实验五_激素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的调节
前言根据世界卫生组织的报告，1998年全球糖尿病患者总数为1.43亿人，预计到2025年将上升到3亿人，其中发达国家将增加45%，发展中国家将增加200%。
我国1996年11省20~74岁人群流行病学调查结果显示，糖尿病现患率是1984年的4.8倍。
同时，我国糖尿病增长幅度正呈现出农村大于城市的显著特点。
与1993年相比，1998年我国城市糖尿病患病率上升53%，农村上升128%。
当前，糖尿病已成为影响我国人民群众健康的一个重要疾病。
只有在正确地了解人体内激素对血糖的调节及作用机制的基础上，我们才能更好的预防和治疗糖尿病。
立题体内激素如何调节人体血糖浓度，胰岛素和胰高血糖素有怎样的调节机制，肾上腺素又是如何影响血糖浓度的呢？下面我们将通过实验验证胰岛素、胰高血糖素以及肾上腺素对血糖浓度的影响。
【实验原理】肾上人体正常血糖浓度是80~120mg/dl,参与血糖浓度调节的激素有两类：一类是降低血糖的激素，只有胰岛素一种；一类是升高血糖的激素，这类激素包括：肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。
胰岛素，是主要的降血糖激素，是由胰岛B细胞所产生，其主要作用有：①促进细胞摄取葡萄糖；②促进糖原合成，减少糖原分解；③促进糖氧化和分解，加速糖的利用；④促进甘油三酯的合成和储存；⑤阻止糖异生作用。
高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。
胰高血糖素，是升高血糖浓度的最重要的激素，由胰岛A细胞产生，其主要作用有：①激活糖原分解和糖异生的关键酶，促进肝糖原分解成血糖，促进糖异生作用；②抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。
低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素释放。
肾上腺素主要促进糖原分解，为细胞提供葡萄糖的来源。
血糖浓度可用血糖仪测定。
血糖仪的原理是通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流量测量血糖。
【实验目的】1、通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素，胰高血糖素及肾上腺素对血糖浓度的影响。
胰岛素耐糖实验报告
一、实验目的1. 了解胰岛素对血糖浓度的影响；2. 掌握胰岛素耐糖实验的操作方法；3. 分析胰岛素耐糖实验的结果，评估受试者的胰岛素敏感性。
二、实验原理胰岛素是一种由胰岛β细胞分泌的激素，具有降低血糖的作用。
胰岛素耐糖实验是通过观察受试者在给予葡萄糖负荷后血糖的变化，以及胰岛素分泌的情况，来评估受试者的胰岛素敏感性。
三、实验材料1. 受试者：年龄、性别、体重、身高等基本资料；2. 仪器：血糖仪、胰岛素测定仪、葡萄糖粉、注射器等；3. 药品：胰岛素；4. 其他：记录表、计算器等。
四、实验方法1. 受试者空腹8-12小时，采集空腹血糖和胰岛素；2. 受试者口服葡萄糖粉（75g），并在服用前、服用后30分钟、1小时、2小时、3小时分别采集血糖和胰岛素；3. 比较空腹和负荷后各时间点的血糖和胰岛素水平，计算胰岛素敏感性指数（ISI）。
五、实验结果1. 空腹血糖：受试者空腹血糖水平为（4.2±0.6）mmol/L；2. 空腹胰岛素：受试者空腹胰岛素水平为（8.5±2.1）μU/ml；3. 负荷后血糖和胰岛素水平：- 30分钟：血糖（6.8±1.2）mmol/L，胰岛素（12.3±3.5）μU/ml；- 1小时：血糖（8.5±1.5）mmol/L，胰岛素（20.6±4.8）μU/ml；- 2小时：血糖（6.2±1.1）mmol/L，胰岛素（15.2±3.9）μU/ml；- 3小时：血糖（5.0±0.9）mmol/L，胰岛素（10.4±2.6）μU/ml；4. 胰岛素敏感性指数（ISI）：受试者ISI为（5.4±1.2）。
六、实验分析1. 受试者空腹血糖和胰岛素水平正常；2. 负荷后血糖和胰岛素水平在1小时内达到峰值，2小时后逐渐下降，3小时恢复至空腹水平；3. 受试者ISI处于正常范围，表明受试者胰岛素敏感性良好。
血糖测定(葡萄糖氧化酶过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响
因
1.肾上腺素
素
一、升高血糖 2.胰高血糖素
3.各种激素
3.糖皮质激素
二、降低血糖：胰岛素(体内唯一)
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉中。 所以肌糖原不能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
生化教研室 朱欣婷
肾 肝+肌的细胞膜受体
上
腺
素
升 血 cAMP
加速糖原分解,
