色谱指纹图谱结合化学计量学用于3种乳香的鉴别和质量评价_孙磊
高效液相色谱法测定乳香药材中乳香酸含量的方法研究
高效液相色谱法测定乳香药材中乳香酸含量的方法研究摘要：目的建立一种高效液相色谱法测定乳香药材中乳香酸的含量测定方法。
方法采用Agilent1260–C8(150mm×4.6mm,4μm)色谱柱，检测波长210nm。
乙腈—0.1%磷酸为流动相，80:20(测定α-乳香酸，β-乳香酸)，70:30(测定11-羰基-β-乙酰乳香酸)，流速1.0ml/min，进样量10μL。
结果α-乳香酸、β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸的线性范围分别为0.04668～0.5835μg (r=1.0000)、0.05148～0.6435μg (r=1.0000)、0.05212～0.6515μg (r=1.0000)。
平均加样回收率(n=6)分别为94.76%(RSD=1.61%)、99.40%(RSD=0.84%)、100.55%(RSD=1.30%)。
结论本方法简便、灵敏、准确、重现性好。
实现了乳香药材的专属性含量测定，为其质量控制提供依据。
关键词：《中国药典》；高效液相色谱法；乳香乳香为橄榄科植物乳香树及同属植物的树干切口中渗出的坚硬胶状树脂。
分为索马里乳香和埃塞俄比亚乳香[1]。
辛、苦、温。
归心、肝、脾经。
具有活血行气止痛，消肿生肌之功效。
主要用于痛经、经闭、胃痛、心腹诸痛、风湿痹痛；跌打伤痛、痈疽肿痛、肠痈；疮疡肿痛或溃久不收口[2]。
在院方和成方制剂中应用广泛，而且为进口名贵药材。
近年来，特别是进口名贵药材的掺假比较普遍[3-4]，质量控制尤为重要。
在2020年版《中国药典》一部中乳香药材的含量测定为挥发油测定。
此方法专属性不强，可能给企业带来经济损失和失信风险。
而且现有含量测定文献不多，大多基于挥发油研究，个别仅针对一种成分，不够科学[5-7]。
因此，为了解决这一问题，对乳香药材的代表性成分[8-9]进行分析研究，建立代表性成分乳香酸类含量测定的高效液相色谱法，为乳香药材质量控制和用药安全提供依据。
中药指纹图谱共有峰的自动识别
收稿日期:2008204216 修回日期:2008206215基金项目:国家自然科学基金(No.20775028)3通讯联系人:曹玉华,女,教授,研究方向为中药分析.第25卷第1期Vol.25 No.1分析科学学报J OU RNAL OF ANAL YTICAL SCIENCE 2009年2月Feb.2009文章编号:100626144(2009)0120041206中药指纹图谱共有峰的自动识别冯启余,曹玉华3,龚立冬(江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122)摘 要:依托时间匹配、光谱信息辅助,利用自编的VB 程序,建立并比较了时间匹配和时间匹配参考光谱信息两种识别中药指纹图谱共有峰的方法,并成功地应用于肉苁蓉的高效液相色谱2二极管阵列检测器(HPL C 2DAD )法指纹图谱的建立。
结果表明,只需要人为设置色谱峰大小下限、保留值相对误差上限和最大吸收波长差值上限三个参数,VB 程序编制的指纹分析系统就能快速对所有样本进行共有峰识别和模糊数学处理,实现了无人工干预下的中药指纹图谱共有峰的自动识别,指纹图谱的建立过程客观,并且节省大量时间,其中参考光谱法识别结果更准确。
关键词:中药指纹图谱;共有峰识别;肉苁蓉;高效液相色谱2二极管阵列检测器中图分类号:O657.7+2 文献标识码:A中药是中华民族的瑰宝,现代化是中药走向世界、实现国际化的前提,其制剂的质量水平控制是现代化的中心环节[1]。
以指纹图谱[2,3]规范中药制剂的质量,被评价为中药质量控制的里程碑[4-6]。
国家食品药品监督管理局2002年发布了《中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行)》[7]。
色谱法是研究指纹图谱的首选方法,高效液相色谱(H PL C )因具有灵敏、重现、适用对象广泛、分离效率高等特点而被广泛应用[8]。
峰匹配是指纹分析的关键,保留时间或相对保留值常常作为色谱指纹图谱的共有峰识别标准[9]。
但是,由于中药体系的复杂性和HPL C 仪器系统的微小波动,同一组分在各色谱图中的保留时间不尽相同。
三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定
三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱，并同时测定8种酚类成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷）的含量，为三叶青叶质量评价提供依据。
采用UHPLC法，Welch UHPLC Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，2.7 μm），流动相为乙腈-0.1%甲酸（含5%甲醇）水梯度洗脱，流速0.4 mL·min-1，柱温30 ℃，采用国家药典委员会“相似度评价软件2004AB”处理分析，建立41批不同产地三叶青叶的指纹图谱，共标定15个共有峰并对不同产地进行聚类分析，然后选择其中8个主要的酚类成分作为定量指标，建立UHPLC同时测定8种主要酚类成分含量的方法，经方法学验证该研究建立的三叶青叶指纹图谱和8种酚类成分含量测定方法简便有效、灵敏、准确，可为综合评价三叶青叶的质量提供参考。
