光合作用中常用实验方法

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光合作用中常用的实验方法
奉化中学 戴长虹
一、光合作用实验中涉及到的药品和器材 及作用
NaOH(吸收CO2)
Ca(OH)2(检验CO2)
缓冲液NaHCO3溶液 (CO2的来源,保证装置内CO2浓度稳定)
酒精(脱去叶片中的色素,便于观察 淀粉和碘液的颜来自百度文库反应)
碘液(检验淀粉)
灯( 光源 )
布(黑纸)(遮光 )
定CO2的物质是RuBP.
停止CO2供应
半叶法是测定大田农作物光合作用强度的常用方法 之一。 3、 采用“半叶法”对番茄叶片的光合作用强度进 行测定,其原理是:将对称叶片的一部分(A)遮 光,另一部分(B)不做处理,并采用适当的方法 阻止两部分的物质和能量转移。在适宜光照下照射 6小时后,在A、B的对应部位截取同等面积的叶片, 烘干称重,分别记为MA、MB,获得相应数据, 则可计算出该叶片的光合作用强度。
二、光合作用实验的常用方法
饥饿—照光法可以用来验证光合作用的原料或生成 的产物:实验植物先遮光饥饿,再照光,一段时间 后用碘液检测淀粉的生成,其遮光饥饿时为了营造 空白对照,便于结果分析
1、下图是用健壮植株设计的一个研究植物生理的装置, A中装有某种液体。请回答以下问题:
(1)欲通过检测叶片中是否有淀粉 来验证光合作用需要CO2作原料, 应该用__两__个这样的装置, 先都置于__黑__暗__24小时,再置 于_适__宜__强_度__(__相__同__)_的_ ,光照下 且对A的处理应该是_______________。
(1)现在由你进行实验设计, 请写出你的设计思路: 将三种颜色的灯泡分别放在三个图示装 置等距离的位置照射相同的时间,用pH 试纸检测溶液pH的变化。 (2)请预测并简要分析上述实验结果: _黑__藻_在__不__同__光__质_下__光__合__强__度_不__同__,__C_O__2_的_吸__收__量__不_。 同,试管内的pH不同。在白光下光合作用最强,
①卡尔文向密闭容器中通入14CO2,经过不同时间的照光(数
秒直至数十分钟)后,将小球藻放入沸酒精中处理,其目的是
▲ 分离,从出而各使种小化球反合藻应物中时,测的间定化长其合短放物射停性留.上在碳述反实应验的中某卡尔一文阶段是通;然过后
控制 ▲ 来探究14CO2中碳原子的转移路径.
②卡尔文发现光照30秒C,1O4C2固出定现的在第三碳一化个合产物物,五是碳三化合物
叶片不能进行呼吸作用,叶肉细胞间隙仍缺乏气体,因此叶 片仍位于试管底部。(6分)
8.为检测光质(不同波长的光)对水生黑藻光合作用 强度的影响,现提供如下材料,红、绿、白三种颜色 的40W的灯泡数个,试管数只,黑藻数枝,pH试纸, 石蜡油,NaHCO3溶液,请你完成下面的实验设计并 回答有关问题。
实验开始步骤为:在温度为20° 环境中,按右图组装好实验装置。
A
A.下午4时后将整个实验装置遮光3小时 B.下午4时后将整个实验装置遮光6小时 C.下午4时后在阳光下照射1小时 D.晚上8时后在无光下放置3小时
黑白瓶法一般用于测定水生植物光合作用固定的太阳
能或制造的有机物
5.为了调查太湖某一水层是否有自养生物存在,及其产
氧量能否维持本层水体生物呼吸耗氧所需,可用黑白
③按编号顺序分别剪下叶片对称的一半,立即处死,然后依次夹 入湿润的纱布中,放于暗处;4小时后,要再按编号的顺序以同 样的速度剪下另一半叶片,也依次夹入湿润的纱布中。
④返回实验室,将各同号叶片的两半对应叠在一起,在无粗叶脉
处 在用80刀℃片-沿90边℃切下下烘照一干光定5的小面叶时积,片的然两干后个重在叶总分块量析,减天分平去别阻上置黑称止于暗量实两中,个验的记称叶叶录量片数片皿据中,, 进行比较。请回答下列问干题重:总量,再除以的叶光片合数作用产 (1)在该实验中,特定时间段内(4小时)每片叶物块输的出净光合
和六碳化合物,七碳化合磷物酸等甘20油余酸种,化然合后物由中三;而磷当酸把光照时
间缩短为5秒时,14C主要甘出现油在酸一转种变三为磷其酸他甘化油合酸物(三碳化合
物)中,这说明 ▲ .
③为探究固定CO2的化合物,卡尔文改变某实验条件后,发现 RuBP的含量快速升高,其改变的实验条件是 ▲ ,由此得出固
B叶片被截取部分在6小 若M=MB-MA,则M表示 时内光合作用合成的有。机
物总量
3、下面的方法可用来测定田间棉花植株的光合作用强度。操作 步骤如下:
①在田间选有代表性的叶片20片(叶片左右称),挂小纸牌编 号。
②用5%的三氯乙酸点涂叶柄一圈,将叶柄的筛管细胞杀死,并 采取措施尽量保持叶片的自然生长角度。
9.取一植物形态、大小、生长发育状况相同的四张叶片 按下图进行实验,烧杯中的液体可以保证叶片所需的水 与矿质元素的正常供应,气体的移动可以通过观察油滴 的运动判断。(不考虑气体在水中的溶解与外界气压的 变化和蒸腾作用的影响)
(1)适宜的光照下,装置A中油滴的移动情况是
不移动 。
原因是