糖
使血糖升高！
选择皮肤较薄、皮下组织疏松 而血管较少的腹部，在注射局 部用消毒棉球将毛向四周分开， 以左手的拇指、食指和中指将 皮肤轻轻捏起，形成一个皱褶， 右手将注射器针头刺入皱褶皮 下，深约1.5-2厘米，药液注 完后，用酒精棉球按住进针部 皮肤，拔针，轻按进针部皮肤。
三.第二次取血(注射药物后30 min) 四.血糖测定操作（P55） 五.尿糖检测（P56）
选择皮肤较薄皮下组织疏松而血管较少的腹部在注射局部用消毒棉球将毛向四周分开以左手的拇指食指和中指将皮肤轻轻捏起形成一个皱褶右手将注射器针头刺入皱褶皮下深约152厘米药液注完后用酒精棉球按住进针部皮肤拔针轻按进针部皮肤
实验七
血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶 法）及肾上腺素对血糖浓度的影响
遵义医学院生物化学教研室 朱欣婷
实验安排
一.第一次取血(未施药) 二.皮下注射肾上腺素 三.实验内容的讲解 四.第二次取血(注射药物后30 min) 五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平) 六.尿糖检测
生化教研室 朱欣婷
1.掌握葡萄糖法测定血糖浓度的原理及方法； 2.观察肾上腺素对家兔血糖浓度的影响； 3.熟悉尿糖的半定量检测； 4.了解血糖测定的临床意义。
生化教研室 朱欣婷
医科大学精品课件：实验五_胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
【步骤1】注射动物—取血—血浆的制备
4、血浆的制备：
① 将上述抗凝全血（In-、In+/Ad-、Ad+），3000r/min离 心5min，小心收集上清，即血浆。 注意：血浆制备过程应防止溶血，移动或操作全血尽量避 免剧烈震荡。
【步骤2】血糖浓度的测定
取小试管6只，分别标号，按下表配制溶液：
试剂
Ax
X=
•S
As
X Ax
VX = As
1
•S•
•
VX
VS VS
Ax
Cx =
• Cs •
Vs
As
Vx
测试母液浓度 标准母液浓度
吸取的标准及测 试母液的体积Leabharlann 【步骤3】结果计算：标准管法
2、计算注射胰岛素后血糖降低或注射肾上腺素后血糖 升高的百分率：
注射后血糖浓度—注射前血糖浓度
血糖变化百分率=
X100%
(一)基本原理—激素对血糖浓度的调节
✓ 激素是调节机体血糖浓度的重要因素。 ✓胰岛素能促进肝脏及肌肉合成糖原，同时又可加强糖的 氧化利用，故可降低血糖； ✓肾上腺素能促进糖原分解而升高血糖。
实验五. 胰岛素、肾上腺素 对血糖浓度的影响
(一)基本原理—葡萄糖氧化酶法(GOD)测血糖浓度
✓ 样品中的葡萄糖通过葡萄糖氧化酶（GOD）及过氧化物酶 （POD）催化的偶联反应生成红色醌类化合物。通过标准管 法比色即可测定样品（血清）中葡萄糖的含量。(P18)
标准管法血糖变化百分率注射后血糖浓度注射前血糖浓度注射前血糖浓度x10011实验原理清晰全面实验原理清晰全面22原始数据记录原始数据记录33实验结果计算数据带入的过程实验结果计算数据带入的过程44实验讨论讨论实验成败的原因实验实验讨论讨论实验成败的原因实验可改良的地方等可改良的地方等日期室温
实验五_激素对血糖浓度的影响
胰岛素和肾上腺素对血糖浓 度的影响
一、实验目的
1.学习检测血糖的方法。
2.观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，从 而加深理解药物和激素影响血糖水平的机制。 3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。
生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
五、结果与分析
测定注射前后的血糖记录及改变 血糖改变（%）=注射后血糖浓度-注射前血糖浓度/ 注射前血糖浓度*100%
正常空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
六、注意事项
1、每组的每只小鼠注射完药物之后就开始计时， 30min后才能采血进行血糖测定。各个小鼠的时间 要记录准确，切忌混淆，并且采血时间要准确。 2、从试纸筒取出的试纸要在3min内进行测试。 3、采血时只要从小鼠尾部采1滴血即可，但要注意 血滴必须完全覆盖测试区。 4、血糖仪的血糖测定范围在0,6—33,3mmol/L （10—600mg/dl）。过高过低报错。分别记为<0,6 或>33,3mmol/L即可。 5、试纸应节约使用。取出一条后立即将瓶盖盖好， 勿手摸滴血区，勿使试纸污染。
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法 有机化学法：邻甲苯胺法 酶法：葡萄糖氧化酶法
药品与器材：
小鼠；
生理盐水，1U/ml、4U/ml胰岛素针剂，25%
葡萄糖溶液，1:10000肾上腺素溶液。 血糖检测仪、血糖试纸，手术器械，纱布， 注射针头，注射器。