标签：三叶青叶；UHPLC；指纹图谱；含量测定[Abstract]A novel method combining ultra-high performance liquid chromatography （UHPLC）fingerprint and simultaneous quantitative analysis of eight phenolic components was developed and validated for quality evaluation ofTetrastigma hemsleyanum leaves. For fingerprint analysis，15 peaks were selected as the common peaks to evaluate the similarities among 41 batches ofT. hemsleyanum leaves collected from different regions. Additionally，simultaneous quantification of eight markers，including neochlorogenic acid，chlorogenic acid，cryptochlorogenic acid，isoorientin，orientin，vitexin-2-O-rhamnoside，vitexin and isovitexin，was performed and the obtained data demonstrated that our method has achieved desired linearity，precision and accuracy. Clustering statistical analysis was further application inT. hemsleyanum leaves from different regions. The results indicated that new approach conbine ultra-high performance liquid chromatography （UHPLC）fingerprint and simultaneous quantitative analysis of eight phenolic components was applicable in quality control ofT. hemsleyanum leaves.[Key words]Tetrastigma hemsleyanum leaves；UHPLC；fingerprint analysis；quality controldoi：10.4268/cjcmm20162115三葉青是我国特有的珍稀药用植物，为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg，以块根或者全草入药，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功效[1]，并广泛用于多种国药准字中成药，如排石利胆胶囊、华佗风痛宝、结石康胶囊等。
中药指纹图谱综述
中药指纹图谱综述编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（中药指纹图谱综述）的内容能够给您的工作和学习带来便利。
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中药指纹图谱摘要: 实现中药现代化首先要解决的是中药的现代化质量标准问题,其关键就要建立合乎现代科学要求的“中药指纹图谱”。
正如国家药品监督管理局任德权副局长指出，“中药指纹图谱的建立已是牵动行业全面进步的关键技术，其应用研究，对保证中成药功效,提高中药工业整体水平，带动中药产业现代化,推进中药走向世界，具有非常重要的意义。
"关键词：中药指纹图谱、测定、DNA、化学特征中药指纹图谱借用DNA指纹图谱发展而来,广义的中药指纹图谱包括中药材DNA指纹图谱和中药材化学（成分）指纹图谱，狭义的中药指纹图谱仅指后者，是表达中药代谢产物化学特征的指纹图,包括光谱、波谱和色谱指纹图.色谱指纹图谱发展最早，也是迄今为止最为重要的指纹图谱。
按谢培山先生的定义〔，中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。
整体性和模糊性是它的基本属性。
色谱指纹图谱应满足专一性(或称唯一性)、重现性和实用性的技术要求[1］。
中药生产的原材料,因土壤、气候等环境因素及采收加工的不同，实际使用时不能保证药材质量的稳定,经加工提取得到的中间体，每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能保持一致[2]。
因此对中药原材料、中间体及成方制剂的质量控制在中药的应用上占据着很主要的位置。
中药指纹图谱借用了法医学上指纹鉴定的概念，对中药的化学信息以现代分析技术给予表征并加以描述,全面反映中药内在化学成分的种类与数量，对判断中药真伪优劣,控制中药原材料、中间体及成品的质量，减少批间差异，并最终控制成品的质量起到了极其重要的作用。
农产品挥发性风味品质研究现状与展望
农产品挥发性风味品质研究现状与展望摘要：随着经济社会的发展和物质生活水平的提高，人们的饮食观念已从“吃得饱”向“吃得好”转变，消费者比以往更加关注农产品品质。
在影响农产品品质的众多因素中，挥发性风味品质是农产品内在品质的重要评价指标之一，也是决定农产品可接受性和产品价值的首要条件。
因此，围绕农产品风味品质开展其物质基础、形成机理、鉴定评价新技术开发与应用等相关研究意义重大。
本文通过梳理近年来国内、外农产品风味品质的研究现状和发展趋势，重点介绍特征风味鉴定研究的新方法和新技术，概述基于分子感官组学的特征风味解析与鉴定，风味品质的生物调控技术研究，风味特征识别技术在农产品等级区分与真伪鉴别中的应用，智能嗅觉检测技术与风味评价，基质-风味及风味组分间相互作用机理等方面的最新研究进展，总结了我国现有风味研究存在的问题和不足，同时对新形势下农产品风味品质研究的发展趋势和研究重点进行了展望，以期为今后相关领域人员开展农产品风味品质研究与评价，推动优质特色风味农产品挖掘、培育、高值化开发利用和消费升级提供思路与参考。
关键词：农产品；风味品质；分子感官科学；生物技术；指纹图谱随着我国社会经济发展和消费结构升级，人们的饮食观念已从“吃得饱”向“吃得好”转变，消费者比以往更加关注农产品的品质问题。
