植物多糖的功能..提取及纯化
化妆品中植物多糖的功能与应用
化妆品中植物多糖的功能与应用在当今的化妆品市场中,植物多糖作为一种天然的活性成分,正逐渐受到广泛的关注和应用。
植物多糖具有多种独特的功能,为化妆品带来了诸多的益处。
植物多糖是一类从植物中提取的大分子碳水化合物,其结构多样,性质复杂。
常见的植物多糖来源包括芦荟、海藻、银耳、枸杞等。
首先,植物多糖在保湿方面表现出色。
它能够吸收并锁住水分,增加皮肤的水分含量。
这是因为多糖分子中的羟基等官能团能够与水分子形成氢键,从而将水分保留在皮肤表面和角质层中。
以银耳多糖为例,其具有出色的保湿效果,能够使皮肤保持水润、柔软,减少因干燥引起的细纹和粗糙。
其次,植物多糖还具有抗氧化的功能。
在我们的日常生活中,皮肤会不断受到自由基的攻击,导致皮肤老化、失去弹性和出现皱纹。
而植物多糖中的一些成分,如多酚类物质,能够有效清除自由基,保护皮肤细胞免受氧化损伤。
例如,枸杞多糖就具有良好的抗氧化活性,能够延缓皮肤的衰老进程,使皮肤保持年轻状态。
再者,植物多糖在抗炎方面也发挥着重要作用。
皮肤炎症可能由外界刺激、过敏反应或内部因素引起。
植物多糖能够调节炎症因子的释放,减轻炎症反应,舒缓肌肤。
例如,芦荟多糖对于舒缓晒伤、过敏等引起的皮肤炎症具有显著效果,能够缓解皮肤的红肿、瘙痒等不适症状。
此外,植物多糖还能够促进胶原蛋白的合成。
胶原蛋白是维持皮肤弹性和紧致度的关键成分。
随着年龄的增长,胶原蛋白的合成逐渐减少,导致皮肤松弛和皱纹的产生。
某些植物多糖,如海藻多糖,可以刺激胶原蛋白的生成,增强皮肤的弹性和紧致度,减少皱纹的出现。
在化妆品的应用中,植物多糖有着广泛的形式。
它们可以作为保湿剂添加到面霜、乳液中,为肌肤提供长效的保湿效果;也可以作为抗氧化成分加入精华液中,帮助抵抗自由基的伤害;还可以用于舒缓类产品,如面膜、喷雾等,减轻皮肤炎症。
然而,在使用植物多糖的过程中,也存在一些需要注意的问题。
首先,不同来源的植物多糖其功效和安全性可能会有所差异,因此在选择化妆品时,需要关注产品中所使用的植物多糖的种类和来源。
植物多糖的研究现状的研究报告
植物多糖的研究现状的研究报告植物多糖是从植物中提取的一种多糖,是一种有机大分子物质,具有高度的生物活性和药用价值。
近年来,植物多糖的研究受到了广泛的关注,也在国内外得到了广泛的应用。
植物多糖的种类很多,在不同的植物中含量和种类也会有所不同。
随着技术的不断发展,越来越多的植物多糖被发现和提取出来。
植物多糖在抗氧化、免疫调节、降血糖、抗癌等方面具有显著的药用效果,因此对植物多糖的研究和开发具有很大的意义。
目前,关于植物多糖的研究主要集中于以下几个方面:1.提取和纯化方法的改进植物多糖在植物中的含量通常很低,而杂质又很多,因此要提取出纯度高的植物多糖是一项技术难点。
目前,以超声波辅助提取、离子液体等为代表的新型提取技术正在逐步发展,可以有效提高多糖的提取率和纯度。
2.药用活性成分的研究植物多糖的药用效果主要与其分子结构、分子量、空间构象等有关。
因此,通过分析不同来源植物多糖的化学性质和生物功能,在深入研究其机制的基础上,努力筛选和开发具有高药用活性的植物多糖成分。
3.多糖药物的开发近年来,越来越多的植物多糖被用于研制药物,如多糖肽药物、多糖胶束等。
多糖药物具有良好的生物相容性、低毒性、高效性等优点,可望成为新型药物的重要领域。
总之,植物多糖的研究在不断深入,为我们了解植物多糖的药用价值、开发新药提供了新的思路和方法。
通过深化对植物多糖的研究,可以挖掘出更多的药用活性成分和制备更先进、更有效的多糖药物,为人类健康事业做出更大的贡献。
植物多糖的相关数据:1. 提取率和纯度:在以超声波法提取 Artemisia annua 中polysaccharide 的研究中,可以实现的最大提取率为26.71%,最高纯度为74.34%。
2. 含量:植物多糖的含量因植物种类和部位不同而异。
如在当归中,多糖含量为8.08%,而在灵芝中为1.96%-8.19%。
3. 药用效果:植物多糖具有很强的生物活性和药用效果,如提高免疫力、抗氧化、调节血糖、抗癌等。
植物多糖的制备原理
植物多糖的制备原理
植物多糖的制备原理主要涉及以下几个方面:
1. 提取植物材料:首先,选择适合的植物材料,如绿藻、褐藻、菌类、甘蓝类等。
然后,将植物材料洗净、破碎、粉碎或切割成细小颗粒。
2. 提取多糖物质:将植物材料与适当溶剂(如水、醇等)混合,并使用适当的方法(如浸泡、浸提、催化酶解等)提取多糖物质。
多糖物质通常溶解在提取液中。
3. 过滤和脱色:将提取液过滤去除固体残渣,得到澄清的提取液。
在需要时,可以使用活性炭或其他吸附材料进行脱色处理,去除杂质以获得更纯净的多糖溶液。
4. 浓缩和纯化:使用适当的方法(如浓缩、沉淀、离心、逆流膜过滤、超滤等)将多糖溶液进行浓缩,去除多余的水分,提高多糖的浓度。
然后,通过色谱、电泳、凝胶过滤等技术进行纯化,去除和分离其他杂质。
5. 干燥和粉碎:将纯化后的多糖溶液进行干燥,可以选择自然风干或低温烘干等方法。
干燥后的多糖物质会呈现出块状或粉末状。
最后,将干燥的多糖物质进行粉碎,以获得所需的颗粒大小。
总之,植物多糖的制备原理涉及植物材料的提取、过滤和脱色、浓缩和纯化,以及干燥和粉碎等步骤,旨在获取纯净的植物多糖物质。
具体的制备方法和工艺会根据不同的植物材料和多糖种类而有所变化。
植物多糖提取与纯化方法的步骤与技巧
植物多糖提取与纯化方法的步骤与技巧植物多糖是一类具有广泛生物活性的天然产物,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。
因此,植物多糖的提取与纯化方法备受关注。
本文将介绍植物多糖提取与纯化的步骤与技巧,以帮助读者更好地了解和应用这些方法。
首先,植物多糖的提取需要选择适当的溶剂。
常用的提取溶剂包括水、醇类和酸碱溶液。
水是最常用的提取溶剂,因为植物多糖多为水溶性。
但有些植物多糖在水中溶解度较低,此时可以选择醇类溶剂如乙醇、丙醇等。
酸碱溶液的选择要根据不同的植物多糖来确定,一般来说,酸性条件有利于提取酸性多糖,碱性条件有利于提取碱性多糖。
其次,植物多糖的提取需要注意样品的准备。
样品的选择要根据植物多糖的来源来确定,可以是植物的根、茎、叶、果实等部位。
样品在提取前需要经过粉碎处理,以增加提取效果。
此外,样品的质量也会影响提取效果,因此要选择新鲜、干燥、无霉变的样品。