(2)适宜的光照下短时间内装置B中油滴的移动情况是 _向_左__移__动_,此时装置B叶片的表观光合量___小__于__零。
密封.剩余水样用于测 溶解氧浓度

②将黑、白瓶 挂回原水层

③ 24h后取出黑、白瓶测溶解氧浓度

(2)设计记录所测数据的表格。
黑、白瓶溶氧变化记录表(mg/L)
编号 项目
白瓶
l23 平 均
24h后溶 氧量
原初溶氧
黑瓶 l 2 3 平均
(3)预测实验结果并分析
若WDO-BDO>0,则有自养生物; 若WDO-BDO=0,则无自养生物; 若WDO≥0,则该水层产氧量能维持生 物耗氧量所需。
同位素标记法:通常用来研究光合作用中物质的 转移。
2.光合作用研究史上有许多经典的实验.请分析回答下列问题:
卡尔文将小球藻装在一个密闭容器中,通过通气管向密闭容器
中通入CO2,通气管上使有酶一失个活开,关导,可致以碳控反制应C停O2止的供应,密闭
容器周围有光源,通过控制电源开关可以控制光照的有无.
实验组中用NaOH溶液,对照组中用清水
(2)若装置中的玻璃钟罩全部遮光,A溶液为NaHCO3 缓冲液,则可用这一装置来测定_细__胞__呼_吸__中__氧__气__的_消_ 耗。量 为除去气体膨胀或收缩因素将,植对株照换组成应同为样_大_小__的__死__植__株。 若两个装置起始液面左右相平,一段时间后都是左高右 低,且实验组的液面高度差为10,对照组为2,则可以 得出的实验结论是_细__胞__呼__吸__消_耗_ 了。4个单位的氧
产量的计算方法为_____________。 (2)用三氯乙酸杀死叶柄筛管细胞的目的是_____________。 (3)试验步骤中,有一些措施是为了减少实验误差而设置的, 请你列举两例。
(1)照光的叶片干重总量减去黑暗中的叶片干重总量, 再除以叶片数(2分) (2)阻止实验叶片的光合作用产物输出(2分) (3)(以下内容写出任意两项均可,其它合理的分析 也可得分,每项2分,共4分) ①实验的对象不是一片叶子而是20片叶子; ②采用同一叶片对称的两部分进行对照比较的方法;
(1)光照下,NaHCO3稀溶液中的叶片进行光合作用,释 放出来的氧气多于消耗的氧气,叶肉细胞间隙的氧气增加,
叶片上浮。而蒸馏水中缺乏二氧化碳和氧气,叶片不能进行
光合作用和呼吸作用,叶肉细胞间隙缺乏气体,因此叶片仍 位于试管底部。(6分) (2)黑暗中,NaHCO3稀溶液中的叶片呼吸作用,消耗了 叶肉细胞间隙中的氧气,放出二氧化碳溶于NaHCO3稀溶液 中,叶肉细胞间隙缺乏气体,叶片下沉。蒸馏水中缺乏氧气,
(3)若不增加实验用具,指出另一种检测 该实验结果的简便方法:
__________直__接_观__察__气__泡__释_放__的__速__度__。__。
(4)若上述实验效果不明显,请设计一种 增加光合强度的方法: 适当提高温度、适当增加光照强度、 _适__当_提__高__C_O__2_浓__度_。_________。
变式题5 某研究小组从当地一湖泊的某一深度取得一 桶水样,分装于六对黑白瓶中,剩余的水样测得原初 溶解氧的含量为12 mg/L,白瓶为透明玻璃瓶,黑瓶 为黑布罩住的玻璃瓶。将它们分别置于六种不同的光 照条件下(由a→e逐渐加强),24小时后,实测获得 六对黑白瓶中溶解氧的含量,记录数据如下:
光照强度(klx) 白瓶溶氧量mg/L 黑瓶溶氧量mg/L
(填大于、小于、或等于)放置一段时间后,装置中的 氧气消耗完,这时油滴的移动方向是_不__移__动_。写出此时
叶片进行的生理反应的方程式_______________ 。
