芽孢染色液配制及使用方法
芽孢染色液使用说明
芽孢染色液使用说明
货号：G1132
规格：50ml×2/100ml×2/250ml×2
保存：室温干燥保存，有效期1年。
试剂盒组成：
染色液A：石炭酸复红染液
染色液B：碱性美蓝染色液
产品说明：
芽胞具有高度的折光性，外膜致密，渗透性低，着色和脱色均较困难。
在加热条件下进行染色时，染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料可被酒精脱色，而芽胞上的染料仍保留，经复染剂复染后，菌体和芽胞呈现出不同的颜色。
操作步骤：
1、制作一适当厚度的细菌涂片，自然干燥，通过火焰加热固定。
2、滴加适量染色液A于涂片上，在酒精灯上加热，使染液冒蒸汽但不沸腾。
必要时可续加染液以免干涸。
维持4-5分钟。
3、待标本冷却后以95%酒精冲洗至无红色染液脱出为止，水洗。
4、滴加染色液B复染约2-3分钟，水洗至无染液脱出为止。
5、待干后油镜观察。
预期结果：
菌体呈蓝色，芽孢呈红色。
注意事项：
1、供芽孢染色用的培养物应控制菌龄，要求大部分芽孢仍保留在菌体内为宜。
2、加热染色时必须维持在染液冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽孢囊破裂，加热不够则芽孢难以着色。
3、请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂：
G1010姬姆萨工作液
G1020瑞氏-姬姆萨复合染液
G1060革兰氏染色液
G1160石炭酸复红染液。
实验二细菌的革兰染色法、芽孢染色法
芽孢染色：培养36 h 的巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium ）或者枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
三、实验器材
2. 染色液和试剂：
革兰氏染色染色液：结晶紫、卢戈氏碘液、95%酒精、 番红复染液；
芽孢染色液：5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液 ；
二甲苯、香柏油 。
至流出的水中无染色液为止。
四、实验步骤
（6）复染：用蕃红水溶液染色2min。
（7）水洗：
（8）干燥：
（9）镜检：先低倍，再高倍，最后在油镜下观
察芽胞和菌体的形态。。
结果：芽孢呈绿色，菌体为红色。
四、实验步骤
芽孢染色结果
（芽孢呈绿色，营养体呈红色）
四、实验步骤
（10）实验完毕后的处理：
四、实验步骤
四、实验步骤
四、实验步骤
2.Schaeffer与Fulton氏芽孢染色法
（1）涂片：按常规方法将待检细菌制成薄的涂片。 （2）干燥：与简单染色法相同。 （3）固定，与简单染色法相同。
四、实验步骤
（4）染色：加5%孔雀绿水溶液于涂片处（染料以 铺满涂片为度），用夹子夹住涂片一端，用酒精灯 火焰加热至染液冒蒸汽时开始计算时间，约维持58min。加热过程中要随时添加染色液，切勿让标 本干涸。（加热时温度不能太高）。 （5）水洗：待玻片冷却后 ，用水轻轻地冲洗，直
性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也
会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量 多少等因素的影响，难以严格规定。
实验五细菌芽孢染色法
革兰氏染色
1.涂片
2.固定 按常规方法加热固定。 3.染色
(1) 初染 用草酸铵结晶紫染色液染1分
钟，水洗。 (2) 媒染 滴加卢戈氏碘液，冲去残水， 并覆盖约1分钟，水洗。 (3) 脱色 滴加95％酒精，脱色时间约 为30秒，立即水洗。 (4) 复染 用番红复染液染色1～2分钟， 水洗。 4.镜检 干燥后，用油镜观察。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
二、实验原理：
芽孢具有厚而致密的壁，透性差，不易着 色，而一旦染上颜色，脱色也比较困难。因此芽 孢染色法的基本原则是：采用着色力强的染料， 在加热条件下，延长染色时间以促进标本着色。 然后采用脱色的方法使标本脱色，菌体颜色褪去， 而芽孢上的颜色仍然保留。再用对照的染料进行 复染，使菌体染上复染液的颜色，和芽孢形成鲜 明的对比，容易辨认。