接下来是植物多糖的提取步骤。
一般而言,提取步骤包括浸提、过滤、浓缩和沉淀等。
浸提是将样品与提取溶剂接触一段时间,使植物多糖溶解到溶剂中。
过滤是将提取液中的固体颗粒去除,以获得澄清的提取液。
浓缩是将澄清的提取液进行浓缩,以减少体积。
沉淀是通过加入沉淀剂使植物多糖从溶液中沉淀出来,然后通过离心等方法将沉淀物收集。
在提取过程中,还需要注意一些技巧。
首先是浸提时间的控制,过短的浸提时间可能导致多糖未能充分溶解,过长的浸提时间可能导致多糖的降解。
因此,需要根据不同的植物多糖来确定合适的浸提时间。
其次是提取溶剂的选择和用量,溶剂的选择要根据植物多糖的特性来确定,用量要适量,既能保证提取效果又能节约溶剂。
此外,还可以采用超声波辅助提取、微波辅助提取等方法来提高提取效率。
提取完成后,还需要对提取液进行纯化。
纯化的目的是去除杂质,提高植物多糖的纯度。
常用的纯化方法包括醇沉、蛋白酶处理、离子交换层析、凝胶过滤层析等。
醇沉是将提取液中的植物多糖用醇类溶剂沉淀出来,然后通过离心等方法将沉淀物收集。
多糖的提取和纯化
多糖的提取和纯化目前,真菌多糖的提取可从子实体和采用深层培养发酵液的菌丝中分离获得,但以从子实体中提取多糖为主。
首先是将子实体粉碎,加入甲醇或乙醇乙醚1:1混合液,水浴加热搅拌1一3小时除去表面脂肪。
其次是用残渣提取多糖,常用的方法有不同温度下的水提法、稀酸提法、冷热稀碱提法。
水提法采用的较多,适合于提取水溶性多糖。
稀酸提取法适用于提取酸溶性多糖、时间宜短,温度不超过50℃,以防止糖昔键断裂。
稀碱法适合于提取碱溶性糖。
然后除去小分子杂质,常采用透析法,将多糖提取液置于半透膜透析袋中,逆向流水透析1一3天。
第四步是沉淀多糖。
大部分多糖在有机溶剂中的溶解度极小,所以可用有机溶剂来沉淀。
常用4一5倍低级醇、丙酮,一般在pH=7.0左右沉淀多糖,制得粗多糖。
最后是除去蛋白质。
除去多糖中的蛋白质常用的方法是三氯醋酸法。
得到的溶液基本上是没有蛋白质与小分子杂质的多糖混合物或单一多糖。
多糖的纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖。
纯化方法很多,主要纯化方法有:(l)分步沉淀法根据不同多糖在不同浓度的低级醇或酮中具有不同溶解度的性质,逐次按比例由小而大加入这些醇或酮分步沉淀。
此法适用于分离各种溶解度相差较大的多糖。
(2)盐析法根据不同多糖在不同浓度盐中具有不同溶解度而分离。
纯度鉴定和分子量测定多糖纯度标准不能用通常化合物纯度标准来衡量,因为我们所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围内的均一组成。
因此,测得的分子量一般为平均分子量。
过去常用粘度法、蒸气压渗透计法、沉降法、超速离心法、光散射法等测定高分子化合物分子量的方法测定真菌多糖的分子量,但由于这些方法测定起来比较麻烦,且误差较大,现多数已不采用。
目前实验室常用的方法为凝胶过滤法和高压液相色谱法,对于分子量小于1百万的多糖用高压液相法为最好。
1.2.1发酵、提取取香菇465菌株斜面菌种接人摇瓶培养基中振荡培养,逐级扩大培养至10O0L,25℃下通气培养72h,压滤,得香菇深层培养菌丝体。
提取植物多糖的实验报告
一、实验目的1. 掌握植物多糖提取的基本原理和操作方法。
2. 学习植物多糖的分离纯化技术。
3. 探讨植物多糖的生物活性。
二、实验原理植物多糖是一类具有生物活性的天然高分子化合物,广泛存在于植物中。
提取植物多糖的原理是利用植物多糖在特定溶剂中的溶解度差异,通过物理或化学方法将植物多糖从植物组织中分离出来。
三、实验材料1. 实验植物:绿豆2. 实验药品:乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、丙酮、苯酚、硫酸等3. 实验仪器:粉碎机、搅拌器、离心机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计、色谱柱等四、实验步骤1. 植物样品处理取绿豆种子,用粉碎机粉碎成粉末,过筛后备用。
2. 植物多糖提取将绿豆粉末加入一定量的蒸馏水中,搅拌均匀,加热至沸腾,保持沸腾状态30分钟。
然后加入氢氧化钠溶液,调节pH值为7.0,继续煮沸30分钟。
将煮沸后的溶液冷却至室温,加入适量的盐酸溶液,调节pH值为7.0,静置过夜。
3. 植物多糖分离纯化将静置后的溶液离心分离,取上清液。
将上清液加入无水乙醇,静置过夜,沉淀植物多糖。
将沉淀物用蒸馏水洗涤,然后用丙酮洗涤,干燥后得到植物多糖粗提物。
4. 植物多糖结构鉴定采用高效液相色谱(HPLC)法对植物多糖进行结构鉴定。
将植物多糖粗提物溶解于一定浓度的水溶液中,进行HPLC分析,根据保留时间和峰面积判断植物多糖的结构。
5. 植物多糖生物活性测定采用DPPH自由基清除法测定植物多糖的抗氧化活性。
将植物多糖溶解于一定浓度的水溶液中,与DPPH自由基溶液混合,在室温下反应30分钟,测定溶液的吸光度。
以Vc为对照,计算植物多糖的自由基清除率。
五、实验结果与分析1. 植物多糖提取率通过测定植物多糖粗提物的重量,计算植物多糖的提取率。
实验结果表明,绿豆植物多糖的提取率为2.5%。
2. 植物多糖结构鉴定HPLC分析结果表明,绿豆植物多糖主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,分子量为10万~20万。
3. 植物多糖抗氧化活性DPPH自由基清除法测定结果表明,绿豆植物多糖的自由基清除率为60.2%,具有较好的抗氧化活性。
多糖的提取和纯化
多糖的提取和纯化Company Document number:WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT多糖的提取和纯化→粉碎→脱脂→粗提(2-3次)→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
原料经粉碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或1:1的乙醇乙醚混合液,水浴加热搅拌或回流1-3小时,脱脂后过滤得到的残渣一般用水作溶剂(也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1%醋酸和1%苯酚或-1M氢氧化钠作为提取溶剂)提取多糖。
