果蔬Vc的测定
果蔬维生素C含量测定
果蔬维生素C含量测定原理:还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯靛酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。
还原型抗坏血酸还原2,6-二氯靛酚后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸,在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准2,6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
试剂配制:(1)2%草酸溶液:溶解20克草酸结晶于200毫升水中,然后稀释至1000ml(2)0.2 mg/ml抗坏血酸标准溶液:准确称取10 mg抗坏血酸,溶于2%草酸溶液中,定容到50 ml容量瓶中,置冰箱中保存。
(3)2,6-二氯靛酚溶液:称取50 mg2,6-二氯靛酚钠盐,溶于50 ml热水中,冷却后用蒸馏水定容至250 ml容量瓶中。
过滤后,置于棕色药瓶中保存在冰箱内。
步骤1.标准抗坏血酸溶液的标定吸取标准抗坏血酸溶液2 ml,加入5 ml20 g/L的草酸溶液,以2,6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色即为终点。
用同时刚配好的V C标准溶液标定,记录每ml 2,6-二氯靛酚溶液相当于V C的毫克数(mg/ml)。
2.样品的准备及滴定取样品匀浆10.0 g,加入90 ml 2%草酸溶液,定容至100 ml,过滤备用。
用标定过的2,6-二氯靛酚溶液滴定至桃红色且15 s内不褪色为止,记下染料的用量,重复三遍。
3.维生素C含量计算W=(V0-V1)A*100/MW为100g鲜样样品中含抗坏血酸的毫克数V0为滴定样品所用的染料的ml数。
V1为空白样品所用的染料的ml数。
A为1ml染料溶液相当于维生素C的毫克数(mg/ml)。
M为取样量即样品克数。
第三法2,6-二氯靛酚滴定法17 原理用蓝色的碱性染料2,6-二氯靛酚标准溶液对含L(+)-抗坏血酸的试样酸性浸出液进行氧化还原滴定,2,6-二氯靛酚被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的2,6-二氯靛酚在酸性介质中显浅红色,由2,6-二氯靛酚的消耗量计算样品中L(+)-抗坏血酸的含量。
果蔬中维生素C的测定
实验十:果蔬中维生素C的测定(2,6—二氯靛酚滴定法) 教学目的要求基本知识点1、了解从果蔬中提取Ve的方法。
2、掌握2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操作关键。
3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
4、掌数据处理和结果计算技术。
重占≡≡.∕∙⅜t2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。
难点2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的原理课时教学方案:复习与提问:1、2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。
2、2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。
3、检查学生实验准备情况。
【引入新课】Ve在人体内的主要功能是:参加体内的氧化还原过程,促进人体的生长发育,增强人体对疾病的抵抗能力,促进细胞间质中胶原的形成,维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能,增强肝脏的解毒能力。
当人体中缺少VC时,就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。
近年来,科学家们还发现,VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质一亚脱胺,从而减低癌的发病率。
据测定,成年男子每天约需VC65mg,成年女子每天约需VC60mg oVC广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜,特别是獄猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的%。
以IOOg水果的VC的含量来计算,獄猴桃含420nιg,鲜枣含380mg,草莓含8Omg,橙含49mg,枇杷含36mg,橘含30mg,柿子含3Omg0但葡萄、无花果、苹果各自只有5nιg,香蕉、桃子各含IOmg,梨子仅含4mg。
实验十:果蔬中维生素C的测定—2,6—二氯靛酚滴定法维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbicacid)。
化学名称为:L-3-氧代苏己糖醛酸内酯【英文名:ASCOrbiCACid(INN)],分子式为C6H8O6,相对分子质量:176.13o自然界存在两种形式的维生索C:抗坏血酸(还原型VC)和脱氢抗坏血酸(氧化型DHVC),抗坏血酸易氧化成脱氢抗坏血酸,脱氮抗坏血酸又易还原成抗坏血酸。
果蔬中维生素C的测定
果蔬中维生素C的测定
维生素C(抗坏血酸)是一种重要的水溶性维生素,可以在多种果蔬中找到。
以下是一种常见的方法来测定果蔬中的维生素
C含量:
1. 准备样品:将所需的果蔬样品洗净,去除外皮、种子和纤维,然后将其切碎成小块。
2. 提取维生素C:将切碎的果蔬样品加入足够的去离子水中,使用搅拌器将其搅拌均匀。
然后使用滤纸或离心机将提取液分离出来。
3. 准备标准曲线:制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液,可以使用市售的维生素C标准品。
标准溶液的浓度应该涵盖
预期测定样品中的维生素C范围。
4. 进行反应:将提取液和维生素C标准溶液分别加入试剂中,常见的试剂是重铬酸钾溶液。
经过一段时间的反应,产生颜色变化。
5. 反应色彩测定:使用分光光度计或相关仪器,对样品和标准溶液中的颜色进行测定。
维生素C的浓度与测定的吸光度或
测得的颜色深浅有关。
6. 计算维生素C含量:使用标准曲线得出的吸光度与维生素
C标准溶液的浓度的关系,计算样品中的维生素C含量。
综合分析实验:实验3:果蔬中维生素C测定(实验报告)
实验果蔬中维生素C含量的测定
学院/专业/班级:______________________________ 姓名:
合作者:________________ 实验日期______年__月__日教师评定:______________ 【实验目的】
【实验原理】
【仪器及试剂】
【简单实验步骤】
【数据记录及处理】
Vc质量: g ;西红柿质量: g ;橙子质量: g
实验中你与合作者配制的公用试液有(详细记录称取量及配制过程):
(1)分光光度法:标准曲线及待测样品吸光度的测定
表1. 标准系列及待测果蔬吸光度的测定
以Vc含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线:
图1. 标准曲线(图打印成适当大小,贴在此处)
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量(利用拟合方程求算,注意稀释倍数,以mg/100g表示)
(2)荧光法:标准曲线及待测样品荧光光度的测定
表2. 标准系列及待测果蔬荧光强度的测定
图2. 标准曲线(图打印成适当大小,贴在此处)
计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量(利用拟合方程求算,注意稀释倍数,以mg/100g表示)
【实验评价及问题讨论】。
果蔬中维生素C含量的测定(精)
研究过程
1、确定果蔬中维生素C含量测定的 方法及实验方案。
2 、设计实验记录卡
3、实验测定一些常见果蔬中 维生素C的含量。 4、误差分析 5 、对实验过程和结果的 反思与建议
测定果蔬中VC含量
• 荧光法:
• 样品中VC与邻苯二 胺反应生成有荧光 的物质,其荧光强度 与VC浓度成正比.
