实验四--血涂片的制备与染色
实验报告 血涂片的制备
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液细胞的形态和数量。
通过制备血涂片，我们可以了解疾病的诊断和治疗过程中的重要信息。
本实验报告将介绍血涂片的制备过程和相关技术。
一、材料与设备：1. 血液样本：采集自健康人士或实验动物。
2. 血涂片玻片：具有一定的光学透明度和平整度。
3. 血涂片刮板：用于制备血涂片的工具。
4. 血涂片染色剂：如吉姆萨染色剂。
二、实验步骤：1. 准备工作：清洁实验台面，并确保材料和设备的无菌状态。
2. 血液采集：使用无菌针头采集血液样本，将血液缓慢抽入无菌注射器中。
3. 制备血涂片：a. 取一片无菌血涂片玻片，用无菌棉球蘸取适量的酒精擦拭玻片表面，使其干燥。
b. 用无菌血涂片刮板，将血液样本滴于血涂片玻片的一端。
c. 快速而均匀地将刮板从滴液处向另一端刮过，使血液在玻片上均匀分布。
d. 在刮板刮过的血液上方，迅速将另一片无菌玻片平放在上方，使血液与玻片接触。
e. 缓慢而均匀地将上方的玻片向下滑动，使血液在两片玻片之间形成薄膜。
f. 将制备好的血涂片放置在通风干燥的地方，待其完全干燥。
三、血涂片染色：1. 准备工作：将吉姆萨染色剂按照说明书的要求稀释至适当浓度。
2. 染色过程：a. 将制备好的血涂片放入染色盒中，使其与染色剂接触。
b. 根据需要，将血涂片浸泡在染色剂中的时间可调整为几分钟至几十分钟。
c. 取出血涂片，用清水轻轻冲洗，直至水清。
d. 将血涂片放置在通风处晾干。
四、结果与讨论：通过制备和染色的血涂片，我们可以观察到不同类型的血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
通过观察它们的数量、形状和结构，我们可以判断出是否存在异常情况，如贫血、感染或血液疾病等。
血涂片的制备和染色技术在临床诊断和科学研究中具有广泛的应用。
结论：通过本实验报告，我们了解了血涂片的制备过程和相关技术。
制备血涂片的步骤包括血液采集、血涂片制备和血涂片染色。
血涂片制备实验报告
血涂片制备实验报告血涂片制备实验报告引言：血涂片制备是一项重要的实验技术，通常用于临床血液学检查和疾病诊断。
本实验旨在探究血涂片制备的步骤和技巧，以及其在血液学研究中的应用。
一、材料和方法1. 实验材料：- 血液样本：采用新鲜的全血样本。
- 血液薄片：玻片、刮刀、洗净的无菌玻璃片。
- 染色剂：Wright染色液、甲醇、乙醇。
- 实验仪器：显微镜、离心机。
2. 实验步骤：- 步骤一：准备血液样本。
使用无菌针头采集新鲜全血样本，将其转移到干净的离心管中。
- 步骤二：制备血涂片。
取一块洗净的玻璃片，将其倾斜放置于离心管中的血液样本上，使血液与玻璃片接触，形成一条薄而均匀的血涂片。
- 步骤三：干燥血涂片。
将制备好的血涂片放置于通风处，使其自然干燥。
- 步骤四：固定血涂片。
将干燥的血涂片浸入甲醇中，使其固定。
- 步骤五：染色血涂片。
将固定的血涂片浸入Wright染色液中，保持一定时间，使细胞染色。
- 步骤六：洗净血涂片。
将染色后的血涂片放入乙醇中，轻轻摇晃，将多余的染色剂洗净。
- 步骤七：干燥血涂片。
将洗净的血涂片放置于通风处，使其自然干燥。
- 步骤八：观察血涂片。
将干燥的血涂片放置于显微镜下，调节倍率和焦距，观察细胞形态和结构。
二、结果与讨论通过血涂片制备实验，我们成功制备了一张血涂片，并进行了染色和观察。
观察结果显示，血涂片中可见红细胞、白细胞和血小板等细胞成分。
红细胞呈圆形或椭圆形，中间凹陷，具有较大的体积；白细胞则呈现不同的形态和大小，包括淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等；而血小板则呈现为小而不规则的颗粒状结构。
血涂片制备的关键在于制备过程中的技巧和细节注意。
首先，采集血液样本时应使用无菌针头，以避免污染。
其次，在制备血涂片时，要保持玻璃片与血液的均匀接触，避免形成过厚或过薄的血涂片。
此外，干燥和固定过程中的时间和条件也会对血涂片的质量产生影响。
过长或过短的干燥时间都会导致血涂片的异常，而固定过程中甲醇的使用量和浸泡时间也要控制适当。
血涂片的制备与染色实验报告
血涂片的制备与染色实验报告血涂片的制备与染色实验报告简介本报告旨在介绍血涂片的制备与染色实验方法及步骤，以及相关注意事项和结果分析。
实验步骤1.准备所需材料：–血液样本–血涂片载玻片–血液涂片器–双氧水–细胞染色剂–拖尾液–显微镜片2.制备血涂片：–取一滴血液样本，滴于载玻片中。
–使用血涂片器，将血液涂片器顶端垂直贴附在载玻片上。
–慢慢向后移动血涂片器，使血液样本均匀地涂布于载玻片上。
3.干燥血涂片：–将制备好的血涂片放置于通风处，自然晾干。
4.染色处理：–将已干燥的血涂片浸入双氧水中，浸泡5分钟，用来溶解红细胞。
–用显微镊子夹取血涂片，轻轻晃动10次，使红细胞充分分散。
–轻轻将血涂片冲洗干净，以去除残留的双氧水。
–将血涂片浸入细胞染色剂中，染色1分钟。
–将血涂片冲洗干净，确保没有染色剂残留。
5.拖尾处理：–取适量拖尾液滴在盖玻片上。
–将染色好的血涂片倒置放在盖玻片上，使其与拖尾液接触。
–轻轻拖动血涂片，使细胞核进入拖尾液。
6.结果观察与分析：–将染色好的血涂片放置在显微镜下进行观察。
–分析细胞形态、染色程度等指标，记录结果。
注意事项•实验过程中需戴好实验手套，避免直接接触血液。
•制备血涂片时，务必将血液涂布均匀，以免影响结果。
•双氧水具有漂白作用，使用时需小心避免溅到衣物或皮肤上。
•染色剂使用过程中，应注意避免吸入或误食。
•结果分析时，应根据实验要求和标准参考范围进行判断。
结论通过本实验，我们成功制备了血涂片并进行了染色处理。
观察结果可为后续血液相关研究提供重要数据和参考。
在实验过程中，我们严格遵守实验室操作规程，并注意了安全事项。
希望本报告对今后的血涂片制备与染色实验有所帮助。
参考文献：无。
制作血涂片的实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。
2. 了解血涂片在临床医学中的应用。
3. 观察血细胞的形态和分布。
二、实验原理血涂片是临床医学中常用的一种检测方法，通过将血液涂抹在载玻片上，经过固定和染色处理，使血细胞在显微镜下清晰可见，从而对血液中的各种细胞进行形态学和数量的观察，有助于诊断某些疾病。