温度控制在90-100℃,搅拌4-6小时,反复提取2-3次。
得到的多糖提取液大多较粘稠,可进行吸滤。
也可用离心法将不溶性杂质除去,将滤液或上清液混合(得到的多糖若为碱性则需要中和)。
然后浓缩,再加入2-5倍低级醇(甲醇或乙醇)沉淀多糖;也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三甲基铵等,与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。
然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。
将洗干后疏松的多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥(若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时,可直接冷冻干燥)。
干燥后可得粉末状的粗多糖。
微波辅助提取法:其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度,使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热,从而使萃取物质从基体或体系中分离出来,进入到介电常数小,微波吸收能力较差的萃取剂中[14]。
由于微波能极大加速细胞壁的破裂,因而应用于中草药中有效成分的提取能极大加快提取速度,增加提取产率。
而且由于其选择性好,提取后基体能保持良好的性状,提取液也较一般的提取方法澄清[15]。
聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取[18]中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较,发现微波辅助提取法所需时间最短(10min),多糖的提取率最高(%)。
超声辅助法:其原理是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取[16]。
多糖的提取分离纯化及分析鉴定方法研究
多糖的提取分离纯化及分析鉴定方法研究多糖是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖具有广泛的应用价值,包括食品、医药、化妆品和生物材料等领域。
因此,对多糖的提取、分离纯化以及分析鉴定方法的研究具有重要意义。
一、多糖的提取方法1.物理法物理法主要包括热水提取法、酸碱提取法和微波提取法等。
热水提取法是最常用的提取方法之一,通过加热使细胞壁破烂,有利于多糖的溶出。
酸碱提取法则是利用酸碱反应将多糖从细胞壁中释放出来。
微波提取法则是利用微波辐射对样品进行加热,加速多糖的溶解和释放。
2.化学法化学法主要包括酶解法、酶解分离法和酸碱水解法等。
酶解法是利用特定的酶对样品进行处理,将多糖分解为单糖,然后进行分离和纯化。
酸碱水解法则是通过酸碱反应将多糖水解为低聚糖和单糖。
3.生物法生物法是利用微生物或植物产生的酶对多糖进行酶解和分离。
生物法具有选择性强、工艺简单等优点,在多糖提取中得到了广泛的应用。
二、多糖的分离纯化方法多糖的分离纯化方法主要包括离子交换色谱法、凝胶渗透色谱法和亲和色谱法等。
1.离子交换色谱法离子交换色谱法是利用离子交换树脂对多糖进行分离的方法。
通过控制溶液pH值和离子强度等条件,使不同电荷的多糖在树脂上发生吸附反应,实现多糖的分离纯化。
2.凝胶渗透色谱法凝胶渗透色谱法是根据多糖分子量的大小来进行分离的方法。
多糖分子量越大,越容易在凝胶渗透色谱柱的孔隙中滞留,分离得到纯度较高的多糖。
3.亲和色谱法亲和色谱法是利用多糖与一些特定配体之间的相互作用进行分离的方法。
例如,可以利用亲和色谱柱上的特定配体与多糖的特定结构之间的结合作用,实现多糖的分离和纯化。
三、多糖的分析鉴定方法多糖的分析鉴定方法主要包括红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振波谱法、高效液相色谱法和气相色谱法等。
1.红外光谱法红外光谱法能够通过检测样品吸收、散射或透射特定波长的红外光来分析多糖的结构和功能。
2.紫外光谱法紫外光谱法是利用多糖分子在紫外可见光区域的吸收特性进行分析。
植物多糖提取、分离纯化及鉴定方法的研究进展
然而,本研究仍存在一定的不足之处,例如实验范围较窄,未能全面考虑各 种因素对多糖提取、分离纯化及分析鉴定的影响。未来可以进一步拓展研究范围, 探讨更加高效、环保的多糖提取方法和纯化技术,同时深入研究多糖的结构与功 能关系,为多糖的应用提供更多理论依据和技术支持。
一、植物多糖概述
植物多糖是由植物细胞壁和细胞间层组成的复杂碳水化合物,具有调节植物 生理功能、增强免疫力等多种生物活性。近年来,随着生物技术的不断发展,植 物多糖在医药、保健、农业等领域的应用价值逐渐被挖掘出来,引起了广泛。
在分析鉴定方面,采用光谱分析法可以获得多糖的结构信息,而电化学分析 法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
结论
本次演示对多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法进行了详细的研究,得出 了各种方法的相关优缺点。实验结果表明,乙醇提取法是一种高效、环保的多糖 提取方法;沉淀法和吸附法相结合可以获得高纯度的多糖;光谱分析法可以提供 多糖的结构信息,而电化学分析法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
在分离纯化方面,除了传统的沉淀法、色谱法和膜分离等方法外,一些新的 分离技术如分子印迹技术、电泳技术等也被应用于多糖的分离纯化。此外,一些 新型材料如聚合物材料、无机材料等也被用于制备分离纯化多糖的新型膜和填料, 取得了很好的效果。
在鉴定方面,除了传统的化学法和光谱法外,一些新的鉴定技术如质谱技术、 基因工程技术等也被应用于多糖的鉴定。此外,一些新的生物活性方法也被用于 测定多糖的生物活性,如细胞试验、动物试验等。
四、研究进展概述