农产品品质是指农产品的优质程度，不仅包括风味、外观和营养成分，还包括加工品质、卫生品质及商业品质。
在影响农产品品质的众多因素中，挥发性风味品质，作为农产品内在品质的重要评价指标之一，是直接决定农产品品质好坏和产品价值的首要条件，也是影响消费者购买行为的最重要评判指标[1]。
因此，开展农产品风味品质方面的研究与开发，不仅有助于农产品风味品质特色的精准定位、优质风味品质农产品的资源挖掘和品种培育，而且对特色风味农产品的生产指导和消费引导等方面也具有重要的借鉴和指导意义。
本文通过系统总结近年来国内外农产品风味品质研究的重要技术方法和各研究分支的最新进展，梳理了我国在农产品风味品质方面的研究现状及存在问题，展望了未来农产品风味品质研究的重要领域和发展方向。
中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤
中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤杨永生 2009级研究生学号：2009110100摘要目的：介绍中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤，为祖国传统医药走向世界提供手段方法。
方法：归纳国内近年关于指纹图谱的大量文献，分析其研究的方法，在中蒙药制剂质量控制中起到了重要作用。
结果：中蒙药制剂指纹图谱技术进展很快完全可以利用其作为中蒙药质量控制的手段。
结论：中蒙药制剂指纹图谱的研究进展很快其科学的方法和步骤可以更好的提升中蒙药质量，中蒙药制剂指纹图谱技术一定可以加速祖国传统医药走向世界。
关键词中蒙药制剂指纹图谱；方法和步骤中蒙药是我国人民在数千年治疗疾病过程中积累起来的宝贵财富，中蒙药生产和质量的规范化和现代化是祖国传统医药走向世界的重要前提，目前中蒙药正处于迈向现代化的瓶颈阶段，中蒙药制剂指纹图谱的出现为解决这个问题提供了现代技术手段、中蒙药制剂指纹图谱近年来进展很快，本文综合了国内近年的有关文献对中蒙药制剂指纹图谱的建立和辨认的方法和步骤作一论述。
1、中蒙药指纹图谱的定义、特点、分类1.1 定义：中蒙药指纹图谱是指某种（或某产地）中蒙药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段,得到的能够标志该中蒙药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱。
利用色谱技术进行指纹图谱分析的中蒙药材因生长年限，生长环境的变化而可能产生个体间较为明显的差异，但个体间必然有群体共有的相似性[1]。
1.2 特点：①通过指纹图谱的特异性，能有效鉴别样品的真伪或产地；②通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保质量的相对稳定。
中蒙药指纹图谱有两个基本属性[2]：整体性和模糊性。
1.3 分类：按应用对象来分类，可分为中蒙药材(原料药材)指纹图谱、中蒙药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指纹图谱、中蒙药中间体（工艺生产过程中间产物）指纹图谱和中蒙药制剂指纹图谱。
按测定手段可分为：中蒙药化学指纹图谱和中蒙药生物指纹图谱。
光谱指纹定量法评价木香顺气丸质量
光谱指纹定量法评价木香顺气丸质量王玲娇;孙国祥;戴娜;杨继章;于静【摘要】目的建立木香顺气丸红外-紫外光谱(IR-UV)指纹图谱,并以光谱指纹定量法评价其质量.方法以中药IR-UV为基础,将IR和UV光谱各数据点按平均值法分别生成对照指纹图谱,以光谱点为单位计算两类光谱的宏观定性定量信息,并以等权融合.结果光谱指纹定量法鉴定出15批木香顺气丸质量好,1批质量为中等.结论基于IR-UV的光谱指纹定量法可便捷地评价木香顺气丸质量.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2019(028)004【总页数】5页(P1-5)【关键词】光谱指纹定量法;木香顺气丸;红外指纹图谱;紫外指纹图谱;质量评价【作者】王玲娇;孙国祥;戴娜;杨继章;于静【作者单位】河北医科大学第一医院,河北石家庄 050031;沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016;河北省直属机关第二门诊部,河北石家庄 050000;河北医科大学第一医院,河北石家庄 050031;河北医科大学第一医院,河北石家庄 050031【正文语种】中文【中图分类】R932;R284.2木香顺气丸由木香、砂仁、香附（醋制）、槟榔、甘草、陈皮、厚朴（制）、枳壳（炒）、苍术（炒）和青皮（炒）10 味中药组方，传统剂型为水丸，收载于2015年版《中国药典（一部）》[1]。
其具有行气导滞、燥湿健脾等功效，常用于治疗食积、腹痛、气郁等症[2]。
药典收载的质量标准为用高效液相色谱（HPLC）法测定厚朴酚含量，现有文献报道了厚朴酚的HPLC指纹图谱[3]和甲醇提取物的指纹图谱[4]，也有文献报道橙皮苷、厚朴酚、和厚朴酚、木香烃内酯等单个或多个成分的含量[5-8]。
紫外指纹图谱可反映中药中具有不饱和化学键及其共轭体系基本物质的吸收情况，并以此控制中药质量[9-10]。
红外指纹图谱不仅可反映中药中多种化合物成分饱和键的吸收，且样品预处理简单，无须行样品损坏检测[11]。
可通过适当校正样本建立数学模型，应用优化后的数学模型和未知样品的近红外光谱[12-13]，进行中药质量控制。
指纹图谱(PPT)
1年生
2年生
3年生
4年生
5年生
6年生
三七主根
其中云南省文山州占80%以上， 种植面积约5万亩，分布于文山 砚山、马关、麻栗坡、西畴等
三七药材资源分布图
三七GAP种植基地
化学成分研究：
已分离成分： 人参皂苷（ginsenoside）-Rb1、Rd、Re、
HO
O glc
20(S) 20( R)
