常用免疫组化试剂(类别)介绍
免疫组化特殊染色试剂
Giemsa,s stain
120片/套
瓶
PATH
120片/套
瓶
120片/套
瓶
120片/套
瓶
碱性刚果 红染色液 (淀粉染 色) 纤维素染 色液 嗜银颗粒 染色液 肥大细胞 染色液 基底膜银 染色液
120片/套
瓶
120片/套 120片/套 120片/套 120片/套
瓶 瓶 瓶 瓶
Masson氏 改良三色 染色液 网纤染色 液 AB-PAS肠 化生粘液 染色液 AB-PAS肠 化生粘液 染色液AB AB-PAS肠 化生粘液 染色液PAS 胃幽门螺 杆菌 LeungGibbon氏 染色液 胃幽门螺 杆菌双色 染色液 抗酸杆菌 染色液 革兰氏细 菌染色液 瑞氏染色 液 吉姆萨染 色液 新型隐球 菌.霉菌 染色液 胶原纤维 VG染色液 弹力纤维 染色液 Mallory 磷钨酸苏 木素染色 液 脂肪染色 液(苏丹 111染色 液) 含铁血黄 素染色液 (普鲁士 兰) 黑色素染 色液
120片 120片 120片
套 套 套
结缔组织 染色 网状纤维 肠化生染 液 阿利新蓝 PH2.5染 色液 过碘酸雪 夫氏染色 液
120片
套
120片
套
120片
套
120片 120片 100ml*4 100ml 100ml*2 120片/套 120片/套 120片/套
套 套 套 瓶 套 瓶 瓶 瓶
HP染液
免疫组化名称及各指标染色的意义
免疫组化名称及各指标染色的意义ACTH 促肾上腺皮质激素。
可用于垂体腺瘤的功能性分类,有助于区分原发性和转移性垂体肿瘤。
某些神经内分泌肿瘤也可出现阳性反应。
Actin 肌动蛋白。
用于标记骨骼肌、心肌、平滑肌及其来源的肿瘤。
AFP 甲胎蛋白。
用于标记肝癌、卵黄囊瘤和某些生殖细胞肿瘤。
Bcl-2 主要用于滤泡性淋巴瘤、毛细胞性白血病的辅助诊断及细胞凋亡方面的研究。
CerbB-2 主要作为判断乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌及消化道肿瘤预后的参考指标,并用于赫赛汀治疗乳腺癌的药物治疗的筛选。
CD3 目前是T细胞标记物的首选。
95%以上的T细胞或NK细胞淋巴瘤阳性表达。
CD4 辅助T细胞。
与CD8联合使用,对于某些疾病的诊断、疗效观察及预后有一定意义。
CD8 细胞毒T细胞。
一般与CD4联合使用。
CD10 为滤泡中心细胞的标记。
Burkitt淋巴瘤/生发中心母细胞/生发中心滤泡性淋巴瘤可阳性CD15 是成熟粒细胞、R-S细胞的标志之一。
主要用于标记霍奇金淋巴瘤。
CD20 B细胞的标记。
主要用于B细胞淋巴瘤的诊断。
CD21 主要用于B细胞、滤泡树突状细胞及其来源的肿瘤。
CD30 主要用于R-S细胞和大多数间变性大细胞淋巴瘤的标记。
CD31 内皮细胞标记。
主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。
CD34 内皮细胞标记。
主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。
与CD117联合用于诊断间质瘤。
CD56 是NK细胞淋巴瘤比较好的标记物。
还可用于神经源性肿瘤的辅助诊断。
CD57 自然杀伤细胞。
主要用于NK细胞介导的细胞毒、NK细胞及T细胞亚群的功能方面的研究。
CD68 巨噬细胞。
可作为组织细胞标记物及骨髓白血病的的鉴别。
CD99 有助于尤文肉瘤、原始神经外胚叶肿瘤、小圆细胞肿瘤进行鉴别。
也可用于鉴别胸腺上皮性肿瘤。
CD117 是胃肠道间质瘤的特异性标记物,可用于指导格列卫药物治疗。
免疫组化试剂
免疫组化免疫组化是组织化学的一种,它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色,并借助显微镜观察其颜色的变化,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质。
免疫组化试剂盒:Vector Laboratories公司VECTASTAIN@ ABC免疫组化试剂盒:Vector公司于1977年率先开发出了生物素-亲和素系统,该产品系列是检测方法上的重要革命。
其后,公司发展出ABC技术(Avidin : Biotinylated Enzyme Complex Technology,亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术),并建立了著名的VECTASTAIN®ABC系统,目前,该系统被视为最灵敏、最可靠与最有效的染色系统,并被广泛应用于免疫组织化学、免疫电镜、原位杂交与凝集素化学中。
ABC技术利用生物素和卵白素具有极高亲和性的生物学特征,将卵白素和生物素化辣根酶按照一定的比例混合,形成ABC复合物。
该法亦被称作三步法,第一步为biotin化二抗和一抗结合,第二步为avidin(亲和素,A液)和二抗上的biotin结合,第三步为HRP偶联的biotin(B液)和avidin结合,而HRP再催化底物显色完成染色。
试剂盒组份:2ml试剂A(Avidin DH溶液)2ml试剂B(生物素化的酶)1ml生物素化的二抗(1.5mg anti-IgG/0.5mg anti-IgM抗体/2.1mg通用抗体)3ml阻断血清其中standard试剂盒只含有试剂A和试剂BVECTASTAIN®ABC系列产品VECTASTAIN®ABC-HRP Kits(辣根过氧化物酶)最通用的系统,使用范围广VECTASTAIN®ABC-AP Kits(碱性磷酸酶)灵敏度较高,染色密度较低,适于形态学染色非常重要的组织VECTASTAIN®ABC-GO Kits(葡萄糖氧化酶)灵敏度较低,适用于组织内源性HRP或AP 含量比较高的组织,常与HRP或AP系统配合进行双染。
免疫组化(SP法)原理步骤及试剂
免疫组化原理步骤及试剂原理抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。
众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。
免疫组化正是利用这一特性,即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以其作为抗原或半抗原去免疫实验动物,制备特异性抗体,再用这种抗体(第一抗体)作为抗原去免疫动物制备第二抗体,并用某种酶(常用辣根过氧化物酶)或生物素等处理后再与前述抗原成分结合,形成抗原 - 一抗 - 二抗复合物,将抗原放大,由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。
通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细胞或组织中的化学成分,在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。
组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。
分类(常用)1、免疫荧光方法最早建立的免疫组织化学技术。
它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。
当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。
由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用比较广。
2、免疫酶标方法免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。
基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。
免疫酶标技术是目前定位准确、对比度好、染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。
免疫组化常用试剂
免疫组化常用试剂免疫细胞化学常用试剂介绍佚名一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。
但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。
某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。
因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)的化学性质,并根据需要来选择适宜的固定剂(或固定方法)以及改进固定条件。
目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。
在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)试剂:多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1n NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续浸泡固定2~24h。
另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛 40g蒸馏水 400mlB液:Na2HPO4·2H2O 16.88g蒸馏水 300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水 200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH 或1N HCl 将pH调至7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至1000ml充分混合,4℃冰箱保存备用。