(3)分析装置C中油滴移动情况与光合作用和呼吸作用 的关系 ①当光合作用强度大于呼吸作用强度时,油滴向_向__右_移动 ②当光合作用强度等于呼吸作用强度时,油滴向_不___移动
③先后两次剪下的叶片同样保存在湿润的纱布中;
④用于烘干和称重的各叶片两半的部位和面积相同。
4.某同学欲测定植物叶片叶绿体的光合作用速率,作如 图所示实验。在叶柄基部作环剥处理(仅限制叶片有机 物的输入和输出),于不同时间分别在同一叶片上陆续 取下面积为1cm2的叶圆片烘干后称其重量,测得叶片的 叶绿体光合作用速率=(3y-2z-x)/6 g·cm2·h(不考虑 取叶圆片后对叶生理活动的影响和温度微小变化对叶生 理活动的影响)。则M处的实验条件是( )
0(黑暗) 4 4
abcde 12 18 26 32 32 44444
(1)黑瓶中溶解氧的含量降低为4mg/L的原因 是 黑瓶中的生物呼吸消耗氧气,没有光;照,
植物不能进行光合作用产生氧气
该瓶中所有生物细胞在24 h内呼吸消耗的O2量为 8 mg/L。
(2)当水层光照强度为c时,在24h内白瓶中植物产生 的氧气量为 22 mg/L。光照强度至少为 a (填字 母)时,该水层产氧量才能维持生物正常生活耗氧量所 需。当光照强度为 d (填字母)时,再增加光照强 度,瓶中溶解氧的含量也不会增加。
(3)若将a光照下的白瓶移至d光照下,则瓶中植物细 胞的光合作用速率 加快,其主要原因 是光反应产生的ATP和NADPH增多。被还原后的C3经 一系列变化可形成 糖类、C5 。
真空渗入法:是制备细胞间隙不含气体的叶片的 一种实验技术,用打孔器打下叶圆片,放于加满 水的注射器中抽吸,重复几次,使圆片下沉,等 下沉的叶圆片重新上浮时,则标志植物光合作用 释放的氧气多于呼吸作用消耗的氧气。
瓶法测定该水层生物昼夜平均代谢率来判定。白瓶为
透明玻璃瓶,其水体溶解O2的昼夜变化值为水中生物
光合作用产生的O2与呼吸消耗的O2的差值(以WDO
表示);黑瓶为黑布罩住的玻璃瓶,瓶中水体溶解O2
的昼夜变化值为水中生物呼吸消耗的O2(以BDO表
示)。请完成下列实验。
(1)实验步骤:
①用采水器取该层水样,分别注满500mL黑、白瓶并
(4)能否直接用B、D装置证明光合作用需要光。 不能,因为都缺少CO2,均不能进行光合作用。
(5)能否直接用C、D装置证明光合作用需要二氧化碳? 为什么?如果用B、C装置证明光合作用需要二氧化碳, 应该先将叶片做怎样的处理?
6. 为了验证叶片在光合作用和呼吸作用过程中有气体的 产生和消耗,请用所提供的实验材料与用具,在给出的 实验步骤和预测实验结果的基础上,继续完成实验步骤 的设计和预测实验结果,并对你的预测结果进行分析。
实验材料与用具:烟草幼苗、试管两支、NaHCO3 稀溶液(为光合作用提供原料)、真空泵、暗培养箱、 日光灯(实验过程中光照和温度等条件适宜,空气中O2 和CO2在水中的溶解量及无氧呼吸忽略不计)。
实验步骤和预测实验结果: (1)剪取两小块相同的烟草叶片,分别放入盛有 等量蒸馏水和NaHCO3稀溶液的两支试管中。此时,叶 片均浮在水面。 (2)用真空泵抽去两支试管内液体中和叶肉细胞 间隙中的气体后,敞开试管口,可观察到叶片均下沉到 试管底部。 (3)
. .. 分析预测结果:
(3)将这两支试管放在日光灯下,照光一段时间。结果: NaHCO3稀溶液中的叶片上浮,蒸馏水中的叶片在试管底部。 (5分) (4)再将这两支试管放在暗培养箱中一段时间。结果: NaHCO3稀溶液中的叶片下沉,蒸馏水中的叶片仍在试管底 部。(5分) 分析预测的结果:
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