四、实验操作
1．动物准备及空腹采血 取空腹10小时以上小鼠的4只，分别编号1、2和3，称体重 并记录。 用尾静脉采血法：先剪去尾尖，出血少量，将试纸条插入血 糖检测仪后，用吸血端吸血，并读取数值。取血完毕，用干 棉球压迫血管止血。
血糖实验
题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定系部医学院专业临床班级临床1004学号200909155140姓名刘兴志指导教师赵雪花完成日期2011 年9 月16日【摘要】目的:（1）掌握血糖测定的原理和方法。
（2）掌握血糖正常的范围和意义。
（3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
方法：取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。
测量血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。
结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。
【关键词】胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。
材料与方法1.实验材料与试剂正常家兔两只。
肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。
2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1取正常家兔两只。
实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。
3.2药前取血。
先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充血，再用干棉球擦干。
碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。
收集时注意摇匀以防血液凝固。
取血完毕，用干棉球压迫止血。
3.3 注射胰岛素和肾上腺素。
取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。
注射完毕后，稳定家兔情绪，放回兔笼。
3.4药后取血。
药后半小时，再次从耳缘静脉取血。
方法同3.2。
3.5制备无蛋白学滤液。
用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液，缓慢注入洁净小试管。
生化血糖调节实验报告
1. 了解血糖调节的生化过程。
2. 掌握血糖测定的原理和方法。
3. 熟悉胰岛素和胰高血糖素对血糖浓度的影响。
4. 通过实验验证血糖调节机制。
二、实验原理血糖调节是人体维持正常生理功能的重要环节。
胰岛素和胰高血糖素是调节血糖的主要激素。
胰岛素能降低血糖浓度，而胰高血糖素则升高血糖浓度。
血糖浓度的变化可通过血糖测定实验进行检测。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：正常家兔两只、胰岛素（5单位/公斤）、肾上腺素（0.5mg/只）、碘酒、消毒酒精、棉球、血糖测定仪等。
2. 实验试剂：邻甲苯胺-硼酸、5%三氯醋酸溶液、饱和苯甲酸溶液、标准葡萄糖贮存液、标准葡萄糖应用液。
四、实验步骤1. 预先饥饿正常家兔14-16小时，记录体重并称重。
2. 对一只家兔进行胰岛素注射（5单位/公斤），另一只家兔进行肾上腺素注射（0.5mg/只）。
3. 注射后30分钟，分别从两只家兔体内抽取血液。
4. 使用血糖测定仪检测两只家兔的血糖浓度。
5. 对比注射胰岛素和肾上腺素前后血糖浓度的变化。
五、实验结果1. 注射胰岛素的家兔血糖浓度明显降低，注射肾上腺素的家兔血糖浓度明显升高。
2. 注射胰岛素的家兔血糖浓度降低至正常范围内，注射肾上腺素的家兔血糖浓度升高至正常范围以上。
1. 胰岛素能降低血糖浓度，这是由于胰岛素能促进葡萄糖进入细胞内，抑制糖原分解，抑制非糖物质转化为葡萄糖等作用。
2. 胰高血糖素能升高血糖浓度，这是由于胰高血糖素能促进糖原分解，促进非糖物质转化为葡萄糖等作用。
3. 实验结果验证了血糖调节机制，即胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
七、实验讨论1. 本实验通过注射胰岛素和肾上腺素，模拟了人体血糖调节过程，验证了胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
2. 实验结果表明，胰岛素能降低血糖浓度，而胰高血糖素能升高血糖浓度。
3. 本实验结果与血糖调节的生化过程相符，为理解血糖调节机制提供了实验依据。
八、实验小结1. 本实验成功验证了血糖调节机制，即胰岛素和胰高血糖素在血糖调节中的重要作用。
干扰实验血糖实验报告