三、实验器材1. 载玻片2. 盖玻片3. 刺血针4. 消毒酒精5. 蒸馏水6. 瑞氏染液7. 显微镜8. 移液器9. 计数板四、实验步骤1. 采血：选择合适的采血部位（如耳垂或手指尖），用消毒酒精消毒皮肤，待干。
用刺血针刺破皮肤，血液自然流出。
2. 制备血涂片：a. 将载玻片倾斜45度，用移液器吸取少量血液。
b. 将血液滴在载玻片的右端，用另一载玻片作为推片，将推片的末端斜置于血液滴的左缘，成30°～40°角。
c. 将推片稍向后退，使之与血液滴接触，使血液在两载玻片之间充满斜角。
d. 将推片向前推动，使血液均匀涂抹在载玻片上，形成薄薄的一层。
e. 将盖玻片轻轻放置在血涂片上，避免产生气泡。
3. 固定：将血涂片放入固定液（如甲醇）中浸泡5分钟，取出晾干。
4. 染色：将固定后的血涂片放入瑞氏染液中染色10分钟，取出后用蒸馏水冲洗，晾干。
5. 观察：将染色的血涂片放在显微镜下观察，先低倍镜观察，再高倍镜观察。
五、实验结果与分析1. 观察到血涂片上红细胞呈两面凹的圆饼状，没有细胞核，细胞质呈淡红色。
2. 观察到白细胞有核，呈圆形、椭圆形或不规则形，细胞质呈蓝色或紫色。
3. 观察到血小板呈不规则形，细胞质呈蓝色或紫色。
六、实验总结通过本次实验，我们掌握了血涂片的制作方法，了解了血涂片在临床医学中的应用。
在实验过程中，我们观察到了红细胞、白细胞和血小板的形态和分布，为后续的医学诊断提供了基础。
七、注意事项1. 采血时，要确保采血部位消毒彻底，避免感染。
2. 制备血涂片时，要保持推片与载玻片之间的角度，避免血液涂抹不均匀。
实验报告 血涂片的制备
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞形态。
本实验旨在探究血涂片的制备方法和技巧，以及观察和分析血涂片的步骤和注意事项。
材料与方法：1. 血液样本：采集新鲜的静脉血，使用无抗凝剂的试管收集。
2. 血涂片材料：玻璃片、洗净的玻璃滴管、无纺布、无纺布夹子、显微镜玻璃片、显微镜盖玻璃片。
3. 实验仪器：显微镜、离心机。
步骤：1. 准备工作：将玻璃片和显微镜玻璃片用去离子水和无纺布擦拭干净，保证表面无杂质。
2. 血液制备：使用无纺布夹子固定玻璃片，用洗净的玻璃滴管将血液滴在玻璃片上。
滴管与玻璃片的接触角度应适中，以保证血液均匀地分布在玻璃片上。
3. 血涂片制备：用另一块玻璃片将血液滴在玻璃片上的血液涂抹均匀，使血细胞分散均匀并形成单层。
4. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，或使用离心机低速离心，去除多余的液体。
5. 固定处理：将干燥的血涂片固定在95%乙醇中，浸泡2-3分钟，以保持细胞形态。
6. 染色处理：将固定的血涂片浸泡在Wright染料溶液中，浸泡时间根据染料浓度和需要的染色效果而定。
7. 清洗处理：用去离子水将染色过的血涂片洗净，去除多余的染料。
8. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，确保完全干燥。
9. 封片处理：将干燥的血涂片放在显微镜盖玻璃片上，用透明胶带固定。
结果与讨论：制备完毕的血涂片可用于显微镜观察。
通过血涂片，我们可以观察到血液中的各种细胞，如红细胞、白细胞和血小板，并且可以分析它们的数量、形态和结构。
在制备血涂片的过程中，有几个关键的步骤需要特别注意。
首先，血液的滴取和涂抹要均匀、细致，以避免细胞聚集和不均匀分布。
其次，血涂片在制备过程中要保持湿润，避免细胞干燥和变形。
此外，染色过程中的浸泡时间和染料浓度要控制好，以保证染色效果的准确性和清晰度。
血涂片的制备是一项基础实验技术，广泛应用于医学、生物学和病理学等领域。
血涂片的制备及染色
图 １ 血涂片制备
·１６８·
２０ｍｉｎ，用热水将肥皂和血膜洗去，然后，用自来水对其反复
冲洗，擦干或烤干后备用。 取用载玻片时需用专用仪器，不
可用手接触玻片表面，以免污染玻片表面。 另外，还需对载
玻片两角作斜线标记，用剥离切割刀将载玻片两角裁去，制
成宽度约为 １５ｍｍ 的推片。
（ 二） 采血
准备好载玻片后，便可给受检者采血，可采用静脉采血
的着色效果较差。
（ 二） 姬姆萨染色法
姬姆萨染色法染色操作基本同瑞特染色法，不同的是其
采用的染料为姬姆萨染料，这是一种由天青和酸性染料伊红
组成的复合染料，可对细胞核结构和寄生虫进行良好的着
色，从而能清晰显示出这些物质的结构，但是，其对细胞质和
颗粒的着色效果较差。
（ 三） 瑞－姬染色法
瑞－姬染色法指的是将瑞氏染料与姬姆萨染料充分混
否存在血液疾病等，虽然该项检验技术在临床应用上极广，
但是，在实际检验过程中，受血涂片制备和染色不当等因素
的影响，常常会降低检验结果的准确性，从而会影响该项检
验技术的临床应用效果。 基于此，就需要检验人员掌握正确
的血涂片制备和染色方法。
一、 血涂片制备
（ 一） 载玻片和推片准备
一般需选用高纯度、耐腐蚀性强、抗水的玻璃制成的载
缘平滑的一端从血滴前方后移接触血液，使血滴沿推片边缘
展开，然后是推片与载玻片保持 ３０ ～ ４５° 夹角，平稳匀速地向
前推动，使血液沿推片散开，在载玻片上形成厚薄适宜、边缘
整齐的薄层血膜（ 边缘需留有一定的空隙） ，且还需保证血
涂片呈舌状，头体尾三部分明显，如图 １ 所示。
（ 四） 血涂片干燥
完成血涂片制备后，还需对其进行干燥处理，可采用空
血涂片的实验报告
一、实验目的1. 熟悉血涂片的制备方法。
2. 了解血液细胞的基本形态和功能。
3. 掌握显微镜的使用技巧。
二、实验原理血液是人体的重要组成部分，其中包含红细胞、白细胞和血小板等细胞。
通过制备血涂片，可以在显微镜下观察血液细胞的形态和数量，从而了解人体的健康状况。
三、实验器材1. 显微镜：低倍镜、高倍镜、油镜2. 血涂片制备器材：载玻片、盖玻片、吸管、酒精灯、镊子、剪刀、滴管、蒸馏水、生理盐水、染色液（如瑞氏染液）3. 试剂：生理盐水、染色液四、实验步骤1. 准备血涂片（1）用剪刀将载玻片的一端剪成斜面，以便血液滴落。
（2）用吸管吸取少量血液，滴在载玻片的斜面上。
（3）用另一张载玻片的一端轻轻刮过血液，使血液均匀分布在载玻片上。
（4）将盖玻片轻轻覆盖在血液上，避免产生气泡。
2. 固定将制备好的血涂片放入固定液中浸泡5-10分钟，取出后用蒸馏水冲洗干净。
