食源性致病菌快速检测方法研究报告

合集下载

食源性致病菌快速检测技术研究进展

食源性致病菌快速检测技术研究进展

食源性致病菌快速检测技术研究进展食品是人类赖以生存的物质基础,其安全性直接关系到环境安全和人类健康。

近年来,随着经济全球化进程的加快,食品安全已成为当今世界性公共卫生热点[1]。

据WHO估计,全世界每年发生食源性疾病数十亿人,每年约有二百万儿童死于腹泻,其中66%以上是由细菌性致病菌所致[2]。

食源性致病菌导致的疾病是食品安全的关键问题,而食源性致病菌是影响食品安全的主要因素,因此,检测食源性致病菌是食源性疾病预防与控制的关键环节。

传统的微生物检测方法主要包括细菌的分离培养和生化鉴定等,在实际检测中周期较长、工作量大,对致病菌的检测特异性不高、灵敏度低、操作烦琐耗时,不能实现及时有效的监测。

随着免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,近年来已创建不少快速、简便、特异、敏感的微生物学检测方法,明显加快了微生物检验速度,显著提高了检测水平,采用快速、准确而简便的食源性致病菌鉴定方法已成为食品安全质量控制中的重要问题,因此快速、简便、特异的检测方法成为研究的热点。

1、酶联免疫法酶联免疫法是以酶或者辅酶作为标记物,标记抗原或者抗体,用酶促反应的放大作用来显示初级免疫学反应。

既可测抗原,也可测抗体,可进行定性和定量测定,该法具有灵敏度高、选择性好、结果判断客观准确、实用性强、样品处理量大等优点。

酶联免疫法主要分3类:间接法测抗体、双抗体夹心法测抗原、竞争法测抗原。

前两种方法主要用于测定抗体和大分子抗原,适用于临床诊断,而竞争法是测定小分子抗原的方法,尤其适用于食品安全检测[3]。

酶联免疫技术现已广泛地应用于病原微生物的检验,酶联免疫法可检测食品中沙门氏菌、军团菌、大肠埃希菌0157等微生物。

其中沙门菌是引起细菌性食物中毒的最主要的致病菌,严重影响着食品安全。

传统的沙门菌检测试剂复杂、周期长,远远不能适应实际需要,而酶联免疫法则能方便、快速地检测出食品中污染的沙门菌。

文其乙等[4]应用直接酶联免疫法对500份蛋品进行检测,表明方法可靠,且阳性率比国标法高,经用生化实验进一步验证,确认国标法存在一定的漏检。

食源性致病菌快速检测方法研究报告

食源性致病菌快速检测方法研究报告

食源性致病菌快速检测方法研究报告摘要】目的应用酶联免疫吸附实验(ELISA)快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。

方法样品经增菌后,用ELISA法及国标法对样品中的沙门菌进行初步检测,并比较ELISA法检测结果与国标法灵敏性、特异性、符合率。

结果检测200份奶类制品和肉制品,经ELISA法检测阳性率为8.3%,国标法阳性率为6.7%。

ELISA法敏感性、特异性分别为100%、97%,与国标法符合率达99.3%。

结论 ELISA法可快速、方便的对食品中沙门菌的污染情况进行初步检测,灵敏度高、特异性好,与国标法符合率高。

适用于食品中沙门菌的初步检测。

【关键词】奶制品肉制品沙门菌 ELISA沙门菌为常见的引起食源性疾病爆发的病原菌,在我国微生物性食物中毒中一直位居首位,而受沙门菌污染的奶、肉制品为造成人类感染的主要来源,因此沙门菌一直为医疗卫生、食品卫生及商检部门重点检验对象之一[1]。

本研究采用ELISA法检测奶、肉制品中沙门菌,并与国标法进行比较研究,现报道如下:1 材料与方法1.1实验材料奶、肉制品分别来自本市8家不同超市,包括70份奶及奶制品样本,60份肉及肉制品样本。

取样均采取随机抽样的方法进行。

每份样品250ml或250g,经无菌包装后置冷链保存送实验室检测。

缓冲蛋白胨水,氯化镁孔雀绿增菌液,四硫酸钠煌绿增菌液,亚硒酸盐胱氨酸增菌液,亚硫酸铋琼脂,DHL琼脂,HE琼脂,WS琼脂,SS琼脂,三糖铁琼脂,蛋白陈水、靛基质试剂,尿素琼脂(pH7.2),氰化钾(KCN)培养基,氨基酸脱梭酶试验培养基,糖发酵管, ONPG培养基,半固体琼脂,丙二酸钠培养基,沙门氏菌因子血清。

均按国标相关规定进行。

ELISA相关试剂均购自试剂公司。

1.2实验方法样品按国标法相关规定预先增菌。

样品处理后于36°C培养4h,转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液中,42°C18-24h,另取10ml转种于亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,36°C18-24h。

食源性致病菌及其检测技术的调查

食源性致病菌及其检测技术的调查

食源性致病菌及微生物检测技术的调查报告目录前言 (2)1 食源性致病菌概述 (2)1.1 食源性致病菌的定义及种类 (2)1.2 食源性致病菌对人体健康的影响 (3)1.3 食源性致病菌引起的食品安全问题 (3)1.3.1 国际情况 (3)1.3.2 国内情况 (3)1.3.3 食源性疾病不断上升的原因 (5)2 国内外的食品微生物标准检验体系 (5)2.1 国外主要食品微生物检测体系 (6)2.2 国内主要食品微生物检测体系 (6)2.3 常见食源性致病菌检测执行标准 (6)2.4 国标中致病菌常规检测方法流程 (7)3 微生物检测技术的发展现状 (8)3.1 常规微生物快速检测技术现状——传统计数改良法 (8)3.2 常规微生物快速检测技术现状——快速检测微生物数量的新方法 (10)3.2.1 ATP生物荧光法 (10)3.2.2 检测微生物产生的CO2量的方法 (10)3.2.3 电化学方法(电导率法或电阻抗法) (10)3.2.4 颜色变化 (11)3.2.5 流式细胞技术 (11)3.2.6 热量法 (12)3.2.7 放射测量法 (12)3.3食源性致病菌快速检测方法 (12)3.3.1 显色培养基法 (12)3.3.2 免疫学方法 (13)3.3.3分子生物学检测方法 (15)4 小结 (16)前言近年来我国食品安全频频出现问题,食品安全问题已经成为生活中不可不谈的话题。