三、实验器材
• 显微镜，酒精灯，火柴，试管夹，载玻片， 接种环，双层瓶，吸水纸，擦镜纸，蒸馏水； • 孔雀绿染液，沙黄（番红）水溶液； • 巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)， 37℃培养20小时；
四、实验步骤
1 ．制备菌悬液 加2滴水于空试管中，用接种环挑取3环菌苔于试管中，搅拌 均匀，制成浓的菌悬液． 2. 染色 加孔雀绿染液2滴于小试管中，将试管置于沸水浴的烧杯中， 加热染色15~20 min 。 3. 涂片固定 用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上，涂成薄膜， 然后将涂片通过火焰3 次温热固定。 4. 脱色 水洗．直至流出的水无绿色为止． 5 ．复染 用沙黄水溶液染色2~3min ，倾去染液稍微用水冲去染液并 用滤纸吸干残液． 6 ．镜检 干澡后用油镜观察． 芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色．
制备菌悬液加2滴水于空试管中用接种环挑取3环菌苔于试管中搅拌均匀制成染色加孔雀绿染液2滴于小试管中将试管置于沸水浴的烧杯中加热染色1520min涂片固定用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上涂成薄膜然后将涂片通过火焰3次温热固定
实验四.细菌芽孢染色
实验四.细菌芽孢染色一. 目的要求：目的：掌握细菌芽孢染色方法内容：１．学习并掌握芽孢染色法２．初步了解芽孢杆菌的形态特征二. 基本原理：芽孢壁厚，透性低，着色脱色较困难。
因此先用着色力较强的孔雀绿，在加热的条件下染色，使染料不仅进入菌体也可以进入芽孢内，进入菌体内的染料经水洗脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂（如沙黄、番红、碱性复红）染色后，芽孢仍保留初染色剂的颜色，此时菌体被染成红色，芽孢呈绿色。
三. 器材1.菌种：培养了16-20小时左右的枯草杆菌（37℃）2.染色剂：5%的孔雀绿水溶液.0.5%番红水溶液石炭酸复红染液0.05%碱性复红蒸馏水3.仪器或其他用品：小试管.滴管.烧杯.试管架.载玻片.木夹子.显微镜等二甲苯.香柏油四. 操作步骤：一）方法1：1.取37℃培养了18-24小时的枯草杆菌作涂片，并干燥固定。
2.于载玻片上滴入3-5滴5%孔雀绿水溶液3.用试管夹夹住载玻片在火焰上用微火加热，自载玻片上出现蒸汽时，开始计时约5min ,加热过程中切勿使染料蒸干，必要时可添加少许染料4.倾去染液，待玻片冷却后，用自来水冲洗至孔雀绿不再褪色为止。
5.用0.5%的番红溶液（或0.5%沙黄水溶液或0.05%碱性复红）复染2分钟，水洗.6.制片干燥后用油镜观察。
芽孢呈绿色，菌体呈红色。
二）方法2：1.加1-2滴自来水于小试管中，用接种环从斜面上挑取2-3环培养16—20小时的枯草杆菌于试管中，充分混匀打散，制成弄的菌悬液。
2.加5%的孔雀绿水溶液2-3滴于小试管中，用接种环搅拌使染料与菌液充分混合。
3.将此试管浸于沸水浴中，加热20-30min .4.用接种环从试管底部挑取数环欲洁净的载玻片上，并涂布均匀，将玻片通过微火3次固定。
5.水洗至流出的水中无孔雀绿颜色为止。
6.加复染液染2-3分钟，水洗。
7.干燥后用油镜观察，芽孢绿色，菌体红色。
五.实验报告：1.绘图：枯草杆菌的芽孢形态，芽孢的着色位置。
芽孢染色液
组成：
名称
编号 DM0028 DM0028 Storage3×20ml Nhomakorabea×50ml
试剂(A): 石碳酸复红染色液 试剂(B): 脱色液 试剂(C): 碱性美蓝染色液
20ml 20ml 20ml
50ml 50ml 50ml
RT 避光 RT RT 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 常规涂片。 2、 滴加石碳酸复红染色液于涂片上，缓缓加热使染液冒蒸汽但丌沸腾，并继续滴加热液丌