3. 染色将染液滴在血涂片上，染色时间为3-5分钟，然后用蒸馏水冲洗干净。
4. 观察与记录（1）低倍镜观察：观察血涂片的质量，选择细胞分布均匀、染色良好的区域进行观察。
（2）高倍镜观察：转换高倍镜，观察红细胞的形态、数量和分布情况。
（3）油镜观察：在选定的区域滴加香柏油，转换油镜，观察白细胞的形态、数量和分布情况。
五、实验结果与分析1. 红细胞：呈两面凹陷的圆饼状，无细胞核，细胞质略呈碱性，经染色后显红色。
2. 白细胞：体积比红细胞大，有细胞核，分为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和浆细胞等。
其中，淋巴细胞和单核细胞呈圆形或椭圆形，核染色质细腻；嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞呈球形，核染色质粗大；浆细胞呈圆形或椭圆形，细胞质丰富，核染色质细腻。
六、实验结论通过本次实验，我们成功制备了血涂片，并观察了血液细胞的形态和数量。
实验结果表明，红细胞呈两面凹陷的圆饼状，无细胞核；白细胞体积比红细胞大，有细胞核，分为多种类型。
通过观察血液细胞的形态和数量，可以初步了解人体的健康状况。
实验四 血涂片的制备与染色
实验四血涂片的制备与染色【目的】掌握血涂片的制备和染色方法（preparation and staining of thin blood films）。
【原理】将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层紧密分布，制成薄血片。
用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。
细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染成淡紫红色。
【器材】1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。
2．推片选择边缘光滑的载玻片，在两角分别作斜线标记，然后用玻璃切割刀裁去两角，制成约15mm 宽度的推片。
3．吸耳球。
4．显微镜。
5．酒精灯或Bunsen灯。
6．采血针。
7．注射器和针头。
【试剂】1．瑞氏（Wright）染液（1）Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上)600ml、甘油15ml。
将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨（至少30min），以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。
再加15ml甘油密闭保存。
（2）Ⅱ液：磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8），包含磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g、蒸馏水加至1000ml。
配好后用磷酸盐溶液校正pH，塞紧瓶口贮存。
如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
2．吉姆萨染液包含吉姆萨染料0.75g、甘油35ml、甲醇65ml。
将吉姆萨染料、甘油和甲醇放入含玻璃珠的容器内，每天混匀3次，连续4天，最后过滤备用。
3．瑞-吉复合染液（1）I液：包含瑞氏染料1g、吉姆萨染料0.3g、甲醇500ml、中性甘油10ml。
制作血涂片实验报告
制作血涂片实验报告制作血涂片实验报告引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。
本次实验旨在通过制作血涂片，了解血液中各种细胞的形态特征，并掌握制作血涂片的步骤和技巧。
材料与方法：1. 血液样本：从健康人士的指尖或静脉采集新鲜全血。
2. 血液采集器：使用无菌注射器或采血针。
3. 血涂片：玻璃片或载玻片。
4. 血涂片制备工具：无菌棉签、无菌盖玻片、无菌滴管等。
5. 染色剂：酒精、甲苯、吉姆萨染色液等。
步骤：1. 消毒：将玻璃片、棉签、滴管等工具用酒精或甲苯擦拭消毒，保证实验无菌。
2. 采集血液：用无菌注射器或采血针采集适量血液样本，避免空气污染。
3. 制作血涂片：将一滴血液滴在玻璃片上，用无菌棉签将血液涂抹成薄膜状。
4. 干燥：将制作好的血涂片放置在通风处晾干，避免外界污染。
5. 固定：将干燥的血涂片浸入酒精或甲苯中，使细胞固定在玻璃片上。
6. 染色：将固定的血涂片浸入吉姆萨染色液中，使细胞染色。
7. 清洗：用蒸馏水或生理盐水轻轻冲洗血涂片，去除多余的染色剂。
8. 干燥：将清洗后的血涂片放置在通风处晾干，避免水分残留。
结果与讨论：通过制作血涂片并观察，我们可以看到血液中包含了许多不同类型的细胞。
其中，红细胞是最常见的细胞类型，呈圆形或凹陷状，无核，主要负责携带氧气和二氧化碳。
白细胞则有多种类型，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等。
它们在免疫和炎症反应中起着重要作用。
血涂片的制备过程中，固定和染色是关键步骤。
固定可以使细胞保持原有形态，并防止细胞脱落。
染色则能够突出细胞的形态特征，使其更易于观察和分析。
吉姆萨染色液是常用的染色剂，可以染出细胞核和胞质的颜色差异，便于细胞分类和计数。
制作血涂片的技巧也需要注意。
首先，血涂片的制备过程应尽量快速，避免血液样本在空气中暴露时间过长，以免细胞形态发生变化。
其次，血涂片的涂抹要均匀且薄，以确保细胞分布均匀，不会重叠或过于稀疏。
血涂片制备与染色临床应用
血涂片制备与染色临床应用血涂片制备是临床实验室中常见的实验操作，用于观察和诊断患者的血液情况。
正确的血涂片制备与染色技术将有助于提高血涂片的质量，为临床医生提供准确的诊断信息。
本文将介绍血涂片制备的步骤以及常用的染色方法，并探讨其在临床应用中的意义。
一、血涂片制备步骤1. 准备工作：首先需要准备好检测所需的材料，包括玻璃片、无菌注射器、消毒酒精、无纺布等。
确保工作台面整洁，无尘无菌。
2. 采集血液样本：选择合适的采血部位，用无菌注射器采集血样，并将血样滴在玻璃片上。
3. 制备血涂片：将另一块玻璃片平行放在血样上，以45度角倾斜，缓慢向前移动，使血涂片的宽度均匀。