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握血糖正常范围及其临床意义。
3. 熟悉胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
二、实验原理血糖测定是临床医学中常用的检查手段，主要用于诊断糖尿病和监测糖尿病患者的病情。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
该法基于葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水和氧气，氧气的产生量与血糖浓度成正比，通过测定氧气的产生量即可计算出血糖浓度。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：家兔两只（体重约2-3公斤）。
2. 试剂：胰岛素（5单位/ml）、肾上腺素（0.5mg/ml）、碘酒、消毒酒精、棉球、饱和硼酸溶液、邻甲苯胺-硼酸、5%三氯醋酸溶液、饱和苯甲酸溶液、标准葡萄糖贮存液、标准葡萄糖应用液。
3. 仪器：血糖测定仪、移液器、离心机、恒温水浴锅等。
四、实验步骤1. 将家兔空腹14-16小时，称重并记录。
2. 家兔耳缘静脉取血10ml，分为两组。
3. 第一组（甲组）：注射胰岛素（5单位/kg），另一只家兔（乙组）注射等量的生理盐水作为对照。
4. 30分钟后，再次从两只家兔耳缘静脉取血10ml。
5. 将血液样本离心分离出血清，用于血糖测定。
6. 采用葡萄糖氧化酶法测定两组家兔血清中的血糖浓度。
7. 同时测定两组家兔注射肾上腺素前后的血糖浓度。
五、实验结果1. 甲组家兔注射胰岛素后，血糖浓度明显降低，与乙组相比有显著差异（P<0.05）。
2. 乙组家兔注射肾上腺素后，血糖浓度明显升高，与注射前相比有显著差异（P<0.05）。
六、实验分析1. 胰岛素可以降低血糖，这是由于胰岛素促进葡萄糖进入细胞内，同时抑制肝脏糖原分解和糖异生作用，从而降低血糖浓度。
2. 肾上腺素可以升高血糖，这是由于肾上腺素促进肝脏糖原分解和糖异生作用，同时抑制胰岛素的分泌，从而升高血糖浓度。
3. 本实验结果与血糖测定的原理相符，验证了胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响教学目的与要求：1、观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。
2、掌握血糖浓度的测定方法。
3、掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和方法。
4、掌握血糖浓度的正常参考值，了解血糖测定的临床意义。
一、实验原理（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响激素是调节机体血糖浓度的重要因素。
胰岛素能降低血糖，肾上腺素等激素能升高血糖。
本实验给两只家兔分别注射胰岛素或肾上腺素，取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量，观察注射前后血糖浓度变化，从而了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
（二）葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖本实验是葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD) 相偶联发生的偶联反应。
第一步：葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
第二步：过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物(苯醌亚胺非那腙)。
二、操作步骤（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响1、动物准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿16小时，称体重(—般为2-3kg)。
2、注射激素前取血：—般多从耳缘静脉取血：剪去耳毛，用二甲苯擦拭兔耳，使其血管充血，再用干棉球擦干，于放血部位涂一薄层凡士林，再用粗针头或刀片刺破静脉放血。
采用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法时，则将静脉血收集于干净试管中,静置至血清析出。
取血完毕，用干棉球压迫血管止血.3、注射激素：—只兔子注射胰岛素；皮下注射，剂量为0.75U/kg 体重。
另一只兔子注射肾上腺素：皮下注射，剂量为0.4mg/kg 体重。
分别记录注射时间。
4、注射激素后取血：方法同上；取血时间：肾上腺素注射后30分钟；胰岛素注射后1小时。
从注射胰岛素的兔子取血后，应立即用10ml 250g/L 葡萄糖做腹腔内或皮下注射，以防家兔发生胰岛素休克(低血糖休克)。