常用免疫组化标记物
常用免疫组化指标的意义Ki-67 为细胞增值的一种标记,在细胞周期G1、S、G2、M 期均有表达, G0 期缺如,其和很多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后亲密有关。
PCNA(增埴细胞核抗原 )。
多半腺癌表达CEARb (retinoblastoma 视网膜母细胞瘤 )基因是肿瘤克制基因,调理细胞周期。
P53 在免疫组化中均为突变型,阳性率越高,预后约差。
野生型半衰期很短 Nm23 是转移克制基因,其阳性表达和肿瘤转移呈负有关。
E-Ca, E钙粘附蛋白,介导细胞间粘连作用的跨膜糖蛋白,其功能丧失惹起细胞之间连结的损坏,主要用于肿瘤侵袭和转移方面的研究。
PS2(雌激素调理蛋白),其表达和 ER表达有关,可作为内分泌治疗和预后判断的指标之一。
CK18,低分子量角蛋白,主要标记各样单层上皮包含腺上皮,而复层鳞状上皮常阴性,主要用于腺癌诊疗。
CK19,散布于单层上皮和间皮,常用于腺癌诊疗,肝细胞不表达,而胆管为阳性反响Hep par 1,肝细胞抗原,正常肝细胞和高分化肝细胞癌阳性,低分化肝细胞癌多弱阳性或阴性。
CK20,用于胃肠道腺癌、卵巢黏液性肿瘤、皮肤 Merkel 细胞癌诊疗。
鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜和卵巢非黏液性肿瘤常阴性。
CK7卵巢、肺和乳腺上皮常阳性,结肠、前列腺、胃肠道上皮阴性。
Villin 绒毛蛋白,正常组织中,villin 往常只表达于有刷状缘的细胞上,如胃肠道上皮细胞、胰腺和胆管上皮细胞以及肾本质的上皮细胞中(特别是近曲小管)。
Villin 在胃肠道癌、胰腺癌、胆囊癌和胆管癌组织中有很高的表达率,拥有显然腺样构造的肿瘤上没有 villin 表达,则这个肿瘤为胃肠道、胰腺、胆囊或胆管根源的可能性极低。
乳腺癌也常常成为女性患者未知原发部位转移癌要鉴识清除的一种疾病。
由于在转移癌组织上察看到显然的 villin 免疫组化阳性染色,则这个肿瘤就极不行能为乳腺根源。
其余 villin 免疫组化染色往常为阴性表达的肿瘤还有:如卵巢浆液性癌、尿道移行细胞癌和前列腺癌。
常用免疫组化试剂(类别)介绍
常用免疫组化试剂(类别)介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性: 1、细胞角蛋白/cytokeratin、CK: 目前,商品化得细胞角蛋白有20多种,不同得分子量代表不同类型得上皮标志。
通常将CK分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量).理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量得CK;复层上皮多表达高分子量得CK;移形上皮(膀胱)与假复层上皮(呼吸道得被覆上皮)既表达低分子量得CK,也表达高分子量得CK。
在癌组织中,低分子量得CK多在腺癌中表达,高分子量得CK多在鳞癌中表达.目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CK,某些上皮可含2-10种不同分子量得CK。
因此,目前试图应用单一得CK免疫表型来确定某种特定得上皮性肿瘤就是不可能得。
同样,应用CK来区别腺癌、类癌与间皮瘤也就是困难得。
因此,CK得免疫组化结果判断就是一个较为复杂得问题,在应用这类标记物作为腺癌与鳞癌得鉴别应特别注意。
有必要时,应联合用多种CK加以综合判断。
CK得阳性表达还包括有间变癌、双向分化得滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等. CK得阴性表达有:副节瘤单向分化得滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外).在判断CK免疫组化结果时应注意几点:(1)CK得单克隆抗体优于多克隆抗体;(2)CK常出现斑点状得假阳性反应,应注意识别; (3)虽然大多数CK多在胞浆表达,但CK17多在胞核表达;(4)绝大多数CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率与染色强度;(5)部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见有CK表达,在诊断时应注意;(6)淋巴结、扁桃体与脾组织中得滤泡外得网织细胞含有CK8与18以及desmin,在判断淋巴结转移癌与肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断. 2、上皮膜抗原(epithelialmembraneantigen/EMA):EMA就是上皮细胞分泌得一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其就是分化差得癌EMA有时可呈强阳性表达。
临床常用免疫组化标记物及意义
临床常用免疫组化标记物及意义免疫组化(immunohistochemistry,IHC)是一种广泛应用于临床病理学领域的技术,用于检测组织样本中特定蛋白质的表达和定位信息。
这种技术的基本原理是使用特异性的抗体与目标蛋白质结合,然后通过化学反应或荧光染色方法来显示出蛋白质的表达情况。
在临床实践中,免疫组化常用于诊断肿瘤包括癌细胞的分类、分级以及分子靶向治疗的预测。
下面将介绍一些常用的免疫组化标记物及其意义。
1. 细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)2.细胞膜蛋白(CD)细胞膜蛋白是细胞膜上的免疫组化标记物,常用于诊断和分类各种肿瘤。
例如,CD20和CD3是血液系统恶性肿瘤(如淋巴瘤)的诊断标记物;CD34用于判断肿瘤的血管生成和预后。
3. 平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle Actin,SMA)平滑肌肌动蛋白是平滑肌组织中的一个标志性蛋白,常用于诊断和分类平滑肌源性肿瘤,如平滑肌肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤。
4. 雌激素受体和孕激素受体(Estrogen Receptor,ER和Progestrone Receptor,PR)雌激素受体和孕激素受体的阳性表达在乳腺癌诊断和治疗中具有重要的价值。
ER和PR的表达程度可以预测乳腺癌对内分泌治疗的敏感性,指导治疗方案的选择。
5. 肿瘤抑制基因(Tumor Suppressor Gene,TSG)蛋白常用的TSG蛋白包括p53、PTEN、BRCA1等。
这些蛋白的突变或缺失与肿瘤的发生和进展密切相关。
免疫组化检测这些TSG蛋白的表达情况可以帮助评估肿瘤的分子异常,对于预测预后和指导治疗具有重要意义。
6.基因突变相关蛋白近年来,免疫组化也逐渐应用于检测肿瘤常见的基因突变或扩增,其中包括EGFR、HER-2、ALK、BRAF等。
这些突变和扩增与肿瘤的治疗反应和预后关系密切。
免疫组化检测这些基因突变相关蛋白的表达情况可以为肿瘤靶向治疗的选择和预后评估提供重要信息。
常用免疫组化试剂介绍
常用免疫组化试剂介绍概述免疫组化(IHC)是一门通过检测特定抗原在组织切片中的表达程度来揭示组织形态和细胞化学等方面信息的技术。
由于IHC是一种定性分析技术,所以该方法需要与定量技术(如分子生物学)结合使用,从而得到更准确的数据。
IHC涉及到多种试剂,其标记原理和表现形式各异,能够检测的抗原种类也不同。
本文将对常用的IHC试剂进行介绍,以此为指导,让大家更好地了解和应用IHC技术。
常用的免疫组化试剂抗原修复试剂抗原修复试剂(Antigen Retrieval)用于在组织样本中使细胞内蛋白与抗体亲和性和特异性增加。
这种试剂可通过热处理(如高压)或化学处理(如酶样蛋白和酸性处理)来复原被检测抗原的结构和功能。
常用的抗原修复试剂包括:EDTA、Tris、Citrate等。
原位杂交试剂原位杂交试剂(In Situ Hybridization)可检查DNA或RNA分子的特异性结合情况。
这种试剂可将RNA等分子与特定热稳定的蛋白质结合,用于检测基因突变等。
常用的原位杂交试剂包括:流式胶体金试剂、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、双链RNA原位杂交等。
细胞计数试剂细胞计数试剂(Cell Counting)用于获得细胞数量或结构变化。
这种试剂通常用于确定某一类细胞的数量、细胞计数和分离、细胞生长和分裂的应用。
常用的细胞计数试剂包括:皮质醇、14C-labeled thymidine等。
细胞信号转导试剂细胞信号转导试剂(Cell Signaling)用于研究细胞分子级别的通讯系统,并采取措施以确定物质在细胞内的作用机理。
常用的细胞信号转导试剂包括:抗体、试剂原和阻断类似物等。
同型抑制剂同型抑制剂(Isotype Control)用于在IHC实验中作为实验设计的对照组,以检测所观察的抗原与探测剂结合的特异性表现。
常用的同型抑制剂包括:IgG1、IgG2a和IgG2b等。
情况控制试剂情况控制试剂(Condition Control)用于确定IHC试验的最佳条件,包括温度、缓冲液、酸碱程度等。