范例
• 实验方案设计(框架) • 测定一些常见果蔬中维生素C含量实验结果 记录卡
学习评价
全体学生活动:填写《研究型 课程学生学习手册》中课题研 究过程记录。
反思与后续研究
1、同一蔬菜、水果,由于外界条件变 化而使维生素C含量损失(如贮存时 间、贮存条件不同、蔬菜烹调后等)。 2、同一果蔬不同部位维生素C的含量 是否相同。
–仪器:
–荧光计
测定果蔬中VC含量
• 电位滴定法:样品中的有机酸
(弱酸)用标准碱液滴定时,被中和生成盐类。 用酚酞作指示剂,当滴定到终点(pH=8.2,指 示剂显红色)时,根据消耗的标准碱液体积, 计算出样品总酸的含量。其反应式如下: • RCOOH + NaOH→ RCOONa +H2O
• 仪器:电位滴定器
ห้องสมุดไป่ตู้
蔬菜水果中维c含量的测定
蔬菜水果中维c含量的测定摘要:利用维生素C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,用紫外分光光度法测定5种常见果蔬中维生素C的含量。
最大吸收波长为243.4nm,标准曲线方程为A=0.0528c-0.0568,相关系数为R2=0.9996。
5种果蔬中维生素C含量[mg·(100g)-1]分别为:黄瓜20.5、苹果14.9、西红柿18.4。
关键词:紫外分光光度法;维生素C;果蔬维生素C又称抗坏血酸,是一种水溶性维生素。
能预防牙龈出血及萎缩、提高人体免疫力,对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效。
实验1.1材料、试剂与仪器:青椒、橙子、黄瓜、苹果、西红柿,市售抗坏血酸、HCl、NaOH均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。
UV1102型紫外可见分光光度计,TB-214型电子天平1.2方法1.2.1标准溶液的配制准确称取0.050g抗坏血酸,加10mL10%HCl溶解,用蒸馏水定容至500mL,混匀,即得100μg·mL-1维生素C标准溶液。
1.2.2吸收曲线的绘制移取10mL维生素C标准溶液于50mL比色管中,稀释至刻度,混匀。
用1cm石英比色皿,以蒸馏水为参比,在200~300nm波长范围内用紫外可见分光光度计自动扫描。
绘制吸光度与波长关系曲线,以最大吸收波长作为测定波长。
1.2.3标准曲线的绘制分别准确移取100μg·mL-1维生素C标准溶液0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于50mL容量瓶中,定容至刻度。
以水为参比,在最大吸收波长处测定吸光度,以维生素C浓度为横坐标、吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
1.2.4果蔬样品的处理将青椒、西红柿、黄瓜洗净晾干,橙子和苹果取肉,分别称取10.00g于研钵中,各加入1%HCl10mL,匀浆,转移到50mL容量瓶中,稀释至刻度,混匀。
移至离心管中离心10min,取上清液即为待测果蔬提取液。
水果和蔬菜中维生素C含量的测定
水果和蔬菜中维生素C含量的测定实验18 水果和蔬菜中维生素C含量的测定一、目的学会测定果蔬中Vitc含量的方法。
二、材料、用具及仪器药品1(材料,各种蔬菜或水果2(用具及仪器、研钵或捣碎机。
100ml锥形瓶、50ml容量瓶,10ml移液管,5ml移液管,100ml量筒,微量滴定管,漏斗、滤纸,电子天平3(试剂(1)2%草酸溶液:草酸2g,溶于100ml蒸馏水(2)1%草酸溶液:溶1g草酸于100ml蒸馏水。
(3)标准抗坏血酸溶液:准确称取50.mg纯抗坏血酸,溶于是1%草酸溶液,并稀释至500ml。
贮棕色瓶,冷藏,最好临用时配制。
(4)2.6-二氯酚靛酚钠溶液:溶31mg2.6-二氯酚靛酚在300ml热水中,冷却后加水稀释至500ml,滤去不溶物,贮在棕色瓶内,冷藏(大约可保存一星期)。
每次临用时,以标准抗坏血酸溶液标定。
三、原理果蔬中含有维生素C(又称抗坏血酸),维生素C能还原染料2.6-二氯酚靛酚钠(蓝色)为还原型2.6-二氯酚靛酚钠(无色)。
因此,可用2.6-二氯酚靛酚钠滴定样品中的维生素C,根据滴定时所用去染料数,计算出样品中的维生素C含量。
滴定终点的判定是以被滴定溶液在一定时间范围内显现的粉红色不褪色为准,这是由于2 .6——二氯酚靛酚钠具有在酸性溶液中显粉红色,而在中性或碱性溶液中呈蓝色的特性。
四、方法步骤1、提取:用水洗净新鲜白菜叶柄,用纱面或吸水纸吸干表面水份,然后称取10.0g,加2%草酸20ml,置于组织搅碎机中打成浆状或用研钵研匀浆。
倒入100ml 容量瓶中以2%草酸溶液稀释至刻度,静置10分钟,过滤滤液备用。
2、滴定(1)(标准液滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液1.0ml(含0.1抗坏血酸)置100ml 锥形瓶中,加9ml%草酸,微量滴定管以2.6-二氯酚靛酚钠滴定至淡红色,并保持15秒即为终点。
由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少mg抗坏血酸。
(最好做两份)2(样液滴定:准确吸取滤液两份10.0ml分别放入100ml锥形瓶内,滴定方法同前。
蔬菜水果中Vc含量的测定
实验名称:蔬菜水果中Vc含量的测定实验报告撰写人:Tang Chen注:本实验报告仅供参考,不得抄袭。
非作者允许禁止私自转载,违者将追究法律责任。
一、实验目的1、进一步学习样品的预处理方法2、学会碘量法测定物质含量的方法及其应用3、熟练掌握滴定基本操作技能和查阅资料的能力二、实验原理Vc具有很强还原性,能将碘还原成碘离子。