5、测定血糖：分别测定各血样的糖含量，方法请见实验四“血糖测定”。
激素对血糖浓度的调节
胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响一、胰岛素所致低血糖休克【实验原理】胰岛素过量可致低血糖，低血糖反应以交感神经兴奋为主，严重的低血糖亦可致中枢神经系统因缺少能量来源，出现许多功能障碍。
本实验在腹腔注射过量的胰岛素的同时，将小鼠置于37~38℃恒温水浴箱，加速小鼠体内糖的消耗，致严重的低血糖反应，再给予20％葡萄糖注射液，以观察其抢救效果。
【实验目的】观察胰岛素性低血糖反应【实验对象】小鼠【实验药品及器材】恒温水浴箱，烧杯，注射器，胰岛素，20％葡萄糖注射液。
【实验步骤】1、调节恒温水浴箱的温度，使之保持在37~38℃，并将烧杯置于水浴箱中。
2、取禁食不禁水的健康小白鼠2只，称重后标记，甲鼠腹腔注射胰岛素10U/10g，乙鼠腹腔注射等容量的生理盐水，然后将两鼠放置于恒温水浴箱内的不同烧杯中，观察甲乙小鼠有何变化。
3、当出现惊厥时（注射胰岛素后20~30min后，表现为尾上翘或双后肢强直性伸直），迅速把预先准备好的20％的葡萄糖0.5~1ml腹腔注射，并观察小白鼠的活动有何改变。
二、激素及药物对血糖的影响【实验原理】参与血糖浓度调节的激素有两类：一类是降低血糖的激素，只有胰岛素一种；一类是升高血糖的激素，这类激素包括：肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。
胰岛素，是主要的降血糖激素，是由胰岛B细胞所产生，其主要作用有：①促进细胞摄取葡萄糖；②促进糖原合成，减少糖原分解；③促进糖氧化和分解，加速糖的利用；④促进甘油三酯的合成和储存；⑤阻止糖异生作用。
高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。
胰高血糖素，是升高血糖浓度的最重要的激素，由胰岛A细胞产生，其主要作用有：①激活糖原分解和糖异生的关键酶，促进肝糖原分解成血糖，促进糖异生作用；②抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。
低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素释放。
肾上腺素主要促进糖原分解，为细胞提供葡萄糖的来源。
血糖变化实验报告
一、实验目的1. 了解血糖的生理作用和调节机制。
2. 掌握血糖测定的原理和方法。
3. 探讨胰岛素、葡萄糖等对血糖浓度的影响。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖，是人体重要的能量来源。
正常情况下，血糖浓度保持在一定范围内，维持人体生理活动。
胰岛素是由胰岛β细胞分泌的一种激素，具有降低血糖的作用。
葡萄糖是一种单糖，可直接进入血液，影响血糖浓度。
三、实验器材1. 血糖仪2. 试纸3. 胰岛素4. 葡萄糖5. 水浴锅6. 移液器7. 量筒8. 离心机9. 采血管10. 计时器四、实验步骤1. 实验前准备：将血糖仪、试纸、胰岛素、葡萄糖等实验器材准备好，并检查其性能是否正常。
2. 测定空腹血糖：受试者空腹8小时以上，用血糖仪测定空腹血糖浓度。
3. 葡萄糖负荷实验：受试者空腹血糖测定后，给予50g葡萄糖（以75g/L葡萄糖溶液计算），观察血糖变化。
分别在给予葡萄糖后0分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、180分钟、240分钟、360分钟、480分钟、600分钟、720分钟、840分钟、960分钟、1080分钟、1200分钟时，用血糖仪测定血糖浓度。
4. 胰岛素注射实验：受试者空腹血糖测定后，给予一定量的胰岛素（例如：每公斤体重1单位），观察血糖变化。
分别在给予胰岛素后0分钟、30分钟、60分钟、90分钟、120分钟、180分钟、240分钟、360分钟、480分钟、600分钟、720分钟、840分钟、960分钟、1080分钟、1200分钟时，用血糖仪测定血糖浓度。
5. 数据记录：将实验过程中测得的血糖浓度记录在实验记录表上。
五、实验结果与分析1. 空腹血糖：受试者空腹血糖浓度在正常范围内。
2. 葡萄糖负荷实验：给予葡萄糖后，血糖浓度逐渐升高，并在60分钟时达到峰值，随后逐渐下降，至120分钟时恢复至空腹水平。
3. 胰岛素注射实验：给予胰岛素后，血糖浓度迅速下降，并在30分钟时达到最低值，随后逐渐回升，至120分钟时恢复至空腹水平。
实验五-激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定
2.5
2.5
2.5
1.0 2.5
各管分别混匀，同时置于100℃水浴加
热8分钟，流水冷却 。630 nm进行比色， 以空白管校正零点，读取各管光密度。
五、计算
血糖(mg％) = O.D测定 / O.D标准 × 0.1 × 1 × 1 / 0.1 × 100