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂产品是一种重要的医疗诊断工具,广泛应用于临床诊断、疾病预防和治疗等领域。
为了规范免疫组化类诊断试剂产品的分类和管理,制定了一系列的指导原则。
一、免疫组化类诊断试剂产品的定义免疫组化类诊断试剂产品是指通过免疫学原理,利用抗体与抗原的特异性结合作用,对生物样本中的特定分子进行检测和定量的试剂产品。
二、免疫组化类诊断试剂产品的分类根据免疫组化类诊断试剂产品的不同特点和用途,可以将其分为以下几类:1. 抗体试剂:包括单克隆和多克隆抗体试剂,用于检测特定抗原或蛋白质。
2. 标记试剂:包括酶标记试剂、荧光标记试剂、放射性标记试剂等,用于标记抗体或抗原,以便于检测和定量。
3. 控制试剂:包括阳性对照、阴性对照、内标和外标等,用于检测试剂的准确性和可靠性。
4. 辅助试剂:包括缓冲液、洗涤液、稀释液等,用于制备和处理样本。
三、免疫组化类诊断试剂产品的管理为了确保免疫组化类诊断试剂产品的质量和安全性,需要进行严格的管理和监管。
具体措施包括:1. 产品注册:免疫组化类诊断试剂产品需要进行注册,获得批准后才能上市销售。
2. 质量控制:生产企业需要建立质量管理体系,确保产品的质量和稳定性。
3. 标签标识:产品标签需要标注产品名称、批号、生产日期、有效期等信息,以便于追溯和管理。
4. 储存运输:产品需要储存在干燥、阴凉、避光的环境中,运输过程中需要避免震动和高温。
5. 应用范围:产品应用范围需要明确,不能用于未经批准的用途。
综上所述,免疫组化类诊断试剂产品是一种重要的医疗诊断工具,需要进行严格的分类和管理。
只有确保产品的质量和安全性,才能更好地服务于临床诊断和治疗。
免疫组化原理步骤及试剂
免疫组化原理步骤及试剂免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种广泛应用于生物医学领域的实验技术,用于检测组织切片中特定抗原的分布和表达水平。
它结合了免疫学和组织学的原理,能够在组织切片上定位和检测抗原,并通过染色方法将抗原可视化,从而实现对抗原的定性和定量分析。
免疫组化实验的步骤通常包括固定、脱脂、抗原修复、抗体和检测步骤。
下面将详细介绍每个步骤的操作和常用试剂。
1.组织固定:组织固定的目的是保持组织结构完整并固定细胞的抗原。
常用的固定试剂包括10%中性缓冲福尔马林(10% neutral buffered formalin,NBF)和乙醇等。
2.脱脂:脱脂是将组织切片中的脂质去除,以提高抗体对抗原的结合效率。
常用的脱脂试剂包括二甲苯、甲醛和乙醚等。
3.抗原修复:抗原修复是为了使被固定的组织恢复原样,增强抗原的可检测性。
抗原修复的方法包括热处理、酶解法和pH调整等。
常用的抗原修复试剂包括热解剂例如EDTA缓冲液、Tris-EDTA缓冲液,酶解剂例如胰蛋白酶和蛋白酶K,以及甲酸、盐酸等酸性溶液。
4.抗体:5.检测:检测步骤用于将抗原-抗体复合物可视化。
这通常通过染色方法完成。
常用的染色方法包括免疫酶标记、免疫荧光和免疫金标记等。
免疫组化实验所需的试剂种类繁多,下面列举一些常用的试剂:1. NBF(10% neutral buffered formalin):用于组织固定,保持组织形态完整。
2.二甲苯:用于脱脂步骤,去除组织中的脂质。
3.甲醛:用于脱脂步骤。
4.乙醚:用于脱脂步骤。
5.EDTA缓冲液:用于抗原修复的热解剂。
6. Tris-EDTA缓冲液:用于抗原修复的热解剂。
7.胰蛋白酶:用于抗原修复的酶解剂。
8.蛋白酶K:用于抗原修复的酶解剂。
9.盐酸:用于抗原修复的酸性溶液。
10.一抗:选择特异性良好的一抗抗体,常用的有多克隆和单克隆抗体。
11.二抗:用于检测一抗结合的抗体,常用的二抗有反兔、反小鼠或反人的多克隆抗体。
免疫组织化学染色试剂
免疫组织化学染色试剂免疫组织化学染色试剂是一种用于免疫组织化学染色的特殊试剂,通过与目标分子发生特异性反应,可使其在组织切片上呈现出明显的颜色反应,从而实现对目标分子的定位和定量分析。
免疫组织化学染色试剂主要包括抗体、底物和显色剂三个主要组成部分。
抗体是免疫组织化学染色的核心,其具有高度的特异性,能够与目标分子发生特异性结合。
根据所需检测的目标分子不同,可选择相应的一抗或二抗进行染色。
底物是抗体与目标分子结合后的标记物,一般通过与抗体结合的酶或荧光染料作为标记物,使其在组织切片上呈现出明显的染色信号。
显色剂是底物与标记物反应后形成的可见颜色产物,通过显色剂的作用,可以直观地观察和分析目标分子的分布和表达水平。
在免疫组织化学染色中,常用的试剂有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)等酶标记试剂,以及荧光素酶、碱性磷酸酶和荧光染料等荧光标记试剂。
HRP和AP是常用的酶标记试剂,其优点是灵敏度高、信号稳定,适用于常规显微镜观察。
荧光标记试剂具有高度的灵敏度和多色选择性,适用于荧光显微镜观察。
免疫组织化学染色试剂的选择要根据实验需求和目标分子的特性来确定。
首先要选择合适的抗体,确保其与目标分子具有高度的特异性和亲和力。
其次,根据实验的目的和所需的信号强度,选择合适的标记物和显色剂。
最后,根据实验的具体要求和条件,选择适当的染色方法和试剂浓度,以确保最佳的染色效果。
免疫组织化学染色试剂在生命科学研究中起着重要的作用。
通过对组织切片的染色,可以实现对目标分子的定位和定量分析,从而揭示其在组织中的表达和分布特点。
免疫组织化学染色技术广泛应用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学、神经科学等领域的研究中,为疾病的发生机制和治疗提供了重要的实验依据。
免疫组织化学染色试剂是一种重要的实验工具,能够实现对目标分子在组织切片中的定位和定量分析。
通过选择合适的抗体和标记物,以及优化试剂浓度和染色方法,可以获得清晰、准确的染色结果。
常用免疫组化试剂介绍
常用免疫组化试剂介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性:1、细胞角蛋白/cytokeratin、CK:目前,商品化得细胞角蛋白有20多种,不同得分子量代表不同类型得上皮标志。
通常将CK分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量)。
理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量得C K;复层上皮多表达高分子量得CK;移形上皮(膀胱)与假复层上皮(呼吸道得被覆上皮)既表达低分子量得CK,也表达高分子量得CK。
在癌组织中,低分子量得CK多在腺癌中表达,高分子量得CK多在鳞癌中表达。
目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CK,某些上皮可含210种不同分子量得CK。
因此,目前试图应用单一得CK免疫表型来确定某种特定得上皮性肿瘤就是不可能得。
同样,应用CK来区别腺癌、类癌与间皮瘤也就是困难得。
因此,CK得免疫组化结果判断就是一个较为复杂得问题,在应用这类标记物作为腺癌与鳞癌得鉴别应特别注意。
有必要时,应联合用多种CK加以综合判断。
CK得阳性表达还包括有间变癌、双向分化得滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。
CK得阴性表达有:副节瘤单向分化得滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外)。
在判断CK免疫组化结果时应注意几点:(1) CK得单克隆抗体优于多克隆抗体;(2) CK常出现斑点状得假阳性反应,应注意识别;(3) 虽然大多数CK多在胞浆表达,但CK17多在胞核表达;(4) 绝大多数CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率与染色强度;(5) 部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见有CK表达,在诊断时应注意;(6) 淋巴结、扁桃体与脾组织中得滤泡外得网织细胞含有CK8与18以及desmin,在判断淋巴结转移癌与肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。
2、上皮膜抗原(epithelial membrane antigen/EMA):EMA就是上皮细胞分泌得一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其就是分化差得癌EMA有时可呈强阳性表达。
免疫组化试剂
常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。