随着植物多糖在各个领域的应用价值逐渐被挖掘出来,植物多糖提取分离纯 化的研究也取得了长足的进展。从早期的水提取法、酸碱提取法等传统方法,到 后来的离子交换法、色谱法等较为先进的方法,植物多糖的提取分离纯化技术不 断发展。同时,各种新技术的应用也使得植物多糖的得率、纯度和结构分析更加 准确可靠。
沙枣多糖提取、分离纯化研究概述
沙枣多糖的提取、分离纯化研究概述【摘要】天然植物多糖是由十个以上的单糖通过苷键连接而成的聚合物,它们除了作为植物的贮藏养料和骨架成分外,还具有免疫调节,抗肿瘤、抗衰老、降血糖、抗凝血等作用,且对机体的毒副作用小。
现针对沙枣多糖的提取,分离纯化,生物活性及复合多糖的研究进展进行综述,为其未来的相关研究提供参考。
【关键词】沙枣;多糖;提取;分离纯化沙枣是胡颓子科胡颓子属落叶灌木,分布于我国“三北”地区和中西亚半干旱一带的区域,沙枣果实具有多种药物用途和营养价值,沙枣果实浸出物的浓缩液有抗炎作用,可用于肠炎,腹泻的治疗,是我国新疆、伊朗和土耳其民间治疗作呕和胃胀的传统药方[1-2]。
药理实验也表明,对实验引起腹泻的动物,有抑制小肠运动功能[3] 。
近年来,有关植物多糖的研究备受关注。
据临床研究表明[4],植物多糖能提高人体的免疫功能,具有抗肿瘤活性、抵抗细菌病毒的侵袭、抗炎症、抗感染、降血糖血脂、抗药性溃疡、抗衰老等作用。
一、多糖的生物活性(一)增强机体免疫功能作用[5]植物多糖最为突出而普遍的功能就是其对机体的免疫功能加强,而这种功能的发挥主要通过以下途径来实施的。
(1)激活巨噬细胞[6];(2)激活t和b淋巴细胞;(4)激活补体。
(二)抗肿瘤作用[7]自从1950年发现酵母多糖具有抗肿瘤效应以来,己分离出很多具有抗肿瘤活性的植物多糖。
(三)抗病毒作用大量研究表明[8] ,许多多糖对细菌和病毒有抑制作用,如艾滋病毒、单纯疱疹病毒、流感病毒、囊状胃炎病毒等。
(四)降血糖血脂作用有许多文献研究和报道,植物多糖能够促进胰岛索,影响糖代谢酶的活性,促使外周组织对葡萄糖的作用,从而抑制糖异生。
另外,甘蔗多糖也能降低体内血脂。
(五)抗衰老作用有些植物多糖具有抗衰老的作用。
一方面这类多糖作为免疫调节剂能增强机体的免疫功能;另一方面可以增强集团对自由基的清除能力和抗氧化能力。
二、植物多糖的提取方法(一)传统提取方法传统提取法主要指溶剂提取法、酸提取法和碱提取法。
杜仲多糖的提取、纯化和活性评价研究
杜仲多糖的提取、纯化和活性评价研究植物多糖作为一种重要的天然活性物质,具有广泛的生物活性和药用价值。
其中,杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)是一种中药材,也是中国传统药物的重要组成部分之一。
杜仲多糖作为杜仲的主要活性成分之一,已成为研究的热点之一。
一、杜仲多糖的提取方法提取杜仲多糖可采用常用的水煮法、醇沉法、酶解法等方法。
常用的水煮法是将杜仲粉末与适量的水混合,加热至沸腾后煮沸一段时间,然后离心或过滤得到提取液。
醇沉法是将杜仲粉末与适量的有机溶剂(如乙醇、甲醇等)混合,反复搅拌后静置沉淀,然后离心得到提取液。
酶解法是将杜仲粉末与适量的酶液(如纤维素酶、蛋白酶等)混合,经过一段时间的反应后,用热水提取液煮沸一段时间,最后离心得到提取液。
二、杜仲多糖的纯化方法提取得到的杜仲多糖常常需要进行纯化,以消除杂质和提高纯度。
常用的纯化方法包括离子交换层析、凝胶过滤层析、高效液相色谱等。
离子交换层析是利用离子交换树脂对杜仲多糖进行分离,树脂上的固定离子与多糖的带电部分发生吸附与解吸反应,从而实现对多糖纯化的目的。
凝胶过滤层析是利用凝胶基质对分子大小进行分离,通过溶液在凝胶颗粒之间的扩散来实现纯化。
高效液相色谱则是利用固定相与流动相的相互作用,根据化学性质和大小形状的差异进行分离。
三、杜仲多糖的活性评价杜仲多糖具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、免疫调节等。
因此,对其活性进行评价十分重要。
常用的评价方法包括细胞实验和动物实验。
细胞实验是通过孵育细胞株与不同浓度的杜仲多糖进行接触,观察细胞增殖、凋亡、迁移等指标的变化。
动物实验则是将杜仲多糖添加到动物饲料中,观察动物体内的生理指标变化,如免疫功能、抗氧化能力、抗炎能力等。
在细胞实验中,可以通过MTT法、DCFH-DA法、流式细胞术等进行测定。
MTT法是一种评价细胞增殖和细胞毒性的常用方法,根据细胞活力与还原剂MTT 的转化关系,通过检测产生的紫色产物的光密度来评估细胞的活力。
多糖的提取和纯化
多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘要本文较详细地介绍了多糖的提取和纯化方法,为多糖的研究和生产提供参考依据。
关键词多糖;提取;纯化;活性炭多糖(polysacharides,PS),又称多聚糖,是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的,具有广泛生物活性的天然大分子化合物。
它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物(细菌和真菌)与动物体内。
20世纪60年代以来,人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能[1]:(1)多糖可作为广谱免疫促进剂,具有免疫调节功能,能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病,甚至能抗AIDS病毒[2]。
如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[10],黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能[3-5]。
(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。
如柴胡多糖具有抗辐射,增强免疫功能等生物学作用[6],麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用[7-8],动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能[9]。
(3)多糖能控制细胞分裂和分化,调节细胞的生长与衰老。