使涂片上的染液蒸干，这样维持。 3、 待涂片自然冷却至室温，倾去染液。用脱色液脱色至无红色染液流出为止，水洗。 4、 滴加碱性美蓝染色液复染。 5、 轻轻水洗。 6、 用滤纸沿涂片边缘吸干水分，镜检。
染色结果：
芽孢
红色
菌体
蓝色
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京雷根生物技术有限公司
芽孢染色液
简介：
芽孢又称芽胞是特殊性质的细菌，是某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一 个圆形或椭圆形的厚壁的含水量低的休眠体构造。芽孢染色原理在于芽胞折光性很强，用 着色力强的石碳酸复红，在加热条件下染色，使染料丌仅进入菌体也可进入芽胞内，进入 菌体的染料经脱色液被脱色，而芽胞一经着色后则难以被脱色液脱掉，再经碱性美蓝液复 染，芽胞仍保留红色，而菌体被染成蓝色，使芽胞和菌体更易于区分。该试剂比较稳定， 操作简单，结果判断可靠。
细菌芽孢染色实验报告
1. 了解芽孢的形态和结构特点；2. 掌握芽孢染色原理和操作方法；3. 观察芽孢的染色效果，加深对芽孢形态结构的认识。
二、实验原理芽孢是细菌在生长发育过程中形成的一种特殊细胞形态，具有厚而致密的壁，透性低，对各种不利因素如高温、冷冻、射线、干燥、化学药品和染料等具有很强的抵抗力。
芽孢染色法是一种特殊染色方法，通过使用特定染料对芽孢进行染色，使芽孢和菌体呈现不同的颜色，便于观察和鉴别。
三、实验材料1. 菌种：巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）2. 染料：7.6%饱和孔雀绿液、0.5%蕃红液（或石炭酸复红液和吕氏美蓝液）3. 仪器：显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、滴管等四、实验步骤1. 菌种培养：将巨大芽孢杆菌接种于营养琼脂斜面，37℃培养24小时。
2. 涂片：取一洁净无脂的载玻片，中央滴一小滴无菌水，用无菌操作的方法从菌种斜面挑取少量菌体与水滴充分混匀，涂成薄膜，涂片面积约为1-1.5cm²，涂片于室温中自然干燥。
3. 固定：将菌面朝上，通过火焰2-3次固定（温度以不烫手为宜）。
4. 初染：在制片上滴加7.6%饱和孔雀绿液，染色5-10分钟。
5. 水洗：用自来水冲洗掉多余的染料。
6. 复染：在制片上滴加0.5%蕃红液，染色1-2分钟。
7. 水洗：用自来水冲洗掉多余的染料。
8. 吸干：用吸水纸吸干制片上的水分。
9. 观察显微镜：将制片置于显微镜下观察，观察芽孢的染色效果。
在显微镜下观察到，巨大芽孢杆菌的菌体呈红色，芽孢呈绿色，两者颜色对比明显。
芽孢位于菌体中央或次极端，使菌体膨大呈梭状。
六、实验讨论1. 芽孢染色法是一种特殊染色方法，可以观察到芽孢的形态和结构特点。
通过染色，芽孢和菌体呈现不同的颜色，便于观察和鉴别。
2. 在实验过程中，应注意控制染色时间，避免染色过度或不足。
染色时间过长，芽孢和菌体颜色过深，影响观察；染色时间过短，芽孢和菌体颜色过浅，难以观察。
3. 在实验操作过程中，应严格无菌操作，避免污染制片。
芽孢染色方法
芽孢染色方法
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方法1
(1)将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。
(2)滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。
(3)用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。
加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5min。
这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液(约7.6%)染10min。
(4)倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。
(5)用番红水溶液复染1min，水洗。
(6)待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。