notoginsenoside 8 notoginsenoside 9
glcO OH
OOH
HO
Oglc
notoginsenoside R10
HO
O glcO
OH
Oglc
glcO OH
notoginsenoside R1
OCH3
HO
HO Oglc
notoginsenoside R12
第三部分、三七系列中药注射剂指纹图谱研究及 相似度计算软件的试用。
研究单位：
中国药科大学 中国药品与生物制品检定所 中科院昆明植物研究所 广西药品检验所 上海市药品检验所 云南省药品检验所 广东省药品检验所 黑龙江省药品检验所 北京禾普康天然药物技术开发有限公司
研究的主要内容
➢ 三七药材GAP情况 ➢ 指纹图谱方法学研究 ➢ 三七药材指纹图谱研究、三七总皂甙生
500 400 300 200 100
0 0
10
20
mAU 500
VWD1
A,
(SANQI\A2112502.D)
Wavelength=203
nm
400
300
200
中药指纹图谱相似度评价方法的比较
中药指纹图谱相似度评价方法的比较一、本文概述中药指纹图谱作为一种全面、综合地反映中药内在质量的技术手段，已经在中药质量控制、真伪鉴别以及新药研发等领域得到了广泛应用。
指纹图谱相似度评价则是评估中药指纹图谱质量、稳定性的重要指标，其评价方法的优劣直接关系到中药质量评价的准确性。
本文旨在对现有的中药指纹图谱相似度评价方法进行比较分析，探讨各种方法的优缺点，以期为提高中药质量控制水平提供理论支持和实践指导。
本文将首先介绍中药指纹图谱相似度评价的基本概念和研究意义，然后重点阐述几种常用的相似度评价方法，包括夹角余弦法、相关系数法、谱峰匹配法等。
在此基础上，本文将通过对比分析这些方法的计算原理、适用范围、优缺点等方面，为读者提供一个全面、深入的相似度评价方法比较视角。
本文将展望中药指纹图谱相似度评价方法的未来发展趋势，以期为推动中药现代化、国际化进程提供有益参考。
二、中药指纹图谱相似度评价方法概述中药指纹图谱相似度评价是中药质量控制领域的一个重要研究方向，旨在通过科学、客观的方法来评估中药的内在质量。
随着现代分析技术的不断发展，越来越多的相似度评价方法被应用于中药指纹图谱的研究中。
这些方法大致可以分为以下几类：谱图直观比较法：这是最简单直接的相似度评价方法，通过直接观察指纹图谱的峰形、峰位和峰强度等信息，对中药样品进行直观的比较和判断。
这种方法简单易行，但主观性较强，容易受到观察者的经验和技能影响。
相似度计算法：这类方法通过数学公式或算法，对中药指纹图谱进行量化分析，从而得出样品间的相似度。
常用的相似度计算法包括相关系数法、夹角余弦法、欧氏距离法等。
这些方法具有客观性强、结果可重复等优点，但也需要选择合适的计算参数和阈值。
模式识别法：模式识别技术，如人工神经网络、聚类分析、主成分分析等，也被广泛应用于中药指纹图谱的相似度评价中。
这些方法能够通过学习和训练，自动识别指纹图谱中的特征信息，并对中药样品进行分类和识别。
清香型卷烟特征指纹图谱的建立
清香型卷烟特征指纹图谱的建立殷飞;宋诗清;张晓鸣【摘要】利用GC—MS和电子鼻指纹图谱技术对清香型卷烟的品质和风格特色进行质量控制,分别采用同时蒸馏萃取(SDE)结合GC MS方法及电子鼻,构建清香型卷烟的致香物质标准指纹图谱和电子鼻雷达指纹图谱,并选取非清香型卷烟样品对指纹图谱进行分析,相似度计算结果表明:6个批次的清香型卷烟样品与该标准指纹图谱的相似度极高,程度相似度都在85％以上,而6种非清香型卷烟与该标准指纹图谱的相似度较低.说明清香型与非清香型卷烟的品质和风格特色具有明显差异.通过与建立的电子鼻雷达指纹图谱进行比较,6种非清香型卷烟在统计质量控制分析(SQC)图中都位于可接受区域以外,在宏观上进一步阐明清香型与非清香型卷烟的差异明显,与相似度计算结果一致.综上表明,清香型卷烟的SED/GC-MS指纹图谱和电子鼻雷达指纹图谱具有较好可用性,能够用于辨别清香型卷烟以及可进行控制质量和特色风格的稳定性.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2016(032)008【总页数】7页(P29-34,74)【关键词】卷烟;致香物质;指纹图谱;GC-MS;电子鼻【作者】殷飞;宋诗清;张晓鸣【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡214122;上海应用技术大学香料香精技术与工程学院,上海201418;江南大学食品学院,江苏无锡214122【正文语种】中文目前，中国卷烟产品类别划分主要包括清香型、中间型、浓香型及混合型的卷烟香型风格，但这些类别更多的是一种感官划分或人为划分，是一些能体会到感受到而又说不清或定量不了的相对模糊的概念。
且评吸者的主观因素会对感官评价结果产生较大影响，使得评价结果容易产生误差。
因此，探寻客观公正的卷烟类别划分方法就显得尤为重要。
目前，由于现代仪器分析技术的迅速发展，“指纹图谱”技术也取得了长足发展。
现代色谱指纹图谱是指先将样品经过适当前处理，如液液萃取、同时蒸馏萃取(SDE)、固相微萃取(SPME)等，然后利用气相色谱、气质联用或液相色谱等分析其中的成分，之后再借以化学计量学、统计学、应用数学等统计学方法而建立的用于鉴别样品品质与衡量质量稳定性的一种模式[1]。
指纹图谱实验研究技术指南(试行)
中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行）说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。
本指南未能概括的内容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。
指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。
光谱指纹图谱将另行规定。