常用试剂有:1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS),稀释抗体和洗片子用;2、清洁液、纯水,洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片,防止脱片4、固定液:4%多聚甲醛;5、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋;6、抗原修复液:枸橼酸缓冲液(pH6.0);7、H2O2,灭活内源性过氧化物酶8、血清清蛋白(BSA)封闭液;9、显色液:根据酶来选择,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫荧光则不需要10、树胶封片液一般的sp法步骤啊,具体如下:1. 烤片,68℃,20分钟,2. 常规二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水;二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min3.阻断灭活内源性过氧化物酶:3%H2O2 37℃孵育10min,PBS冲洗3X5min;4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液(PH 6.0)中用煮沸(95℃,15-20min),自然冷却20min 以上,再用冷水冲洗缸子,加快冷却至室温,PBS冲洗3X5min。
5. 正常羊血清工作液封闭,37℃10 min,倾去勿洗.6. 滴加一抗4℃冰箱孵育过夜,PBS冲洗3X5min(用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照);滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min;7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液,37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min;8. DAB/ H2O2反应染色,自来水充分冲洗后,苏木素复染,常规脱水,透明,干燥,封片。
1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则
免疫组化类诊断试剂产品分类界定指导原则免疫组化类诊断试剂是临床诊断的重要工具之一,广泛应用于疾病的诊断、分型和预后评估等方面。
为了规范和统一免疫组化类诊断试剂的分类,制定了一系列的指导原则。
本文将介绍关于免疫组化类诊断试剂产品分类界定的指导原则,并分享对这一主题的观点和理解。
一、免疫组化类诊断试剂的定义和作用免疫组化类诊断试剂是指利用免疫反应原理和技术,对疾病相关分子或细胞进行检测和诊断的试剂。
它能够通过标记免疫试剂与待检测目标结合,从而发现、定量或定位特定分子或细胞,为临床诊断提供重要依据。
二、免疫组化类诊断试剂产品分类的基本原则1. 根据试剂检测的靶点分子或细胞进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以针对不同的靶点分子或细胞进行检测,如蛋白质、酶、细胞膜分子等。
根据不同的靶点,可以将试剂分为抗体试剂、标记物试剂、底物试剂等不同类型。
2. 根据试剂的用途和应用进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以用于不同的临床检测目的,如肿瘤诊断、感染性疾病诊断等。
根据应用领域的不同,可以将试剂分为免疫组化肿瘤标志物试剂、免疫组化感染性疾病诊断试剂等。
3. 根据试剂的技术原理进行分类。
免疫组化类诊断试剂可以采用不同的技术原理进行检测,如免疫组化反应、免疫组化染色等。
根据技术原理的不同,可以将试剂分为免疫组化免疫反应试剂、免疫组化染色试剂等。
三、免疫组化类诊断试剂产品分类的回顾性总结通过对免疫组化类诊断试剂产品分类的研究和实践,总结以下几点:1. 免疫组化类诊断试剂的分类应该考虑到临床实际需求和应用的目的,以便为医生提供准确、可靠的诊断结果。
2. 针对不同的靶点分子或细胞,选择适当的试剂类型和技术原理进行分类,有利于提高诊断的敏感度和特异性。
3. 在分类过程中,应该充分考虑以从简到繁、由浅入深的方式进行,以帮助医生和研究人员更好地理解和应用免疫组化类诊断试剂。
4. 免疫组化类诊断试剂的分类应该与其他临床检测方法相衔接,形成有机的整体,为综合诊断和治疗提供更全面、准确的信息。
免疫组化常用标记物
免疫组化常用标记物免疫组化常用标记物一、常用标志物1. CD15(LeuM1)---(阳性部位:细胞膜)。
是一种由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖组成的碳水化合物抗原,又称半抗原χ,是粒/单核细胞相关抗原。
免疫组织化学表达:成熟粒细胞、激活的淋巴细胞(主要是T淋巴细胞)、R-S细胞、大多数腺癌等。
2. 癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)(CD66e)---(阳性部位:细胞膜/浆)。
癌胚抗原是表达于胎儿上皮细胞的一种糖蛋白,分子量为180kDa。
存于某些恶性肿瘤组织尤其是内胚层来源发肿瘤中,大多数胃肠道(包括胰腺)和肺腺癌均有表达,少量成人上皮细胞和良性肿瘤亦可表达。
CEA主要用于标记上皮性肿瘤,尤其是腺上皮来源的腺癌。
3.嗜铬素A(chromogranin A,CgA)---(阳性部位:细胞浆)。
嗜铬素是位于神经分泌颗粒内的酸性糖蛋白家族,是一组可溶性酸性蛋白,分子量为76~1 20 kDa,分布广泛。
含量最丰富的是嗜铬素A,另两个是嗜铬素B和嗜铬素C。
几乎所有的神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素。
嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞的分泌颗粒中,也广泛分布于所有含有颗粒的内分泌细胞和神经内分泌细胞来源的肿瘤细胞。
此抗体可以识别嗜铬素A抗原羧基末端的片段,而不与氨基末端的片段反应,主要用于标记神经内分泌细胞及其来源的肿瘤。
对小细胞癌进行抗原修复可提高检测的敏感性。
4.细胞角蛋白(cytokeratin pan,广谱CK)--- AE1/ AE3(阳性部位:细胞浆)。
此抗体可以识别绝大部分酸性细胞角蛋白(Ⅰ型/低分子量)和碱性细胞角蛋白(Ⅱ型/高分子量)。
用于标记上皮及上皮来源的肿瘤,特别是对鉴别和判断转移性肿瘤是否为上皮源性具有一定的意义。
5.细胞角蛋白5/6(cytokeratin 5/6,CK5/6)---(阳性部位:细胞浆)。
在正常组织中,鳞状上皮和导管上皮的基底细胞以及部分的鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞和间皮细胞阳性,腺上皮细胞阴性。
免疫组化实验--全套试剂耗材
免疫组化实验试剂耗材大全华越洋---------------------------- 0.1%胰蛋白酶消化液waryong 10ml 110多聚甲醛merk 25g 504%多聚甲醛waryong 500ml 22010X多聚赖氨酸waryong 10ml 260抗荧光衰减封片剂waryong 25ml 230防脱载玻片waryong 50片310mayer'苏木素染液(免疫组化)waryong 100ml 410封闭用正常绵羊/山羊/兔/人血清waryong 10ml 75弗氏不完全佐剂sigma 10ml 180弗氏完全佐剂sigma 10ml 200柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L PH6.0 waryong 1L 10DAB amresco 1g 13520XDAB显色液 A,B液各1.5ml waryong 3ml 95NBT amresco 100mg 95BCIP amresco 100mg 310BCIP/NBT底物显色试剂盒waryong 25ml 210PBST(PH7.4)抗体稀释液waryong 1ml 25一抗稀释液waryong 100ml 390HRP标记抗体稀释液waryong 100ml 390AP标记抗体稀释液waryong 100ml 390荧光抗体稀释液waryong 50ml 110免疫组化名称规格价格Super Polymer-二步法IHC试剂盒3ml35818ml1598兔Streptavidin-HRP试剂盒3ml19818ml998鼠Streptavidin-HRP试剂盒3ml19818ml998兔∕鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒3ml25818ml1198山羊抗兔IgG,Biotin(IHC工作液)3ml6818ml298山羊抗鼠IgG,Biotin(IHC工作液)3ml6818ml298山羊抗兔∕鼠IgG,Biotin(IHC工作液)3ml9818ml498 Streptavidin-HRP(IHC工作液)3ml9818ml49860ml258 AEC底物显色试剂盒20ml98 BCIP∕NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(40x)40ml198 BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂40ml229改良型苏木素(IHC常用复染试剂)10ml68柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100x)100ml68EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50x)100ml68封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)10ml68内源性过氧化物酶封闭液10ml68内源性碱性磷酸酶封闭液10ml68Biotin标记抗体稀释液20ml中性树胶100g98水性封片剂10ml98 Super Polymer-二步法IHC试剂盒(带DAB显色液)3ml39818ml1698兔Streptavidin-HRP试剂盒(带DAB显色液)3ml25818ml1098鼠Streptavidin-HRP试剂盒(带DAB显色液)3ml25818ml1098兔∕鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒(带DAB显色液)3ml29818ml1298。