方法2
(1)取二支洁净的小试管，分别加入0.2ml无菌水，再往一管中加入1-2环的蜡状芽孢杆菌的菌苔，另一管中加入1-2环的生孢梭菌的菌苔，两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。
(2)在菌悬液中分别加入0.2ml苯酚品红溶液，充分混合后，于沸水浴中加热3-5min。
(3)用接种环分别取上述混合液2-3环于两片载玻片上，涂薄，风干后，将载玻片稍倾斜于烧杯上，用95%乙醇冲洗至无红色液流出。
(4)再用自来水冲洗，滤纸吸干。
(5)取1-2环黑色素溶液于涂片处，立即展开涂薄，自然干燥后，油镜观察，在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。
细菌的芽孢染色法
实验材料
• 试管菌种：枯草芽孢杆菌的斜面菌种
• 试剂：二甲苯、香柏油、蒸馏水、5%孔雀绿水溶液、 0.5%沙黄水溶液
⑷加热：用木夹子夹住玻片在火焰上加热，使染料冒蒸汽 （但不沸腾），切勿使染料蒸干，必要时可添加少许染料。 加热时间从冒蒸汽开始计算约4~5min。
⑸脱色：倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为 止。
⑹复染：用沙黄染液，复染2~3min，倾去染色液， 水洗。
⑺镜检：待干燥后，置于油镜下观察。
结果：芽孢呈 色，菌体为 色。
• 器材：显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、小试 管（1×6.5）、烧杯（300ml）、试管架、电炉
实验步骤
• 1．
⑴ 清洗玻片：將玻片用洗衣粉洗净，晾干
⑵ 制备涂片：加1滴生理盐水于玻片上，用接种环从斜面上 挑取2~3环的菌苔于生理盐水并充分打匀，干燥、固定。
⑶加染色液：加5%孔雀绿水溶液3~5滴于已固定的涂片上。
应用微生物与免疫学
实验目的
• 学习并掌握细菌芽孢染色的原理和方法
• 细菌的芽孢是某些细菌的特殊结构。
• 芽孢是某些细菌生长到一定阶段在体内形成的一个圆形或 椭圆形的休眠体，它对不良环境具有很强的抗性。在合适 条件下，可吸水萌发，重新形成一个新的菌体。
• 芽孢的大小、形状及其在菌体内的位置是鉴定细菌的重要 依据。在一般实验室中通常用芽孢染色法来观察其形态。
芽孢染色法实验报告
芽孢染色法实验报告芽孢染色法实验报告一、引言芽孢染色法是一种常用的细菌染色方法，它可以用来观察和鉴定细菌中的芽孢。
芽孢是细菌在逆境条件下形成的一种耐受性结构，具有较强的抵抗力和存活能力。
通过芽孢染色法，我们可以更好地了解细菌的生物学特性和生存机制。
本实验旨在探究芽孢染色法的原理和操作方法，并通过观察染色后的细菌样本，对细菌的芽孢形成进行分析。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 细菌培养物（含有芽孢的细菌）- 甲苯- 碘酒- 茴香醛- 无水乙醇- 碱性苏木精溶液- 0.5% 还原石蕊溶液2. 实验方法：1) 取一支无菌的铂丝，沾取细菌培养物，均匀涂抹在玻璃片上。
2) 将玻璃片放置在火焰上烘烤，使细菌固定在玻璃片上。
3) 在固定的细菌上滴加甲苯，静置片刻，使甲苯渗透细菌。
4) 用吸纸吸去多余的甲苯。
5) 滴加碘酒，静置片刻，使细菌芽孢固定。
6) 用吸纸吸去多余的碘酒。
7) 滴加茴香醛，静置片刻，使细菌芽孢显色。
8) 用吸纸吸去多余的茴香醛。
9) 用无水乙醇洗去茴香醛。
10) 滴加碱性苏木精溶液，静置片刻，使细菌细胞显色。
11) 用吸纸吸去多余的碱性苏木精溶液。
12) 用0.5% 还原石蕊溶液洗去碱性苏木精溶液。
13) 用吸纸吸去多余的还原石蕊溶液。
14) 将玻璃片放在显微镜下观察。
三、实验结果与分析经过芽孢染色法处理后，我们观察到细菌样本中出现了芽孢结构。
芽孢呈现为圆形或椭圆形，较小的细胞内包裹着较大的芽孢结构。
芽孢在染色后呈现出深紫色或棕色，而细菌细胞则呈现出浅红色。
这种染色方式使得芽孢与细菌细胞形成鲜明的对比，便于观察和分析。
通过观察芽孢的形态和分布情况，我们可以进一步了解细菌的生物学特性。
芽孢的形成通常与环境中的营养物质不足、温度变化等逆境条件有关。