同时食品引发的中毒事故频发,媒体曝光度增加,消费者对食品安全的重视程度与日俱增,国家也加大了食品安全问题的整顿和监管力度。

根据国家食品药品监管总局法制司19日发布的通知,国务院已将《食品安全法》修订工作列入2013年立法计划。

影响我国食品安全的最主要因素是微生物污染和化学性物质污染,而由病原微生物引起的食源性疾病是影响食品安全的最主要的因素之一。

化学污染监管,将进入长期化和制度化;食源性疾病,这一食品安全隐患因微生物性食物中毒事件屡次发生,它也不会再继续“潜伏”。

食源性致病菌快速分子学检测方法探讨

食源性致病菌快速分子学检测方法探讨
的 S B R e 探 针 , Y E ge n r 由于此 探 针 的 非 特 异 性 , 于 食 源 性 致 病 菌 的 检 测 而 对 言 , A 的 检测 假 阳 概 率 很高 。 BX 生 另外
结 合其 硬 件 平台 推 出的 检 测 系 统 等 。 目
(a n l e tr a 、 S eL n ) 单核增生李斯 L mo a ei c
Bo o t l iC nr 公司针对 P R 法在致 o C方
发的R a t — C 平台使其在致病菌 el i P R me
检测领域得以应用。
i Ch k 用 伯 乐 公 司 专 利 Q e 采 c
的 D u I S n 探 针 取代 传 统 的 O b e ta d r Moe u rB a o s l l ec n 探针。 ca 由于Moe ua l l c r B a o s 针 的发夹环 结构 的不 稳定 e c n探 性 D u l Srn 探针则很好地解决了 o be t d a 此类问题 , 使得R a i P R e l me C 反应结 t 果更准确 。 另外 . 乐公司开发的专利 伯 目标菌D A N 提取 简易流程 使其相 比其
础上开发了软件 系统 及试剂盒 , 可检测
对 于样本 中的 目标茵 先 采用专利 设 的P ke 免疫磁珠提取系统进行富集 . iPn c 再选 用旋转式的R —P R T C 仪进行硬件 梭
项 目主要包括 : 沙门氏菌 李斯特菌属、 单核 增生李 斯特菌 、 弯曲菌 、 大肠杆菌
检测增加了工作量和难 度。 由于该系 但
统 检 测 项 目较 多 进 入 中国 市场 较 早 . 目
1B X . A 系统 及其检 测方法
杜 邦 所 收 购 的Q ac n( 力康 ) u lo 快 i 公

食源性致病菌的检验检测

食源性致病菌的检验检测

食源性致病菌的检验检测 杭婧 淮安市食品药品检验所在世界范围食源性疾病问题都普遍存在,这其中很大程度上都与食源性致病菌有关系。

因此,针对食源性致病菌的检验检测对于提高人们的健康水平有着至关重要的作用。

而现代检测技术在不断发展的过程也形成了一套相对较为完整的食源性致病菌的检验检测体系。

本文基于此开展研究,对食源性致病菌最新检测技术及其研究进展进行简述。

传统的细菌培养技术在我国国标中,传统的细菌培养技术仍然是占有重要地位。

其检验检测的原理主要是对样品中的微生物进行增殖,然后利用划线分离,实施选择性培养,进而观察菌落特征,实现检测目标。

随着生物技术的不断发展,灵敏度高、特异性强显色培养基投入到检测过程,有效提高了筛选效率。

在后续的生化鉴定过程中,全自动微生物鉴定分析系统的使用可以简化试验步骤、缩短试验周期,并且能更高效地得出试验结果。

但是,该方法的弊端就在于操作繁琐,检测周期长,在一些应急情况下无法满足检测要求。

免疫学技术ELISA技术。

ELISA技术是基于免疫学抗原-抗体特异性结合的检测方法。

对于沙门氏菌检测有着较好的检测范围和灵敏度。

使用该方法进行沙门氏菌的检测也需要对于食品中的微生物进行增殖。

很多学者利用该方法针对多种细菌进行检测,发现WLISA技术可以在24小时内实现对多种食源性致病菌。

例如,应用ELISA原理生产出的mini-Vidas全自动免疫分析仪可在2天内完成对沙门氏菌、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌和空肠弯曲菌等细菌的筛选。

免疫荧光标记。

该方法属于食源性致病菌检测中的一类新型免疫学检测法,原理上主要是基于特异性抗体敏化的免疫色谱卡片。

在具体操作中,仅需要将实现进行增殖后的样品滴加到免疫色谱卡上,就能够用肉眼直接观察结果。

该方法在操作上十分便捷,无需其他设备辅助,具有较好的适应性。

虽然同ELISA法一样需要进行样品的增殖,但增殖后的操作时间大概仅有10分钟。

PCR技术PCR法是基于核酸的一类检测方法,任何一类生物都有特异性的核酸片段,它们通过含有探针的补体核酸片段来进行检测,通常探针都是含有放射性同位素。

PCR快速检测4种不同食源性致病菌的研究

PCR快速检测4种不同食源性致病菌的研究

临床研究者只用漱口液棉球进行擦洗,不漱口;1.2.3 实验组口腔护理的方法是:对镶有假牙的患者,应先取下假牙用冷水冲洗刷净;对于能漱口或可以进行口腔冲洗的病人,护理人员将牙刷沾湿涂上适量的牙膏刷洗病人牙齿的各面、牙龈及舌面,然后给予温开水漱口或进行口腔冲洗;不能漱口和不可以进行口腔冲洗的病人,先将病人侧卧或头偏向一侧,护理人员将牙刷沾湿涂上适量的牙膏刷洗牙齿的各面、牙龈及舌面,然后用温开水棉球擦净牙膏泡沫,棉球不可过湿,以免漱口液吸入呼吸道,血管钳须夹紧棉球,每次1只,防止棉球遗留在患者口腔内;凝血功能较差的病人,应用软毛牙刷或将牙刷用开水烫软后再进行刷洗,刷洗牙齿时动作要轻,防止损伤口腔粘膜;能够配合的病人只需一名护士即可完成操作,不能配合的病人需两人配合操作,一人协助固定头部并撑开病人的口腔及上下牙齿,另一人进行刷洗,刷洗时动作要轻,以免损伤粘膜。

