体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证课件
合集下载
体内药物分析ppt课件
HPLC —— 调整检测器(类型、条件)
色谱柱(型号、牌号、填料性状与粒经、柱长度)
流动相(组分及其配比)及其流速
柱温、进样量、内标物质的浓度及其加入量等
—— 使各物质具有足够的方法灵敏度(LOQ)
良好的色谱参数(n、R、T)
2019/11/25
适当的保留时间(tR)
体内药物分析
15
(二)分离条件的筛选
第四章 分析方法的建立与验证 第二节 分析方法的建立步骤
在进行分离条件筛选时，应考察生物基质中的内源性物质及代谢 产物对分离与检测的干扰，步骤如下：
1．空白溶剂试验 ——溶剂(方法特异性) 2．空白生物基质试验 —— endogenous compounds(方法特异性) 3．模拟生物样品试验 —— 方法效能指标 4．实际生物样品测试 —— 代谢产物(方法特异性)
2019/11/25
体内药物分析
16
1．空白溶剂试验
第四章 分析方法的建立与验证 第二节 分析方法的建立步骤
待测药物的非生物基质溶液（通常为水溶液） ——采用拟定的分析方法进行衍生化反应、萃取分离等 样品预处理（反应试剂、衍生化试剂、萃取溶剂等） ——测定响应信号（如HPLC峰面积或峰高）
考察目标 ——方法的特异性 ——空白值应尽可能小，并能有效校正
2019/11/25
体内药物分析
9
四、实验室条件
第四章 分析方法的建立与验证 第一节 分析方法的设计依据
在设计体内药物分析方法时，还应充分考虑 到实验室现有的或有可能在其它实验室使用的仪 器装备，合理选择可行的分析方法。
2019/11/25
体内药物分析
10
第二节 分析方法
第四章 分析方法的建立与验证
体内药物分析第三章生物样品与样品制备
数据记录与审核
建立完善的数据记录与审核制度，确保实验数据的真实性和可追溯性。
效果评价指标设定和持续改进方向
效果评价指标
根据实验目的和要求，设定合理的效果评价指标，如方法回收率、精密度、准确度等，对实验结果进 行客观评价。
持续改进方向
针对实验过程中出现的问题和不足，制定改进措施并持续改进，如优化实验条件、改进操作方法、提 高设备性能等，不断提高体内药物分析的质量和效率。同时，关注新技术、新方法的发展和应用，不 断完善和更新质量保证和质量控制体系。
质量控制样品的使用
使用质量控制样品进行方法验证和日常质量监控，确保实验结果的准 确性和可靠性。
质量控制方法选择及实施过程监控
方法学验证
在建立新的体内药物分析方法时，应进行充分的方法学验证，包括专属性、线性、精密度、准确 度、稳定性等方面的考察，确保方法的可行性和准确性。
过程监控
在实验过程中，采用定期抽查、盲样测试等方式对实验过程进行监控，确保实验操作的规范性和 结果的可靠性。
04 生物样品保存、运输和接 收标准操作流程
保存条件及时限设定原则
保存条件
生物样品应在规定的低温条件下保存，以确保样品的稳定性和防止降解。通常，血浆、血清和尿液等样品应在20°C或更低温度下保存，而一些特殊样品可能需要在-70°C或更低温度下保存。
时限设定
生物样品的保存时限应根据其稳定性和分析物的性质来确定。一般来说，长期保存的样品应在采集后尽快处理并 冻存，以避免分析物的降解或转化。同时，应定期对保存样品进行质量评估，以确保其完整性和可用性。
新型生物样品的保 存与运输
对于细胞和基因等新型生物样 品，同样需要在低温条件下保 存和运输。此外，还应避免反 复冻融和长时间存放，以确保 样品的稳定性和可靠性。
建立完善的数据记录与审核制度，确保实验数据的真实性和可追溯性。
效果评价指标设定和持续改进方向
效果评价指标
根据实验目的和要求，设定合理的效果评价指标，如方法回收率、精密度、准确度等，对实验结果进 行客观评价。
持续改进方向
针对实验过程中出现的问题和不足，制定改进措施并持续改进，如优化实验条件、改进操作方法、提 高设备性能等，不断提高体内药物分析的质量和效率。同时，关注新技术、新方法的发展和应用，不 断完善和更新质量保证和质量控制体系。
质量控制样品的使用
使用质量控制样品进行方法验证和日常质量监控，确保实验结果的准 确性和可靠性。
质量控制方法选择及实施过程监控
方法学验证
在建立新的体内药物分析方法时，应进行充分的方法学验证，包括专属性、线性、精密度、准确 度、稳定性等方面的考察，确保方法的可行性和准确性。
