为基础的生物群体生长数学模型[J].微生物学通报,2007,34(5):836-838.[8] 虞蔚岩.影响培养轮虫的因素及对策[J].生物学通报,2002,37(8):8-10.[9] AWAISSA,KESTEMONTP.AninvestigationintothemassproductionofthefreshwaterrotiferBrachionuscalyciflorusPallas.2.influenceoftemperatureonthepopulationdynamics[J].Aquaculture,2002,105(3/4):337-344.[10] 耿红,席贻龙,胡好远.食物种类和浓度对红臂尾轮虫种群增长、个体大小及卵大小的影响[J].应用生态学报,2003,14(5):753-756.(编辑:刘志强)·556·。

昆虫病原线虫大量培养技术研究

昆虫病原线虫大量培养技术研究

昆虫病原线虫大量培养技术研究田会鹏;梁洪柱;李学燕;陈倩;宁少华;侯峥嵘【摘要】为实现昆虫病原线虫的大量繁殖,在三角瓶培养的基础上,使用自行设计制造的不锈钢培养盒进行线虫的固体培养.结果显示:培养盒最佳培养物装量为1000g/盒,是500 mL三角瓶装量的12.5倍,最佳培养时间18 d,线虫侵染力与三角瓶培养无显著性差异,并且提高了线虫培养量,降低了人工成本.【期刊名称】《中国森林病虫》【年(卷),期】2013(032)002【总页数】3页(P12-13,21)【关键词】昆虫病原线虫;培养容器;固体培养;大量培养【作者】田会鹏;梁洪柱;李学燕;陈倩;宁少华;侯峥嵘【作者单位】北京市西山试验林场,北京100093;北京市西山试验林场,北京100093;北京市西山试验林场,北京100093;北京市西山试验林场,北京100093;北京市西山试验林场,北京100093;北京市西山试验林场,北京100093【正文语种】中文【中图分类】Q959.17昆虫病原线虫寄主范围广,具有主动搜索能力、高杀虫力,对人畜、环境安全,能够人工大量培养等优点,是害虫生物防治中很有潜力的类群[1-3]。

因此,用昆虫病原线虫防治农林及牧草害虫受到国内外学者及生产厂家的广泛重视[4-5]。

目前,美国、德国、澳大利亚、荷兰、加拿大等国家的数十家商业化公司均可提供生产上应用的昆虫病原线虫[6]。

在昆虫病原线虫生防产品的生产中,线虫的大量繁殖是制约其商品化的瓶颈之一,由于昆虫病原线虫三角瓶培养过程繁琐、占用空间大、产量小等原因导致生产成本过高,在市场上无法与价格相对低廉的化学农药竞争[7-8]。

本研究设计制造了昆虫病原线虫不锈钢培养盒,试图通过增加装量来提高线虫产量,降低生产成本。

1 材料与方法1.1 材料线虫Steinernema carpocapsae A24和其共生菌Xenorhabdus nematophila。

培养容器为不锈钢培养盒,35 cm×25 cm×20 cm,侧面靠上部开突出圆口,可用纱布封口,以满足培养过程产生的CO2、氨等不良气体的排出。

土壤线虫的室内扩培方法研究及条件优化

土壤线虫的室内扩培方法研究及条件优化

土壤线虫的室内扩培方法研究及条件优化李阳;贾美清;黄静;汪钱英;刘成宝;许帅;张国刚【期刊名称】《天津师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2016(036)001【摘要】为了寻求一种高效、快速的土壤线虫培养方法,在人工气候箱中分别以无菌水、土壤浸出液和生菜蛋黄(LE)为基质培养土壤线虫,分析基质对土壤线虫增殖的影响,并且对培养基浓度、培养基稀释方式、线虫初始接种密度、线虫培养空间等4种培养条件进行优化.研究结果表明:(1)在20d的培养周期内,土壤线虫在生菜蛋黄培养基中增殖成功;(2)以无菌水稀释、体积分数为25%的生菜蛋黄培养基中土壤线虫的休眠时间最短、增殖速率最大;(3)土壤线虫的初始接种密度为5条/mL时,培养效果最好;(4)培养空间对土壤线虫的增殖没有显著影响.【总页数】5页(P57-61)【作者】李阳;贾美清;黄静;汪钱英;刘成宝;许帅;张国刚【作者单位】天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市水资源与水环境重点实验室,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学生命科学学院,天津300387【正文语种】中文【中图分类】Q142.3【相关文献】1.莼菜深层基质、深水、种茎扦插池培快速扩繁方法研究 [J], 种法岭;张静;曲肖华2.啤酒酵母扩培过程中无菌条件的保证措施 [J], 解思松3.响应面法优化窖泥中一株产酯酵母的扩培条件 [J], 刘梅;黄治国;卫春会;邓杰;谢军4.杭锦旗地区X区块盒一段孔隙度在严重扩径和非严重扩径条件下的校正方法研究[J], 刘锋;杨斌;张鹏;张智南5.多肋藻雌配子体种质保存和扩培的温光条件研究 [J], 赛珊;赵楠;罗世菊;王伟伟;武瑞娜;李晓捷因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立和优化