1.2.4 每次口腔护理后,由护士长带领2-3名经验丰富的护士进行观察评价并记录,观察评价内容包括:每次口腔护理的材料成本、有无口臭、口腔是否清洁、口腔有无感染、口腔粘膜有无出血、口腔粘膜有无机械损伤等。

2 结果2.1 对照组口腔护理的材料成本≥7.44元/次,实验组口腔护理的材料成本<1.00元/次;2.1 两组口臭、口腔不洁、口腔感染、口腔粘膜出血、口腔粘膜机械损伤等情况见表3、表4。

表3 两组口臭、口腔不洁、口腔感染情况比较例数口臭口腔不洁口腔感染例数百分比(%)例数百分比(%)例数百分比(%)对照组53214014341120实验组53122436 X222.943710.6000 5.2671p<0.0001=0.00110.0217表4 两组口腔粘膜出血、口腔粘膜机械损伤情况比较例数口腔粘膜出血口腔粘膜机械损伤例数百分比(%)例数百分比(%)对照组533612实验组5336123 结论3.1 由结果可以看出实验组每次口腔护理的材料成本远远低于对照组,说明危重病人使用牙膏牙刷进行口腔护理能大大降低了口腔护理的材料成本;3.2 经卡方检验,对照组与实验组比较在防治口臭、清洁口腔、防止口腔感染上差异有显著性统计学意义(p<0.05),说明危重病人使用牙膏牙刷进行口腔护理能有效清洁口腔、防治口臭、防止口腔感染;3.3 从表4可以看出对照组与实验组的口腔粘膜出血、口腔粘膜机械损伤例数相等,说明危重病人使用牙膏牙刷进行口腔护理不会增加口腔粘膜出血和口腔粘膜机械损伤的机会。

食品中致病菌的快速检测技术研究

食品中致病菌的快速检测技术研究

食品中致病菌的快速检测技术研究食品安全一直是人们关注的焦点,食品中的致病菌往往会给人们的健康带来严重威胁。

因此,研究食品中致病菌的快速检测技术显得尤为重要。

本文将探讨当前食品安全领域中的一些新兴技术,并讨论其在食品检测中的应用前景。

首先,快速检测致病菌技术中的一项重要进展是基于PCR方法的检测技术。

PCR(聚合酶链反应)是一种分子生物学技术,可以快速复制并扩增特定的DNA序列。

以此为基础,科学家们开发出了一系列快速、高灵敏度的PCR方法,用于检测食品中的致病菌。

这些方法通过检测食品样品中的致病菌特定基因的存在与否,可以快速准确地判断食品的卫生状况。

其次,近年来,光学传感技术的应用给食品检测带来了一系列的创新。

光学传感器可以通过测量食品样品中特定物质的吸收光谱或发射光谱来判断样品中是否存在致病菌。

这种技术不仅可以实现快速检测,还具有灵敏度高、非侵入性等优点。

此外,激光散斑技术也被应用于食品安全领域中的快速致病菌检测。

激光散斑技术通过测量食品表面激光光斑的散射和衍射情况,可以对样品中的细菌进行非接触式的检测。

除了传统的实验室方法外,生物传感技术也被广泛应用于食品安全领域中的致病菌快速检测。

例如,基于免疫反应的生物传感技术利用抗体和抗原的特异性结合来检测致病菌。

这种技术灵敏度高、选择性强,可以在短时间内检测出食品中的致病菌。

另外,基于DNA杂交的生物传感技术也被广泛研究和应用。

这种方法通过将食品样品中的致病菌RNA与DNA探针杂交,然后通过特定的检测方法来测量杂交物质的存在,从而判断样品中是否存在致病菌。

当然,上述的技术只是众多食品安全领域中致病菌快速检测技术的冰山一角。

随着科技的不断进步,越来越多的新技术被应用于食品安全领域。

例如,纳米技术可以通过纳米材料与致病菌的特异性相互作用,实现对致病菌的快速检测。

此外,微流控技术的应用也有望在食品中的致病菌快速检测领域产生重要影响。

利用微流控技术,可以实现对微小样品的高通量、自动化检测,从而提高食品样品的分析效率和准确性。

食源性致病菌快速检测方法的研究

食源性致病菌快速检测方法的研究

B技I分析与检测食源性致病菌臟检测方法的研究□何苗吉林省安信食品技术服务有限责任公司陈兴长春生物制品研究所有限责任公司王璐任明月岳阳吉林省安信食品技术服务有限责任公司摘要:近年来,人们在日常生活中面临着越来越多的食品安全问题,从三聚氰胺奶粉到地沟油、毒生姜等,食品安 全问题正在逐渐影响着人们的健康。

造成食品安全问题的原因有很多,食源性致病菌是其中非常重要的感染源,是食品卫 生问题的主要源头,对于食源性致病菌必须要尽早地进行检测和防治,以确保食品的卫生安全。

本文总结了目前食源性致 病菌快速检测的几种方法,希望通过对这些方法的研究能够更快地检测出食品中致病菌,保证食品的卫生安全。

关键词:食品安全;致病菌;快速检测1免疫学检测免疫学检测是近些年来食源性致病菌检测中比较常用的方法,其原理 是根据免疫学的理论和技术,对食品 进行检测,食物中的微生物表面具有 独特的表面抗原,能够激发机体内的 抗体,通过抗体跟抗原的特异性结合 反应来检测食物,可以快速准确地得 到检测结果[1]。

免疫学检测方法比较 常用的有这四种:酶联免疫吸附法、荧光免疫检测法、免疫胶体金标记分 析法、免疫磁珠技术。

l.i酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法最主要的是让抗体和酶复合物结合,利用酶复合物对 抗体的高效催化性能,将两者的反应 现象放大观察,更清楚迅速地检测出 致病菌。