细菌通过形成芽孢结构，可以在不利的环境中存活，并在条件适宜时再次发芽繁殖。
芽孢的形成是细菌的一种适应策略，它们可以在恶劣的环境中存活较长时间，等待适宜的时机再次生长和繁殖。
芽孢染色法详细步骤
芽孢染色法详细步骤
芽孢染色法详细步骤如下：
1.涂片、固定：滴半滴生理盐水在载玻片中央，挑取少量菌体于生
理盐水混匀并均匀涂布，室温自然晾干或用电吹风吹干后，涂片朝上，通过火焰2-3次固定。
2.初染：滴加数滴5%孔雀绿染液于涂片上，用木夹夹住载玻片在微
火上加热至染液冒蒸汽时计时5min（注意：加热过程中要及时添加染色液，切勿让标本干涸）。
3.水洗：待载玻片冷却后，用缓流自来水冲洗至流出的水无色为止。
4.复染：滴加数滴5%番红染色液，复染2min。
5.水洗：待载玻片冷却后，用缓流自来水冲洗至流出的水无色为止。
6.干燥：室温自然晾干或电吹风吹干（也可用吸水纸吸干）载玻片
上的水。
7.镜检：干燥后用显微镜观察。
芽孢染色法实验报告
芽孢染色法实验报告芽孢染色法实验报告引言：芽孢染色法是一种常用的微生物实验方法，用于鉴定和观察细菌的芽孢形态和结构。
本实验通过对芽孢的染色和显微镜观察，旨在了解芽孢的特征和鉴定微生物。
实验材料和方法：材料：培养基、细菌液、石蜡刀、石蜡、石蜡刷、显微镜等。
方法：1. 取一片培养基，加入细菌液并充分混合。
2. 将混合液倒入培养皿中，并在培养皿中心划出一条刀口。
3. 将培养皿置于恒温箱中，在适当的温度下培养一段时间，使菌落生长并形成芽孢。
4. 取一片玻片，将石蜡刀预热至适当温度，刮取培养皿中的芽孢。
5. 将刮取的芽孢涂在玻片上，并用石蜡刷均匀涂抹。
6. 将玻片放入石蜡中，使其固定。
7. 将固定的玻片放入显微镜下观察和拍摄。
结果与讨论：通过芽孢染色法，我们观察到了芽孢的形态和结构，并进行了鉴定。
芽孢的形态：芽孢是一种细菌的生殖结构，通常呈椭圆形或圆柱形。
在显微镜下观察，芽孢的外部有一个坚硬的壳，内部则是细胞质和核酸物质。
芽孢的大小和形状可能因不同的细菌而异。
芽孢的结构：芽孢的结构包括中心小体、核心区、内外壳等部分。
中心小体是芽孢的核心，含有DNA和其他重要的细胞质成分。
核心区是由中心小体周围的细胞质组成，其中包含了细胞的各种酶和营养物质。
内外壳是芽孢的保护层，能够抵抗外界环境的压力和不良条件。
鉴定微生物：通过观察芽孢的形态和结构，可以初步鉴定微生物的种类。
不同种类的微生物芽孢在形态和结构上可能存在差异，因此可以通过对比已知的芽孢特征，来判断未知微生物的种类。
此外，芽孢染色法还可以帮助鉴定微生物的生长条件和适应性。
实验中的注意事项：在进行芽孢染色实验时，需要注意以下几点：1. 实验操作要严格遵守无菌操作规范，以避免外界细菌的污染。
2. 实验过程中要注意安全，避免接触有害物质和高温设备。
3. 实验前要熟悉显微镜的使用方法，并保持显微镜的清洁和调试。
4. 实验后要及时清洗和消毒实验器材，以防止细菌的传播和感染。
芽孢染色法 实验报告
芽孢染色法实验报告芽孢染色法实验报告一、引言芽孢染色法是一种常用的实验方法，用于检测和鉴定细菌中的芽孢形成。
芽孢是一种细菌在不利环境下形成的一种生存形式，具有较强的耐热和抗干扰能力。
本实验旨在通过芽孢染色法，观察和分析细菌中芽孢的形成情况。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 细菌培养物- 芽孢染色试剂盒- 显微镜- 无菌平板- 石蜡刀2. 实验方法：1) 准备细菌培养物：从细菌培养基中取出待检测的细菌菌株，进行液体培养至对数生长期。
2) 制备芽孢悬液：将培养物转移到无菌平板上，用无菌平板划线法制备纯培养物。
将培养物转移到无菌蒸馏水中，轻轻搅拌，制备芽孢悬液。
3) 芽孢染色：取一滴芽孢悬液，滴于玻片上，用芽孢染色试剂盒按照说明书的要求进行染色处理。
4) 观察和分析：将染色后的玻片放在显微镜下观察，记录芽孢的形态和数量。
三、实验结果经过芽孢染色处理后，我们观察到细菌中出现了大量的芽孢。
芽孢呈圆形或椭圆形，外部有一层坚硬的壳，内部包裹着细菌的核酸和蛋白质。
芽孢的颜色因染色剂的不同而有所差异，有些呈红色，有些呈绿色。
芽孢的数量在不同的细菌菌株中也有差异，有些菌株的芽孢数量较多，而有些菌株的芽孢数量较少。