4. 干燥固定：将制备好的血涂片晾干，或者用火焰烘干，使细胞固定在玻璃片上。
5. 染色处理：根据需要选择合适的染色方法进行处理，使细胞核、胞质等结构清晰可见。
二、血涂片染色1. Giemsa染色：是血涂片最常用的染色方法之一，可用于观察红细胞形态、白细胞分类及寄生虫等。
染色时间和比例需控制好，避免染色过度或不足。
2. Wright染色：适用于白细胞分类和形态分析，特别是嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的染色效果较好。
3. 厌氧染色：用于观察寄生虫、真菌等微生物，需要较长的染色时间和特殊的操作条件。
三、血涂片在临床应用中的意义1. 诊断疾病：通过观察血涂片中各种细胞的数量、形态、分布等特征，可以帮助医生诊断贫血、感染、白血病等疾病。
2. 指导治疗：血涂片可以反映患者的血液情况，指导医生制定合理的治疗方案，监测治疗效果。
3. 预后评估：血涂片中某些指标的变化可以反映患者病情的进展和预后情况，有助于医生及时调整治疗策略。
综上所述，正确的血涂片制备与染色技术对于临床医学具有重要意义。
通过规范操作和严格控制，可以提高血涂片的质量，为临床诊断提供可靠的依据。
希望本文对于血涂片制备与染色临床应用有所帮助，谢谢！。
实验四静脉采血血涂片的制备与染色
取血
待酒精干后，刺破皮肤，使血自然流出， 勿挤。取干净载片，让血滴在离载片一端 中4～5毫米处，注意手指 持握载片的边缘 ，勿触及其表面。不能使载片接触取血部 位的皮肤。
推片 取一块边缘光滑的载片做推片。将其一
端置于血滴前方，向后移动到接触血滴， 使血液均匀分散在推片与载片的接触处。 然后使推片与载片呈30°～40°角，向另 一端平稳地推出。涂片推好后，迅速在空 气中挥干，使之自然干燥。
标记试管
在试管上贴上标签，著名患者姓名、项目名 称、采集日期、门诊或住院号。
消毒双手
采血前，操作人员应用肥皂或消毒液和水洗手。
选择静脉
采血前，要求受检者坐在实验台前。将前臂放在 实验台上，掌心向上，并在肘下放一枕垫。卧床 受检者要求前臂申展，暴露穿刺部位。常用采血 位置是肘前静脉，因其粗大、容易辨认。
检查注射器
静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固， 针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光 滑、通气，针筒不漏气。抽血时针栓只能向外抽 ，不能向静脉内推，以免形成空气栓塞，造成严 重后果。
扎压脉带
采静脉血时止血带压迫时间不能过长 、绑扎不能过紧，以避免淤血和血液浓缩 ，最好不超过1min，否则会影响某些试验 结果，如造成血红蛋白和血细胞比容增高 。
醇所固定;
3、 加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量 超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5-10分钟;
4、 水洗、吸干、镜检。
血涂片染色
涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴 覆盖整个血膜1分钟
勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和 Ⅱ液充分混匀静置10分钟
直接流水冲洗3-5分钟 （切勿先倒掉染液）
血涂片制作实验报告
血涂片制作实验报告血涂片制作实验报告一、引言在医学领域，血涂片是一项常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和成分。
本实验旨在探究血涂片制作的方法和步骤，并观察不同染色剂对细胞的影响。
二、材料与方法1. 实验材料：- 血液样本- 血涂片- 血涂片玻璃片- 血涂片染色剂（如吉姆萨染色液、伊昔洛尔染色液）- 显微镜2. 实验步骤：1）取一滴新鲜的血液样本，放在血涂片玻璃片的一端。
2）将另一片玻璃片倾斜放在血涂片上，使血液沿着玻璃片的一侧均匀涂开。
3）将血涂片晾干，避免阳光直射。
4）将干燥的血涂片，分别放入吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液中浸泡，按照染色液说明书上的时间要求。
5）取出血涂片，用水轻轻冲洗，使多余的染色剂洗掉。
6）将血涂片晾干，然后放置在显微镜下观察。
三、结果与讨论1. 血涂片制作过程中，需要注意的细节：- 血液样本应新鲜，避免血液凝固。
- 血涂片制作时，玻璃片的倾斜角度要适中，以保证血液均匀涂开。
- 血涂片晾干时，应避免阳光直射，以免影响后续观察。
2. 不同染色剂对细胞的影响：- 吉姆萨染色液：吉姆萨染色液主要用于染色细胞核，使其呈现暗蓝色或紫色。
这种染色剂对红细胞、白细胞和血小板的染色效果较好，能清晰地显示细胞核的形态和细胞数量。
- 伊昔洛尔染色液：伊昔洛尔染色液主要用于染色红细胞，使其呈现橙红色。
这种染色剂对红细胞的染色效果较好，能够清晰地显示红细胞的形态和数量。
3. 观察结果：- 在吉姆萨染色液中染色的血涂片下，可以清晰地观察到红细胞、白细胞和血小板的细胞核，细胞核呈现暗蓝色或紫色。
- 在伊昔洛尔染色液中染色的血涂片下，可以清晰地观察到红细胞的形态和数量，红细胞呈现橙红色。
4. 结果分析：- 吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液分别适用于不同的细胞成分的观察和分析。
- 吉姆萨染色液适用于细胞核的染色，可以帮助研究者观察和计数细胞核的数量。
- 伊昔洛尔染色液适用于红细胞的染色，可以帮助研究者观察和计数红细胞的数量。
血涂片实验报告
血涂片实验报告血涂片实验报告引言：血涂片实验是一种常见的临床检验方法，用于观察和分析血细胞的形态和数量，从而帮助医生判断患者的健康状况。
本次实验旨在通过对血涂片的制备和观察，了解血液中各类细胞的形态特征及其数量变化，进一步加深对血液疾病的认识。
实验步骤：1. 血液采集：使用无菌注射器从患者的指尖或静脉采集适量的血液样本，注意避免血液污染和交叉感染。
2. 制备血涂片：将采集到的血液样本滴在玻片上，利用另一块玻片将血液涂抹成薄膜，然后晾干。
3. 固定染色：将制备好的血涂片浸入甲醇中，固定血细胞的形态，然后再放入染色剂中，如吉姆萨染色液，使细胞成为可观察的颜色。
