最新将植物组织培养流程

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将植物组织培养流程

附录一

植物组织培养流程及相应图片

1、配制培养基并进行高温蒸汽灭菌20min;

2、接种工具以及超净工作台灭菌:接种工具用高温蒸汽灭菌,超

净工作台用紫外灯灭菌30min;

3、外植体消毒:首先用流水冲洗外植体,用酒精灭菌30s,再用

0.1%升汞消毒10min,最后用无菌蒸馏水冲洗4-5次;

4、用75%酒精对手进行灭菌消毒;

5、接种:用剪刀剪取1cm2左右的叶片或者1cm长的茎段,迅速

放入三角瓶中,并立即封口;

6、将接种的三角瓶放入组培室中进行培养,大约2周后(时间根

据培养条件不同而不同)长出愈伤组织,如图1、2;

图1 西瓜茎段愈伤组织图2 烟草叶片愈伤组织

7、长出愈伤组织后,即可进行继代和分化培养,具体流程与接种

一致,只是将外植体换成愈伤组织,并注意无菌条件的控制,如图3、4;

图3 西瓜愈伤分化图4烟草愈伤分化

8、将继代分化的愈伤组织放入适宜的条件下进行光照培养,诱导

出芽和根,如图5、6

图5 西瓜诱导发芽图6西瓜诱导发芽生根

9、将诱导出根和芽的植株进行练苗;

10、练苗后的植株移栽到自然条件下,让其自然生长繁殖,最终达

到植物组织培养的目的。

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