在进行检测之前,将酶与待 测菌按照一定比例放置在载体上,然 后加入酶的催化底物,检测发生反应 的酶与待测菌的量,就可以确定待测 菌是否是致病菌,这种检测方法中酶 的催化反应放大了微生物的反应现象, 使得检测结果更加清楚快速。

1.2荧光免疫检测法荧光免疫检测法就是通过对检测 物进行焚光成像或焚光光度计检测,标记检测物的荧光信号,对荧光信号 进行分析从而判定检测物中是否含有 致病菌。

检测物中一般都含有一定的 荧光活性分子,检测物中的成分不同,荧光信号也不尽相同,这种通过荧光 信号来检测致病菌的方法,在可视化 检测领域具有很好的发展前景。

食源性致病菌快速检测方法研究进展

食源性致病菌快速检测方法研究进展

索特 异性灵 敏度 高 、 简 捷 且 能 实 时监 测 与 控 制 的检
测 方 法 成 为 广 大 研 究 者 追 求 的 目标 。本 文 就 近 年 来
放 射测 量法 定量 测定 大肠 埃 希 菌 , 其 特 异 性 敏 感 性 均较传 统方 法高 。
4 ELI S A法
有关食 源性 致病 菌快 速检 测方 法 的进展 作一综 述 。
摘要 食 源性 致病 菌快 速检测方 法近年来得 到了较快的发展 , 目前研究较多 的是 电阻抗技 术、 微热量 技术 、 放射测量 法、 E L I S A法 、 P C R技 术、 基 因芯片技术 、 生物传感器技 术 , 这些新技 术均具有 特 异性强 、 灵敏 度高 、 检测 时 间短 等优 点。而 P C R技术 、 基因芯片技术 、 生物传感器技术是 目前研究 的热点 , 但均存在一定 程度 的不 足, 仍需要不断 的改进。
2 微 热 量 技 术
该 技 术 通 过 测 定 细 菌 生 长 产 生 热 量 的 变 化 来 判 断 是 否 存 在 细 菌 和 鉴 别 其 种 类 。 通 过 微 热 量 计 测 定 细 菌生长 产生 的热 量 等 数 据 , 并 经 过 计 算 机 处 理 后
在 记 录 器 上 绘 制 出 热 量 一 时 间 曲 线 图 。将 试 验 所 得 的 热 量 一 时 间 曲线 图与 已知 细 菌 的热 量 一 时 间 曲 线
5 P CR 技 术
抗 曲线 , 因 此 有 利 于 鉴 定 细 菌 。该 技 术 特 异 性 及 灵 敏性 较高 、 操 作 简单 、 反 应 快 ,目前 主 要 用 于 检 测 食
品细 菌总 数 、 大肠杆 菌 、 酵母菌 、 沙 门 氏菌 、 霉 菌 。 有

食源性致病菌快速检测技术及其标准化应用研究进展

食源性致病菌快速检测技术及其标准化应用研究进展

吴鹏,孙雅和,朱旭丽,等. 食源性致病菌快速检测技术及其标准化应用研究进展[J]. 食品工业科技,2024,45(5):426−437. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023060053WU Peng, SUN Yahe, ZHU Xuli, et al. Research Progress on Rapid Detection Technology and Standardized Application of Foodborne Pathogens[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(5): 426−437. (in Chinese with English abstract). doi:10.13386/j.issn1002-0306.2023060053· 专题综述 ·食源性致病菌快速检测技术及其标准化应用研究进展吴 鹏1,孙雅和1,朱旭丽1,周树华1, *,张成云2,*(1.浙江省标准化研究院,金砖国家标准化(浙江)研究中心,之江标准化智库,国家市场监管数字化研究与应用技术创新中心,浙江杭州 310007;2.文成县食品药品综合检测中心,浙江温州 325399)摘 要:随着新型食品安全检测技术的快速发展,食源性致病菌快速检测技术改善了传统检测方法周期长、灵敏度低等缺陷,对于保障民众生命健康和经济社会发展起到重要作用,而标准化则是推动快速检测技术应用推广的关键和前提。

本文系统介绍了生理生化检测技术、免疫学检测技术、分子检测技术等目前使用较多的食源性致病菌快速检测方法,总结了各类不同方法的技术原理、研究进展及优缺点,并从标准化角度进一步介绍了国内外快速检测技术的标准现状以及应用实践情况。

新型快速检测技术具备灵敏、快速、特异性强的优势,但也存在一定的缺陷,如免疫检测技术抗体前处理较为麻烦,生理生化检测技术有污染菌混淆问题,分子检测技术有一定假阳性等。

食源性致病微生物的快速检测方法及其研究现状

食源性致病微生物的快速检测方法及其研究现状
Ke y wor ds : f oo d b om ep a t h og e n ;f o od s a f e t y; r a pi dd e t e c io t n
无 论在 发达 国家还是在 发展中 国家 ,食源性疾 病 都是危 害公众健康 的重要 因素 。其 中,由微 生物 引起
ha s a t t r a c t e d mo r e nd a mo r e a t t e n t i o n.Thi s pa pe r r e vi e we d he t d e ve l o p me n t o f i mmu n ol o gi c a l a n a l ys i s ,PCR , nu c l e i c a c i d p r o be d e t e c i t o n t e c hn i q u e , e l e c t r i c a l i mp e d a n c e ,g e ne c h i ps , bi os e ns o r s , p r o t e i n c hi ps nd a n a n og o l d d e t e c io t n me ho t d n i r a pi d d e t ct e i o n of f o d bo o me pa hog t e n .
米金技术等,这些方法的应用将为食品安全提 供有力的保障,同时促进我国食品工业的健康发展 。
关键 词 :食 源 性致 病微 生 物 ;食 品安 全 ;快速 检 测 文 章篇 号 : 1 6 7 3 . 9 0 7 8 ( 2 0 1 3 ) 2 - 4 3 8 - 4 4 2
Re v i e ws 0 f Ra pi d De t e c t i o n M e t ho d s f 0 l r