广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立和优化

广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立和优化宋增梅;黄慧聪;潘长旺【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2012(028)005【摘要】目的优化双向凝胶电泳的条件,建立适合广州管圆线虫Ⅴ期幼虫的最适二维电泳模型.方法经研磨、反复冻融提取广州管圆线虫Ⅴ期幼虫蛋白质,测定其浓度后分别用pH3~10和pH4~7的固相胶条进行双向凝胶电泳,同时对双向电泳的条件进行调节和优化,银染后进行凝胶图像比较.结果采用pH3~10的胶条分离蛋白时,蛋白质点分布较集中,各蛋白点间间距较小;pH4~7的胶条分辨率较高,蛋白分布均一,获得719个蛋白点,各蛋白点间距相对较大,避免了高丰度掩盖低丰度蛋白点,在相同的pH范围内,检测到的蛋白点更多,灵敏度更高.结论建立和优化适合广州管圆线虫的二维电泳模型,其重复性好、分辨率高,为广州管圆线虫的蛋白质组学研究奠定了基础.%To establish and optimize two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) models for proteomic analysis of A. Canionensis larvaeV > the protein of larvae V of A. Canionensis was extracted by grinding and repeated freezing and thawing, then 2-DE was carried out respectively with the strip of pH3-10 and pH4-7 after measuring the concentration. The gel electrophoresis image was compared after silver staining. The results indicated that the protein spots were more concentrated, and the space among spots were smaller with IPG strip of pH3-10. Then we obtained high-resolute, uniform distributed protein spots,719 protein spots with IPG strip of pH4-7, and the space among spots were relatively large, avoiding to protein spots of high a-bundance cover the low abundance, it has higher sensitivity. As a result, establishment and optimization of 2-DE models for A. Canionensis was successfully conducted, and 2-DE gel with high resolution was obtained, which might provide foundation for the proteomic analysis of A. Canionensis.【总页数】4页(P445-448)【作者】宋增梅;黄慧聪;潘长旺【作者单位】温州医学院基础医学院寄生虫教研室,温州,325035;温州医学院基础医学院寄生虫教研室,温州,325035;温州医学院基础医学院寄生虫教研室,温州,325035【正文语种】中文【中图分类】R373【相关文献】1.国人胃癌蛋白质组分析中双向凝胶电泳技术建立及优化 [J], 赵吉生;房学东;冯也2.人玻璃体蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立及优化 [J], 张雯;张学东3.胃粘膜组织蛋白质组双向凝胶电泳技术的初步建立与优化 [J], 李新华;张万岱;王波涛;肖冰;张振书4.结肠黏膜组织蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立与优化 [J], 彭丽华;杨云生;孙刚;王巍峰5.建立并优化胃溃疡复发大鼠蛋白质组分析的双向凝胶电泳技术 [J], 申定珠;李家邦;蒋荣鑫;凌江红;叶川;叶仁群;郭全;张宗棨因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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绕 线 虫培 养条 件 的优 化
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肌 肉的伸 缩来 完成 , 具有 很 强 的穿 透 性 . 绕线 虫 能 够 穿透 饮用 水常 规 处 理 工 艺 中 的砂 滤 层 , 入供 水 系 进
饮 用水 中的绕线 虫不 仅可 能造 成 饮用 水感 官 质 量 的下 降 , 给人 体健 康带 来潜 在 的致病 风 险 J 以 还 . 绕线 虫 为对 象 的灭 活实 验 需要 大 量 的 实验 对 象 , 为
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( .Sho o E v o m n l n hmi l nier g S aga U ie i , h nhi 04 4 hn ; 1 col f n i n et dC e c gne n , h nhi n r t S aga 2 0 4 ,C ia r aa aE i v sy
摘要: 对分离 自饮用水的绕线虫 ( l t p ) Pe u s. 进行培养条件优化 的研究. cs 结果表明 , 温度 和 p H值对 绕线 虫的生长影 响显著 , 光照对绕线虫 的生长影响较小. 采用生菜蛋黄 (e ueeg ,E) 1tc gsL 培养基培 养绕线 虫时 , t 最佳 培养条 件如下 :
温度 2 5℃ ,H = p 6和 无 光 照 . 关 键 词 : 用 水 ; 线 虫 ; 照 饮 绕 光 中 图分 类 号 : 0 X5 1 文 献 标 志码 : A 文 章 编 号 : 0 726 ( 00 0 - 5 -4 10 —8 12 1 ) 50 3 5 0
O p i ii g t e Culur n iin fPlcu p. tm zn h t e Co d to o e t s s
近年来 , 用 水 中微 型动 物 污 染 问题 受 到 了高 饮
消毒 剂带来 的损 伤 , 能 保 护其 体 内 的 细菌 免 受 消 还 毒剂 的影 响 。.
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第 l 6卷 第 5期
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