如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用[10],银杏外种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥等功能[11]。
另外,多糖作为药物,其毒性极小,因而多糖的研究已引起人们极大的兴趣。
由于多糖具有的生物活性与其结构紧密相关,而多糖的结构又是相当复杂的,所以在这一领域的研究相对缓慢。
但人们在多糖的分离提取与纯化方面已做出了不少工作。
1. 多糖的提取[12]1.1 热水浸提法:1.1.1多糖提取条件的优选根据文献报道[13]:影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度和植物颗粒大小等。
在试验前对上述多种因素利用正交实验法做出优选,才能选出最佳提取方案。
1.1.2其步骤为:原料→粉碎→脱脂→粗提(2-3次)→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
植物多糖的提取与利用
植物多糖的提取与利用植物多糖是一类以多糖作为主要成分的天然高分子物质。
其在植物中广泛存在,主要包括葡萄糖多糖、木糖多糖、甘露醇多糖等,常见的来源有枸杞、芦荟、银耳等。
植物多糖因其多种生物活性,近年来被广泛应用于医药、食品、化妆品和农业等领域。
本文将探讨植物多糖的提取和利用,以及其未来的发展前景。
一、植物多糖的提取方法植物多糖的提取方式多样,但是基本上都包括以下几个步骤:原料处理、提取、纯化和干燥。
首先需要对植物原料进行处理,如清洗、去杂质等。
然后通过物理或化学手段将多糖从原料中提取出来,包括水提、酸提、碱提等方法。
提取后的多糖还需要进行纯化处理,常用的方法有沉淀法、离子交换法和凝胶层析法等,以去除杂质和提高纯度。
最后是干燥处理,使多糖呈粉末状态以便于存储和使用。
二、植物多糖的生物活性植物多糖具有多种生物活性,其中最为突出的是免疫调节活性。
多种植物多糖在体内可以刺激免疫系统的反应,促进免疫细胞的增殖和活性,提高机体的免疫力。
此外,植物多糖还具有抗氧化、抗肿瘤、降血脂、调节血糖等多种生物活性,具有广泛的应用前景。
三、植物多糖在医药领域的应用植物多糖在医药领域是一种非常重要的天然活性物质,被广泛用于免疫和肿瘤治疗。
通过调节机体的免疫系统,多糖可以提高身体的抵抗力,增强机体对病毒、病菌等有害物质的防御能力。
同时,植物多糖还可以减轻化疗和放疗等治疗带来的副作用,如恶心、呕吐、头痛等。
四、植物多糖在食品领域的应用植物多糖在食品领域同样具有很大的应用前景。
由于其良好的生物活性和功能特性,植物多糖已被广泛应用于功能性食品的开发和生产。
例如,植物多糖可以增强人体的免疫力、改善肠道菌群、降血糖和血脂等。
同时,植物多糖还可以在食品中增加口感和质感。
五、植物多糖在化妆品领域的应用由于其良好的保湿性、抗氧化性和细胞再生能力,植物多糖被广泛应用于化妆品领域。
通过引入植物多糖成分,化妆品可以有效滋润肌肤,减少皮肤在紫外线和其他有害环境因素下的损伤,增强皮肤的抵抗力。
植物多糖在食品中的应用研究
植物多糖在食品中的应用研究随着人们对健康饮食的追求,食品行业中对于天然植物多糖的需求也日益增加。
植物多糖是天然多糖的一种,是一种具有生物活性的多糖物质,它具有特殊的结构和生理功能,广泛存在于植物、菇类等天然食材中。
因其独特的性能,在食品工业、医药、化妆品等领域受到了广泛的关注。
一、植物多糖的种类及特性植物多糖是指来源于天然植物的多糖,其种类丰富,包括:多糖、半乳糖、寡糖、酚酸多糖等。
植物多糖具有多种生物活性,可用于防龋齿、免疫调节、抗过敏、抗肿瘤等方面。
同时,它还能够增强人体免疫能力、促进肠胃消化和吸收、改善肝功能、降低血脂等作用。
二、植物多糖在食品中的应用植物多糖在食品工业中的应用非常广泛,已成为一种重要的天然食品添加剂。
它可以增加食品的口感和储存时间,提高产品的质量,同时还能够为人体提供多种营养成分。
1、植物多糖的保湿性植物多糖具有很好的保湿性能,能够保持食品的水分,增加食品的软嫩口感。
在烘焙行业中,植物多糖常用于糕点、面包、蛋糕等烘焙食品中,能够增加产品的储存时间和食品的松软度,同时,植物多糖在乳制品加工中,如酸奶、奶豆腐、奶酪等,可以增加产品的质口感和保湿性能。
2、植物多糖的增稠性植物多糖具有较好的增稠性,可在食品中起到增稠、增香、凝固效果。
在肉制品加工中,如火腿、香肠、鸡肉等加工中,植物多糖可以增加产品的黏度和凝固度,提高产品的质量,并将水分锁定进食品中。
同时,在果汁、果泥、冰淇淋等食品中添加植物多糖,能够提高产品的口感和稠度,让顾客更加爱不释手。
3、植物多糖的功能性植物多糖具有多种功能性,可以增强人体免疫力和治疗某些疾病。
例如,在果冻中添加植物多糖能够增强人体的免疫力,并帮助治疗感冒和肠胃疾病;在饮料中添加植物多糖,能够降低血脂,调节胆固醇,达到预防心血管疾病的目的。
三、植物多糖的提取方法目前,植物多糖的提取方法主要有两种:常温提取法和热水提取法。
常温提取法是指在常温下,使用酸或碱溶液将植物多糖溶解并提取出来。
植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析
食品科技植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析白海娜(吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022)摘 要:多糖是广泛存在于动植物、微生物中的一类大分子化合物,具有调节免疫力、抗癌、抗氧化、抗衰老等方面的功能作用,本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
关键词:多糖;提取;分离纯化;结构分析多糖又称聚糖,是由分子质量从中等到高分子的聚合物,不同聚糖中单糖的同一性、链的长度、连接单糖的键类型以及链的分支程度等方面不同。
植物及食用菌多糖的结构特征以及生物活性等研究已成为食品和制药的热门研究。
与蛋白质的研究相比,多糖各方面研究还比较落后。
本文主要对植物及食用菌多糖的提取、分离纯化及结构分析进行阐述。
1 多糖的提取1.1 酶解提取该方法是由于酶具有专一性的特征,所以根据酶解反应将植物细胞壁分解成小分子物质,该小分子物质容易溶于提取溶剂,使植物细胞壁被破坏,从而使植物细胞中的有效成分溶出。