碘与淀粉变蓝色,而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色;因此,在含有Vc的溶液中,加入淀粉溶液,就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。
记录滴定用去的碘溶液量,再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的Vc发生反应,就可以计算出被检测样品的维生素C含量。
由于Vc的强还原性,在空气的易被氧化,特别是在碱性介质中更易被氧化,故测定时须加入少量稀HCl或稀CH3COOH使溶液呈弱酸性,以减少副反应的发生。
三、仪器与药品桔子、酸式滴定管(50mL)、锥形瓶、量筒、食物粉碎机、烧杯、0.02mol/L碘溶液、盐酸(质量分数2%)、可溶性淀粉溶液(质量分数2%)、蒸馏水、Vc药片(100mg/片)四、实验步骤1、制备果蔬提取液①制取50g水果,放入食物粉碎机中,再加入50mL蒸馏水,然后进行粉碎。
②向锥形瓶中加入2mL淀粉溶液,然后滴加盐酸,将pH调至32、滴定果蔬组织提取液①将一片维生素C药片溶解在25mL蒸馏水中②用碘溶液滴定维生素C药片溶液与果蔬组织提取液,滴定过程中,边滴定边晃动锥形瓶,直到提取液呈现蓝色,并在0.5min内不褪色。
重复滴定两次,记录每次滴定的初读数和末读数。
最后,计算出两次滴定所用去碘溶液的平均值五、实验结果数据处理果蔬组织中的维生素C含量计算公式:Vc含量=(V2/V)·aa=100mg1 2 3 平均值桔子/30g 2.90 3.40 3.35 3.22Vc片29.12 28.96 29.21 29.10Vc的含量mg/50g桔子/30g 18.45。
果蔬中维生素C含量的测定
果蔬中维生素C含量的测定一、设计目的1、了解维生素C,掌握测定维生素C含量的方法;2、进入实验室亲身体验此实验;3、加入CELL团队。
二、实验原理1、维生素C(Vitamin C)又名L-抗坏血酸,分子式C6H8O6,结构简式,相对分子质量176.12,具有较强还原性,水溶液呈酸性,加热或在碱性条件下易被氧化,但在酸性溶液中能稳定存在。
它是一种无色晶体,可溶于水。
其在医药上有非常广泛的应用,例如:抗坏血病、治疗感冒,对禽流感、SRAS、AIDS和癌症等多种顽疾也有一定的疗效。
2、利用VC的还原性,用标准碘溶液滴定。
化学方程式:C6H8O6+I2→C6H6O6+2HI强还原性且溶于酸的化合物含量少(≤0.4mg/100g);④果肉为黄色,对颜色反应影响小。
三、仪器与材料锥形瓶(250ml*4)、移液管(20.00ml)、容量瓶(100ml)、烧杯(50ml*2)、酸式滴定管、量筒(50ml)、电子天平(0.01g)、数显恒温水浴锅、漏斗、研钵、玻璃棒、铁架台、洗耳球、脱脂棉、胶头滴管、小刀。
黄色柿子椒、0.02mol/L标准碘溶液、淀粉溶液、0.2mol/L乙酸溶液。
四、实验步骤(一)制备黄色柿子椒组织提取液取两只黄色柿子椒,洗净,称量约180g。
然后用小刀将其切碎置研钵中,加20ml0.2mol/L乙酸溶液(边加边洗小刀),充分研磨成匀浆(研磨不能过于剧烈),再加入40ml0.2mol/L乙酸溶液继续研磨。
在漏斗口垫一层脱脂棉,将匀浆倒入漏斗,过滤置容量瓶中。
用0.2mol/L乙酸溶液清洗研钵,将洗液也倒入漏斗,清洗三次(每次10ml),加水定容。
(二)滴定用移液管从容量瓶中取20.00ml提取液于锥形瓶中,加入3ml淀粉溶液,震荡。
将0.02mol/L的标准碘溶液倒入酸式滴定管中,进行滴定。
当溶液变蓝,且30s内不褪色,即为滴定终点,记下读数。
(三)平行滴定三次。
(四)空白对照再用移液管从容量瓶中取20.00ml提取液于锥形瓶中,将锥形放入70℃恒温水浴锅中加热3分钟。
果蔬维生素C含量测定及其分析
果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量;试验中;通过2;6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量;我们测得橘子的维C的含量是20.46mg/100g;相对较低..经查阅资料;讨论后发现维生素C在空气中易氧化;而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响..一、前言实验目的:测定橘子中的维生素c含量;从而进行分析..实验原理:维生素C是人类营养中最重要的维生素之一;缺少它时会产生坏血病;因此又称为抗坏血酸ascorbic acid..它对物质代谢的调节具有重要的作用..近年来;发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力;并具有化学致癌物的阻断作用..维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中..水果中以猕猴桃含量最多;在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富;蔬菜以辣椒中的含量最丰富;在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富;野生植物以刺梨中的含量最丰富;每100克中含2800毫克;有“维生素C王”之称..维生素C为无色晶体;味酸;溶于水及乙醇;不耐热;在碱性溶液中极不稳定;日光照射后易被氧化破坏;有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解;干燥条件下较为稳定..故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存;在烹调蔬菜时;不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器维生素C具有很强的还原性..