过程监控
在实验过程中，采用定期抽查、盲样测试等方式对实验过程进行监控，确保实验操作的规范性和 结果的可靠性。
04 生物样品保存、运输和接 收标准操作流程
保存条件及时限设定原则
保存条件
生物样品应在规定的低温条件下保存，以确保样品的稳定性和防止降解。通常，血浆、血清和尿液等样品应在20°C或更低温度下保存，而一些特殊样品可能需要在-70°C或更低温度下保存。
时限设定
生物样品的保存时限应根据其稳定性和分析物的性质来确定。一般来说，长期保存的样品应在采集后尽快处理并 冻存，以避免分析物的降解或转化。同时，应定期对保存样品进行质量评估，以确保其完整性和可用性。
新型生物样品的保 存与运输
对于细胞和基因等新型生物样 品，同样需要在低温条件下保 存和运输。此外，还应避免反 复冻融和长时间存放，以确保 样品的稳定性和可靠性。
中药制剂分析 生物样品的成分分析ppt课件
二、样品预处理
• • • • • （一）预处理方法选择依据 1. 待测成分理化性质 样品的分离制备与分析方法均依赖于待测成分及其代 谢物的理化性质，如成分的酸碱性、极性、挥发性、光谱特征、功能团性质、 化学稳定性、蛋白结合程度等。 2. 待测成分浓度范围 生物样品中待测成分浓度相差悬殊，对待测成分浓度 高的样品，预处理要求可稍低；浓度越小则样品净化富集的要求越高。 3. 测定目的 测定目的不同，对样品要求也不同。如需测定代谢物，则要求代 谢物从缀合物中释放出来，并在不同pH值介质中分离，以获得酸性、中性或 碱性代谢物。 4. 生物样品类型 不同的生物样品处理方法不同。例如，血浆、血清及组织 匀浆等样品含有大量蛋白质，常需去除蛋白质后提取；而唾液有大量粘液蛋 白，需离心沉淀除去；尿中药物大多呈缀合状态，常需采用酸或酶使缀合物 水解。 5. 测定方法 样品制备和需要净化的程度与所用测定方法是否专属，是否具分 离能力等有关。例如，不具有高的分辨率的光谱分析法与兼有分离作用的色 谱法相比，前者对样品分离纯化的要求就要比后者高。又如在各种免疫测定 中通常不必考虑成分的分离，只需采取简单的浓集，这是因为免疫测定法具 有很高的特异性。
二、样品预处理
• （四）富集 • 在样品提取纯化过程中，不仅待测成分得到了纯 化，而且还有可能被初步浓集，但往往不能直接 供GC或HPLC测定用，因为微量的待测成分仍然 分布于较大的提取溶剂之中，而GC和HPLC都受 进样量的限制。富集方法可采用真空蒸发、减压 冻干或通入气流吹干(一般通入压缩空气，遇氧不 稳定的组分可改用氮气)。为了避免被测成分随溶 剂一起挥发损失，可在通气前往提取液中加入少 许沸点稍高的溶剂起固定作用。例如，在乙醚提 取液中加入乙醇后再通气流蒸发。
第二节 生物样品的成分分析
体内药物分析 生物样品与样品制备PPT共87页
60、人民的幸福是至高无个的法。— —西塞 罗
Hale Waihona Puke 谢谢11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
体内药物分析 生物样品与样品制备
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
Hale Waihona Puke 谢谢11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
体内药物分析 生物样品与样品制备
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克
生物体内药物分析方法的选择及应用ppt课件
SFDA/FDA S/F S/F S/F
F S/F S/F
F F S/F F 23
3.2.1 Selectivity:
被测组分与内源性物质、试剂中杂质、代谢产物 以及其它干扰物质有良好的分离; 必须证明所测定的物质是预期的分析物，内源性 物质和其他代谢物不得干扰样品的测定。对于色 谱法至少要考察6个不同来源空白生物样品色谱图、 空白生物样品外加对照物质色谱图（注明浓度） 及用药后的生物样品色谱图。对于质谱法则应着 重考察分析过程中的介质效应。
24
试验报告(论文)中应提供:
1. 被试验药物标准样品的色谱图 2. 正常生物样品（空白）的色谱图 3. 空白生物样品外加被试药物的色谱图 4. 给药后的生物样品的色谱图
25