此方法的优点是不仅能使植物细胞壁中的有效成分发生降解,使其更容易被提取出来,从而达到使提取率提高或溶剂用量减少的目的;而且还可以对植物药中的部分杂质进行选择性降解,使多糖的提取分离更加容易,同时除了所需的有效成分之外其他的成分还可以收集利用[1]。
尽管该方法在多糖的提取率方面得到了提高,但是在操作过程中温度和pH的变化会严重影响所用酶的活性,且提取的成本相对较高。
1.2 微波提取微波提取多糖的方法又被称为微波萃取技术,该方法是通过微波辐射,使高频电磁波快速穿透被萃取的物质。
因为植物细胞在微波辐射能的作用下吸收了微波能,使植物细胞的内部温度升高,从而导致了组织内部的压力变大,细胞发生破裂,需要被提取的成分在能量的作用下从内部溶出。
该方法在提取多糖时的优势是操作简单、溶剂的使用量消耗少、在操作过程中不会造成污染、多糖提取率高等。
1.3 热回流提取法该方法是在多糖提取方法中最为传统、也是一种操作简单的方法,此方法是根据相似相溶的原理来提取多糖,提取溶剂一般是选择用热水、酸、碱;但是该方法由于在提取过程中温度高、时间长、能量消耗高,容易引起多糖结构以及生物活性发生变化,因此若利用此方法提取多糖,会限制天然多糖产业在市场上的发展。
植物多糖的提取技术与功能研究进展
提 醇 沉法 。
13 超 微 粉 碎 技 术 . 对 样 品 进
行 碾 磨 、 冲 击 、 剪 切 等 ,将 原 材 料 加 工 到 微 米 级 甚
防 和 治 疗 起 到 一 定 作 用 。 张 拥 军 等 研 究 了南 瓜 多 糖
近 年 来 国 内 外 对 植 物 多 糖 的 研 究 逐 步 深 入 , 由
对 糖 尿 病 小 鼠 的 降 血 糖 作 用 ,结 果 表 明 南 瓜 多 糖 可
对 抗 四 氧 嘧 啶 引 起 的 血 糖 升 高 ,改 善 糖 耐 量 ,增 加 肝 糖 元 合 成 ,其 作 用 机 理 可 能 与 其 改 善 胰 岛 B细 胞 的功 能 或增 加组 织对 糖 的转化 利用 有关 。
3 结语
21 降 血 糖 与 降 血 脂 .
植 物 多 糖 能 够 刺 激 胰 岛 分 泌 胰 岛 素 ,影 响 糖 代 谢 酶 的 活 性 ,促 使 外 周 组 织 对 葡 萄 糖 的 利 用 ,抑 制
糖 异 生 途 径 ,起 到 降 血 糖 作 用 ,从 而 对 糖 尿 病 的 预
提 取 法 、 超 微 粉 碎 技 术 、超 临 界 流 体 萃 取 法 等 , 以
下 仅 介 绍 几 种 比较 先 进 的 提 取 方 法 。 11 超 滤 法 . 超 滤 法 又 称 膜 分 离 法 ,是 一 种 新 型 的 膜 分 离 技 术 。该 法 中 所 用 超 滤 膜 可 以从 溶 液 中分 离 出 小 分 子
凋 亡密 切相关 。植物 多糖 具有 降血 糖 、降血 脂 、预 防 和 治 疗 糖 尿 病 、抗 肿 瘤 、抗 氧 化 等 生 理 功 能 ,可
植物多糖的提取与应用研究
植物多糖的提取与应用研究植物多糖通常指的是从植物中提取出的多种糖类分子,包括葡聚糖、半乳糖、木糖、甘露糖、果糖等成分,具有广泛的应用价值。
一、植物多糖的提取方法植物多糖提取方法包括物理法、化学法、生物法等。
其中,化学法是目前最常用的提取方法,在其中对植物材料进行处理,使得其中的多糖分子能够在化学反应中相对纯净地分离出来。
同时,生物法则是近年来研究较为广泛的提取方法,这种方法的优点是不会损害多糖分子所在的宿主生物体,提取后的多糖也较为纯净。
二、植物多糖的应用领域植物多糖具有广泛的应用价值,主要涉及食品、医药和化妆品等领域。
1. 食品:植物多糖在食品加工中被广泛地应用,特别是在果冻、口香糖、糖果等糖类制品的制作中,同时也可以增加膳食纤维的摄入量,对人体健康有很大的好处。
2. 医药:植物多糖在医药领域的应用主要包括免疫调节、抗肿瘤、促进伤口愈合等,其中地高辛的提取就是经典例子。
植物多糖具有明显的免疫调节作用。
3. 化妆品:植物多糖的保湿效果非常明显,因此在化妆品领域被广泛地应用。
同时植物多糖因其良好的功能和物理性质,也可以用于改善肌肤质地和抗皱等效果。
三、植物多糖在医疗领域中的应用举例植物多糖在医疗领域中有广泛的应用,举例来说,现在人们通过提取植物多糖可以治疗胃溃疡、癌症、糖尿病等疾病。
例如,胃溃疡患者可以通过提取人参、黄芪、当归等植物中的多糖来进行治疗。
这种多糖在胃肠道中起到了润滑的作用,可有效减轻疼痛并促进溃疡的愈合。
此外,多糖还被广泛用于治疗癌症,其主要作用在于增强人体免疫力,促进肿瘤细胞的自毁。
对于糖尿病患者,通过提取苦瓜、荞麦、北枸杞等植物中的多糖进行治疗可以有效的控制血糖水平。
四、植物多糖的研究前景随着科技的不断进步,对于植物多糖提取方法的研究和开发也将得到进一步的加强。
同时,植物多糖在医疗领域中的应用也将得到进一步的研究和开发,预计将会有更多的医药品种将植物多糖作为药物的主要成份。
同时,传统的食品制造行业中也将进一步利用植物多糖,进一步提高食品中的营养价值并改善其口感和特色。
多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展
多糖提取纯化化学修饰和抗氧化性研究进展多糖是一类生物大分子,在自然界中广泛存在于植物、菌类和海洋生物等中。
它们由许多重复单元组成,具有多种生物活性和功能。
多糖具有广泛的应用价值,如食品工业、医学和生物材料领域。
多糖的提取、纯化以及化学修饰和抗氧化性的研究对于开发多糖的应用潜力具有重要意义。
多糖的提取和纯化是多糖研究的基础。
传统的提取方法主要包括热水提取、乙醇沉淀和酸碱水解等。
热水提取是最常用的方法之一,它通过加热将多糖从细胞壁中释放出来。
乙醇沉淀是一种富集多糖的方法,通过加入乙醇使多糖在溶液中沉淀出来。
酸碱水解是将多糖经过酸碱处理,使其分解为单糖或低聚糖的方法。
这些方法都具有一定的局限性,如提取效率低、纯度不高等。
近年来,一些新的多糖提取和纯化方法逐渐被开发出来。
超声波提取法利用超声波的机械作用和热效应,可以快速高效地提取多糖。
超声波破碎细胞壁,使多糖从细胞中释放出来,提高了提取效率。
离子液体提取法利用离子液体的溶解性和选择性,可以选择性地提取多糖。
这些新的方法提高了多糖提取的效率和纯度,为后续的研究提供了更好的基础。
多糖的化学修饰是将多糖的结构进行改变,从而获得具有特定功能和性能的多糖。