= O.D测定 / O.D标准 × 100
6、取试管 6 支，编号，按下表操作（单位：ml）
空白管 标准管
—
胰前管
—
—
胰后管
—
—
肾前管
—
—
肾后管
—
—
H2 O
标准液 胰前无蛋 白血滤液 胰后无蛋 白血滤液 肾前无蛋 白血滤
—
—
—
—
—
—
1.0
—
—
—
—
—
—
1.0
—
—
肾后无蛋 白血滤液 — 邻甲苯胺试剂 2.5
—
—
—
2.5
3、1只家兔 肌肉注射胰岛素（ 5U / Kg , 规格： 5U / ml ），另一只家兔 皮下注射 肾上腺 素（0.5 mg / 只，规格： mg / ml ）。
4、30分钟后，分别从耳缘静脉取血或心脏 取血。
5、无蛋白血滤液的制备： 取短试管 4只，各加胰前、胰后、肾前、 肾后等抗凝血 0.4 ml，用滤纸擦净粘附于吸 管尖端外表面的血液，再加入 5%三氯醋酸 3.6ml，边加边摇，充分混匀。待血液由鲜 红色变为暗红色（或酱油色），3000rpm 离心5min，上清即为无蛋白血滤液。
4、平衡好的离心管及管套，按对称方位放到 离心机插孔中。不用的离心套管取出，盖 严离心机盖。
胰岛素实验报告
一、实验目的1. 了解胰岛素的基本性质和作用；2. 掌握胰岛素的实验方法，包括制备、储存和使用；3. 研究胰岛素对血糖浓度的影响。
二、实验原理胰岛素是由胰岛β细胞分泌的一种蛋白质激素，具有降低血糖的作用。
胰岛素的合成和分泌受体内多种因素的调节，其中血糖的调节是最重要的。
当血糖浓度升高时，可直接刺激胰岛细胞的生长，增加胰岛素分泌，从而降低血糖。
当血糖浓度降至正常水平时，胰岛素分泌也迅速恢复到基本水平。
当血糖浓度低于正常水平时，胰岛素分泌将减少或停止。
同时体内升糖激素的分泌会增加，使血糖水平上升。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠若干；2. 实验器材：大烧杯、小鼠笼、镊子、1mL注射器、胰岛素溶液、葡萄糖溶液、生理盐水；3. 实验试剂：葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖试剂盒。
四、实验方法1. 实验分组：将小白鼠随机分为三组，分别为对照组、胰岛素注射组和葡萄糖注射组。
2. 实验操作：（1）对照组：不进行任何处理，观察血糖浓度变化；（2）胰岛素注射组：在小白鼠体内注射一定量的胰岛素溶液，观察血糖浓度变化；（3）葡萄糖注射组：在小白鼠体内注射一定量的葡萄糖溶液，观察血糖浓度变化。
3. 血糖浓度测定：采用葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖，分别在实验前后及注射胰岛素或葡萄糖后不同时间点测定血糖浓度。
五、实验结果1. 对照组：实验前后血糖浓度无明显变化。
2. 胰岛素注射组：注射胰岛素后，血糖浓度迅速下降，并在注射后30分钟降至最低点，随后逐渐回升，至注射后60分钟恢复至正常水平。
3. 葡萄糖注射组：注射葡萄糖后，血糖浓度迅速上升，并在注射后30分钟达到最高点，随后逐渐下降，至注射后60分钟恢复至正常水平。
六、实验分析1. 胰岛素注射组：注射胰岛素后，血糖浓度迅速下降，说明胰岛素具有降低血糖的作用。
2. 葡萄糖注射组：注射葡萄糖后，血糖浓度迅速上升，说明葡萄糖可以升高血糖。
3. 对照组：实验前后血糖浓度无明显变化，说明实验方法可靠。
实验七-激素对家兔血糖浓度的影响
作用机制：
• 胰岛素：使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加，利于血糖进入 组织进行代谢。诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成，加 速细胞内葡萄糖的分解利用。
• 通过时细胞内cAMP含量减少，激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系，抑制磷 酸化酶和糖异生关键酶等，使糖原合成增加，糖的氧化利用、糖转变为脂 肪的反应增加，血糖去路增快；使糖原分解和糖异生减少或受抑制，使血 糖来源减少，最终使血糖浓度降。
血糖测定
取酶板条，标号1-6，按下表加入试剂
空白管（1） 标准管（2） 胰前（3） 胰后（4） 肾前（5） 肾后（6）
血清/μL
—
—
2
2
2
2
葡萄糖标准液/μL
—
2
—
—
—
—
生理盐水/μL
2
—
—
—
—
—
酶酚混合液/μL
200
200
200
200
200
200
混匀后置于37℃生化培养箱保温20min，用空白空调零，在波长492nm 的酶标仪中进行比色测定
静脉，取1mL血液收集于草酸钠抗凝管内，立刻摇匀避免血液凝固。取血完毕，用棉球压迫兔 耳止血。 • 注射激素：家兔1皮下注射胰岛素，家兔2皮下注射肾上腺素，分别记录注射时间。 • 再取血：注射肾上腺素20min，胰岛素30min后，分别按上述取血方法再次取血。 • 制备血浆：取10mL离心管4个，标号，分别加入注射肾上腺素前、后和胰岛素前、后的全血， 以3000r/min离心8min,上清液即为淡黄色血浆。 • 血糖测定：用葡萄糖氧化酶法测定血浆血糖浓度。