3.2.2 Linear Range and Response Factor：
必须用至少6个浓度建立标准曲线(n = / > 5); 应使用与待测样品相同的生物介质; 定量范围要能覆盖全部待测浓度; 不允许将定量范围外推求算未知样品的浓度。 建立标准曲线时应随行空白生物样品，但计算 时不包括该点。
(或根据试验样品复制的标准品)
22
3.2 体内药物分析方法的评价内容：
1. Selectivity: 2. Linear Range and Response Factor： 3. Inter-Day Precision and Accuracy: 4. Intra-Day Precision and Accuracy: 5. Dilution Integrity: 6. Sensitivity: 7. Recovery (Extraction Efficiency) 8. Matrix Effects: 9. Carryover Evaluation 10. Stability: 11. Relative Retention:
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证ppt课件
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
5 唾液
• 唾液中所含成分比较简单，且容 易获得，但是只有少数药物的唾 液浓度和血浆游离药物浓度具有 相关性，实际使用不多，当药物 血浆结合率高的时候，唾液中药 物的浓度极低，很难检测。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
生物样品的保存：
• 采样后除立即分析外，为防止药物发生变化，应：短 期保存，可 4℃冷藏；长期保存，可-20℃冷冻，不要 反复冻融，必要时可以加入酶抑制剂和抗氧化剂。
• 全血不易保存，且血细胞中含有 更多的干扰物质，影响测定，故 很少采用全血测定药物浓度。仅 适用于血浆药物浓度太低或者血 浆药物浓度波动大，且难以控制 的药物如：环孢霉素A。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
2 血浆
• 测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血 清中的药物浓度，而不是指含有血细胞的 全血中的药物浓度。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
③加入强酸 当pH低于蛋白质的等电点时，蛋白质以阳离子形
式存在，加入强酸，可与蛋白质阳离子形成不溶性盐 而沉淀。常用的强酸有：10%三氯醋酸等。血清与强 酸的比例为1:0.6混合，高速离心,就可除去蛋白质。 在酸性下分解的药物不宜用本法除蛋白。
体内药物分析常用生ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ样品处理方法和方法学验证
的氢键发生变化而使蛋白质凝聚。常用的有机溶剂有：乙 睛、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、四氢呋喃等。
血浆或血清与有机溶剂的体积比为1:3时，就可以将90% 以上的蛋白质除去，采用低温高速速离心机16000r/min离 心10min 便可将析出的蛋白质完全沉淀。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
• 实际应用中，多是取50uL的血浆，加入500uL的有机溶 剂，涡旋离心后，取上清进样；
5 唾液
• 唾液中所含成分比较简单，且容 易获得，但是只有少数药物的唾 液浓度和血浆游离药物浓度具有 相关性，实际使用不多，当药物 血浆结合率高的时候，唾液中药 物的浓度极低，很难检测。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
生物样品的保存：
• 采样后除立即分析外，为防止药物发生变化，应：短 期保存，可 4℃冷藏；长期保存，可-20℃冷冻，不要 反复冻融，必要时可以加入酶抑制剂和抗氧化剂。