常用免疫组化试剂介绍完整版
常用免疫组化试剂介绍完整版免疫组化试剂是一类用于检测细胞和组织中特定分子的试剂。
它们能够与目标分子发生特异性的结合反应,通过显色、荧光等方式实现目标分子的定位和检测。
常用的免疫组化试剂有抗体、底物、荧光染料等。
下面将详细介绍常用的免疫组化试剂。
一、抗体单克隆抗体:单克隆抗体是由单个克隆的B细胞分泌的抗体组成。
它们具有更高的特异性和一致性,适用于特定的免疫组化实验。
单克隆抗体一般通过酶联免疫吸附试验或杂交瘤技术获得。
二、底物底物是一种被特定酶催化后能够产生染色或荧光信号的化学物质。
在免疫组化实验中,常用的底物有DAB、VIP、AP、HRP等。
DAB:DAB(3,3'-二氨基联吡啶)是一种常用的免疫组化染色底物。
当DAB与过氧化物酶结合后,在特定条件下会产生棕色沉淀物,用于检测目标分子的位置。
VIP:VIP(维珍纳胶体阳离子)是一种特殊的底物,其在经过过氧化物酶催化后,形成带有阳离子电荷的胶体颗粒。
VIP用于染色后,可以形成黑色沉淀物。
AP:AP(碱性磷酸酶)是一种常用的底物,可以和特定基质反应生成可见或荧光信号。
AP基质有两种常用的类型,一种是快速红色溶液(Fast Red),另一种是紫色溶液。
HRP:HRP(过氧化物酶)是一种广泛使用的底物,在过氧化物酶的作用下可以产生明亮的荧光或染色信号。
HRP染色通常呈现为褐色或黑色。
三、荧光染料荧光染料是一种通过吸收特定波长的光线并在另一个波长下发射荧光的化合物。
免疫组化实验中常用的荧光染料有FITC、TRITC、Cy3、Cy5等。
FITC:FITC(荧光异硫氰酸酯或荧光同硫氰酸酯)是一种常用的绿色荧光染料,其在激发波长为488nm的波长下产生绿色荧光。
TRITC:TRITC(荧光异硫氰酸酯)是一种常用的红色荧光染料,其在激发波长为568nm的波长下产生红色荧光。
Cy3:Cy3是一种荧光发色团,其在激发波长为550nm的波长下产生黄绿色荧光。
Cy5:Cy5是一种荧光发色团,其在激发波长为650nm的波长下产生红色荧光。
免疫组化标记物
免疫组化标记物免疫组化常用抗体标记物(一)上皮源性标记物1、一般性标记物(1)CK(角蛋白)CK亚型:CK5/6、CK7、CK8、CK10/13、CK18、CK19、CK20 (2)EMA(上皮膜抗原)2、特异性和(或)相对特异性上皮标记物(1)CEA(癌胚抗原,标记胃肠道癌、肺腺癌等)(2)CA242(肿瘤相关粘液抗原、标记胰腺癌、结、直肠癌等)(3)TG(甲状腺球蛋白,标记甲状腺癌)(4)PSA(前列腺特异性抗原,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(5)PSAP(前列腺特异性酸性磷酸酶,主要用于前列腺癌和转移性前列腺癌的诊断)(6)34βE12(高分子量细胞角蛋白,标记前列腺基底细胞)(7)AFP(甲胎蛋白,标记肝癌、内胚窦癌等)(8)Hepatocyte(标记肝细胞癌)(9)β-HCG(β绒毛膜促性腺激素,标记胎盘滋养叶细胞肿瘤、生殖细胞肿瘤)(10)CA125(卵巢癌抗原)(二)间叶源性标记物肌源性标记物1、Desmin(Des,结蛋白)2、Actin(肌动蛋白)3、SMA(平滑肌肌动蛋白)4、MSA(肌特异性肌动蛋白)5、Myosin(肌球蛋白)6、Myoglobin(MG,肌红蛋白)7、Myogen(肌浆蛋白)8、MyoD1(肌调节蛋白)(三)血管源性标记物1、FVⅧRAg(第8因子相关抗原)2、CD314、UEA-15、BNH9(四)组织细胞源性标记物1、CD68/KP-12、Lysozyme(溶菌酶)3、α-AT(α1-抗胰蛋白酶)4、α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)5、Mac387(五)淋巴造血组织源性标记物1、全淋巴细胞(1)CD45/LCA(白细胞共同抗原)(2)TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)(3)CD30/ki-12、全B细胞(1)Igκ(2)Igλ(3)CD20/L26(4)CD79α(5)BLA36(B淋巴细胞抗原)(6)Pax-5(B细胞系特异性激活蛋白)3、B细胞亚型(1)CD10(2)CD21(标记滤泡性树突状细胞)(3)CD23(4)CD35(标记滤泡性树突状细胞)(5)CD384、全T细胞(1)CD3(2)CD5(4)CD45RO/UCHL-15、T细胞亚型(1)CD1α(2)CD4(3)CD86、NK细胞(1)CD56(2)CD57/Leu-7(3)CD16/Leu-117、粒细胞和单核细胞(1)CD11c/LeuM5(2)CD15/LeuM5(3)Lysozyme(溶菌酶)(4)α-AT(α1-抗胰蛋白酶)(5)α1-ACT(α1-抗胰糜蛋白酶)(6)CD68(7)S-100蛋白(8)Mac3878、其他(1)EMA(上皮细胞膜抗原)(2)CD99(尤因肉瘤标记物)(3)ALK-1(间变性淋巴瘤激酶)(4)HLA-DR(5)Bcl-2(6)Bcl-6(7)Bcl-10(8)Ki-67(9)CyclinD1(周期素D1)(10)CD25(六)神经源性标记物1、S-1002、NSE(神经原特异性烯醇化酶)3、Leu-74、Neurofilament(NF,神经微细蛋白)5、GFAP(胶质纤维酸性蛋白)(七)神经内分泌源性标记物1、激素标记物(1)CA(儿茶酚胺)(2)5-HT(5-羟色胺)(3)垂体激素GH(促生长素)PRL(催乳素)ACTH(促肾上腺皮质激素)TSH(促甲状腺素)FSH(促滤泡素)LH(促黄体素)(4)甲状腺TG(甲状腺球蛋白)CT(降钙素)(5)甲状旁腺PTH(甲状旁腺素)(6)胰岛Insulin(胰岛素)Glucagon(胰高糖素)VIP(舒血管肠肽)PP(胰多肽)Someitostatin(生长抑素)Gastrin(胃泌素)2、非激素标记物(1)NSE(神经原特异性烯醇化酶)(2)CgA(嗜铬素A)(3)SY(突触素)3、激素受体(1)ER(雌激素受体)(2)AR(雄激素受体)(3)PR(孕激素受体)(八)细胞增殖标记物1、PCNA(细胞增殖核抗原)2、Ki-67(九)黑色素标记物1、S-100蛋白2、HMB453、Melanoma(十)癌基因和(或)抑癌基因1、Bcl-22、C-erbB-23、P534、P16(多肿瘤抑制基因)5、nm23(十一)病原体标记物1、Myocobacterium Bovis(分枝杆菌,抗卡介苗)2、HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原)3、HBcAg(乙型肝炎病毒核心抗原)4、HPV(人乳头状瘤病毒)5、HTLV-1(人类T细胞白血病病毒)免疫组化套餐泌尿与男性生殖系统肿瘤1.前列腺癌:CK、P63、34?E12、PSA、P504S(9AMAC)、AR2.前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S3.肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD104.肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-675.膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P636.精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4淋巴造血系统肿瘤7.胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV*8.霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX-59.非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD4310.间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*11.弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-6712.小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT13.T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin14.套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-6715.T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B16.淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD2017.Burkitt淋巴瘤:CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki-67、EBV*、T dT18滤泡性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl-2、Bcl-6、Ki6719.