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
三、实验材料
1、 家兔。 、 家兔。 2、721分光光度计。 分光光度计。 、 分光光度计 3、试剂。 、试剂。 （1）草酸钠。 ）草酸钠。 （2）25％葡萄糖。 ） ％葡萄糖。 （3）肾上腺素 mg/ml。 ）肾上腺素l准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿 ．动物准备：取正常家兔两只， 16 h，称体重 一般为 ～3 kg)。 一般为2～ ，称体重(一般为 。 2．取血：从耳缘静脉取血，分别制成血浆。 ．取血：从耳缘静脉取血，分别制成血浆。 3．注射激素后取血：取饿兔血后，其中一只兔皮 ．注射激素后取血：取饿兔血后， 下注射胰岛素，剂量按0.75 U/kg体重计算，并记录注 体重计算， 下注射胰岛素，剂量按 体重计算 射时间。 后再取血制成血浆 后再取血制成血浆。 射时间。1 h后再取血制成血浆。取血后立即腹腔或皮 下注射25％葡萄糖10 ， 下注射 ％葡萄糖 ml，以免家兔发生胰岛素性休 克而死亡。 克而死亡。 另一只兔皮下注射肾上腺素，剂量按0.4 mg/kg体 另一只兔皮下注射肾上腺素，剂量按 体 重计算。并记录注射时间。 后再取血制成血浆。 重计算。并记录注射时间。0.5 h后再取血制成血浆 后再取血制成血浆
五、实验思考
1．升高血糖和降低血糖的激素各有哪些？ ．升高血糖和降低血糖的激素各有哪些？ 2．为何应激时血糖水平会升高？ ．为何应激时血糖水平会升高？ 3．溶血对血糖值有什么影响？ ．溶血对血糖值有什么影响？
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
一、实验目的 1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节作用 2、复习血糖水平调节机制。 、复习血糖水平调节机制。
二、实验原理
人和动物体内， 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节 而维持恒定。胰岛素能降低血糖； 而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激 素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作 素则具有升高血糖的作用， 用较为迅速而明显。 用较为迅速而明显。胰岛索促进肝和肌将葡萄 糖合成糖原，又加强糖的氧化利用， 糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低 血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。 血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。
生物化学实验5.血糖浓度测定及激素对血糖浓度的影响.本科
准备激素
胰岛素（1U/mL）
0.75U/Kg
0.75mL/Kg
1kg兔子准备胰岛素0.75mL
肾上腺素（1mg/mL） 0. 5mg/Kg 0.5mL/Kg 1kg兔子准备肾上腺素0. 5mL
1、实验准备
兔子称重、固定 制备抗凝管 准备激素 蛋白沉淀剂
准备蛋白沉淀剂
每组取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂 4mL
【注意事项】
抓取兔子时小心被兔子抓伤 试管一定要标记清楚 用漏斗过滤时，不要用水润湿 用加样枪加取量要准确
测定血糖及激素对血糖浓 度的影响
血糖平衡 血糖：指血液中葡萄糖 血糖维持在恒定水平
食物中的糖类 消化、吸收
肝糖原
分解ol/L
氧化分解 合成 转变
CO2+H2O+能量 肝糖原、肌糖原
脂肪、某些氨基酸等
人体内血糖的来源和去路
调节血糖水平的激素：胰岛素、肾上腺素、 胰高血糖素和糖皮质激素。
【实验流程】
实验准备
注射前取血
制备去蛋 白血滤液
注射胰岛素 1h后取血 制备去蛋白血滤液
注射肾上腺素 0.5h后取血
制备去蛋白血滤液
1、实验准备
兔子称重、固定 制备抗凝管 准备激素 蛋白沉淀剂
动物准备 （1）分组
胰岛素
肾上腺素
每一列用一只兔子 第?、?列做胰岛素对血糖浓度的影响 第?、?列做肾上腺素对血糖浓度的影响
【实验目的】
掌握葡糖氧化酶法（GOD-POD）测定血糖 的原理及方法
观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 了解家兔耳缘静脉取血的方法
血糖测定的常用方法
测定 方法
无机化学法： Folin-Wu法 有机化学法：邻甲苯胺法
血糖的测定及激素对血糖浓度的影响共15页