它可分为还原性和脱氢型..还原型抗坏血酸能还原染料2;6-二氯酚靛酚DCPIP;本身则氧化为脱氢型..在酸性溶液中;2;6-二氯酚靛酚呈红色;还原后变为无色..因此;当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时;维生素C尚未全部被氧化前;则滴下的染料立即被还原成无色..一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时;则滴下的染料立即使溶液变成粉红色..所以;当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化;此时即为滴定终点..如无其它杂质干扰;样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比..试剂和器材错误!试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中..1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中..标准抗坏血酸溶液1mg/mL: 准确称取100mg纯抗坏血酸应为洁白色;如变为黄色则不能用溶于1%草酸溶液中;并稀释至100mL;贮于棕色瓶中;冷藏..最好临用前配制..0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2;6-二氯酚靛酚溶于150mL含有的热水中;冷却后加水稀释至250mL;贮于棕色瓶中冷藏4℃约52mg NaHCO3可保存一周..每次临用时;以标准抗坏血酸溶液标定..错误!材料橘子1只错误!器材锥形瓶100mL2;移液管10mL2;容量瓶100mL1;250mL1;50mL5;微量滴定管5mL1;研钵;漏斗;纱布..操作方法错误!提取水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果;用纱布或吸水纸吸干表面水分..然后称取20g;加入20mL 2%草酸;根据实验设计需要处理样品;然后用研钵研磨;四层纱布过滤;滤液备用..纱布可用少量2%草酸洗几次;合并滤液;滤液总体积定容至50mL..错误!标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中;加9mL 1%草酸;用微量滴定管以0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色;并保持15s不褪色;即达终点..由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸取10mL 1%草酸作空白对照;按以上方法滴定..错误!样品滴定准确吸取滤液两份;每份10mL; 分别放入2个锥形瓶内;滴定方法同前..另取10mL 1%草酸作空白对照滴定..数据记录与处理1、标准滴定结果用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液滴定抗坏血酸溶液;得到以下数据表一:表一 0.1%2;6-二氯酚靛酚的标准滴定表二多种蔬果的维生素C含量测定数据处理:由结果得1ml 抗坏血酸需要的染料0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液的体积为V=5.30+5.45/2-0.10=5.275ml1ml 染料能氧化抗坏血酸质量为T=11/5.275=0.19mg2、多种水果蔬菜的维生素C 含量测定结果本组试验我们选取了橘子作为材料;并对其进行了维生素C 含量测定..同标准滴定操作相似;用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液对样品进行滴定;得到以下数据表二;图一;并由公式得样品中维生素C 的含量100mg/100g 样品: 附公式:(-)100C mg/100g A B V V C T D W⨯⨯⨯⨯维生素含量(样品)= 式中:V A 为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数;V A =4.41mLV B 为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数;V B =0.10mL C 为样品提取液的总毫升数;C =50mLD 为滴定时所取的样品提取液毫升数;D=10mLT 为1mL 染料能氧化抗坏血酸毫克数由操作二计算出;T=0.19mg W 为待测样品的重量..W=20.012g注意事项1 某些水果、蔬菜如橘子、西红柿等浆状物泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..2 整个操作过程要迅速;防止还原型抗坏血酸被氧化..滴定过程一般不超过2min..滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..3提取的浆状物如不易过滤;亦可离心;留取上清液进行滴定..五、讨论与误差分析通过查阅资料;我们了解到;我组测得的桔肉维生素C含量为20.46mg/100g;相对偏低;分析其原因为:1、研磨时;研磨的不完全;过滤使得纱布上有残余;2、滴定时;滴定管有微小漏液;导致结果数据有误差;3、可能受到橘子成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素;4、由于操作不熟练;整个操作不够迅速;滴定过程超过了2min;导致还原型抗坏血酸被氧化;从而测定的结果偏小..六、思考题1.