一、供试品收集供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代谢产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。
收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。
（一）原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。
原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的内在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。
由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。
药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。
由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。
供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，内容包括:药材名称供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。
乳香炮制后挥发性成分的变化及含量测定
乳香炮制后挥发性成分的变化及含量测定作者：汪莹张玉珊孙丽平陈昊媛王庆闫凯莉齐滨刘莉来源：《中国药房》2022年第10期中圖分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）10-1172-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.10.04摘要目的分析乳香及其炮制品中挥发性成分的变化，并测定乙酸辛酯等4个成分的含量。
方法提取乳香及炒乳香、醋乳香的挥发油，采用气相色谱-质谱（GC-MS）法鉴定其成分，并利用Xcalibur 4.0软件及NIST 2.0质谱数据库对相似度≥80%的成分进行结构鉴定和数据分析，采用峰面积归一化法计算各成分的相对含量;采用GC法同时测定乳香及其炮制品中挥发性成分中柠檬烯、乙酸辛酯、芳樟醇、正辛醇的含量并进行比较。
结果从乳香、炒乳香、醋乳香挥发性成分中均鉴定出13个成分，主要为醇类、烯烃类和酯类等，均以乙酸辛酯的相对含量较高，分别为23.86%、37.80%、53.86%。
柠檬烯、乙酸辛酯、芳樟醇、正辛醇检测质量浓度的线性范围分别为0.006 6～0.066 4、0.179 2～1.792 0、0.003 7～0.037 0、0.032 8～0.328 0（r均大于0.999 5）;精密度、重复性、稳定性（24 h）试验的RSD均小于2%;平均加样回收率分别为98.56%、100.02%、99.13%、98.66%（RSD≤2.16，n=6）。
乳香中4个成分的平均含量分别为0.15%、16.27%、0.36%、2.26%，炒乳香中分别为0.85%、17.58%、0.66%、3.47%，醋乳香中分别为0.50%、19.75%、0.58%、3.34%。
与乳香比较，炒乳香和醋乳香挥发性成分中乙酸辛酯、芳樟醇、正辛醇、柠檬烯的平均含量均显著升高（P关键词乳香;炒乳香;醋乳香;挥发性成分;含量测定;气相色谱-质谱法;气相色谱法Changes of volatile components and their content determination of Olibanum after processingWANG Ying，ZHANG Yushan，SUN Liping，CHEN Haoyuan，WANG Qing，YAN Kaili，QI Bin，LIU Li（College of Pharmacy， Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117， China）ABSTRACT OBJECTIVE To analyze the changes of volatile components in Olibanum and its processed products， and to determine the contents of 4 components as octyl acetate. METHODS Thevolatile oil of Olibanum， fried Olibanum and Olibanum stir-baked with vinegar were extracted. The components of volatile components were identified by GC-MS. The structure identification and data analysis of the chemical components with similarity≥80% were performed by using Xcalibur 4.0 software and NIST 2.0 mass spectrum database. The peak area normalization method was used to calculate the relative content of each component. GC method was adopted to simultaneously determine and compare the contents of limonene， octyl acetate， linalool and n-octanol in volatile components of Olibanum and its processed products. RESULTS Thirteen components were identified from volatile components