脂膜炎样T细胞淋巴瘤:CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA-1、EBV *20.浆细胞瘤:CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ*、λ*21.坏死性淋巴结炎:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、C D16322.粘膜相关淋巴瘤:CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、Cy clinD123.血管免疫母细胞性淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α24.组织细胞肉瘤:S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD4526.指状突树突细胞肉瘤/肿瘤:S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD4527.滤泡树突细胞肉瘤/肿瘤:CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、E MA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB4528.肥大细胞肿瘤:CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20消化系统肿瘤29.胃癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**30.肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、AB/PAS**31.肝细胞癌:AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、P53、HbsAg、Hepatoc yte32.肝胆管细胞癌:CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8/18、CK19、Ki-67、Hepatocyte、HbsAg33.食道癌:P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、P6334.胰腺癌:CEA、P53、Ki-67、CDX-2、GST-π、Villin、CK7、CK20、35.胰岛细胞瘤:CD56、Syn、CgA、Ki-67、Insulin、CK8/18、CK1939.肝炎病毒:HbsAg、HbcAg、HCV涎腺肿瘤37.涎腺粘液性囊腺癌:CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin-heavy chain38.上皮肌上皮癌:CK、P63、SMA、Vimentin、S-100、Myosin-heavy chain39.导管腺癌:CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin-heavy chain40.多形性腺瘤:CK、P63、SMA、S-100、GFAP、Myosin-heavy chain神经内分泌肿瘤41.神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/1842.肺神经内分泌癌:CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8/18、CD99、TTF-1、P6 3、Sp-B43.甲状腺乳头状癌:Tg、TTF-1、CK19、HMBE-1、Gelactin-3、Ki-67、TPO44.甲状腺髓样癌:T g、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA45.肾上腺皮质癌:CK、CEA、Inhibin、Melan-A、CD10、CgA、Syn、S10046.肾上腺嗜铬细胞瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、47.肾上腺外副神经节瘤:Syn、CgA、S-100、CK、EMA、Inhibin、Melan-A、GFAP48.Merkel细胞癌:CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99软组织肿瘤49.促纤维增生性小圆细胞肿瘤:CK、EMA、CD99、S-100、Des、Syn、CgA、50.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin51.上皮样血管平滑肌脂肪瘤:HMB45、S-100、Melan-A、CD34、CK、SMA、Vime ntin52.上皮样血管瘤:CK、CD34、CD31、CD68、EMA53.孤立性纤维性肿瘤:CD34、Bcl-2、CD99、S-100、CK、Vimentin、SMA54.间皮瘤:CK5/6、HMBE-1、Calretinin、TTF-1、D2-40、CK、WT155.横纹肌(肉)瘤:MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD9956.滑膜肉瘤:EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S-100、Bcl-2、Vimentin57.皮隆突/恶纤组:CD34、CD68、S-100、SMA、Vimentin58.血管球瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-10059.血管周肌细胞瘤:EMA、CK、CD34、SMA、S-100、Desmin60.梭形/多形性脂肪:CD34、SMA、S-100、HMB45、CK、CD31、CD6861.脊索/副脊索瘤:SMA、S-100、EMA、CK、GFAP、CD6862.腱鞘巨细胞瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin63.平滑肌(肉)瘤:SMA、MSA、Desmin、CK、S-100、CD34、Vimentin64.软骨母细胞瘤:CD99、S-100、CK、Vimentin65.结节性筋膜炎:CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin66.缺血性筋膜炎:VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin67.肌纤维瘤/肌纤维瘤病:VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin68.硬化性纤维母细胞瘤:VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD3469.乳腺型肌纤维母细胞瘤:DES、CD34、EMA70.钙化性腱膜纤维瘤:VIM、SMA、MSA、CD99、S10071.血管肌纤维母细胞瘤:DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin72.富于细胞性血管纤维瘤:VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA73.项型纤维瘤:VIM、CD34、CD99、DES、Actin74.Gardner纤维瘤:VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR75.钙化性纤维性肿瘤:Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD3 4、CK76.巨细胞血管纤维瘤:CD34、CD99、Bcl-277.韧带样型纤维瘤:Vim、SMA、Des、S10078.脂肪纤维瘤病:CD34、Bcl-2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD9979.炎症性肌纤维母细胞性肿瘤:Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD11780.低度恶性肌纤维母细胞瘤:Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK81.黏液炎症性肌纤维母细胞瘤:Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B转移性肿瘤鉴别82.转移性肺/肝癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CK、AFP、CD34、Hepatoc yte83.转移性肺/胃肠癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、Sp-B、CDX-284. 转移性肺/前列腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、PSA、PSAP85. 转移性肺/甲状腺癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、TG86. 