为了测得准确的维生素C含量;实验过程中都应注意哪些操作步骤为什么(1)过滤后纱布尽量用少量2%草酸多洗几次以保证维生素c基本析出;若泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..(2)为了防止还原型抗坏血酸被氧化;滴定过程一般不超过2min..(3)滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..2.试简述维生素C的生理意义..维生素C参与体内的众多氧化还原反应..可促进细胞间质的完整;保持细胞间质的完整;增加毛细血管壁致密度;降低其通透性及脆性;具有抗炎抗过敏作用;具有还原性;有保护酶系的巯基以避免被毒物破坏的作用;可用于铅、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射线病;大量维生素C有中和细菌内毒素;促进抗体合成;增强白细胞吞噬功能;促进铁在肠内吸收;对血红蛋白的合成和红细胞的成熟有影响;维生素C对增强鱼的抗病力有重要作用..本品蛋白结合率低..少量贮藏于血浆和细胞;以腺体组织内的浓度为最高..肝内代谢..极少数以原形物或代谢物经肾排泄;可经血液透析清除..维生素C主要用于由维生素C缺乏引起的全身淤点;齿龈、肌肉、关节囊及浆膜腔等出血症状的坏血病..同时可增强机体对传染病的抵抗力;用于结核病、急性或慢性传染病、感染性休克的辅助治疗;缓解应激、解暑热;改善种公畜精液质量;防治代谢性酸中毒、高血钾症的治疗以及氨基甙类对第8对脑神经的损害..此外还可用于各种贫血、肝胆疾病的辅助治疗;促进创伤愈合;缓解砷、汞、铅、苯等慢性中毒..。
实验三果蔬中维生素C的定量测定
实验三果蔬中维生素C的定量测定实验三果蔬中维生素C的定量测定一、实验目的通过实验掌握果蔬中维生素C含量的测定方法,了解维生素C在果蔬中的分布情况,为合理膳食提供参考。
二、实验原理维生素C是一种水溶性维生素,具有还原性,可采用高效液相色谱法(HPLC)或2,6-二氯靛酚滴定法进行测定。
本实验采用2,6-二氯靛酚滴定法,该方法操作简便、快速,适用于各类果蔬样品的测定。
三、实验步骤1.样品处理:称取适量新鲜果蔬样品,用研钵捣碎,加入适量提取剂(如蒸馏水、酸性乙醇等),研磨成匀浆。
对于一些难以提取的样品(如胡萝卜等),可采用加热或超声波辅助提取。
2.样品过滤:将研磨好的匀浆通过纱布或滤纸过滤,收集滤液备用。
3.滴定:用移液管准确吸取滤液10.0mL,放入250mL三角瓶中,加入2,6-二氯靛酚溶液(浓度约为0.02g/L)约20mL,摇匀后迅速滴定至终点。
记录消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积(V1)。
4.空白试验:用移液管准确吸取提取剂10.0mL,按步骤3进行滴定操作,记录消耗的2,6-二氯靛酚溶液体积(V2)。
5.数据记录与处理:根据滴定结果计算维生素C含量,并记录数据。
数据处理可采用表格或图表形式展示。
四、实验结果与数据分析1.实验数据记录:将实验过程中测定的数据记录在表格中,包括样品名称、提取剂用量、滴定消耗体积等。
2.数据分析:根据实验数据计算各类果蔬中维生素C的含量,并对其分布情况进行统计分析。
可以绘制柱状图或饼图来表示不同种类果蔬中维生素C的含量比例。
还可以对不同种类果蔬中的维生素C含量进行对比分析,探讨不同种类果蔬中维生素C含量的差异及其原因。
五、结论通过本实验,我们掌握了果蔬中维生素C含量的测定方法,了解了不同种类果蔬中维生素C的分布情况。
实验结果表明,柑橘类水果(如橙子、柠檬)和草莓等水果中维生素C含量较高,而根茎类蔬菜(如胡萝卜、土豆)中维生素C含量相对较低。
此外,我们还发现不同种类果蔬中维生素C含量的差异可能与品种、生长环境、储存条件等多种因素有关。
实验九 果蔬Vc的测定
五 结果与分析
平均数计算
维生素C含量(mg/100g)=(V-Vo) ×T×100×100/(5×W) T= mg/ml,Vc标品 V 样本体积, Vo 对照体积 W 样品量
查表得柚子中的维生素C含量 比较实测值与查表值的差异并加以解释(实验 的系统误差、 技术是否熟练、样品制备是否得当、 水果产地和全国平均值)
实验报告格式
Байду номын сангаас
实验九 报告格式
实验报告题目(宋体四号加粗,居中) 姓名,专业,学号,日期(宋体小四)
一 目的与要求 正文(宋体小四) 二 原理 三 对象与分组 四 项目与方法 小结(宋体小四) 五 结果与分析 (包括对图表的分析)
四 操作步骤
称20g样品加入适量2%草酸于烧杯内。
将混合物质倒入具塞量筒,用2%草酸反复洗涤烧杯数 次,其洗涤液一并倒入定容到100ml,混合,静置 10min,过滤。
吸取5ml滤液(2个平行样品)、5ml 2%草酸(2个空 白对照)分别置于三角烧瓶内。 用2,6—二氯酚靛酚染料滴定至粉红色(15”不褪色), 记录染料消耗量。
+
CH2OH CH2OH
+
还原型Vc
2,6-二氯酚 靛酚(蓝色)
脱氢型Vc
2,6-二氯酚 靛酚(粉红色)
三 材料与方法
琯溪蜜柚 样品制备:清洗去皮,切碎榨汁,取样称量,草 酸定容 2,6—二氯酚靛酚滴定法 2,6—二氯酚靛酚标准溶液;2%草酸溶液 榨汁机、万分之一天平、碱式滴定管、具塞量筒 三角烧瓶、漏斗
实验九 果蔬维生素C的测定
(2,6二氯酚靛酚滴定法)
课程:营养学实验
一 目的与要求
目的 实测新鲜水果中维生素C的含量 要求 掌握新鲜水果检测维生素C的化学方法(GB)
果蔬中维生素C的提取和定量测定