PCR技术检测食源性致病菌的研究进展_徐晓可

PCR技术检测食源性致病菌的研究进展_徐晓可

的病原菌属 , 是细菌性食物中毒中发病率最高的一 种 。 据报道 , 我国细菌性食物中毒中 70 %~ 80 %是 由沙门氏菌引起的 。目前 , 用于沙门氏菌 PCR 检测 的靶 基因 包括 :invA 、invB 、invC 、invD 、invE 、hilA 、 fimA 、rfb 、agf A 、viaB 以及与质粒毒力相关的 SPV 基 因等 。 其中 invA 基因是毒力岛 SP11 基因之一 , 是 产生致病性的关键因子 , 它常用来作为 PCR 检测沙 门氏菌的靶基因 。例如 , T Zahraei 等利用 invA 基因 检测从烤鸡分离的沙门氏菌[ 1] 。 也有一些学者利用 invA 基因 与其 它基 因 组合 对沙 门 氏菌 进 行多 重 PCR 检测 。 如 Chiu 等利用基因 invA 和 SPVC 建立 了一种多 重 PCR 体 系用于 粪便 中沙 门氏 菌的 检 测[ 2] 。又如 Karami 等利用 invA 、rfbE 和 rfbS 3 个基 因建立了一种多重 PCR 体系用于快速检测鼠伤寒 沙门氏菌[ 3] 。 1.2 单核细胞增生李斯特氏菌
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引 发 多种类型感染和食物中毒的病原菌 , 由此菌引起的 食物中毒发生频率很高 。 目前 , 金黄色葡萄球菌常 用的目标基因包括毒素相关基因和特异性鉴 别基 因[ 6] 。毒素相 关基因包 括传统的 SEA 、SEB 、SEC 、 SED 基因及新发现的肠毒素基因 SEI 、SEJ 等 。 特 异性 鉴别基 因主要 包括 nuc 、clfA 、 scpA 、sspB 等 。 鉴于多重 PCR 技术的诸多优点 , Sharma 等建立了一 种多重 PCR 检测肠毒素 A ~ E , 可在 3h ~ 4h 内检测 出毒素基因 A ~ E , 且与标准的免疫检测有近 99 % 的对应性[ 7] 。Mehrotra 等通过两个 PCR 反应体系同 时检测了包括肠毒素 SE 、TSST-1 、Ets 、mecA 在 内的 10 种毒素基因 , 且效果很好 , 有很好的应用前景[ 8] 。 1.4 肠出血性大肠埃希氏菌

食源性致病微生物快速检测技术研究进展

食源性致病微生物快速检测技术研究进展

1 . 速纸 片法 2快
测 试 片 为 预 先 制备 好 的培 养基 系统 和一 种 冷 水
可 溶性 的凝 胶 剂 , 以及 由于 检测 项 目不 同而不 同 的指
示 剂 。它 由上 下 2 薄 膜组 成 , 层 的聚 乙烯 薄膜 上 层 下
印 有 网格并 且覆 盖有 细 菌生 长 的培 养基 , 层是 聚 丙 上 烯 薄膜 。使 用 时接 种 1 L待测 样 品 的稀释 液 在下 层 m 的培 养 基上 , 上 上层 聚丙 烯 薄 膜 即可 完 成 , 常 只 盖 通
需 2~8 4 4 h即可得 出结 果 。纸片法 已成 功用 于大肠 杆
H本 流行 ,0 6年更是 横 扫 了 日本 除冲绳 岛 和青森 外 20 的所有 县 , 患者 人数 已近百万 I 因此 , 强对 食源 性 。 I 。 加
致 病微 生物 的监 测 ,发 展快 速 灵敏 的检 验 检测 技术 ,
成或 显微 点 样技 术 将 大量 D A探 针 有 序地 固化 于支 N
2 酶 联 免 疫 吸 附 法
酶 联 免 疫 吸 附 ( ny —ikdi mu oob n s E zme l e n m n sre t — a sy 简 称 E IA)是 一种 崮相 酶 免 疫 分 析 方 法 , 是 a, LS , 它
文章 编 号 :0 5 4 4 ( 0 0 0 — 0 6 0 10 — 94 2 1 )6 0 9 ~ 4
近年来 , 随着 人 们 生 活水 平 的不 断 提 高 , 品 安 食 全越 来越 受到 重视 和关 注 。 济 贸易全球 化 又使得 食 经 源性 疾病 成 为世 界性 公共 卫 生 问题 , 无论 是 发 展 中 国 家还 是发 达 国家都 不可 避免 I 诺 罗是一 种病 毒 , 们 I 。 人 通 常 因为吃 了牡蛎 之 类 的贝类 感 染 , 引发 急 性肠 胃 并 炎 和食物 中毒 。自 2 0 0 4年开 始 , 罗病 毒连续 2 在 诺 年