常见的化学修饰方法包括酰化、酯化、磷酸化和氨基化等。
这些修饰方法可以改变多糖的溶解性、稳定性和生物活性等,进一步拓展了多糖的应用领域。
氨基化可以增加多糖的带电性,使其在药物传输和生物材料方面具有更好的应用前景。
化学修饰还可以改变多糖的空间结构,从而改变其与生物分子的相互作用,进一步调控多糖的功能。
多糖具有一定的抗氧化性,可以帮助清除体内的自由基,减少氧化应激对身体的损害。
抗氧化性是多糖的重要功能之一,吸引了人们的广泛关注。
目前,研究人员已经发现了许多具有较强抗氧化活性的多糖,如海藻酸、菌藻多糖和植物多糖等。
这些多糖可以通过清除过氧化物自由基和调节抗氧化酶活性等途径发挥抗氧化作用。
研究人员还通过改变多糖的结构和修饰多糖,提高其抗氧化性能。
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植物多糖的功能
多糖与蛋白质一样,具有生物大分子的复杂结构,具有一定的生理和生物学活性,概括起来多糖的生物活性包括:免疫调节性、抗肿瘤活性、降血糖活性、降血脂活性、抗病毒活性、抗衰老活性(抗氧化活性)、抗疲劳、抗突变活性,除此之外,还具有其他生物活性,包括抗凝血、抗炎、抗菌、抗惊厥、镇静、止喘及降血压等作用。
植物多糖的提取
一、植物多糖的提取
1 溶剂提取法
1.1 水提法
水对植物组织的穿透力强,提取效率高,在生产上使用安全、经济。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。
一般植物多糖提取采用热水浸提法,该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物;或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质,沉淀提纯多糖;但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同,它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离;还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离;其中,以乙醇沉淀最为普遍。
但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。
此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出,有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。
1.2酸碱提法
有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。
但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势,目前报道的并不多。
而且即使有优势,在操作上还应严格控制酸度,因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。
有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
采用的稀碱多位为0.1mol/L氢氧化钠、氢氧化钾,为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。
同样,碱提优势也是因多糖类的不同而异。
与酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。
另外,稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅
速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。
1.4 生物酶提取法
酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的释放或提取。
此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果胶酶等。
1.5 超声提取法
超声波是一种高频率的机械波,其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏,有利用植物有效成分的释放,而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流,有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率,有助于溶质的扩散。
另外,超声波的热效应使水温基本在57℃,对原料有水浴作用。
超声波提取与传统的提取方法相比,有提取效率高、
时间短、耗能低等优点。
超声提取的影响因素有:超声时间、超声频率(一般低频中提取效率高,但也有例外)、料液比和温度等。
1.6 微波提取
微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波,微波提取的原理是微射线辐射
于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部,由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高,压力增大,当压力超过细胞壁的承受能力时,细胞壁破裂,位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来,传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率。
具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。
影响微波浸提的主要因素为浸提时间、样品和提取溶剂的含水量,溶剂的介电常数和电导率(介电常数和电导率的溶剂对微波的吸收较好)、微波功率等。
但是由于微波泄漏对操作者影响很大,因而对设备的要求较高,这对微波的研究及应用带来了一定的困难。
二、植物多糖的分离纯化
在多糖提取物中,常会有无机盐、蛋白质、色素及小分子物质等杂质,必须分别除去.一般是先脱除非多糖组分,再对多糖组分进行分级.