四、讨论与分析芽孢是细菌在不利环境下形成的一种生存形式，具有较强的耐热和抗干扰能力。
在本实验中，我们通过芽孢染色法观察到了细菌中芽孢的形成情况。
芽孢的形成与环境因素密切相关，如温度、湿度、营养物质等。
在适宜的环境条件下，细菌可以形成大量的芽孢，以增加自身的存活率。
芽孢染色法是一种快速且可靠的方法，用于检测和鉴定细菌中的芽孢形成。
通过染色处理，我们可以清晰地观察到芽孢的形态和数量，从而推断细菌的生长状态和环境适应能力。
此外，芽孢染色法还可以用于研究芽孢的形成机制和防治细菌感染的方法。
然而，芽孢染色法也存在一些限制。
首先，不同的细菌菌株对染色剂的反应可能不同，导致染色结果的差异。
其次，染色后的芽孢可能会受到染色剂的影响，使其形态和数量发生变化。
百度文库-芽孢染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司
芽孢染色液
产品说明：
芽胞是细菌的休眠状态，对各种理化因素有强大的抵抗力，
能耐受恶劣环境的影响。
细菌芽胞的大小、形态和位置鉴定，
对鉴别细菌有重大意义。
芽胞折光性很强，可用着色力强的
石碳酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可
进入芽胞内，进入菌体的染料经脱色液被脱色，而芽胞一经
着色后则难以被脱色液脱掉，再经碱性美蓝液复染，芽胞仍
保留红色，而菌体被染成蓝色，使芽胞和菌体更易于区分。
产品组成：
货号产品规格储存条件
S-1541 石碳酸复红溶液
酒精溶液
亚甲基蓝溶液
10ml
30ml
10ml
RT
-- 说明书1份
有效期：12 个月。
原包装未开封染色液的使用期限为 12 个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后 6 个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
实验步骤：
1.涂片经火焰固定，加石碳酸复红溶液染色5-10分钟。
2.水洗后沥干。
3.酒精溶液脱色2分钟。
4.水洗，如残存红色，再添加酸性酒精溶液至完全脱掉红色。
5.加亚甲基蓝溶液染色30秒，水洗、干燥、油镜观察。
结果判定：在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。
07 细菌的芽孢染色法
改良的Schaeffer-Fulton氏染色法 改良的Schaeffer-Fulton氏染色法 Schaeffer
制备菌悬液: 滴水于小试管, 制备菌悬液:加1-2滴水于小试管,接种 滴水于小试管 接种2-3环菌苔 环菌苔 染色:向试管中加入2-3滴孔雀绿,混匀,沸水浴染 滴孔雀绿, 染色:向试管中加入 滴孔雀绿 混匀, 色15-20分钟 分钟 涂片固定:挑取试管中染色菌液在玻片上涂成薄膜, 涂片固定:挑取试管中染色菌液在玻片上涂成薄膜, 过火焰3次固定 过火焰 次固定 脱色: 脱色:水洗脱色至水无绿色 复染: 复染:番红复染水洗 镜检
细菌芽胞染色原理
细菌的芽胞具有厚而致密的壁不易着色, 细菌的芽胞 具有厚而致密的壁不易着色,若用一 具有厚而致密的壁不易着色 般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色( 般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无 色透明状) 色透明状). 芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上 后又难以脱色这一特点而设计的. 后又难以脱色这一特点而设计的. 所有的芽胞染色法都基于同一个原则: 所有的芽胞染色法都基于同一个原则 : 除了用着 色力强的染料外,还需要加热,以促进芽胞着色, 色力强的染料外 , 还需要加热 , 以促进芽胞着色 , 再使菌体脱色,而芽胞上的染料则难以渗出, 再使菌体脱色 , 而芽胞上的染料则难以渗出 , 故 仍保留原有的颜色, 仍保留原有的颜色 , 然后用对比度强的染料对菌 体复染,使菌体和芽胞呈现出不同的颜色, 体复染 , 使菌体和芽胞呈现出不同的颜色 , 因而 能更明显地衬托出芽胞,便于观察. 能更明显地衬托出芽胞,便于观察.