of Olibanum， fried Olibanum and Olibanum stir-baked with vinegar，mainly including alcohols， olefins and esters; among them， relative contents of octyl acetate in Olibanum， fried Olibanum and Olibanum stir-baked with vinegar were higher， which were23.86%， 37.80% and 53.86% respectively. The linear ranges of limonene， octyl acetate， linalool and n-octanol were 0.006 6-0.066 4， 0.179 2 -1.792 0， 0.003 7-0.037 0 and 0.032 8-0.328 0（r>0.999 5） respectively; RSDs of precision， repeatability and stability （24 h） tests were all less than 2%; average recoveries were 98.56%， 100.02%， 99.13% and 98.66%， respectively （RSD≤2.16， n=6）. Average contents of 4 components in Olibanum were 0.15%， 16.27%，0.36% and 2.26%， while those of fried Olibanum were 0.85%， 17.58%， 0.66% and 3.47%，respectively; those of Olibanum stir-baked with vinegar were 0.50%， 19.75%， 0.58% and 3.34%，respectively. Compared with Olibanum， average contents of octyl acetate， linalool， n-octanol and limonene in volatile components of fried Olibanum and Olibanum stir-baked with vinegar were increased significantly （PKEYWORDS Olibanum; fried Olibanum; Olibanum stir-baked with vinegar; volatile component; content determination; gas chromatography-mass spectrometer; gas chromatography乳香为橄榄科植物乳香树Boswellia carterii Birdw.及同属植物Boswellia bhaw-dajiana Birdw.树皮渗出的树脂，始载于《名医别录》，被列为木部上品，具有活血定痛、消肿生肌之功效[1]，用于治疗胸痹心痛、胃脘疼痛、痛经经闭、风湿痹痛和跌打扭伤等[2]。
中药技术现代化技术-指纹图谱
02
发展新型检测技术和仪器
研发更精确、更灵敏的检测方法和仪器，满足指纹图谱需求。
03
强化传统理念与现代技术融合
在传承中药理念的基础上，运用现代技术手段，推动中药指纹图谱的发
展。
未来发展趋势预测
技术不断创新
随着科技的进步，中药指纹图谱技术将不断创新，提高准确性和 可靠性。
应用范围扩大
中药指纹图谱将逐渐应用于更多领域，如药品质量控制、新药研 发等。
指导。
中药生产过程监控
指纹图谱技术可以实时监控中 药生产过程中的关键环节，确 保生产过程的稳定性和可控性。
通过对生产过程中指纹图谱的 变化分析，可以及时发现生产 过程中的异常情况，避免生产 事故的发生。
指纹图谱技术还可以应用于中 药生产过程的优化和改进，提 高生产效率和产品质量。
中药疗效评价与机理研究
的快速筛选和鉴定。
03 中药指纹图谱建立方法与 流程
样品选择与制备
01
选择具有代表性的中药样品，确 保其能够反映该中药的整体质量 特性。
02
对样品进行适当的制备处理，如 粉碎、提取、浓缩等，以获得符 合指纹图谱分析要求的样品。
数据采集与处理
采用高效、灵敏的现代分析仪器，如 色谱仪、光谱仪等，对中药样品进行 全面的化学成分分析。
面临挑战
技术标准化难度大
中药成分复杂，不同药材、不同批次间存在差异，制定统一标准 面临挑战。
检测方法与仪器限制
现有检测方法和仪器精度、灵敏度等方面可能无法满足指纹图谱要 求。
传统理念与现代技术融合
如何将传统中药理念与现代技术相结合，是中药指纹图谱面临的重 要问题。
解决方案探讨
01
加强标准化建设
乳香中三萜类成分的薄层色谱鉴别和含量测定
乳香中三萜类成分的薄层色谱鉴别和含量测定佟昕;刘汶;梁晓旭;齐文;潘英妮;华会明;刘晓秋【摘要】目的:以乳香中主要三萜类成分为指标,建立和完善乳香的定性定量分析方法.方法:用TLC鉴别法,以三萜酸类成分11-羰基-β-乙酰-乳香酸(AKBA)为对照品,采用硅胶GF254薄层板,以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶2∶0.2)为展开剂,鉴别乳香药材中AKBA;用HPLC测定方法,Agilent TC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.05％磷酸溶液(80∶20)为流动相,流速:0.8mL·min-1,检测波长:250nm,测定不同来源乳香药材中AKBA和11-羰基-β-乳香酸(KBA)含量.结果:乳香TLC图谱中,AKBA斑点清晰、分离效果好；HPLC含量测定法中,AKBA和KBA分别在0.02463～0.2463mg.mL-1和0.01004～0.1004mg.mL-1,线性关系良好.AKBA和KBA的同收率分别为96.1％(RSD=3.1％)和96.4％(RSD=3.5％).