4. 镜检观察：将染好的血涂片放在显微镜下，通过调节镜头和光源，观察血细胞的形态和数量。
实验结果：在显微镜下观察血涂片，我们可以看到不同种类的血细胞以及它们的形态特征。
红细胞呈圆形或扁平的双凸形，中间凹陷，边缘光滑。
白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等。
中性粒细胞具有多个核，细胞质内有颗粒状物质；淋巴细胞则呈圆形，细胞质较少，核浓染；单核细胞呈圆形或椭圆形，核偏心，细胞质较多。
嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞则带有颗粒状物质，分别呈酸性和碱性反应。
讨论：通过血涂片的观察，我们可以了解到血液中各类细胞的数量和形态特征，进而判断患者的健康状况。
例如，红细胞的形态异常可能提示贫血或其他血液疾病的存在，而白细胞的数量和比例变化则可能与感染、炎症或免疫系统的异常有关。
此外，血涂片还可以用于诊断一些特定的血液疾病。
例如，淋巴细胞的数量增多可能与淋巴细胞白血病有关，而中性粒细胞的数量增多则可能与感染或炎症有关。
嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量增多则可能与过敏反应或寄生虫感染有关。
结论：血涂片实验是一种简单而有效的临床检验方法，通过观察和分析血细胞的形态和数量，可以帮助医生判断患者的健康状况和诊断一些特定的血液疾病。
通过本次实验，我们更加深入地了解了血液的组成和特点，为进一步研究和治疗血液疾病提供了基础。
血涂片制作与染色
血涂片制作与染色1.血涂片的制备血涂片的制备需要用到标本采集工具如无菌化的注射器、针头、试管、硅化玻璃片以及一些实验室试剂如无菌生理盐水、巴氏溶液和电解溶液等。
具体步骤如下：（1）将患者指尖的表面清洁卫生。
（2）选择一个适合的静脉穿刺点，通常是患者的中指或无名指。
（3）用酒精棉球清洁穿刺点，使其干燥。
（4）将无菌化的注射器连接到无菌生理盐水的瓶口上，并抽取一定量的生理盐水。
（5）将针头插入穿刺点后，将生理盐水匀速注射入患者的静脉内。
（6）在生理盐水滴入试管的同时，用眼微观检查，如果有血液进入注射器和管道内，即可采集。
宜用自来水洗净试管外表面，先不带盖座放倾空液。
（7）用试管夹夹住注射针，将针头推入试管内，然后轻轻射入试管底部液面下，同时向上抽手，保持抽液缓慢，可避免气泡产生。
（8）将采集到的血液缓缓带走，同时注入试管内，让其与100ml巴氏溶液进行搅拌。
（9）将混合液倾入瓷漏斗中，从中取出干燥了的血细胞。
2.血涂片的染色血涂片染色可使用湿涂片法或干涂片法，其中湿涂片法应用更广泛。
下文将以湿涂片法为例进行介绍。
（1）取一根硅化玻璃片，用纸巾或棉球擦拭干净。
（2）用血涂片染色钳将准备好的血涂片床放在玻璃片上。
（3）将一滴适量的Wright液倒在血涂片的中段。
Wright液包含了染色剂和辅助剂，其中主要成分是吡啶基甲重氮盐和三氧二氮菲盐。
（4）用另一根玻璃片的尾部将液滴均匀地扩开，并迅速在血涂片上来回涂抹，在染液与血涂片上充分接触并混合。
（5）保持血涂片在室温下静置5-10分钟，以促进染色反应的进行。
（6）用蒸馏水冲洗玻璃片上的染料，并将其晾干。
3.血涂片的观察与分析观察血涂片需用光学显微镜，常规放大倍数为1000倍。
观察血涂片时，应注意血细胞的形态、大小、核形态、细胞质染色情况及相关细胞间的比例等。
根据各种细胞的数量和比例，可以初步评估出是否存在异常细胞，及其可能的病理性质，如感染、贫血等。
总结：血涂片制作与染色是血液检查中重要的步骤之一，它能够帮助医生判断病情，制定治疗方案。
血涂片的制备与染色
血小板
染色结果
血小板呈淡蓝色或蓝紫色，染色质呈 颗粒状或块状。
观察指标
观察血小板数量、形态、大小等，判 断是否存在血小板减少症、血小板增 多症等。
04 染色注意事项
CHAPTER
染色时间
染色时间过短
染色时间适中
染色效果不佳，细胞结构不清晰，颜 色偏淡。
染色效果良好，细胞结构清晰，颜色 适中，便于观察。
染色温度过低
染色效果不佳，细胞结构不清晰，颜色偏淡。
染色温度适中
染色效果良好，细胞核和细胞质对比度明显，易 于观察。
05 染色问题处理
CHAPTER
染色过深或过浅
染色过深
可能是由于染色时间过长或染色液浓 度过高所致。为避免这一问题，应严 格控制染色时间和染色液的浓度，确 保染色过程的一致性。
染色过浅
详细描述
瑞氏染色法使用瑞氏染料和伊红染料进行染色，能够使细胞核呈紫红色，细胞 质呈粉红色，便于观察和鉴别细胞的形态和结构。该方法具有染色鲜艳、对比 度高的优点，适用于多种血细胞染色。
姬姆萨染色法
总结词
姬姆萨染色法是一种特殊的血涂片染色方法，能够更好地显示出细胞的内部结构 和核仁。
详细描述
姬姆萨染色法使用姬姆萨染料进行染色，能够使细胞核呈蓝色或深紫色，细胞质 呈浅红色或粉红色，便于观察细胞的内部结构和核仁。该方法具有较高的染色敏 感性和特异性，适用于鉴别异常细胞和病原体。
采血量
采集适量血液，一般为 20-50微升，根据实验需 求而定。
推片
载玻片
选择清洁、无划痕的载玻片，用 纱布擦拭干净。
推片方法
将血液滴在载玻片的一端，用边缘 平滑的推片从血滴一侧轻轻推动， 使血液均匀展开成一层薄膜。
实验四 血涂片的制备与染色
实验四血涂片的制备与染色【目的】掌握血涂片的制备和染色方法（preparation and staining of thin blood films）。
【原理】将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层紧密分布，制成薄血片。
用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。
细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染成淡紫红色。
【器材】1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。
2．推片选择边缘光滑的载玻片，在两角分别作斜线标记，然后用玻璃切割刀裁去两角，制成约15mm 宽度的推片。
3．吸耳球。
4．显微镜。
5．酒精灯或Bunsen灯。
6．采血针。
7．注射器和针头。
【试剂】1．瑞氏（Wright）染液（1）Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上)600ml、甘油15ml。