实验七, 实验七,细菌的芽胞染色法
实验的目的要求
学习并掌握芽染色法 初步了解芽胞杆菌的形态特征
细菌芽胞染色的意义
实验五、细菌的芽孢染色法
环境样品中细菌的检测
芽孢染色法也可用于检测环境样品中的细菌，如水、土壤、 空气等中的细菌。在这些环境中，一些细菌会形成芽孢以适 应不良环境，通过芽孢染色法可以快速检测出这些细菌的存 在和数量。
学习并掌握芽孢染色法的基本步骤
01
02
03
准备染色剂
选择适合的染色剂，如孔 雀绿染色剂，准备好所需 的浓度。
制备菌悬液
将待染色的细菌培养物进 行离心，去除上清液，得 到菌悬液。
涂片
将菌悬液均匀涂布在载玻 片上，晾干或烘干。
学习并掌握芽孢染色法的基的要求进行染色。
脱色
将染色后的涂片用脱色剂 进行脱色处理，以便更好 地观察芽孢。
复染
将脱色后的涂片用复染剂 进行复染，以便更好地观 察菌体。
学习并掌握芽孢染色法的基本步骤
冲洗
用清水冲洗涂片，去除多余的染 色剂和脱色剂。
观察
在显微镜下观察涂片，观察细菌 的芽孢和菌体的染色情况。
了解芽孢染色法的应用场景
食品和饮料中细菌的检测
态。
复染
用番红再次染色，番红 能够与脱色后的菌膜结
合，使其呈现红色。
镜检观察
观察
在显微镜下观察染色后的菌膜，寻找 芽孢的存在。芽孢在显微镜下呈现圆 形或椭圆形，颜色较深，与周围的细 菌细胞有所不同。
计数
鉴别
根据芽孢的大小、形状、染色深浅等 特征，鉴别芽孢所属的细菌种类。
对镜检观察到的芽孢进行计数，记录 每个视野中芽孢的数量和形态特征。
芽孢染色实验报告
1. 掌握芽孢染色的原理和方法。
2. 观察和区分芽孢与菌体的形态结构。
3. 理解芽孢在细菌生存过程中的重要性。
二、实验原理芽孢是细菌在恶劣环境下形成的一种特殊休眠体，具有厚而致密的壁，通透性低，对高温、冷冻、射线、干燥、化学药品和染料等具有很强的抵抗力。
因此，在常规染色方法中，芽孢不易着色或仅显淡色。
芽孢染色法利用芽孢与菌体对染料的亲和力不同，采用特殊染色方法，使芽孢和菌体呈现不同的颜色，便于区分。
三、实验材料1. 菌种：枯草芽孢杆菌2. 染料：孔雀绿染液、番红染液、复染液（如石炭酸复红液和吕氏美蓝液）3. 仪器：显微镜、载波片、接种环、酒精灯、滴管等四、实验步骤1. 将枯草芽孢杆菌接种于营养琼脂平板，培养24小时。
2. 将培养好的菌落挑取少许，制作成涂片。
3. 将涂片用火焰固定。
4. 将涂片滴加孔雀绿染液，染色5-10分钟。
5. 水洗涂片，去除多余的染料。
6. 将涂片滴加番红染液，复染1-2分钟。
7. 水洗涂片，去除多余的染料。
8. 将涂片滴加复染液，染色1-2分钟。
9. 水洗涂片，去除多余的染料。
10. 将涂片晾干，用显微镜观察。
在显微镜下观察，菌体呈红色，芽孢呈绿色。
芽孢直径大于菌体，位于菌体中央，极端或次极端，使菌体膨大呈梭状。
六、实验分析1. 芽孢染色法是一种特殊的染色方法，可以有效地观察和区分芽孢与菌体的形态结构。
2. 芽孢是细菌在恶劣环境下形成的一种特殊休眠体，具有厚而致密的壁，对各种不利因素具有很强的抵抗力。
3. 芽孢在细菌的生存过程中具有重要意义，可以保护细菌度过恶劣环境。
七、实验讨论1. 在实验过程中，染色时间和染液浓度对实验结果有一定影响，需要根据实际情况进行调整。
2. 芽孢染色法可以应用于多种细菌的芽孢观察，如枯草芽孢杆菌、梭菌等。
3. 芽孢染色法是一种基础实验技术，对于微生物学学习和研究具有重要意义。
八、实验总结通过本次实验，我们掌握了芽孢染色的原理和方法，观察了芽孢与菌体的形态结构，了解了芽孢在细菌生存过程中的重要性。
细菌芽孢染色实验报告
细菌芽孢染色实验报告细菌芽孢染色实验报告引言：细菌芽孢染色是一种常用的实验方法，用于鉴定细菌中是否存在芽孢。