• 全血不易保存，且血细胞中含有 更多的干扰物质，影响测定，故 很少采用全血测定药物浓度。仅 适用于血浆药物浓度太低或者血 浆药物浓度波动大，且难以控制 的药物如：环孢霉素A。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
2 血浆
• 测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血 清中的药物浓度，而不是指含有血细胞的 全血中的药物浓度。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
③加入强酸 当pH低于蛋白质的等电点时，蛋白质以阳离子形
式存在，加入强酸，可与蛋白质阳离子形成不溶性盐 而沉淀。常用的强酸有：10%三氯醋酸等。血清与强 酸的比例为1:0.6混合，高速离心,就可除去蛋白质。 在酸性下分解的药物不宜用本法除蛋白。
体内药物分析常用生ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ样品处理方法和方法学验证
的氢键发生变化而使蛋白质凝聚。常用的有机溶剂有：乙 睛、甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、四氢呋喃等。
血浆或血清与有机溶剂的体积比为1:3时，就可以将90% 以上的蛋白质除去，采用低温高速速离心机16000r/min离 心10min 便可将析出的蛋白质完全沉淀。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
• 实际应用中，多是取50uL的血浆，加入500uL的有机溶 剂，涡旋离心后，取上清进样；
第4章体内药物分析方法的建立与验证 体内药物分析课件,药物分析研究生复试用.重点已标红
二、分析方法的建立
分析方法建立之前
需查阅文献资料——充分了解药物在体内的动力学过程，使所拟定
的分析方法避免受到代谢产物的干扰适用于实际生物样品测定
Hale Waihona Puke 文献查阅：摘要——medline,CA；药学文摘，分析文摘。
全文——各种杂志 移植或改进文献方法
建立新方法。
二、分析方法的建立
初步拟定分析方法后 进行一系列试验工作——选择最佳分析条件
第四章 体内药物分析方法 的建立与验证
2012-4
本章内容提要
分析方法的设计依据
分析方法建立的一般步骤 分析方法验证的内容与要求 分析方法验证的相关国际规范 体内药物分析应用示例
第一节 分析方法的设计依据
待测药物与生物介质 体内分析的目的 实验室的设备条件
待测药物与生物介质
同时验证分析方法的可行性——确认是否适用于实际生物样品
分析方法的建立和验证过程——是不可截然划分的 ——为便于讨论而分别叙述
分析方法的建立步骤
第一步：检测条件的筛选 第二步：分离条件的筛选
1 检测条件的筛选
取被测组分（药物或代谢产物）、内标物 质的标准物质（对照品、标准品或符合标 准的原料药）进行试验。 确定最佳检测条件和检测灵敏度（响应值）
二、分析测定的目的与要求
体内药物分析的目的影响分析方法的应用
药代动力学：研究药物在体内吸收、分布、代谢和排泄过程 不必强调方法的简便、快速； 大多采用色谱及其脱线或在线联用技术，如HPLC、LC-MS
临床治疗药物监测： 测定有效治疗浓度范围内药物浓度 方法尽量简便、易行；适用于长期、批量样品的测定
体内药物分析 体内样品分析 (药物分析课件)
分光光度法 薄层扫描法 气相色谱法 高效液相色谱法
免疫法
五、样品的测定方法
方法
紫外-可见分光光度法 荧光分光光度法 原子吸收分光光度法 紫外扫描 荧光扫描 氢火焰监测器 氮磷检测器 电子捕获监测器 质量碎片选择离子监测器 紫外检测器 荧光检测器 电化学检测器 放射免疫法 酶免疫法 荧光免疫法 游离基免疫法
体内药物分析
一、样品的种类
体内药物分析采用的生物样品种类包括体内的各种体液和组织。其中 最常用的是血液（血浆、血清、全血）、尿液和唾液。
二、样品的采集
采集原则
根据不同的分析目的和要求进行选取； 所取样品应能正确反映药物浓度与效 应之间的关系； 样品应易于获取，便于处理、分析。
二、样品的采集
（一）血样 血样包括血浆、血清和全血，是体内药物 分析中最常用的样品。 血样采集方法：静脉取血或毛细血管取血。 血样采集的量：一般取血量为1～3ml。 动物：采血量不宜超过动物总血量的1/10。
四、样品的制备及测定
样品的制备 （一）样品制备方法选择的一般原则