将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨（至少30min），以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。
再加15ml甘油密闭保存。
（2）Ⅱ液：磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8），包含磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g、蒸馏水加至1000ml。
配好后用磷酸盐溶液校正pH，塞紧瓶口贮存。
如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
2．吉姆萨染液包含吉姆萨染料0.75g、甘油35ml、甲醇65ml。
将吉姆萨染料、甘油和甲醇放入含玻璃珠的容器内，每天混匀3次，连续4天，最后过滤备用。
3．瑞-吉复合染液（1）I液：包含瑞氏染料1g、吉姆萨染料0.3g、甲醇500ml、中性甘油10ml。
血涂片染色的实验报告
血涂片染色的实验报告血涂片染色的实验报告引言：血涂片染色是一项常见的实验技术，用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。
通过染色，我们可以更好地了解血液中的不同细胞类型，从而帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
本实验报告旨在介绍血涂片染色的实验步骤、原理以及实验结果的分析。
实验步骤：1. 收集血液样本：首先，我们需要从被试者的指尖或静脉采集一小滴血液样本。
为了确保实验的准确性，我们使用无菌针头和管子进行采集，并严格遵守消毒措施。
2. 制备血涂片：将采集到的血液样本滴在玻片上，然后使用另一片玻片将其涂抹开来。
这样，我们就得到了一张薄薄的血涂片。
3. 固定与染色：将制备好的血涂片在室温下晾干，然后将其浸入甲醇中进行固定。
固定后，我们可以选择不同的染色方法，如吉姆萨染色、伊昭染色等，以展现细胞的不同特征。
4. 镜检与分析：使用显微镜观察染色后的血涂片。
通过调整镜头和光源，我们可以清晰地看到血液中的各种细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
根据它们的形态、大小和数量，我们可以进行进一步的分析和诊断。
实验原理：血涂片染色的原理基于细胞的结构和染色剂的特性。
不同的染色剂会与细胞的不同成分发生特异性反应，从而使细胞在显微镜下呈现出不同的颜色和形态。
例如，吉姆萨染色中的嗜碱性染料会与细胞核和某些细胞器结合，使其呈现出蓝色或紫色；而伊昭染色则能够染色红细胞，使其呈现出红色。
实验结果分析：通过观察血涂片，我们可以得到以下信息：1. 红细胞数量和形态：红细胞是血液中最常见的细胞类型，其数量和形态可以反映出机体的贫血程度和红细胞的功能状态。
正常情况下，红细胞应呈现出均匀的圆盘状，数量适中。
若红细胞过少或过多，或者形态异常，可能提示贫血、炎症或其他疾病的存在。
2. 白细胞分类和计数：白细胞是免疫系统的重要组成部分，通过观察血涂片，我们可以对白细胞进行分类和计数。
常见的白细胞类型有中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
制作血涂片的实验报告
制作血涂片的实验报告制作血涂片的实验报告引言：血涂片是一种常用的实验技术，用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。
本实验旨在探索制作血涂片的方法，并观察不同染色方法对细胞结构的影响。
通过本实验，我们可以更好地理解血液细胞的特征和功能。
材料与方法：1. 血液样本：本实验采用新鲜的人类全血样本。
2. 血涂片制备：使用无菌玻璃片和无菌血液涂片，将血液样本滴于玻璃片上，迅速涂开成薄膜。
3. 固定与染色：将血涂片在室温下晾干，然后进行固定和染色。
本实验采用两种不同的染色方法：吉姆萨染色和偏碱性甲苯胺蓝染色。
4. 显微镜观察：将制备好的血涂片放置在显微镜下，使用高倍镜进行观察和记录。
结果与讨论：1. 血涂片制备：制备血涂片时，关键是要迅速涂开血液样本，以获得均匀薄膜。
过程中需要注意手法的稳定性和技巧性，以避免产生空隙或过厚的细胞层。
2. 吉姆萨染色：吉姆萨染色是一种常用的染色方法，可以同时染色细胞核和细胞质。
观察结果显示，细胞核呈现紫色至深蓝色，细胞质呈现粉红色至橙红色。
该染色方法能够清晰地显示细胞核的形态和细胞质的颜色区分，有利于细胞的分类和计数。
3. 偏碱性甲苯胺蓝染色：偏碱性甲苯胺蓝染色主要用于染色白细胞，对红细胞的染色效果较差。
观察结果显示，白细胞呈现深蓝色至紫色，而红细胞呈现浅蓝色。
该染色方法有助于区分白细胞和红细胞，并可更好地观察白细胞的形态和数量。
4. 细胞形态观察：通过显微镜观察，我们可以清晰地看到不同类型的血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
红细胞呈现典型的圆盘状，白细胞则具有较大的细胞核和不同形状的细胞质。
血小板呈现为小而不规则的细胞片状结构。
通过观察细胞形态，我们可以初步判断细胞的健康状况和功能。
结论：本实验通过制备血涂片和不同染色方法的应用，成功观察和分析了血液中的细胞结构和数量。
吉姆萨染色和偏碱性甲苯胺蓝染色都是常用的染色方法，各有其适用的细胞类型。
通过显微镜观察，我们可以更好地了解血细胞的形态和功能，为进一步的研究提供了基础。
血涂片制备与染色
器 建议不重复使用。
材
2.推片：推片一般选用边缘有切角且切角光滑、整齐的玻璃，推 片能否在载玻片上平稳推出是保证血涂片质量的关键。
（1）采血 ：静脉采血后，使用玻璃棒、毛细管、注射针头 等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。
（2）推片 ：左手平执载玻片，或放在类似桌子等平坦地方， 右手持推片从前方接近血滴，使血液沿推片边缘展开成适当 的宽度，立即将推片与载玻片呈 30~45°角，轻压推片边缘将 血液推制成厚薄适宜的血涂片，血涂片应呈舌状，头、体、 尾清晰可见。