芽孢是细菌在不利环境下形成的一种耐受性很强的结构，能够在干燥、高温等条件下存活。
通过芽孢染色实验，我们可以观察和鉴定细菌的芽孢形态和分布情况，进一步了解细菌的生物学特性。
材料与方法：1. 细菌培养物：我们选择了常见的大肠杆菌和枯草杆菌作为实验材料。
2. 芽孢染色试剂：我们使用了石碱法染色试剂，包括马来酸、石碱和碘液。
3. 显微镜：用于观察染色后的细菌样本。
实验步骤：1. 取一小滴细菌培养物放在玻璃片上。
2. 等待培养物干燥后，加入适量的马来酸，使其覆盖整个细菌样本。
3. 在马来酸上滴加适量的石碱，使其与马来酸充分混合。
4. 加入适量的碘液，静置片刻。
5. 用水冲洗玻璃片，直至水清澈无色。
6. 将玻璃片放在显微镜下，用100倍镜观察细菌样本。
结果与讨论：在观察大肠杆菌样本时，我们发现细菌呈现出长而细的形态，没有明显的芽孢结构。
这与大肠杆菌不具备芽孢形成能力的特点相符。
而在观察枯草杆菌样本时，我们发现细菌呈现出短而粗的形态，并且有明显的椭圆形芽孢结构。
这表明枯草杆菌具备芽孢形成能力，能够在不利环境下形成芽孢以保护自身。
细菌芽孢的形成是一种适应环境的生存策略。
在不利条件下，细菌通过形成芽孢来保护自身免受干燥、高温、辐射等不利因素的伤害。
芽孢是一种具有高度耐受性的结构，能够在极端条件下存活多年甚至几十年。
这种生存策略使得细菌能够在不利环境中存活并传播，从而保持种群的持续存在。
细菌芽孢染色实验是一种简单而有效的方法，可以用于鉴定细菌中是否存在芽孢。
通过观察细菌样本的形态和分布情况，我们可以初步判断细菌的生物学特性和环境适应能力。
然而，芽孢染色实验并不能提供细菌的详细分类和鉴定结果，需要结合其他实验方法和技术进行进一步的分析。
总结：细菌芽孢染色实验是一种常用的实验方法，通过观察细菌样本的形态和分布情况，可以初步判断细菌是否具备芽孢形成能力。
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芽孢染色液（试剂盒）
试剂盒组成：
染色液A：石炭酸复红染液
染色液B：碱性美蓝染色液
产品说明：
芽胞具有高度的折光性，外膜致密，渗透性低，着色和脱色均较困难。
在加热条件下进行染色时，染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料可被酒精脱色，而芽胞上的染料仍保留，经复染剂复染后，菌体和芽胞呈现出不同的颜色。
操作步骤：
1、制作一适当厚度的细菌涂片，自然干燥，通过火焰加热固定。
2、滴加适量染色液 A 于涂片上，在酒精灯上加热，使染液冒蒸汽但不沸腾。
必要时可续加染液以免干涸。
维持4-5 分钟。
3、待标本冷却后以95%酒精冲洗至无红色染液脱出为止，水洗。
4、滴加染色液B 复染约2-3 分钟，水洗至无染液脱出为止。
5、待干后油镜观察。
预期结果：
菌体呈蓝色，芽孢呈红色。
注意事项：
1. 供芽孢染色用的培养物应控制菌龄，要求大部分芽孢仍保留在菌体内为宜。
2. 加热染色时必须维持在染液冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽孢囊破
裂，加热不够则芽孢难以着色。
3. 请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
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提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
储存条件：室温干燥保存，有效期 1 年。
关键词：芽孢染色液
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