生物样品的类型 药物的理化性质和浓度范围 药物测定的目的 样品制备与分析技术的关系
四、样品的制备及测定
（二）样品的制备方法 1.去蛋白法
（1）加入沉淀剂和变性试剂：加入中性盐、加入酸、加入金属离子。 （2）加入可与水混溶的有机溶剂：如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四 氢呋喃等。 （3）酶消化法：最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。
二、样品的采集
（二）尿液
测定尿药浓度主要用于药物的 剂量回收、肾清除率和生物利 用度的研究以及药物代谢类型 的测定。体内兴奋剂检测的样 品主要是尿液。
二、样品的采集
（三）唾液
唾液的pH约在6.9±0.5，个体差异较 大，此外尚受到一些其他因素，如有 无刺激，剌激类型、强度与持续时间， 年龄，性别，疾病，药物等的影响。 一些药物的唾液浓度与血浆浓度相关， 样品易得，取样无损害。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证1.血浆血浆样品处理方法主要包括离心、超滤、蛋白沉淀和固相萃取。
首先，通过离心将血清和细胞分离，并将上清液收集。
然后，使用超滤技术去除高分子物质，如蛋白质，以得到更纯净的血浆样品。
接下来，可以使用蛋白沉淀方法去除血浆中的蛋白质，以便进一步分析非蛋白质药物。
最后，固相萃取是常用的药物浓度测定方法，可以通过固相材料吸附目标药物，然后用洗脱液洗脱和浓缩样品，最后定量分析。
2.尿液尿液样品处理方法常采用固相萃取、pH调节、加入稳定剂等技术。
固相萃取可以去除尿液中的杂质，并将药物萃取到固相材料上，然后用洗脱剂将药物洗脱出来。
pH调节可以使药物离子化或去离子化，以提高其固相萃取的效率。
此外，加入稳定剂可以保持样品的稳定性，防止药物分解或降解。
3.组织和细胞组织和细胞样品处理方法包括离心、组织切割、细胞溶解和蛋白沉淀等技术。
首先，通过离心将组织或细胞分离，并收集上清液。
然后，使用组织切割技术将组织样品切成适当的大小。
对于细胞样品，可以使用细胞溶解剂将细胞完全裂解。
最后，蛋白沉淀可以去除样品中的蛋白质，以便进一步分析非蛋白质药物。
方法学验证是为了确保分析方法的准确性和可靠性而进行的步骤和操作流程的验证。
主要包括以下几个方面：1.线性范围验证：验证方法在一定浓度范围内，药物浓度与测定结果之间的关系是否呈线性。
2.灵敏度验证：验证方法的最低检测限、最低定量限和测定范围等指标，以评估方法对药物浓度的敏感度。
3.精密度和准确度验证：通过重复测定和与参考方法比较等方法验证方法的重复性和准确性。
4.选择性验证：验证方法对样品中其他可能存在的干扰物的选择性，以保证药物的测定不受干扰。
5.稳定性验证：验证样品在不同温度、时间、pH条件下的稳定性，以评估样品的保存期限和条件。
综上所述，体内药物分析常用的生物样品处理方法包括血浆的离心、超滤、蛋白沉淀和固相萃取，尿液的固相萃取、pH调节和加入稳定剂，组织和细胞的离心、组织切割、细胞溶解和蛋白沉淀等。
《体内药物分析》课件
个体化用药指导
个体化用药指导是体内药物分析的重要应用之一。随着精 准医学的发展，个体化用药已成为提高治疗效果和降低不 良反应的重要手段。通过体内药物分析，可以实现对个体 化用药的科学指导。
在个体化用药指导中，体内药物分析可以帮助医生了解患 者对药物的代谢和反应特点，为医生制定个体化的用药方 案提供依据。这有助于提高治疗效果，降低不良反应的发 生率，提高患者的用药安全性和满意度。
03
免疫分析法
04
利用抗体与抗原的特异性结合反 应进行药物测定的方法。该方法 具有高选择性、灵敏度和简便性 ，适用于生物样品中痕量药物的 测定。
其他方法
除上述常用方法外，体内药物分 析还包括光谱法、荧光法、化学 发光法等其他一些测定方法。这 些方法在特定情况下可能更具优 势，例如光谱法在某些特定药物 的测定中具有较高的灵敏度。
某些药物可能通过皮肤排泄，但这一过程相对较 慢且排泄量较小。
05
CHAPTER
体内药物分析的应用
药效学研究
药效学研究是体内药物分析的重要应用之一。通过分析药物 在体内的代谢和作用机制，可以深入了解药物的疗效和作用 特点，为新药研发和药物优化提供科学依据。