1.采血：一般选用EDTA-K2抗凝的静脉血或毛细血管血液， 注ห้องสมุดไป่ตู้观察避免血细胞破坏、凝集及使用长时间放置的血液 标本因渗透压改变曹成的细胞形态、数量上的改变造成错 误判断；
2.材料：载玻片及推片应干燥无油腻，光滑无缺齿，防治推 出的血片空泡状、拉丝、不均匀；
3.推片水平：血滴大小适中，待血滴顺着推片边缘移动未至 载玻片边缘处开始推片，整个推片过程应当力度适中、速 度均匀，载玻片与推片夹角一般控制在45°角左右。血滴过 大、角度大、推片速度快、推片力度小造成血片偏厚，反 之血片则越薄，用力不匀及速度不均易造成血片厚薄不匀。
1、载玻片：载玻片必须选用正规厂家生产的表面光洁得非磨砂
玻璃，新开封的载玻片需要用1mol/L的氯化氢洗液浸泡24小时以
主 去除载玻片表面的碱性物质，浸泡后用清水冲洗风干。用过的
要
载玻片和通过酸性洗液或碱性洗液煮沸消毒20-30分钟，并用毛 刷及流动水清洗干净方能重复使用，但有划伤及交叉污染风险，
5、血膜很短：血滴太小；
6、血膜边缘无空隙：推片太宽或血滴展开太宽；
7、血膜太厚：血滴大、血黏度高推片角度大、推 片速度快；
血涂片制作实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。
2. 熟悉血细胞的基本形态和分布特点。
3. 了解血涂片染色技术。
二、实验原理血涂片是血液学检查的基本方法，通过将血液涂布在载玻片上，经过固定、染色等步骤，使血液中的各种细胞在显微镜下呈现出不同的颜色和形态，便于观察和分析。
血涂片制作的关键在于血液的涂布、固定和染色。
三、实验器材与试剂1. 器材：载玻片、推片、采血针、酒精棉球、生理盐水、瑞氏染液、蒸馏水、显微镜等。
2. 试剂：10%甲醛溶液、95%乙醇、甘油等。
四、实验步骤1. 消毒与采血（1）取一支采血针，用酒精棉球消毒皮肤。
（2）将采血针对准皮肤，轻轻刺入，使血液自然流出。
（3）用生理盐水湿润载玻片，取少量血液滴在载玻片中央。
2. 推片（1）将推片的一端放在血滴上方，另一端紧贴载玻片。
（2）以30-40°角将推片平稳地推出，使血液均匀分布在载玻片上。
3. 固定（1）将血涂片在空气中晾干。
（2）将血涂片浸入10%甲醛溶液中固定5-10分钟。
4. 染色（1）将固定好的血涂片浸入95%乙醇中脱色2-3分钟。
（2）将脱色后的血涂片浸入瑞氏染液中染色3-5分钟。
（3）将染色的血涂片浸入蒸馏水中分化1-2分钟。
5. 观察（1）将染色的血涂片放在显微镜下观察。
（2）低倍镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。
（3）高倍镜下观察白细胞和血小板的细节结构。
五、实验结果与分析1. 红细胞：呈两面凹的圆饼状，无细胞核，细胞质内充满血红蛋白，略呈碱性。
2. 白细胞：分为三种类型：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
中性粒细胞呈圆形或椭圆形，细胞核分叶；嗜酸性粒细胞呈椭圆形，细胞核为2-3叶；嗜碱性粒细胞呈圆形或椭圆形，细胞核为2-3叶。
3. 血小板：呈不规则形状，无细胞核，细胞质内含有血小板颗粒。
六、实验总结本次实验成功制作了血涂片，并观察到了红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。
通过本次实验，我们掌握了血涂片的制作方法，提高了对血液细胞形态学知识的认识，为今后的临床诊断工作打下了基础。
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实验四血涂片的制备与染色
【目的】掌握血涂片的制备和染色方法（preparation and staining of thin blood films）。
【原理】将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层紧密分布，制成薄血片。
用含天青B和伊红的Romannowsky类染料进行染色。
细胞中的碱性物质如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染成淡紫红色。
【器材】
1．载玻片使用前，必须仔细清洗，并用乙醇或软布清洁。
2．推片选择边缘光滑的载玻片，在两角分别作斜线标记，然后用玻璃切割刀裁去两角，制成约15mm 宽度的推片。
3．吸耳球。
4．显微镜。
5．酒精灯或Bunsen灯。
6．采血针。
7．注射器和针头。
【试剂】
1．瑞氏（Wright）染液
（1）Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇（AR级以上)600ml、甘油15ml。
将全部染料放入清洁干燥的乳钵中，先加少量甲醇慢慢地研磨（至少30min），以使染料充分溶解，再加一些甲醇混匀，然后将溶解的部分倒入洁净的棕色瓶内，乳钵内剩余的未溶解的染料，再加入少许甲醇细研，如此多次研磨，直至染料全部溶解，甲醇用完为止。
再加15ml甘油密闭保存。
（2）Ⅱ液：磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8），包含磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g、磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g、蒸馏水加至1000ml。
配好后用磷酸盐溶液校正pH，塞紧瓶口贮存。
如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
2．吉姆萨染液包含吉姆萨染料0.75g、甘油35ml、甲醇65ml。
将吉姆萨染料、甘油和甲醇放入含玻璃珠的容器内，每天混匀3次，连续4天，最后过滤备用。
3．瑞-吉复合染液
（1）I液：包含瑞氏染料1g、吉姆萨染料0.3g、甲醇500ml、中性甘油10ml。
将瑞氏染料和吉姆萨染料置洁净研钵中，加少量甲醇，研磨片刻，再吸出上液。
如此连续几次，共用甲醇500ml。
收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各摇3min，共5d，以后存放1周即能使用。
（2）Ⅱ液：即磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8）。