食品中食源性致病菌的检测与防控措施研究

食品中食源性致病菌的检测与防控措施研究

食品中食源性致病菌的检测与防控措施研究对于人类来说,食物是生活中至关重要的一部分。

食物的安全问题一直备受关注,特别是食源性致病菌的检测与防控措施,关系着人们的健康和生命安全。

食源性致病菌是指能够通过食物传播的微生物,如沙门氏菌、大肠杆菌等。

这些致病菌存在于食物中,食用后可能引发食物中毒或其他消化道感染。

因此,对食源性致病菌的检测与防控措施的研究非常重要。

一、食源性致病菌的检测方法为了保障食品安全,科学家们开发了许多食源性致病菌的检测方法。

常见的检测方法包括传统培养法、快速培养法和分子生物学方法。

传统培养法是最常用的方法之一。

它基于菌落计数和形态学特征来检测食源性致病菌。

然而,传统培养法需要比较长的培养时间,并且有一些致病菌可能无法在培养条件下生长,这导致了潜在的误差。

快速培养法的出现解决了传统培养法的一些缺点。

这些方法利用快速生长的细菌,如大肠杆菌,来检测食品中的致病菌。

这种方法的优点是快速、准确,但有时也容易产生误报。

分子生物学方法是近年来食源性致病菌检测领域的一项重大突破。

这些方法使用核酸提取和PCR技术来检测食品中的致病菌。

与传统培养法相比,分子生物学方法的优点在于高灵敏度和高特异性。

这种方法能够准确、快速地检测出食源性致病菌的存在。

二、食源性致病菌的防控措施除了检测食源性致病菌,防控措施也是非常重要的。

只有采取科学有效的措施,才能从根本上保障食品安全。

首先,食品生产过程中的卫生管理至关重要。

所有从事食品生产的企业和个人都应遵守相关的卫生规范,确保食品生产的环境和设施符合卫生标准。

定期进行清洁和消毒,以减少致病菌的滋生和传播。

其次,食品加工过程中的温度控制也是至关重要的一环。

致病菌的生长需要适宜的温度,因此,在食品加工过程中,需要合理控制温度,确保食品在安全的温度范围内加工。

此外,合理存储和运输也是防控食源性致病菌的重要措施。

食品在存储和运输过程中,如果没有得到妥善的处理,则可能导致细菌的繁殖和传播。

食品中致病菌的快速检测方法研究

食品中致病菌的快速检测方法研究

食品中致病菌的快速检测方法研究随着人们对食品安全的关注不断增加,食品行业的质量控制问题成为社会关注的焦点。

其中,食品中致病菌的检测问题至关重要。

传统的致病菌检测方法通常耗时长、操作繁琐,这使得快速、准确地检测致病菌成为食品安全领域研究的重点。

近年来,随着生物技术和分子生物学的迅猛发展,一些新的快速检测方法应运而生。

其中,PCR(聚合酶链式反应)技术被广泛应用于食品中致病菌的研究和检测。

PCR技术通过扩增致病菌所特有的基因序列,可以在短时间内对食品样本中的致病菌进行检测,并且具有高度的准确性和敏感性。

目前,PCR技术在食品检测领域已经建立了一系列标准化的方法,可以广泛应用于不同类型食品的致病菌检测。

另一种快速检测致病菌的方法是基于免疫学原理的技术,如酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫荧光法(IFA)。

这些方法通过检测致病菌特异性抗体与目标菌种之间的结合反应,来实现对食品样本中致病菌的快速检测。

这些方法具有操作简便、结果易读等优势,但同时也有一定的局限性,比如无法区分活菌和死菌,以及对样本处理要求较严格等。

同时,在致病菌快速检测方法研究中,纳米材料技术也逐渐走进了人们的视野。

纳米材料具有较大的比表面积和独特的物理化学性质,这使得其在食品中致病菌检测中具有广泛的应用前景。

例如,金纳米颗粒可以通过与致病菌特异性抗体的结合来产生可见的颜色变化,从而实现快速检测。

此外,纳米材料还可以用于电化学传感器的制备,通过检测电流或电压的变化来快速检测食品样品中的致病菌。

除了上述方法外,还有一些新的技术和方法正在被探索和开发。

例如,近年来,基于人工智能算法的快速致病菌检测方法逐渐兴起。

这些方法通过对致病菌的图像进行分析和识别,可以快速、准确地检测食品样品中的致病菌。

人工智能算法的发展使得这一领域具有了更大的潜力和可能性。

总的来说,食品中致病菌的快速检测方法研究一直是食品安全领域的热点。

传统的方法逐渐被一些新兴技术所取代,这些新技术具有快速、准确、简便等优势,有望在实际应用中发挥更大的作用。

食源性致病菌检测分析技术的研究进展

食源性致病菌检测分析技术的研究进展

理论研究·22· 食品安全导刊 2019年9月THEORY食源性致病菌检测分析技术的研究进展摘要:近年来随着人们生活水平不断提高,食源性疾病也是逐渐增多,食源性疾病更多的是由食源性致病菌引发的。

能够针对食源性致病菌进行相对准确的检测,是有效控制食源性疾病发生的关键性的环节,现在传统的检测技术存在很多的问题,比如说耗时长、效率低,所以更加快速和灵敏的新型的检验技术已经成为现在研究的热点问题,这篇文章对利用免疫学以及分子生物学等快速、有效检测食源性致病菌的方法进行分析,总结出各种最新型的致病菌检测技术的研究现状和问题。

关键词:食源性致病菌;分析技术;检测这些年以来,我们面对的食品安全问题已经得到了所有人的关注。

食物中毒案件和人数在逐渐增加,而且大部分食物中毒是因为食源性致病菌所引起的。

根据统计,全世界每年患食源性疾病的患者中,70%是由致病性微生物所引起的。

所以现阶段对于我们来说,构建起有效的测试致病菌整体的检验体系,并且完成快速的致病菌检测,已经成为防止整个疾病传染以及食品中的安全问题的重要手段。

免疫学检测技术免疫学方法,基本上利用的是抗原-抗体发生的化学反应,也就是抗原与抗体对应以后发生结合。

运用免疫技术的检测方法,把目标致病菌的表面抗原,或者说他们分泌的一些毒素之类的东西作为主要的检测点。

因此它是一种可以利用到我们检测致病菌的方法。

这种方法已经广泛应用于我们平常食品中的致病菌的检测。

比如在酶联免疫吸附这项技术中,它对多种致病菌的灵敏度(敏感程度)以及特异性(特异性能)都比较强,但是对和底物结构相似的化合物有一些错杂的错误匹配反应,很难同时分析很多种成分。

还有在分离技术当中,可以很大程度地提高食物样品中某些特定病原菌的检出率,如副溶血性弧菌的检测。

但是它的价格相对其他方法来说是比较昂贵的,并且也是容易出现一些交叉错误的反应的,所以还需要通过其他的技术来进行辅助。

代谢学检测技术代谢学检测技术就是在微生物生长代谢的基础上,能够通过对微生物的生长过程中含有的一些底层物质,以及代谢之后产生物质的变化,结合我们能够看到的、了解的一些特点来进行一系列的监控,从而达到我们检验微生物的一个最终目的。

食源性致病菌快速检测方法研究进展

食源性致病菌快速检测方法研究进展

第40卷第5期2021年5月分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO (Journal of Instrumental Analysis )Vol. 44 No. 5617〜627doi : 10. 3969/j. issn. 1004 -4957. 2021. 05. 001食品安全快速检测专栏I编者按:“民以食为天,食以安为先”目前食品市场空前繁荣,食品安全问题也随之而来,引发了大众的关注和担忧。