在药效学研究中，体内药物分析可以帮助研究人员了解药物 在体内的分布、活化、代谢等过程，以及这些过程对药效的 影响。这有助于发现潜在的药物作用靶点，预测新药在不同 个体内的效果和安全性。
目的
体内药物分析的主要目的是评估药物 的有效性和安全性，为药物的研发、 生产和使用提供科学依据，同时为临 床医学、药理学和毒理学等领域的研 究提供支持。
药物代谢过程
第一季度
第二季度
第三季度
第四季度
吸收
药物通过各种途径进入 生物体内，如口服、注 射、皮肤吸收等。在吸 收过程中，药物可能受 到生物膜的屏障作用、 药物的溶解度、渗透性 等因素的影响。
体内药物分析方法的建立和验证护理课件
的检测。
多组分同时检测
未来体内药物分析将更加注重多 组分同时检测，以全面了解药物
在体内的代谢和分布情况。
体内药物分析方法面临的挑战与机遇
挑战
随着药物种类和数量的增加，体内药物分析的复杂性也在增加，对分析方法的要求也越来越高。同时， 由于人体内环境的复杂性和动态变化，准确测定药物及其代谢物在体内的浓度和行为仍具有很大挑战 性。
机遇
随着新技术的不断涌现，如质谱技术、核磁共振技术等，为体内药物分析提供了更多的手段和工具， 使得更深入地了解药物在体内的行为成为可能。同时，随着临床对个体化治疗的需求增加，体内药物 分析在指导临床用药、评估治疗效果等方面的应用也将更加广泛。
体内药物分析方法未来的发展方向
跨学科融合
体内药物分析将与生物学、 医学、化学等多个学科进 行交叉融合，形成更全面、 系统的研究体系。
体内药物分析方法的 建立和验证护理课件
• 药物分析方法概述 • 体内药物分析方法建立 • 体内药物分析方法验证 • 体内药物分析方法的应用和案例
分析 • 体内药物分析方法的未来发展与
展望
01
药物分析方法概述
药物分析的定义和重要性
药物分析的定义
药物分析是对药物进行全面分析 的过程，旨在了解药物在体内的 性质、行为和作用。
个体化与精准医疗
随着个体化医疗的发展， 体内药物分析将更加注重 个体差异，为精准医疗提 供有力支持。
新技术应用
新技术如人工智能、大数 据等将在体内药物分析中 发挥重要作用，提高分析 的智能化和精准度。
感谢观看
药物分析方法的建立和验证过程
建立药物分析方法
根据研究目的和实验要求，选择合适的分析方法，建立可靠的检测方法和技术。
多组分同时检测
未来体内药物分析将更加注重多 组分同时检测，以全面了解药物
在体内的代谢和分布情况。
体内药物分析方法面临的挑战与机遇
挑战
随着药物种类和数量的增加，体内药物分析的复杂性也在增加，对分析方法的要求也越来越高。同时， 由于人体内环境的复杂性和动态变化，准确测定药物及其代谢物在体内的浓度和行为仍具有很大挑战 性。
机遇
随着新技术的不断涌现，如质谱技术、核磁共振技术等，为体内药物分析提供了更多的手段和工具， 使得更深入地了解药物在体内的行为成为可能。同时，随着临床对个体化治疗的需求增加，体内药物 分析在指导临床用药、评估治疗效果等方面的应用也将更加广泛。
体内药物分析方法未来的发展方向
跨学科融合
体内药物分析将与生物学、 医学、化学等多个学科进 行交叉融合，形成更全面、 系统的研究体系。
体内药物分析方法的 建立和验证护理课件
• 药物分析方法概述 • 体内药物分析方法建立 • 体内药物分析方法验证 • 体内药物分析方法的应用和案例
分析 • 体内药物分析方法的未来发展与
展望
01
药物分析方法概述
药物分析的定义和重要性
药物分析的定义
药物分析是对药物进行全面分析 的过程，旨在了解药物在体内的 性质、行为和作用。
个体化与精准医疗
随着个体化医疗的发展， 体内药物分析将更加注重 个体差异，为精准医疗提 供有力支持。
新技术应用
新技术如人工智能、大数 据等将在体内药物分析中 发挥重要作用，提高分析 的智能化和精准度。
感谢观看
药物分析方法的建立和验证过程
建立药物分析方法
根据研究目的和实验要求，选择合适的分析方法，建立可靠的检测方法和技术。
体内药物分析 生物样品与样品制备PPT共87页
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
•
29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
•
30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
▪
谢谢！
87
体内药物分析 生物样品与样品制备