2.1 除蛋白:除蛋白质时一般选择能使蛋白质沉淀而不使多糖沉淀的试剂来处理,如酚、三氯乙酸、鞣酸等。
但必须处理时间短,温度低,避免多糖降解。
Sevage法(氯仿:戊醇/丁醇=4:1)和三氟三氯乙烷法在避免降解上有较好效果但要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复处理。
如能加入蛋白质水解酶,使蛋白质大分子进行一定程度的降解,再用Sevage
法处理,一般效果更好。
为了避免使用有机溶剂也可采用反复冻融的方法除蛋白,将多糖液浓缩后,一20℃室温反复冻融7~8次,离心除去蛋白质。
另外,蛋白质在等电点时溶解度最小,用氢氧化钙饱和液调pH10~pH11可除去偏碱性的蛋白质,然后再用硫酸调pH5~pH6,可除去偏酸性的蛋白质。
冻融和等电点沉淀除蛋白质操作简单,但多糖液里往往有低浓度的蛋白质残留,应与其它方法结合使用。
2.2 脱色:植物多糖提取物中含有酚类化合物而使其颜色较深,可用吸附剂(纤维素、硅藻土、活性炭等)、离子交换柱(DEAE一纤维素)、氧化剂(H2O2)等脱除。
活性炭比表面积大,吸附能力强,在进行当归多糖的提取时只向多糖液中加入了0.1%左右的活性炭,煮沸后滤过即完成了脱色操作。
此法成本低廉,适合工业化生产。
2.3 除小分子杂质
小分子杂质如低聚寡糖的残留往往影响多糖的生物活性,需要进一步脱除,提高纯度。
传统的方法是透析法,该法操作简单、技术成熟,但周期长,往往需要2一3天,常温下操作有可能造成多糖的霉变,必要时需加入少量防腐剂或需在低温条件下进行。
随着膜分离技术的发展,纤维滤器透析法已经发展起来了,它利用不同孔径的膜使大小不同的分子分级,这种方式可缩短生产周期,而且条件温和,无疑是多糖脱除杂质的一条新途径。
2.4
多糖的分级纯化
采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物,分级的方法可达到纯化的目的.可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等),也可按分子所带基团的性质分级.
2.4.1按溶解性不同分离
2.4.1.1分步沉淀法
分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质,从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀.
2.4.1.2 盐析法
盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。
常用的盐析剂有氯化钠、氯化钾、硫酸铵等,其中以硫酸铵最佳。
2.4.2
按电离性质不同分离
2.4.2.1季胺盐沉淀法
季胺氢氧化物是一类乳化剂,能与酸性多糖形成不溶性化合物季铵络合物,此络合物在低离子强度的水溶液中不溶解而产生沉淀。
若提高多糖液pH值或加入硼砂缓冲液,也可使中性多糖沉淀分离。
常用季铵盐有十六烷基三甲基季铵盐的溴化物及其氢氧化物和十六烷基吡啶。
2.4.3
柱层析法
2.4.
3.1凝胶柱层析法
凝胶柱层析法常用的凝胶有葡聚糖凝胶(Sephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose),以不同浓度的盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂,从而使不同大小的多糖分子得到分离纯化,但不适宜粘多糖的分离。
2.4.
3.2纤维素阴离子交换剂柱层析法
纤维素阴离子交换剂柱层析法常用的交换剂为DEAE一纤维素和ECTEOLA一纤维素,分
类硼砂型和碱型两种,洗脱剂可用不同浓度碱溶液、硼砂溶液、盐溶液,其优点可吸附杂质、纯化多糖,并适用于分离各种酸性、中性多糖和粘多糖。
如百合多糖、北沙参多糖、太子参多糖等。
2.4.
3.3 活性炭柱层析法
活性炭吸附量大、效率高,是分离水溶性物质的常用吸附剂。
柱层析时活性炭中常拌入等量的硅藻土作稀释剂,以增加溶液的流速。
糖溶液上柱后先用水洗脱无机盐、单糖等再依次增加乙醇浓度进行洗脱。
2.4.
3.4
离子交换柱层析和普通凝胶柱层析联用法
有些植物的多糖成分复杂,除中性多糖外,还含有糖醛酸等,因此往往两种不同性质的色谱柱联用才能得到单一多糖组分。
2.4.
3.5 三种层析柱联用
采用离子交换葡聚糖凝胶柱、丙烯葡聚糖凝胶柱和葡聚糖凝胶柱三者联用,即先进行DEA E—SephadexA柱层析,用蒸馏水洗脱。
水洗组分进一步用SephacrylS柱层析,得到主要组分再用SephadexG一100柱层析,有时会有较高的得率。
三、多糖的纯度鉴定
经过分级纯化的多糖在测定结构前须进行纯度鉴定.而且多糖的纯度不能用通常化合物的纯度标准来衡量,因为即便是多糖纯品,其微观也并不均一,仅代表相似链长的多糖分子的平均分布,通常所谓的多糖纯品也只是一定相对分子质量范围的多糖的均一组分.目前常用于多糖纯度的鉴定方法有:高效液相、凝胶层析法、电泳法、色谱法、旋光度法等.
四、常见问题
多糖制备过程中蛋白质的脱除是目前分离纯化多糖的难点。
Sevag法需要消耗大量的有机溶剂,且操作烦琐;三氟三氯乙烷的沸点较低(bp56℃,)易挥发,不宜大量应用;三氯乙酸可引起多糖的降解,从而影响其生理活性;酶价格昂贵,不适合工业化生产。
可以借鉴其它蛋白质脱除的方法,例如用天然澄清剂能简化提取工艺,提高多糖纯度。
脱色也是多糖提取纯化过程中面临的一个难题。
活性炭会吸附多糖而造成多糖的损失;H2 O2氧化脱色容易引起有些多糖的降解,因此,可探索将粗多糖反复溶解与醇析,这可能是多糖脱色的可行方法。
从总多糖中分离单一多糖组分时,各种色谱介质价格昂贵,样品制备量极小,仅限于实验室研究,尚不能规模化生产;而且单一多糖组分生理活性的研究鲜见报道。