转移性腺/鳞癌:CKAE1、CKAE3、CK8/18、CK5/6、EMA、CD15、P6387. 转移性肺/鼻咽癌:CK7、CK20、Villin、TTF-1、CK、Sp-B、EMA、EBV*88.食道低分化癌/神经内分泌癌:Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5/689.转移性卵巢粘液/浆液性癌:CK7、CK20、Villin、CEA、TTF-1、CA125、CDX-2神经系统肿瘤90.垂体瘤:TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P5391.胶质瘤:GFAP、MBP、Vim、EMA、S-10092.少突胶质细胞瘤:Pax-5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S-100、CD5793.胶质肉瘤:GFAP、CD68、Vim、S-100、Ki-6794.节细胞胶质瘤:Syn、CgA、GFAP、S-100、CD68、Vim、Ki-6795.神经束膜瘤:S-100、EMA、GFAP、CK、Vim96.恶性外周神经鞘瘤:S-100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MB P97.脑膜瘤:GFAP、EMA、Vim、S-10098.神经纤维/神经鞘瘤:GFAP、EMA、Vim、S-100、CK99.中枢神经细胞瘤:GFAP、S-100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin100.室管膜瘤:EMA、CK、S-100、GFAP、Syn、CD57、MBP、101.脉络丛乳头状瘤:GFAP、CK、S-100、Syn、EMA、Ki-67、CgA102.颅咽管瘤:CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki-67103.颅内血管母细胞瘤:CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF乳腺及女性生殖器官104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GC DFP-15105.浸润性筛状癌/腺样囊性癌:ER、PR、HER2、P63、Laminin106.实性神经内分泌癌:ER、PR、HER2、GCDFP-15、CK7、CK20、CgA、Syn 107.子宫内膜样肿瘤/宫颈腺癌:Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK117.非妊娠绒毛膜癌:CK、hPL、?-Hcg恶性肿瘤预后与耐药监测指标P53、Bcl-2、PCNA、Ki67、P-gp、TOPOⅡα、GSTπ宫颈CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki-67、CD68、Pro-EXC1.前列腺癌:CK、P63、34?E12、PSA、P504S(AMACR)、AR25.朗格罕氏细胞增生症/肉瘤:S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD45、CD20750.尤文/PNET/视/嗅/髓母细胞瘤:CD99、S-100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin、Fli-1104.浸润性乳腺癌:P53、Bcl-2、ER、PR、HER2、E-Cadherin、Ki-67、CK7、GC DFP-15、P120-catenin108.子宫内膜间质肿瘤:Vim、CD10、SMA、Inhibin-α109.移行细胞癌:CA125、CK7、CK20、P63、uroplakin III110.颗粒细胞瘤:CD99、Inhibin-α、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA111.卵泡膜瘤-纤维瘤:Vim、Inhibin-α112.硬化性的间质瘤:Vim、Des、SMA、Inhibin-α113.Sertoli-间质细胞瘤:Vim、Inhibin-α、EMA、Ker、ER、PR114.无性细胞瘤:Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100、OCT3/4115.卵黄囊瘤:AFP、CK、CD30、ER、PR116.胚胎性癌:AFP、CD30、CK、OCT3/4。
临床常用免疫组化标记物及意义
临床常用免疫组化标记物及意义临床常用免疫组化标记物及其意义1.引言免疫组化技术是一种常用的实验室技术,通过使用特异性抗体来检测细胞或组织中的特定蛋白质标记物。
这些标记物在临床医学研究中发挥着重要的作用,可以帮助医生进行诊断、鉴定肿瘤分子亚型、预测疾病进展和指导治疗。
本文将探讨几种临床常用的免疫组化标记物及其意义。
2.免疫组化标记物的分类免疫组化标记物可分为细胞内标记物和细胞膜标记物两大类。
细胞内标记物包括细胞核内的标记物和细胞浆内的标记物,常用的有P53、Ki-67、ER、PR等。
细胞膜标记物主要用于检测细胞表面分子的存在和分布情况,常用的有Her2、EGFR、CD20等。
3.临床常用免疫组化标记物及其意义3.1 P53P53是一个重要的细胞周期调节蛋白,广泛应用于肿瘤诊断。
其通过调节细胞周期、DNA修复和程序性细胞死亡等方面的功能来抑制肿瘤的发生和发展。
临床上,通过检测肿瘤组织中P53的表达情况,可以帮助评估肿瘤的预后,指导化疗方案的选择。
3.2 Ki-67Ki-67是一个核蛋白,与细胞增殖紧密相关。
其在体外培养条件下可以作为一种细胞增殖标志物。
在临床上,Ki-67的表达水平可以反映肿瘤的增殖活性,帮助评估肿瘤的侵袭性和预后,并指导治疗策略的选择。
高Ki-67表达的患者往往有较差的预后,可能需要更加积极的治疗。
3.3 ER和PRER和PR是雌激素和孕激素受体,对于乳腺癌的治疗和预后评价非常重要。
ER和PR的阳性表达可以指示患者对激素治疗的敏感性,并在临床上指导激素治疗的方案。
ER和PR的表达水平还与乳腺癌的预后相关,阳性表达患者的预后往往较好。
3.4 Her2Her2是一种酪氨酸激酶受体,被发现在多种肿瘤中高表达。
在乳腺癌中,Her2的高表达与肿瘤侵袭性和预后相关。
Her2阳性的乳腺癌患者可通过靶向治疗,如Trastuzumab(Herceptin)来获益。
检测Her2的表达水平对于乳腺癌的诊断、分子亚型的鉴定和治疗方案的选择具有重要意义。
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常用免疫组化试剂(类别)介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性:1、细胞角蛋白/cytokeratin.CK:目前,商品化的细胞角蛋白有20多种,不同的分子量代表不同类型的上皮标志。
通常将CK分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量)。
理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量的CK;复层上皮多表达高分子量的CK;移形上皮(膀胱)和假复层上皮(呼吸道的被覆上皮)既表达低分子量的CK,也表达高分子量的CK。
在癌组织中,低分子量的CK多在腺癌中表达,高分子量的CK多在鳞癌中表达。
目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CK,某些上皮可含2-10种不同分子量的CK。
因此,目前试图应用单一的CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。
同样,应用CK来区别腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。
因此,CK的免疫组化结果判断是一个较为复杂的问题,在应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。
有必要时,应联合用多种CK加以综合判断。
CK的阳性表达还包括有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。
CK的阴性表达有:副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外)。
在判断CK免疫组化结果时应注意几点:(1)CK的单克隆抗体优于多克隆抗体;(2)CK常出现斑点状的假阳性反应,应注意识别;(3)虽然大多数CK多在胞浆表达,但CK17多在胞核表达;(4)绝大多数CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率和染色强度;(5)部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见有CK表达,在诊断时应注意;(6)淋巴结、扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有CK8和18以及desmin,在判断淋巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。
2、上皮膜抗原(epithelialmembraneantigen/EMA):EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其是分化差的癌EMA有时可呈强阳性表达。