•
26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
•
27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —爱·科 克
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
•
28、好法律是由坏风俗创造出来的。 ——马 克罗维 乌斯
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
精品文档
31
精品文档
32
萃取小柱一次性使用，防止交叉污染！
精品文档
33
固相萃取操作一般有五步：
活化——甲醇/乙腈 润湿小柱，活化填料； 平衡——水或适当缓冲液冲洗平衡小柱； 上样——将样品转移上柱，抽去废液； 淋洗——水或缓冲液最大程度洗去干扰物； 洗脱——用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
精品文档
16
实际应用中，多是取50uL的血浆，加入500uL的有机溶 剂，涡旋离心后，取上清进样；
若沉淀后，信号相应不好，可尝试更换有机溶剂或者 在沉淀时，加入酸或碱，调节pH值，可能会对结果影 响很大；
常用的酸碱有：盐酸，甲酸，乙酸，氨水等。
精品文档
17
优点：操作简单，为方法开发中最先考虑使用的。
尿液中药物浓度较高，但尿液浓度受尿量的影响，通常变 化较大，应测定一定时间内排入尿中药物的总量。
精品文档
12
5 唾液
唾液中所含成分比较简单，且容 易获得，但是只有少数药物的唾 液浓度和血浆游离药物浓度具有 相关性，实际使用不多，当药物 血浆结合率高的时候，唾液中药 物的浓度极低，很难检测。
精品文档
精品文档
39
HPLC中化学衍生化法，包括柱前衍生化和柱后衍生化两 种方法。
柱前衍生化分析前尽可能将药物进行提取分离后再衍生 化，防止其他含有相同的功能基团的杂质也被衍生化， 影响分离。柱后衍生化是药物经色谱柱分离之后进行的 ，所以可形成对检测器具有高灵敏度的衍生物。
HPLC法常用的衍生化试剂有邻苯二醛、丹磺酰氯、荧胺 等。
精品文档
15
1.沉淀蛋白
①有机溶剂沉淀法 加入水溶性的有机溶剂，可使蛋白质的分子内及分子间
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证课件
28
举例：雌二醇的检测
取血浆样品100uL，+同位素内标20uL，+甲酸50uL，+正己烷 1mL+叔丁基甲醚3mL，涡旋震荡10min，3000r/min离心10min，-80℃ 冷冻10min，倒出上层有机层，40℃水浴氮气吹干，+150uL丙酮溶解， +50uL丹磺酰氯丙酮溶液，40℃水浴孵育20min，+磷酸盐缓冲液 2mL+叔丁基甲醚4mL，涡旋震荡10min，3000r/min离心10min，-80℃ 冷冻10min，倒出上层有机层，40℃水浴氮气吹干，流动相复溶。
6
1 全血
• 全血不易保存，且血细胞中含有 更多的干扰物质，影响测定，故 很少采用全血测定药物浓度。仅 适用于血浆药物浓度太低或者血 浆药物浓度波动大，且难以控制 的药物如：环孢霉素A。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
7
2 血浆
• 测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血 清中的药物浓度，而不是指含有血细胞的 全血中的药物浓度。
21
④酶解法
• 在测定一些酸不稳定及蛋白结合牢的药物时，常需用 酶解法。
• 在测定尿中的药物浓度时，由于尿中药物主要以缀合 物的形式排除，较原型药物具有较大的极性，不易被 有机溶剂提取，常用酶水解的方法。
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
22
其他的一些去除蛋白质的方法：
• 超速离心法 • 平衡透析法 • 最主要的应用在测定血浆中游离的药物浓度和药物的
体内药物分析常用生物样品处理方法和方法学验证
10
一般认为，当药物在体内达到稳定状态时，血浆中药 物浓度与药物在作用点的浓度紧密相关，即血浆中的药物浓 度反映了药物在体内（靶器官）的状况，因而血浆浓度可作 为作用部位药物浓度的可靠指标。