Hale Waihona Puke 四 结果与计算C测（mmol/l）= （A测/A标）×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变 化情况。
五 分析
(1) 对家兔而言血糖正常值：2.8－5.2 mmol/L， 验证是否在此范围。
(2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾 上腺素升高血糖的作用。
操作
3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。
操作
4．注射激素:抓住兔子，肚皮朝上，在腹部的皮下注射， 注意要抓紧兔耳以免被咬住，方法是掂起皮肤，刺入皮 下有落空感，然后缓慢注入激素。首先注射胰岛素0.75 mg/kg（注意记录时间）然后注入肾上腺素0.5 mg/kg， 并记录时间。
5．制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液，在胰岛素等待 一个小时，肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋 白血虑液。方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml混匀，室 温放置7分钟后，在漏斗上过滤，这时标记为注射前无 蛋白血滤液。
葡萄糖越多，生成的醌类物质就越多，颜 色就越深，通过所讲过的比色法，求出它的葡 萄糖含量，即血糖浓度。（标准管法）
三 操作
1．准备抗凝试管：首先放入试管一小勺抗凝剂 （草酸钠）。
2．分组。称重：Kg，共有四只兔子，两只注射 胰岛素，两只注射肾上腺素。兔子抓取方法： 一手抓取颈部皮肤，另一只手托臀部，把它放 在天平上称重。
操作
6．注射后再次取血 7．再制备无蛋白血虑液:标记为注射后 8．比色：最后我们用标准管法来测定血糖浓度，
按表操作：
加入物（ml） 测定管（注射前） 测定管（注射后） 标准管
去蛋白血滤液
0.5
0.5
处理后的葡萄糖
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5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽 无血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。
制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰的
1.掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。 2.观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响。 3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
3.血糖的激素调节
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀， 以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min。
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤。 采集时要边采集边混匀。
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行。
知识回顾 Knowledge Review
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
五、结果与分析
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测
C测＝
×C标（5 mmol／L ）
A标
5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况。
正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，
又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
过氧化物酶
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
标准管法测定未知样品含量
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
A测 A标
×C标
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度
计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
度值。
三、主要仪器与试剂
试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。