果蔬中维生素C的提取和定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)【实验目的】1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法.2.了解蔬菜,水果中维生素C含量情况.【实验原理】维生素C具有很强的还原性.还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚(DCIP),本身则氧化为脱氢型.在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,还原后变为无色.因此,当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时,维生素C尚未全部被氧化前,则滴下的染料立即被还原成无色.一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色.所以,当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点.如无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比.【仪器和试剂】一,试剂2%草酸溶液,1%草酸溶液,0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液(每次临用时,以标准抗坏血酸溶液标定).二,材料:水果,蔬菜三,仪器烧杯,玻棒,吸量管,长颈漏斗,漏斗架,白纱布,滤纸,容量瓶,滴定管, 锥形瓶.【操作方法】一、标准溶液标定1. 配制标准抗坏血酸溶液(1mg/mL) 准确称取100mg纯抗坏血酸(应为洁白色,如变为黄色则不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀释至100mL,贮于棕色瓶中,冷藏.最好临用前配制。
2. 标准溶液标定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置250mL锥形瓶中,加9mL 1%草酸,以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点.由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸(以T表示)。
3. 取10mL 1%草酸作空白对照,按以上方法滴定。
二、样品测定1.果蔬中Vc的提取与测定:水洗干净待测的新鲜蔬菜或水果,吸干表面水分.称取20g,置于200mL烧杯中,加入30mL 2%草酸,研磨成浆状,以四层纱布过滤至100mL小烧杯中,再以快速滤纸过滤至锥形瓶中。
然后以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡红色,并保持15秒不褪色,即达终点。
果蔬维生素C含量的测定
果蔬维生素C含量的测定果蔬维生素C含量的测定,目前多采用两种方法:2,6-二氯靛酚钠测定法和碘测定法;本实验采用2,6-二氯靛酚钠测定法。
一、目的要求二、维生素C(抗坏血酸)是人体不可缺少的营养物质,近年来医药上又发现它有许多新的功能。
水果和蔬菜是食品中维生素C的主要来源。
因此,维生素C在果蔬中含量多少,是鉴定其营养价值的重要指标。
通过实验,使学生了解果蔬中维生素c测定的原理并掌握其测定方法。
一、基本原理天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种,还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇结构,故为一种极敏感的还原剂.它可失去两个氢原子而氧化为脱氢型抗坏血酸。
利用染料2,6一二氯靛酚钠盐作为氧化剂,氧化抗坏血酸后本身被还原成无色的衍生物。
2,6一二氯靛酚钠盐易溶于水,其碱性或中性水溶液呈蓝色,在酸性溶液中呈桃红色,用这个变化来鉴别滴定的终点。
三、材料、仪器用具试剂(一)材料柑桔、鲜枣、苹果、猕猴桃、番茄、辣椒、洋葱等;本实验用的试材是猕猴桃。
(二)仪器用具微量滴定管(或25ml碱式滴定管)、100ml容量瓶、10ml移液管、100ml三角瓶,小刀、研钵或组织捣碎器、漏斗、滤纸、分析天平、离心机、白陶土等。
(三)试剂的配制与标定1.试剂标准抗坏血酸溶液、2%草酸溶液、2,6一二氯靛酚钠盐溶液。
2.配制与标定标准抗坏血酸溶液:精确称取抗坏血酸50mg (土 0.1mg)用2%草酸溶解,小心地移入250ml容量瓶中,用草酸稀释至刻度,算出每毫升溶液中抗坏血酸的毫克数。
2,6一二氯靛酚钠盐溶液标定:称取2,6一二氯靛酚钠50mg,溶于50ml热蒸馏水中,再加人碳酸氢钠42mg,待盐完全溶解冷却后,加水稀释至250ml,过滤后盛于棕色瓶内,保存在冰箱中,同时用刚配好的抗坏血酸标定。
吸取标准抗坏血酸溶液2ml,加2%草酸5ml,用2,6一二氯靛酚钠盐溶液滴定,至桃红色15秒钟不褪即为终点,根据已知标准执坏血酸溶液和染料的用量,计算出每ml染料溶液中相当的抗坏血酸mg数。
果蔬中vc含量的测定
果汁中Vc含量的测定引言:随着科学技术的发展,食品中维生素C的测定方法很多,如高效液相色谱法、荧光分光光度法、原子吸收光谱法、紫外分光光度法、滴定分析法、钼蓝比色法、碘量法等,其中高效液相色谱法、荧光分光光度法和原子吸收光谱法要求样品的纯度较高,还需要有昂贵的仪器;紫外分光光度法中2,4-二硝基苯肼比色法操作麻烦,耗时较长;2,6-二氯靛酚法操作简便且应用最普遍,但是药品价格昂贵,而且多数果汁样品溶液都有颜色,使滴定终点不易判定,使用脱色剂也很难脱色完全,且造成VC的损失。
相比之下,碘量法只需标定碘液,其后续操作方便简单,易操作,故本次试验采用碘量法测定果汁中维生素C的含量。
关键字:维生素C 碘量法碘溶液可溶性淀粉滴定一、实验部分(一)、实验原理维生素C属水溶性维生素,分子式C6H8O6。