EMA可作为上皮源性肿瘤的常用标记物。
EMA阳性表达的肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。
在判断EMA免疫组化结果时应注意几点:(1)EMA虽然是上皮细胞非常敏感的标记,但一些非上皮性肿瘤(如浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤)也可阳性表达。
因此在癌和其他间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一的参考标记;(2)EMA对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于体表上皮源性肿瘤,因此在腺癌中的表达明显高于鳞癌。
3、桥粒蛋白:是上皮细胞特有的结构,是一种广谱的上皮性标记。
鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌和间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。
在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点:(1)桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢的颗粒细胞瘤和淋巴结的网织细胞中表达;(2)甲状腺间变癌阳性表达率低;(3)冰冻切片效果优于石蜡切片。
(二)间叶源性肿瘤的标记1、波形蛋白Vimentin:是一种52-58的胞浆蛋白。
主要分布于间叶细胞及其起源的肿瘤,是间叶细胞及其肿瘤的特异性标记。
横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤和骨肿瘤Vimentin是一个关键标记。
此外,血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病和恶黑等均可有Vimentin表达。
在判断Vimentin 免疫组化结果时应注意几点:(1)部分肿瘤(如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等)除Vimentin(+)表达外,可同时又有cytokeratin的表达。
应结合其组织学形态加以诊断;(2)福尔马林固定的组织标本,vimentin假阴性并不少见,冰冻切片酒精固定的组织可提高其敏感性和可靠性;(3)vimentin不能单独用于软组织肿瘤的诊断,多提倡与其他特异性标记物联合使用。
2、结蛋白desmin:是一种分子量为50-55ku的细胞浆蛋白,胚胎和成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。
子宫、皮肤、胃肠道及其他部位的平滑肌多呈(+)表达。
现已发现desmin 在良性肿瘤的阳性率和染色强度明显高于恶性肿瘤;高分化的平滑肌肉瘤和染色强度明显高于低分化的平滑肌肉瘤。
Suster报道5例皮肤是上皮性平滑肌肉瘤均为(-),而actin 和vimentin均为(+)反应。
因此目前认为,多应用配套抗体,即与其他肌源性抗体联合应用,不能只根据desmin(-)来排除平滑肌肉瘤的诊断。
在判断desmin免疫组化结果时应注意几点:(1)非常原始的肌源性肿瘤常不表达desmin;(2)某些非肌源性肿瘤也有desmin表达,如纤维肉瘤、恶纤组、腺泡状软组织肉瘤和个别腺癌;(3)常规福尔马林固定、石蜡包埋的低分化横纹肌肉瘤可能表现假(-)结果;(4)desmin不能用于区别横纹肌肉瘤还是平滑肌肉瘤;(5)血管平滑肌不表达desmin。
3、肌动蛋白Actin:是一种具有收缩能力的微丝蛋白,几乎分布于所有的肌型细胞,根据其结构形式的不同,至少有6种不同的类型,即横纹肌型、心肌型、平滑肌型(两种)和非肌源型(两种)。
目前商品化的Actin包括有肌肉型(HHF35),在心肌、平滑肌和横纹肌细胞及其肿瘤中均有表达,尤其在低分化的横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤中的表达,其敏感性和特异性均比desmin高;Actin肌源节型,主要用于横纹肌及其肿瘤的诊断;Actin平滑肌型(SmoothMuscle),主要用于平滑肌及其肿瘤(肉瘤)的诊断。
在判断actin 免疫组化结果时应注意几点:(1)三种在肌源性肿瘤的诊断意义上,尚不能作为一个独立的诊断指标,因为三者之间存在交叉反应;(2)一些非肌源性肿瘤也可有Actin (+)表达,如皮肤、口腔、喉、涎腺肿瘤以及星形细胞瘤等;(3)部分器官和组织的非肌上皮细胞也有Actin(+)表达,如肺、食管、胃、十二指肠、膀胱的上皮细胞和肝脏、肾、胎盘以及胰岛细胞等;(4)HHF35也可标记肌上皮细胞,但其敏感性和特异性均不如平滑肌型actin;(5)福尔马林固定的组织,部分病例可有一些非特异性染色。
4、肌红蛋白myoglobin:myoglobin被认为是存在于正常横纹肌和横纹肌肿瘤中的一种分子量为17.8ku的胞浆蛋白,可作为横纹肌肉瘤的特异性标记。
在判断myoglobin 免疫组化结果时应注意几点:(1)虽然myoglobin有较高的特异性,但要注意其假(+)反应,尤其是坏死或退变以及残留的正常横纹肌均有myoglobin(+),应注意识别;(2)某些肿瘤如恶黑、浸润型乳腺癌、软组织淋巴瘤等也有myoglobin(+),这个可能是瘤细胞破坏横纹肌时吞噬了myoglobin所致;(3)烤片温度过高,>60℃时可能会破坏其抗原,造成假(-)。
(三)神经和内分泌细胞标记:1、胶质纤维酸性蛋白GFAP:是一种分子量为47ku的酸性蛋白。
研究发现:GFAP不仅在星形神经胶质细胞及其肿瘤中存在,还见于各种类型的星形细胞瘤、混合性胶质瘤、多形性成胶质瘤、室管膜下巨细胞性星形细胞瘤、异位星形细胞瘤、松果体瘤和髓母细胞瘤中向胶质分化,以及含胶质成分的神经鞘瘤等肿瘤中。
在判断GFAP免疫组化结果时应注意几点:(1)GFAP不仅在星形细胞和胶质细胞中表达,其他脑肿瘤如成血管细胞瘤等也可表达,尤其是伴有星形细胞分化时,因此应注意识别;(2)GFAP作为中枢神经肿瘤的诊断和分类时,应密切结合HE的形态学改变,尤其是儿童的脑肿瘤;(3)GFAP(+)细胞的染色强度和数量与肿瘤分化程度有关,高分化的(+)表达较好,低分化的表达较弱甚至(-)。
2、神经纤维细丝蛋白NF:是神经元特异性中间丝蛋白,主要存在于神经细胞内,故作为神经细胞分化的标志。
肾上腺内外嗜铬细胞瘤等也可呈(+)反应。
神经节胶质细胞瘤、室管膜瘤、神经鞘瘤等(-);另外,恶黑也可呈(+)。
3、S -100蛋白:早期人们认为,S-100是一种神经系统特异性蛋白存在于胶质细胞和雪旺氏细胞及其肿瘤中,后来的研究证明:S-100也存在于一些非神经源性的正常细胞和肿瘤中,如脂肪组织、脂肪瘤,偶见于脂肪肉瘤;软骨细胞、软骨瘤以及一部分软骨肉瘤等。
几乎所有的黑色素瘤S-100(+)。
S-100蛋白染色强度与瘤细胞的分化程度关系不大。
在判断S-100免疫组化结果时应注意几点:(1)S-100蛋白可在一些非神经源性细胞中表达,包括低分化癌,因此在神经系统肿瘤的诊断时应考虑到这点;(2)S-100蛋白阳性定位在一些细胞中可为胞浆,一些细胞为胞核,另一些细胞为胞浆/胞核共存;(3)由于S-100蛋白敏感性高,特异性差,所以在诊断上应用受到限制。
4、神经元特异性烯醇酶NSE:原先认为NSE只存在于神经元中,现已证明,除神经元外,NSE也广泛存在于各种正常的神经内分泌细胞和许多相应的神经内分泌肿瘤中,包括不同部位的类癌、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、副节瘤、胰岛细胞瘤、垂体腺瘤、肺的小细胞癌和皮肤的Merkel癌。
而雪旺氏瘤、神经纤维瘤和成神经细胞瘤(-)。
NSE(+)表达为胞浆弥漫性着色。
现有的资料表明,NSE可在平滑肌、肌上皮细胞、肾小管细胞、淋巴细胞、支气管上皮细胞和Ⅱ型肺泡细胞中表达,因此NSE的特异性引起怀疑。
在判断NSE免疫组化结果时应注意几点:(1)非神经元性肿瘤也有NSE(+)表达,包括胶质瘤、脑膜瘤、雪旺氏瘤、脉络丛乳头状瘤、神经瘤、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌和肾细胞癌等;(2)NSE在神经病理学中的诊断价值应根据各种特殊病变加以认识;(3)虽然NSE在神经源性肿瘤的表达比神经纤维丝蛋白NF更为常见,但不能作为中枢神经系统肿瘤的特异性标记物;(4)由于NSE特异性差,因此不能单独使用,应与其他相应的标记物联合使用;(5)原始的神经内胚层来源的肿瘤常呈(-)。
5、突触素Syn:是一种突触前酸性转膜蛋白,分子量为38ku。
SY可在许多神经源性和神经内分泌肿瘤中表达,如髓母细胞瘤、成神经细胞瘤、嗜铬细胞瘤、副节瘤、节细胞神经瘤、垂体腺瘤、甲状旁腺瘤、肺和胃肠道类癌、胰岛细胞瘤、甲状腺髓样癌等大多数神经内分泌肿瘤。
在髓母细胞瘤的IHC中,SY比NF更为敏感。
同时,SY比嗜铬素A更敏感,比NSE更特异。
对胰岛细胞及其肿瘤的诊断比嗜铬素A更可靠。
目前尚未发现SY在非神经源性肿瘤和非神经内分泌肿瘤表达的报道。
在判断Syn免疫组化结果时应注意几点:(1)冰冻切片效果最好,福尔马林固定、石蜡包埋的组织也可,但固定时间不宜过长,一般不超过24h;(2)如果突触素含量低,用PAP法和ABC法可能检测不出(+)结果,最好使用S-P法或与其相似的检测系统。