微生物检验第二十二章 衣原体及检验讲义
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第二十二章衣原体及检验
本章内容
一、衣原体的概念、分类和命名
二、生物学性状
三、微生物检验
四、临床意义
沙眼衣原体
鹦鹉热衣原体
肺炎衣原体
衣原体的概念、分类和命名
一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。
细胞壁缺乏肽聚糖。
根据抗原构造和DNA同源性的特点分四个种,包括沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体及家畜衣原体,其中前三个种对人致病。
不耐热,耐寒。对多种抗生素较敏感。
寄生于人类、哺乳类及鸟类,仅少数致病。
生物学性状
发育繁殖周期与形态染色
(1)原体:外有胞壁,内含致密的核质,为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavetllo染色呈红色。无繁殖能力,但有高度的感染性。
(2)网状体又称始体:无胞壁,胞浆内无致密的核质,而有纤细的网状结构。吉姆萨染色和Macchiavello 染色均呈蓝色。为发育周期中的繁殖型,不能在胞外存活,无感染性。
(3)包涵体:在易感细胞胞浆内含增殖的始体和子代原体的空泡。吉姆萨染色深紫色。碘液染色深褐色。
发育繁殖周期与形态染色
抗原
有属、种、型等特异性抗原。包括衣原体LPS和外膜蛋白。
抵抗力
抵抗力弱,不耐热,加热50℃经30min或56~60℃ 5~10min可杀死,但耐寒,在冰冻条件下可存活数年。对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。
微生物检验
标本采集:
沙眼急性期--结膜病灶刮片(2SP培养基)
性病淋巴肉芽肿--腹股沟淋巴结脓液或生殖道上皮细胞刮片
鹦鹉热衣原体--血液、痰或咽喉分泌物
肺炎衣原体--痰液、鼻咽拭子分泌物(24小时内接种或置-70℃保存)
形态学检查:
寻找上皮细胞内的包涵体。
(1)吉姆萨(Giemsa)染色:原体呈紫红色,始体呈蓝色,包涵体呈深紫色。
(2)碘液染色:包涵体成深褐色,而细胞的其他部分呈黄色。沙眼衣原体碘染色阳性。鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体碘染色阴性。
(3)可利用抗LPS单抗进行直接法荧光抗体染色检测上皮细胞内的衣原体抗原。
分离培养
专性细胞内寄生。
将检查标本用链霉素处理后接种于6~8d龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖,并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒,也可在传代细胞(如Mc Coy和HeLa229株细胞)中培养。
用小鼠腹腔、颅内或滴鼻接种,小白鼠对不同种衣原体的敏感性不同,可以分离鉴定衣原体。
酶免法检测抗原。
核酸检测:采用核酸探针、PCR方法。
检测抗体:用补体结合试验、微量免疫荧光法、酶免法检测抗体。
致病性及临床意义
(一)沙眼衣原体
1.沙眼:由沙眼衣原体沙眼生物亚种引起,直接或间接接触传播。
2.包涵体结膜炎:由沙眼衣原体沙眼生物亚种引起。
3.泌尿生殖道感染:沙眼衣原体沙眼生物亚种可经性接触传播引起非淋菌性泌尿生殖道感染、男性尿道炎。女性宫颈炎、阴道炎、盆腔炎、不孕症。
4.性病淋巴肉芽肿:沙眼衣原体性病淋巴肉芽肿生物亚种所致,主要经性接触传播,主要侵犯淋巴组织,发生化脓性炎症和慢性肉芽肿,有些可形成瘘管。
(二)鹦鹉热衣原体
主要引起鸟类或家禽感染,以气溶胶形式传给人,使人发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症。典型临床
表现为非典型肺炎。
(三)肺炎衣原体
飞沫或呼吸道传播。引起青少年急性呼吸道感染,以肺炎为主,常可呈地方性、散发性流行。也可引起慢性感染。
经典例题
下列哪一项不是衣原体的特点
A.体积微小
B.能透过细菌滤器
C.能在人工培养基中繁殖
D.具有独特发育周期
E.原核细胞型微生物
『正确答案』C
『答案解析』衣原体是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。
衣原体与细菌相比,不同之处是
A.有细胞壁
B.含有RNA和DNA
C.二分裂繁殖方式
D.在无生命培养基上不能生长
E.对抗生素敏感
『正确答案』D
『答案解析』衣原体是细胞内专性寄生的原核细胞型微生物,细菌可以在培养基上生长。
检查衣原体常用
A.棉兰染色法
B.革兰染色法
C.镀银染色法
D.吉姆萨染色法
E.墨汁染色法
『正确答案』D
『答案解析』检查衣原体常用吉姆萨染色法。