但食品(特别是农产品)属于快消品,常规检测方法往往难以有效快速辨别有害物,起不到保护消费者健康的作用。

2215年颁布的《食品安全法》鼓励基层用符合要求的快速检测方法进行有害物筛查,从源头保障消费者健康。

食品安全快速检测技术具有操作简单,成本低廉,灵敏度高,检测快速等优势,满足大批量样品快速检测的需求,在非法添加剂、激素、致病菌、农兽药残留、生物毒素、重金属及有毒化合物等食品检测领域得到了广泛应用。

本刊特邀西北农林科技大学的王建龙教授和华南农业大学的徐振林教授策划了 “食品安全快速检测”专栏,组织高质量约稿9篇,充分展示了 “快检”技术在食品安全检测领域的相关应用。

食源性致病菌快速检测方法研究进展姚帮本闫 超5,姚 丽2,陈赵然5**,陈 伟2*收稿日期:2222 -12-22;修回日期::。

?)-。

?-)基金项目:市场监管总局科技计划项目(2929MK949);安徽省博后科研活动经费资助项目(2222B412);安徽省市场监管局科技计划项目(2919MK937)*通讯作者:陈赵然,硕士,工程师,研究方向:食品安全检测技术研究,E-maP : ***************陈 伟,博士,教授,研究方向:食品安全快速检测,E - maP : ******************(5.安徽省产品质量监督检验研究院 安徽 合肥230055; 2.合肥工业大学食品科学与生物工程学院安徽合肥230009)摘 要:食源性致病菌污染是导致食品安全问题的重要因素,食源性致病菌的检测已成为近年来研究的热 点。

几种食源性致病菌快速检测技术研究

几种食源性致病菌快速检测技术研究

几种食源性致病菌快速检测技术研究随着生活水平进一步提高,人们越来越重视食物安全性。

资料证实,致病菌是诱发食品安全的重要危险因素。

本文简单列举几种常见食源性致病菌,并从当前食品检测技术入手,分析食源性致病菌快速检测技术。

标签:食源性致病菌;快速检测技术食品安全是现阶段人们普遍关注的一个社会问题,近几年,我国食源性致病菌爆发几率不断上升,给人们生命财产安全造成严重威胁。

国家有关部门指出,2013年度我国共出现食源性致病菌感染1.3万例,导致132人死亡。

因此,加强对食源性致病菌检测技术的讨论更具有实际意义。

现阶段,沙门氏菌、志贺氏菌与金色葡萄球菌是常见的食源性致病菌,本文以常见致病菌检测为基点,探讨快速检测新技术的应用。

一、传统检测方法传统分离法是一种常见的食源性致病菌快速检测方法。

该检测方法主要分为:致病菌培养、平板分离、生物学鉴定等步骤。

该检测方法由于步骤繁杂、时间长难以适应现代致病菌检测需要。

近几年,部分学者在传统分离法的基础上,相继推出API、BLOLOG等检测技术,简化了生物检测流程,但由于这些技术主要依靠颜色变化判断致病菌情况,若颜色不明显,则检测效果的准确率会大幅度降低,其结果带有一定主观性。

随着显色培养基技术发展,传统检测方法又得到进一步发展,通过特定的显色产物,使不同菌落在检测中会显示不同颜色,而杂菌则不显示颜色,这种方法具有较高的应用价值。

二、新型检测方法1、免疫胶体金检测技术免疫胶体金技术主要依靠胶体金进行检测的一种免疫标记技术。

氯金酸在还原剂影响下,进行分离、组合,成为具有特定比例的颗粒,这种颗粒在静电影响下成为一种稳定的胶状物质,故被称为胶体金。

在快速检测过程中,待检物品会吸附到胶体表面,并被胶体标记,标记下的显色程度与待检物品中的食源性致病菌数量成正比。

该检测方法具有检测速度快,精准度高等特点,并且检测过程不需要检测设备投入。

部分学者通过胶体金标记技术原理,结合双抗体夹心免疫技术,研制出金色葡萄球菌检测方法,能在8min中完成检测。

食源性致病菌的检测方法及趋势

食源性致病菌的检测方法及趋势

食源性致病菌的检测方法及趋势摘要:目的:对食源性致病菌进行检测,并对检测结果进行分析。

方法:按照《食品安全国家标准食品微生物学检验》方法,对281份食品样品展开食源性致病菌检测研究。

结果:在281份食品样品中,一共检测出25份致病菌阳性样本,阳性菌株29株。

其中检出率最高的为弯曲菌(9.09%),最低的为金黄色葡萄球菌(0.42%)。

结论:本次研究中的281份食品样品存在一定程度的食源性致病菌污染,以蜡样芽孢杆菌以及沙门氏菌为主。

加大对食品安全性的检测,对餐饮食品加大监察力度,加强对肉制品、水果等致病菌的检测尤为重要,值得引起食品安全相关部门的注意。

关键词:食源性;致病菌检测;结果分析Abstract:Objective:to detect foodborne pathogens and analyze the results.Methods:according to the national food safety standard food microbiological examination,281 food samples were tested for food borne pathogens.Results:among 281 food samples,25 positive samples were detected and 29 strains were positive.The highest detection rate was Campylobacter (9.09%),and the lowest was Staphylococcus aureus(0.42%).Conclusion:281 food samplesin this study were contaminated by foodborne pathogens to a certain extent,mainly Bacillus cereus and Salmonella.Food safety inspection should be strengthened,especially for food safety inspection.Key words:foodborne;pathogen detection;result analysis近年來,食品安全一直备受人们的关注。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

食源性致病菌快速检测方法研究报告
发表时间:2011-05-13T14:13:40.207Z 来源:《中外健康文摘》2011年第5期作者:高友中
[导读] 目的应用酶联免疫吸附实验(ELISA)快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。

高友中(湖南省岳阳县疾病预防控制中心 414100)
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)5-0106-02
【摘要】目的应用酶联免疫吸附实验(ELISA)快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。

