灵芝液体发酵工艺优化
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摘要：以煮熟土豆汁等为原料，灵芝赤芝GS为出发菌株进行液态发酵，对工艺条件进行研究， 得出最优参数：接种量8%~10%、培养温度(28±1) ℃、培养pH4.5~5.0、发酵周期98~110 h、通 风比1:(0.25~0.35)时，发酵液菌球比可以达到96%以上，灵芝多糖可以达到50 mg/g以上。 关键词：灵芝；发酵；工艺；菌球；灵芝多糖 中图分类号： TS 201.3 文献标志码： A 文章编号：1005-9989(2012)01-0033-03
食品科技
2012年 第 37卷 第 1期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
生物工程
灵芝液体发酵工艺优化研究
李平凡1，姚松君2，邱玉美3 (1.广东轻工职业技术学院，广州 510280；2.无限极(中国)有限公司，新会 529156； 3.广州华宝香精香料有限公司，广州 510730)
Abstract: By using GS Ganoderma lucidum as strain and potato braised filtrate as culture medium, the tech from fermentation are studied in this article. By results analyzing, the optimized tech parameters are: inoculation amount 8%~10%, temperature (28±1) ℃, pH value 4.5~5.0, culture time 98~110 h, the flow rate 1:(0.25~0.35), The fenmentation bacterial ball rate exceeded 96%, Ganoderma lucidum polysaccharide content exceeded 50 mg/g. Key words: Ganoderma lucidum; fermentation; process; bacaterial ball; polysaccharide
*通讯作者 收稿日期：2011-10-25 作者简介：李平凡(1973—)，硕士，主要从事食品与生物技术教学与研究工作。
[5] 中国土壤学会.土壤农业化学分析方法[M].北京:中国农 业科技出版社,1999:147-149 [6] SNT 1113-2002.进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白、叶绿素 含量的测定方法 [7] 朱英,罗永明,严喜鸾,等.螺旋藻多糖含量测定[J].时珍国 医国药,1999,10(2):88 [8] GB/T 12291-1990.水果、蔬菜汁类胡萝卜素全量的测定
The optimum study on Ganoderma lucidum fermentation process
LI Ping-fanΒιβλιοθήκη Baidu, YAO Song-jun 2 , QIU Yu-mei 3
(1.Guangdong Industry Technical College, Guangzhou 510280; 2.Infinitus(China) Company Ltd, Xinhui 529156; 3. Guangzhou Huabao Flavor & Fragrances Co., Ltd., Guangzhou 510730)
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生物工程
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2012年 第 37卷 第 1期
传统的灵芝多糖都来于灵芝孢子粉和灵芝 子实体，而这些灵芝多糖都“深藏”于灵芝纤维 中，这就很大程度地阻止和影响了人体对灵芝多 糖的有效利用和吸收。而改变灵芝多糖的传统来 源，通过灵芝的深层液态发酵法制备灵芝发酵 液，使灵芝多糖由灵芝子实体转而向灵芝菌丝体 中获得，可以使灵芝多糖的生物含量和纯度都远 高于子实体[1-2]。本文主要探讨了不同发酵条件对 灵芝菌丝发酵的影响，通过对菌丝体生物量和灵 芝多糖含量来检验实验效果。 1 实验材料与方法 1.1 实验材料 22PC紫外可见分光光度计：上海棱光技术有 限公司；DZKW-D-2电热水浴锅：北京市永光明 医疗仪器厂；DHG-9000A电热恒温鼓风干燥箱： 上海博迅实业有限公司医疗设备厂；XW-80A微 型旋涡混合仪：上海沪西分析仪器厂；10 L全自 动发酵罐；立式电热蒸气灭菌器；恒温培养摇 床；离心机等。 1.2 菌种来源 赤芝GS：广东轻工职业技术学院菌种室保藏 菌种。 1.3 实验方法 1.3.1 一级液态培养基组成 5%葡萄糖、0.5% 牛肉膏、0.8%蛋白胨、0.15%硫酸铵、0.1% KH2PO4、0.09% MgSO4·7H2O、20 mg/g VB1，初始 定容量60 mL/250 mL(三角瓶)。 1.3.2 液态深层发酵组成 25%土豆煮熟过滤汁、 0.7%蛋白胨、0.7%牛肉膏、30 mg/g V B1、0.05% KH2PO4、0.09% MgSO4·7H2O、0.15%硫酸铵，初 始定容量6 L/10 L(10 L发酵罐）。 1.3.3 培养方法 [3-7] 按照一定的扩培比例放大 培养：一级种子摇床150 r/min，温度29 ℃，培 养时间100 h；发酵罐搅拌速度180 r/min，初始 pH5.5~6.0，温度27~29 ℃，培养时间100~150 h。 1.3.4 灵芝多糖的提取和测定 将经过真空抽滤 得到的菌丝体于60 ℃进行干燥，然后采用热水 提取法。 灵芝多糖的测定采用苯酚-硫酸比色法，以 葡萄糖为标准品[5-6]。 1.3.5 菌球比 将发酵液在量筒中静置2 h，测量菌 球所占体积比例。 1.4 工艺流程