分子中的烯二醇基具有还原性,能被I2定量地氧化成二酮基,因而可用I2标准溶液直接测定。
C6H8O6+I2= C6H6O6+2HI使用淀粉作为指示剂,用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、汁菜、水果中维生素C的含量。
由于Vc的还原性很强,较容易被溶液和空气中的氧氧化,在碱性介质中这种氧化作用更强,因此滴定宜在酸性介质中进行,以减少副反应的发生。
考虑到I -在强酸性中也易被氧化,故一般选在pH为3~4的弱酸性溶液中进行滴定。
(二)、实验仪器及药品材料:果汁。
仪器:烧杯多个、量筒、玻璃棒、滴管、容量瓶多个(250mL)、酸式滴定管、滤纸、锥形瓶等。
药品:0.02mol /L碘溶液、2% 可溶性淀粉溶液、2% HC l溶液。
(三)、试验步骤1、购买市场上现成的果汁;2、滴定果汁中vc的含量;(1)、移取50ml果汁注入250 ml锥形瓶中,三份,分别向三个锥形瓶中加人3m l淀粉溶液,再滴加10ml醋酸,将PH 值调至3左右;(2)、用0.02mol /L碘溶液滴定果汁,在滴定过程中,边滴边晃动锥形瓶,直到提取液呈现蓝色,且在30 秒内不褪色;(3)、重复滴定三次,记录每次滴定所用去的碘溶液量,并算出平均值。
果蔬中维生素c的测定
每毫升染料溶液相当于Vc的毫克数=滴定度
C×V1 滴定度 (T)= ----------
•
V2
式中:
C;抗坏血酸(V)的浓度(mg/mL)
Vl:抗坏血酸的量(mL) V2:消耗染料溶液量(mL)
四、操作方法:
1、称取适量(50.0-100.0g)样品,加等量的2%草酸溶 液,倒入组织捣碎机中捣成匀浆。称取10.0030.00g浆状样品(使其含有抗坏血酸1-5mg),置于 小烧杯中,用1%草酸溶液将样品移入100mL容量 瓶中,并稀释至刻度,摇匀。
将各管于冰浴中取出,在室温下放置30min后, 立即在分光光度计波长540nm处读取光密度。根据 测得的光密度,从标准曲线中查出相应的含量。
(2) 标准曲线的绘制: 分别吸取抗坏血酸标准工作液10、20、30、
40、50mL,稀释至50mL,这些标准液每毫升含 有2、4、6、8类食品中维生素C含量的分 析比较
内容
以苹果及加工产品作为实验材料, 针对不同加工状态的苹果产品,分析 其中的维生素C含量,并探讨维生素C 含量和加工工艺之间的关系。
知识点
测试前的样品预处理; 总维生素C含量的分析原理与方法; 还原型维生素C含量的分析原理与方法; 氧化型维生素C含量的分析原理与方法; 影响维生素C含量的内外因素以及不同
(二) 氧化型Vc的分析 (比色法)
原理:
用酸处理过的活性炭把还原型的抗坏血酸氧 化为脱氢型抗坏血酸再继续氧化为二酮古乐糖酸。 二酮古乐糖酸与2.4-二硝基苯肼偶联生成红色的 络合物。其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正 比,可以比色定量。
过程
1, 配试剂 2, 标定部分试剂 3, 操作方法及计算 4, 说明及注意事项
W V:滴定时所耗去染料溶液的量(mL); T:lmL染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量(mg) W:滴定时所取的滤液中含样品量(g).
实验三 果蔬中维生素C的定量测定
实验三果蔬中维生素C的定量测定(紫外法)(4学时)一、实验目的1. 学习用铜离子氧化法测定维生素C(Vc)(紫外法);2. 了解Vc定量测定的其他方法,如:磷钼酸比色法、碘量法、2,6-二氯酚靛酚滴定法(近年来用全自动电位滴定仪进行电位滴定)、紫外法、2,4-二硝基苯肼测定总抗坏血酸量、高效液相色谱法、毛细管电泳法、荧光法、Flinb近红外分光光度法等。
二、实验原理抗坏血酸在波长243~267nm处有较高的吸收值,但在样品成分比较复杂时,因有强烈的背景吸收而不适宜用紫外法测定其Vc含量。
用碱加热法等处理法都存在试剂较贵、操作复杂、时问长等一系列问题而不能广泛应用。
利用铜离子消除背景误差,能直接测定一些水果蔬菜样品中的Vc含量而不需要进行前处理,操作简单干扰少。
附加说明:在测定Vc的国标方法中,荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法,2,4-二硝基苯肼法作为第二法。
三、实验器材与试剂实验材料桔子实验器材紫外/可见分光光度计;涡旋混合仪;高速冷冻离心机;榨汁器;电热恒温水浴锅;试管与试管架;胶头器长滴管及移液管;250mL烧杯等。
实验试剂1. 120μg/mL Vc贮液:120mg Vc,加适量蒸馏水溶解,然后用1000毫升容量瓶定容。
存4℃备用。
2. 5μg/mL的铜离子溶液:①先配成1000μg/mL的硫酸铜溶液;②取上述硫酸铜溶液5mL,加入1mol/L的醋酸溶液7mL及1mol/L醋酸钠200mL,用蒸馏水定容。
③5×104mol/L的EDTA溶液:36.5mgEDTA溶于适量蒸馏水,250 mL 馏水定容。
④铜离子-EDTA混合液(6.2×105mol/L):使用前将上述铜离子溶液和EDTA以4:1(v/v)混合而成(现用现配)。
四、实验步骤1. 标准曲线制作取12支试管(大试管)分成2组,按下表进行操作。
维生素C溶液浓度为120μg/mL。
2. 样品测试取一定量的桔子瓣记录克数。
综合分析实验:实验3:果蔬中维生素C测定
果蔬中维生素C含量的测定维生素C 又名抗坏血酸, 是维持机体正常生理功能的重要维生素之一, 而人体不能自身合成, 只能从食物和药物中摄取, 因此, 食品、药物中维生素C的分析具有重要意义。
蔬菜水果中维生素C(抗坏血酸)含量的测定方法有很多,常用的方法有荧光比色法、光度比色法、电化学法、滴定法、酶法、色谱法等。