包含无水磷酸二氢钾6.64g、无水磷酸氢二钠2.56g，加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。
【标本】 EDTA抗凝静脉血或末梢血。
【操作】
1．采血
（1）静脉采血法：用EDTA·K2抗凝1～2h内的标本，使用玻棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血，直径约4mm。
（2）皮肤采血法：选择第三、四手指，并先采红细胞、白细胞计数，再采血1滴置洁净玻片上用于血涂片制备。
2．制作涂片左手平执载玻片，或放在类似桌子等平坦地方，右手持推片从后方移动接近血滴，使血
液沿推片边缘展开，将推片与载玻片呈30°～45°角，用均匀速度向前将血液推成厚薄适宜的血涂片（图1-12），血涂片应呈舌状，头、体、尾三部分，且清晰可见。
所有血液必须在推片到达末端前用完。
贫血病人推片速度要快。
图1-12 血涂片制备示意图
3．干燥涂片
（1）空气干燥：将推好的血涂片在空气中晃动，使其迅速干燥。
（2）加热干燥：握住涂片，在距离酒精灯或Bunsen灯火焰上方50mm处晃动，但不能直接对着火焰。
4．标记涂片在载玻片的一端用记号笔编号，注明患者姓名或门诊/住院号。
5．染色
（1）瑞氏染色法：待血涂片干透后，用蜡笔在两端画线，以防染色时染液外溢。
然后将玻片平置于染色架上，滴加染液（I液）3～5滴，使其迅速盖满血涂片，约0.5～1min后，滴加等量或稍多的缓冲液（Ⅱ液），轻轻摇动玻片或用吸球对准血涂片吹气，使染液充分混合。
5～10min后用流水冲去染液，待干。
（2）吉姆萨染色法：将固定的血涂片置于被pH6.4～6.8磷酸盐缓冲液稀释10～20倍的吉姆萨染液中，浸染10～30min（标本较少可用滴染）。
取出用流水冲洗，待干燥后显微镜检查。
（3）瑞一吉复合染色法：操作步骤同瑞氏染色法，只是染色时将瑞一吉复合染液Ⅰ液和Ⅱ液替代瑞氏染液的Ⅰ液和Ⅱ液。
6．观察结果将干燥后的血涂片置显微镜下观察。
用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。
在显微镜下，成熟红细胞染成粉红色；血小板染成紫色；中性粒细胞胞质染成粉红色，含紫红色颗粒；嗜酸性粒细胞含大的桔黄色颗粒；嗜碱性粒细胞胞质含有大量深紫蓝色颗粒；单核细胞胞质染成灰蓝色；淋巴细胞胞质染成淡蓝色。
【注意事项】
1．瑞氏染液新鲜配制的染液偏碱，染色效果较差，经在室温下贮存一定时间，美蓝逐渐转变为天青B后方可使用，这一过程称染料成熟。
放置时间愈久，天青B愈多，染色效果愈好，但必须盖严瓶口，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。
甲醇必须用AR（无丙酮）。
染液中也可加中性甘油3ml，防止甲醇挥发，使细胞染色较清晰。
2．采血
（1）不能采集以下部位的血液：①示指或拇指血液。
②感染部位血液，如甲沟炎。
③耳垂部位血液，含单核细胞太多。
（2）不能使用肝素抗凝标本。
（3）玻片必须清洁、干燥、无尘。
①新玻片：应在清洁液中浸泡过夜，然后用水冲洗，最后用蒸馏水冲洗。
②已用过的玻片：应在60℃清洁液中加热20min，然后用水冲洗，最后用蒸馏水冲洗。
③边缘破碎、表面有划痕的玻片不能再用。
（4）使用玻片时，只能手持玻片边缘，切勿触及玻片表面，以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。
3．制作涂片许多因素可影响血涂片的厚度，针对不同患者应有的放矢，对血细胞比容高、血粘度高的患者应采用小血滴、小角度、慢推；而贫血患者则应采用大血滴、大角度、快推。
涂片质量不佳及可能原因见表1-1，图1-13。
表1-1 涂片质量不佳及可能原因
涂片质量不佳可能原因
不规则间断和尾部太长推片污染、推片速度不连续、载玻片太脏
有空洞载玻片污染脂肪、油脂
白细胞和血小板尾部分布不规则制片技术差
涂片太长或太短推片角度不佳
涂片没有尾部血滴太大
涂片很短血滴太小
涂片没有边缘空隙推片太宽
有细胞退变现象固定延迟、固定时间太短、甲醇污染
血涂片厚血滴大、血粘度高、推片角度大、推片速度快
白细胞破损推片时用力过猛
图1-13 血涂片质量比较
（A为涂片质量好，B、C、D、E、F、G、H、I为涂片质量差）
4．干燥涂片血涂片干透后方可固定染色，否则细胞尚未牢固地吸附在玻片上，在染色过程中容易脱落。
5．染色步骤
（1）操作注意事项及操作不当的后果见表1-3。
表1-2 染色操作注意事项及操作不当的后果
操作注意事项操作不当的后果
加染液应适量过少则易蒸发沉淀，一旦染料沉积在血涂片上，则不易冲洗，使
细胞深染不易检查。
冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲洗染料沉着在血涂片上
冲洗时间不能过久脱色
冲洗完的血涂片应立放于支架上剩余水分浸泡脱色
（2）染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。
染液淡、室温低、细胞多则染色时间要长；反之，可减少染色时间。
必要时可增加染液量或延长时间。
冲洗前，应先在低倍镜下观察有核细胞是否染色清楚，核质是否分明。
应该在具体实践中摸索合适的时间，特别是在更换染液时。
每批染色液和缓冲液，均需试染，以便掌握染色时间和加缓冲液的比例。
6．结果观察低倍镜下观察血涂片应厚薄适宜，细胞不重叠，头尾及两侧有一定的空隙，一些体积大的特殊细胞常在血涂片的尾部出现。
如有可能，干燥后的血涂片先用中性树胶封片后再观察，不仅能长期保存血涂片，而且观察效果更佳。
染色质量不佳及原因见表1-3。
表1-3 染色质量不佳及可能原因
染色效果可能原因纠正措施
太蓝涂片太厚、冲洗时间太短、中性水pH太高、染色时间太长、稀释染液重复使用、贮存染液暴露于阳
光在含1％硼酸的95％乙醇溶液冲洗2次，用中性水冲洗，待干镜检
太红冲洗时间太长、中性水pH太低、贮存染液质量不佳、涂片干燥前加封片规范操作。
新鲜配置中性水。
保证染液质量不佳
太淡染色时间太短、冲洗时间太长复染。
应先加缓冲液，后加染液，或加染
液与缓冲液的混合液，不可先加染液
染料沉积染料沉淀、染液未过滤、涂片太脏用甲醇冲洗2次，并立即用水冲掉甲醇，
待干后复染
蓝色背景固定不当、涂片未固定贮存过久、使用肝素抗凝剂注意涂片的固定。
使用EDTA抗凝静脉血。