结论:所建立的TLC和HPLC法操作简便、结果准确、重复性好,可作为乳香定性、定量的质量控制方法.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2012(014)007【总页数】4页(P11-14)【关键词】乳香;三萜类成分;鉴别;含量测定【作者】佟昕;刘汶;梁晓旭;齐文;潘英妮;华会明;刘晓秋【作者单位】沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;沈阳市食品药品检验所,辽宁沈阳110000;沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016;沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016【正文语种】中文乳香（Olibanum）为橄榄科植物卡氏乳香树Boswellia carterii Birdw.及同属植物鲍达乳香树Boswellia bhaw-dajiana Birdw.树皮渗出的树脂。
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基金项目：国家十二五“重大新药创制”专项资助项目（2014ZX09304307-002）；国家自然科学基金资助项目（81303214）；中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金（2013WA8）；国家食药总局进口药材标准增修订专项（JKYC2012-14）作者简介：孙磊，男，硕士，副研究员研究方向：中药、天然药质量控制及有害残留物分析*通讯作者：马双成，男，博士，研究员，博士生导师研究方向：药物分析、中药学Tel ：（010）67095272E-mail ：masc@色谱指纹图谱结合化学计量学用于3种乳香的鉴别和质量评价孙磊1，张超2，田润涛3，刘丽娜1，陈安珍4，金红宇1，马双成1*（1.中国食品药品检定研究院，北京100050；2.苏州市食品药品检验所，江苏苏州215104；3.科迈恩（北京）科技有限公司，北京100085；4.青岛市药品检验所，山东青岛266071）摘要：目的提出一种中药鉴别和质量评价的整体策略，并遵循该策略建立乳香的HPLC 指纹图谱分析方法。
方法该策略包括5个步骤，步骤1为多品种收集，步骤2建立统一条件的色谱指纹图谱鉴别和含量测定分析法，步骤3借助对照品和液质联用法进行成分鉴别，步骤4使用多元统计分析法对中药进行真伪（或不同种）鉴别，步骤5采用相似度阈值评价结合含量测定区间值评价中药质量的优劣。
结果HPLC 指纹图谱包含26个色谱峰，其中14个色谱峰进行了鉴别，数据进行了聚类热图分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析和自组织映射人工神经网络等多元统计分析，并选择了支持向量机分类器用于模式识别，分别建立了3种药用乳香的共有模式，得出了11-羰基-β-乳香酸（KBA ）和11-羰基-β-乙酰乳香酸（AKBA ）的含量区间。
结论本方法专属、准确，可用于精确区分和系统评价3种药用乳香。
关键词：指纹图谱；化学计量学；高效液相色谱；质谱联用；乳香；乳香酸doi ：10.11669/cpj.2015.02.013中图分类号：Ｒ917文献标志码：A文章编号：1001－2494（2015）02－0140－07A Holistic Strategy of Identification and Quality Evaluation of Frankincense by Chromatographic Finger-print Combined with ChemometricsSUN Lei 1，ZHANG Chao 2，TIAN Ｒun-tao 3，LIU Li-na 1，CHEN An-zhen 4，JIN Hong-yu 1，MA Shuang-cheng 1*（1.National Institutes for Food and Drug Control ，Beijing 100050，China ； 2.Suzhou Institute for Food and Drug Control ，Suzhou 215104，China ； 3.Chemmind Technologies Co .，Ltd .，Beijing 100085，China ； 4.Qingdao Institute for Drug Control ，Qingdao 266071，China ）ABSTＲACT ：OBJECTIVETo propose and establish a novel holistic strategy of identification and quality evaluation of frankincenseby chromatographic fingerprint analysis.METHODSThe strategy contained five steps.The first step was multi-species sample col-lection.The second was to establish fingerprint identification and assay under the same chromatographic conditions.The third was com-ponents identification by means of reference substances and LC-MS.The fourth was multivariate analysis for identification and classifi-cation of certified products and adulterants.The fifth was to evaluate TCMs using similarity threshold and content range criteria.