方法样品经增菌后,用ELISA法及国标法对样品中的沙门菌进行初步检测,并比较ELISA法检测结果与国标法灵敏性、特异性、符合率。

结果检测200份奶类制品和肉制品,经ELISA法检测阳性率为8.3%,国标法阳性率为6.7%。

ELISA法敏感性、特异性分别为100%、97%,与国标法符合率达99.3%。

结论 ELISA法可快速、方便的对食品中沙门菌的污染情况进行初步检测,灵敏度高、特异性好,与国标法符合率高。

适用于食品中沙门菌的初步检测。

【关键词】奶制品肉制品沙门菌 ELISA
沙门菌为常见的引起食源性疾病爆发的病原菌,在我国微生物性食物中毒中一直位居首位,而受沙门菌污染的奶、肉制品为造成人类感染的主要来源,因此沙门菌一直为医疗卫生、食品卫生及商检部门重点检验对象之一[1]。

本研究采用ELISA法检测奶、肉制品中沙门菌,并与国标法进行比较研究,现报道如下:
1 材料与方法
1.1实验材料
奶、肉制品分别来自本市8家不同超市,包括70份奶及奶制品样本,60份肉及肉制品样本。

取样均采取随机抽样的方法进行。

每份样品250ml或250g,经无菌包装后置冷链保存送实验室检测。

缓冲蛋白胨水,氯化镁孔雀绿增菌液,四硫酸钠煌绿增菌液,亚硒酸盐胱氨酸增菌液,亚硫酸铋琼脂,DHL琼脂,HE琼脂,WS琼脂,SS琼脂,三糖铁琼脂,蛋白陈水、靛基质试剂,尿素琼脂(pH7.2),氰化钾(KCN)培养基,氨基酸脱梭酶试验培养基,糖发酵管,ONPG培养基,半固体琼脂,丙二酸钠培养基,沙门氏菌因子血清。

均按国标相关规定进行。

ELISA相关试剂均购自试剂公司。

1.2实验方法
样品按国标法相关规定预先增菌。

样品处理后于36°C培养4h,转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液中,42°C18-24h,另取10ml转种于亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,36°C18-24h。

ELISA法简要步骤如下:特异性抗沙门菌单克隆抗体包被,加入待见样品检测。

显色于酶标仪上读取OD值。

国标法简要步骤如下:经增菌后,划线接种于亚硫酸铋琼脂平板和EHL琼脂平板。

36°C培养18-24h,观察菌落生长情况。

挑选可疑菌落接种于三糖铁琼脂,鉴别反应结果。

如出现异常结果,按国标相关规定选择补做甘露醇和山梨醇试验,ONPG等。

1.3数据分析
参考田素娟[1]等的方法进行。

即利用检验通用的计算方法,并国标法比较实验的敏感性、特异性、符合率。

2 结果
2.1ELISA及国标法检测结果
用ELISA法同步检测份奶、肉制品的沙门菌污染情况,采用国标法进一步验证,结果见表1。

表1沙门菌污染情况检测
2.2ELISA法与国标法敏感性、特异性、符合率计算结果
表2ELISA法与国标法比较
3 讨论
3.1常规检测沙门菌方法
目前,沙门菌常用检测方法有:(1)酶快速反应检测技术。

包括快速酶促反应显色培养基及自动化微生物分析仪两种方法。

VITEK AMS自动微生物检测系统对细菌鉴定是基于细菌的微量生化反应,可鉴定405种细菌。

(2)以免疫学为基础的检测技术。

包括酶联免疫吸附实验(ELISA);免疫磁分离技术,如王海明[2]等报道的使用抗沙门氏菌免疫磁珠经增菌后于VITEK全自动生化鉴定仪和荧光PCR分子检测确认;免疫胶体金技术等。

(3)以核酸为基础的检测技术,如杨俊超[3]等报道的使用实时荧光定量PCR与常规PCR比较研究,其敏感性、特异性均较好;依赖PCR的DNA指纹图谱技术;随机引物扩增DNA多态性(RAPD);基因内重复性一致序列(ERIC)的扩增;多重PCR检测技术;NASBA;基因芯片技术等。

3.2本研究采用检测方法
本研究采用ELISA法快速检测奶及奶制品、肉及肉制品中沙门菌的污染情况。

其敏感性、特异性较高,且与国标法符合率较高。

一般24h 之内可以出检测结果。

其不足之处在于:(1)不能定量检测沙门菌的含量,只能做定性分析,即是否存在沙门菌污染,但不能测得污染量的大小。

后续研究考虑通过设置标准沙门菌对照(蛋白含量已知)的情况下,设立不同稀释度,然后比较样品各组OD值,用统计软件作出标准曲线,进而推算出沙门菌含量。

(2)检测结果不太稳定,有可能出现假阳性结果。

ELISA实验普遍存在抗体效价下降很快的通病,如
不注意保存条件,在反复冻融抗原抗体的过程中,其灵敏度、特异性下降很快。

因此本实验要特别注意抗原抗体的保存。

严格按照说明书进行。

3.3本研究意义
与其他检测方法相比,本研究具有以下优点:(1)操作简单,对仪器要求不高。

ELISA法只需要96孔酶标板及酶标仪即可检测。

而其他的方法,比如PCR,VITEK AMS微生物检测系统,均需要大型仪器支持,且操作复杂,对操作人员要求较高。

(2)耗时短。

ELISA法通常24h即可出结果,如果采用预先包被的方法,检测时间更短,甚至可以缩短至6h左右。

这对于临床快速检测沙门菌意义重大。

(3)敏感性、特异性高。

经前文叙述,本研究敏感性100%,特异性99%,与国标法符合率99.2%。

综上所述,ELISA法应用与快速检测食品中沙门菌有其特定的优势,但同时也存在不足,具体应用何种方法检测需综合各实验室条件及对检测结果相关要求灵活处理。

参考文献
[1]田素娟,徐海燕,王战争等.食品中沙门菌的检测[J].中国卫生检验杂志,2007,17(7):1244-1246.
[2]王海明,俞晓,金燕飞等.应用磁免疫技术快速检测食源性沙门氏菌方法研究[J].中国卫生监督杂志,2009,16(1):36-39.
[3]杨俊超,杜亚平,徐德顺.实时荧光定量PCR法与常规PCR法及细菌培养法检测沙门菌的比较[J].浙江预防医学,2009,21(11):92-93.。

相关文档
最新文档