[9] 董育红,张振兰,封涛,等.螺旋藻培养基中碳、氮、磷最 佳配比及效应[J].西北农业学报,2001,10(1):75-78 [10] 施永宁,陈善坤,施翔.钝顶螺旋藻廉价培养基配方的研 究[J].江西农业大学学报,1996,18(3):278-281 [11] 陈新美,梅兴国,房伟,等.培养条件对螺旋藻生长和藻蓝 蛋白含量的影响[J].氨基酸和生物资源,2003,25 (1):2124
食品科技
2012年 第 37卷 第 1期 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
生物工程
灵芝液体发酵工艺优化研究
李平凡1，姚松君2，邱玉美3 (1.广东轻工职业技术学院，广州 510280；2.无限极(中国)有限公司，新会 529156； 3.广州华宝香精香料有限公司，广州 510730)
Abstract: By using GS Ganoderma lucidum as strain and potato braised filtrate as culture medium, the tech from fermentation are studied in this article. By results analyzing, the optimized tech parameters are: inoculation amount 8%~10%, temperature (28±1) ℃, pH value 4.5~5.0, culture time 98~110 h, the flow rate 1:(0.25~0.35), The fenmentation bacterial ball rate exceeded 96%, Ganoderma lucidum polysaccharide content exceeded 50 mg/g. Key words: Ganoderma lucidum; fermentation; process; bacaterial ball; polysaccharide
*通讯作者 收稿日期：2011-10-25 作者简介：李平凡(1973—)，硕士，主要从事食品与生物技术教学与研究工作。
[5] 中国土壤学会.土壤农业化学分析方法[M].北京:中国农 业科技出版社,1999:147-149 [6] SNT 1113-2002.进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白、叶绿素 含量的测定方法 [7] 朱英,罗永明,严喜鸾,等.螺旋藻多糖含量测定[J].时珍国 医国药,1999,10(2):88 [8] GB/T 12291-1990.水果、蔬菜汁类胡萝卜素全量的测定
The optimum study on Ganoderma lucidum fermentation process
LI Ping-fanΒιβλιοθήκη Baidu, YAO Song-jun 2 , QIU Yu-mei 3
(1.Guangdong Industry Technical College, Guangzhou 510280; 2.Infinitus(China) Company Ltd, Xinhui 529156; 3. Guangzhou Huabao Flavor & Fragrances Co., Ltd., Guangzhou 510730)
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生物工程
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2012年 第 37卷 第 1期
传统的灵芝多糖都来于灵芝孢子粉和灵芝 子实体，而这些灵芝多糖都“深藏”于灵芝纤维 中，这就很大程度地阻止和影响了人体对灵芝多 糖的有效利用和吸收。而改变灵芝多糖的传统来 源，通过灵芝的深层液态发酵法制备灵芝发酵 液，使灵芝多糖由灵芝子实体转而向灵芝菌丝体 中获得，可以使灵芝多糖的生物含量和纯度都远 高于子实体[1-2]。本文主要探讨了不同发酵条件对 灵芝菌丝发酵的影响，通过对菌丝体生物量和灵 芝多糖含量来检验实验效果。 1 实验材料与方法 1.1 实验材料 22PC紫外可见分光光度计：上海棱光技术有 限公司；DZKW-D-2电热水浴锅：北京市永光明 医疗仪器厂；DHG-9000A电热恒温鼓风干燥箱： 上海博迅实业有限公司医疗设备厂；XW-80A微 型旋涡混合仪：上海沪西分析仪器厂；10 L全自 动发酵罐；立式电热蒸气灭菌器；恒温培养摇 床；离心机等。 1.2 菌种来源 赤芝GS：广东轻工职业技术学院菌种室保藏 菌种。 1.3 实验方法 1.3.1 一级液态培养基组成 5%葡萄糖、0.5% 牛肉膏、0.8%蛋白胨、0.15%硫酸铵、0.1% KH2PO4、0.09% MgSO4·7H2O、20 mg/g VB1，初始 定容量60 mL/250 mL(三角瓶)。 1.3.2 液态深层发酵组成 25%土豆煮熟过滤汁、 0.7%蛋白胨、0.7%牛肉膏、30 mg/g V B1、0.05% KH2PO4、0.09% MgSO4·7H2O、0.15%硫酸铵，初 始定容量6 L/10 L(10 L发酵罐）。 1.3.3 培养方法 [3-7] 按照一定的扩培比例放大 培养：一级种子摇床150 r/min，温度29 ℃，培 养时间100 h；发酵罐搅拌速度180 r/min，初始 pH5.5~6.0，温度27~29 ℃，培养时间100~150 h。 1.3.4 灵芝多糖的提取和测定 将经过真空抽滤 得到的菌丝体于60 ℃进行干燥，然后采用热水 提取法。 灵芝多糖的测定采用苯酚-硫酸比色法，以 葡萄糖为标准品[5-6]。 1.3.5 菌球比 将发酵液在量筒中静置2 h，测量菌 球所占体积比例。 1.4 工艺流程
[9] 董育红,张振兰,封涛,等.螺旋藻培养基中碳、氮、磷最 佳配比及效应[J].西北农业学报,2001,10(1):75-78 [10] 施永宁,陈善坤,施翔.钝顶螺旋藻廉价培养基配方的研 究[J].江西农业大学学报,1996,18(3):278-281 [11] 陈新美,梅兴国,房伟,等.培养条件对螺旋藻生长和藻蓝 蛋白含量的影响[J].氨基酸和生物资源,2003,25 (1):2124