ＲE-SULTSTwenty-six chromatographic peaks were separated and fourteen were identified.Furthermore ，HCA heatmap analysis ，princi-pal component analysis ，partial least squares discrimination ，self-organizing map clustering ，and support vector machine were used for pattern recognition.The common patterns for three species of frankincenses were established.The content ranges for KBA and AKBA were also calculated.CONCLUSION The method is specific and can be used to accurately identify and systematically evaluate me-dicinal frankincense.KEY WOＲDS ：fingerprint ；chemometrics ；HPLC ；LC-MS ；frankincense ；boswellic acid乳香是一味使用广泛的中药兼天然药，具有活血定痛、消肿生肌的功效［1］，用于抗炎、抗肿瘤［2］，其活性成分为乳香酸类化合物［2］。
我国习用品为索马里乳香原（植物Boswellia sacra Flück.）和埃塞俄比亚乳香［（原植物B .papyrifera （Del.）Hochst.）］［1，3］，欧美和印度习用品为印度乳香（原植物B .serrata Ｒoxb．）［4-6］。
乳香中成分的分析法主要有高效液相色谱法［4-9］、液质联用法［10-11］和气质联用法［12-13］等。
上述方法多限于几种或十几种成分的含量测定，或者色谱峰的结构推测，未进行深入的指纹图谱结合化学计量学研究，也未对国内外常用的3种药用乳香的异同进行系统比较。
目前，色谱指纹图谱技术、化学计量学分析法、色谱质谱联用技术和多指标含量测定法广泛用于中药的鉴别和质量评价［14-19］，以往的研究常常只涉及上述技术的一种或几种，不够系统和全面。
本实验提出了一种5步骤的整体策略（图1），1是多品种收集，为应对中药材常存在的混淆种或者多种植物来源的问题；2是色谱指纹图谱的建立，本策略特别提出尽量将指纹图谱鉴别和含量测定的前处理条件与色谱条件统一，以简化分析方法；3是成分鉴别，尽量减少中药分析的黑箱属性；4是化学计量学鉴别，先采用聚类分析、主成分分析等方法区分不同类别的样品并得到强特征成分，然后进行降维，最后建立模式识别模型；5是综合质量评价，本策略特别提出优良样品应满足2个条件，该样品与正品共有模式的夹角余弦相似度高于阈值，该样品一个或几个成分的含量值在一定的范围内。
本实验在收集了3种56批药用乳香样品的基础上，照上述策略进行比较研究，建立了区分不同种的模式识别方法和相应种的综合质量评价方法。
1仪器、试剂与材料Waters e2695高效液相色谱仪（2998PDA 检测器，美国Waters 公司）；Agilent1200高效液相色谱仪（DAD 检测器）和6320离子阱质谱仪（美国Agilent公司）；Agilent Zorbax SB C 18柱（4.6mm ˑ250mm ，5μm ）；ChemPattern 先进化学计量学系统解决方案软件［科迈恩（北京）科技有限公司］。
11-羰基-β-乳香酸（KBA ）、11-羰基-β-乙酰乳香酸（AKBA ）、α-乳香酸（α-BA ）、β-乳香酸（β-BA ）、α-乙酰乳香酸（α-ABA ）和β-乙酰乳香酸（β-ABA ）对照品购自美国Chromadex 公司；乙腈、磷酸和甲酸为色谱纯，甲醇为分析纯；水由Milli-Q 系统（美国Mil-lipore 公司）制备；乳香药材经中国食品药品检定研究院孙磊副研究员鉴定，为乳香树（Boswellia sacra Flück.）、纸乳香树［B .papyrifera （Del.）］Hochst.和齿叶乳香树（B .serrata Ｒoxb.）的树脂，见表1。
2实验条件及步骤2.1色谱及质谱条件流动相为乙腈（A ）-0.1%磷酸水溶液（B ，质谱分析为0.1%甲酸水溶液），梯度洗脱0 25min ，75%A ；25 60min ，80%A ；60 75min ，88%A ；75 80min ，88%A 。
柱温30ħ；流速1mL ·min －1；检测波长210、250nm 及200 400nm 全波长扫描；进样量10μL 。
ESI 源，正、负离子模式同时扫描；毛细管电压3.5kV ；干燥气温度350ħ；干燥气流量8L ·min －1；雾化气压力35psi ；智能参数：目标质量m /z 500，化合物稳定度100%，离子阱驱动水平100%；离子阱参数：目标数2e5，最大累积时间200.00ms ，质量范围m /z 50 1000；碎裂电压1.00V 。
2.2对照品溶液及供试品溶液精密称取KBA 和AKBA 对照品加甲醇制成质量浓度分别为204.28和296.82μg ·mL －1的混合对照品储备液，备用。
其余对照品也配成约200μg ·mL －1的甲醇溶液。
取药材粉末约0.1g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇10mL ，超声（功率200W ，频率50kHz ）30min ，滤过，残渣再加入甲醇10mL ，超声30min ，再次滤过，合并滤液置25mL 量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，即得。