辣椒中的维生素C的含量较高,有些品种理论值可高达198mg/100g,橙子中维生素C的含量也达70 mg/100g,西红柿中维生素C的含量也约20 mg/100g,但品种不同差别较大。
本实验利用荧光法和固蓝盐B比色法分别测定西红柿和橙子中维生素C的含量。
固蓝盐B比色法是利用在乙酸溶液中,抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物,可在其最大吸收波长(420nm)处测定吸光度,与标准系列比较定量。
荧光比色法是基于维生素C 被氧化剂如活性炭或Cu2+氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA),DHAA 进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用, 通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。
本实验选取Cu2+做氧化剂,该法样品处理简单、快速, 体系的稳定性好。
2% 乙酸的配制:量取20.0mL冰醋酸,加水稀释至1000mL。
西红柿样品处理:准确称取80g 左右西红柿,剪碎放入榨汁机中(榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸),搅成匀浆,用布氏漏斗抽滤,滤液转移到250mL棕色容量瓶,用蒸馏水定容。
橙子样品处理:将橙子去皮和籽后,准确称取50g左右,剪碎放入榨汁机中(榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸),搅成匀浆,匀浆液转移到250mL棕色容量瓶定容。
定容液用漏斗过滤,干滤法(漏斗、滤纸承接烧杯干燥),注意每次过滤前摇匀容量瓶溶液再过滤,过滤滤液约60mL左右备用。
Vc储备液配制:准确称取0.2g左右维生素C溶解于蒸馏水中,并转移到100mL棕色容量瓶里,定容,放在暗处保存。
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测量酒精专用
【测量原理】酒精度计的原理应该是根据密度计的原理设计的,我们知道乙醇的密度是小于水的,而相应的酒精(乙醇)度越大,那酒的密度也越小而浮力也越小。
酒度计就是根据这种差异而算出乙醇的含量的。
测量酒精酒度通常用酒精表,酒精表又称酒精比重计。
酒精表是根据酒精浓度不同,比重不同,浮体沉入酒液中排开酒液的体积不同的原理而制造的。
当酒精计放入酒液中时,酒的浓度越高,酒精计下沉也越多,比重也越小;反之,酒的浓度越低,酒精计下沉也越少,比重也越大
【使用方法】
测量浓度时,将部分酒精倒入量筒中,注意不要倒得过满,再把温度表和酒精表放入量筒里不要贴筒壁,稍等片刻,目光平视看准温度与酒度,通过《酒度、温度换算表》,然后查出标准(20℃的酒度)。
使用酒精计测量酒度时,应注意:由于表面张力的原因,酒精表面与酒精计长轴的接触处会出现弯月面。
因此,我们在读数时,应以水平面为准
葡萄酒专用酒度计使用说明:
1.将酒度计漏斗端朝上,把少量葡萄酒注入漏斗,葡萄酒会沿着毛细管开始向末端移动,等到末端有几滴葡萄酒滴出时,这时把仪器颠倒过来,葡萄酒会沿着毛细管退后,在停住的那个地方直接读出的刻度就是酒的度数。
2.同样的方法测出纯净水的酒度。
3.用葡萄酒测的数值减去纯净水的数值,就接近葡萄酒的酒度。
【注意事项】
1.清洗干净。
(可用高度白酒泡一下,然后用温水冲一下)
2.酒的温度在20度时,测量结果最准确
3. 葡萄酒里面的固形物和微粒会影响测定结果。
仪器在使用后应该彻底清洗,晾干后确认毛细管里无气泡无杂质方可使用。
4.酒度在0-25度的液体可直接测,超过25度需按比例用清水稀释后再测,测量结果为:直接读数×稀释倍数
白酒酒度计使用说明:将待测酒装入100ml量筒中,将酒度计大头朝下放入量筒中,酒度计会飘起来,这时候看酒度计上显示的酒精度(量筒内酒上液面与空气交接处刻度值即为酒精度)
食品中还原型Vc的测定(分光光度法)
在蔬菜水果中含量丰富,易溶于水,酸性,以还原型抗坏血酸、脱氢型抗坏血酸、二酮古乐糖酸三种形式存在于食品中。
测食品中总Vc含量的方法:荧光法和2,4二硝基苯肼法。
测食品中还原型Vc的方法:分光光度法。
新鲜食品中Vc主要以还原型的形式存在,因此,本实验
学习食品中还原型Vc的测定。
一、实验目的 1.理解食物中维生素C的分布规律以及维生素C的理化特性。
2.掌握分光光度法测定食品中还原型Vc的原理、操作步骤、注意事项
二、实验原理
在乙酸溶液中,抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。
在最大吸收波长420 urn处测定吸光
度,与标准系列比较定量。
三、仪器
1.722分光光度计若干,提前20min打开预热
2.10ml具塞玻璃比色管 10个/组
3.标签纸,记号笔若干
4.组织捣碎机 2个
5.菜刀、菜板、一次性手套
6.棕色容量瓶100ml,胶头滴管 1个/组
7.移液管0.5ml,2ml 移液管1 ml,5 ml,吸小球 2个/组 1个/组
8.漏斗、滤纸 1个/组
9.托盘天平, 1个/组
10.烧杯100ml 2个/组
四、试剂(所用试剂,除另有规定外,均为分析纯试剂。
)
1.乙酸溶液(2mol/L) :吸取11.6mL冰乙酸,加蒸馏水定容至100mL 分装,1瓶/组
2.乙酸溶液(0.5mol/L): 吸取2.9mL冰乙酸,加蒸馏水定容至100mL 分装,1瓶/组
3. EDTA二钠盐溶液(0.25mol/L):称取9.3g 二钠水合EDTA二钠盐于蒸馏水中,加热溶液,放冷后定容至100mL。
作用:是螯合剂,与金属离子螯合,避免有色的金属离子对实验的显色产生干扰。
分装,1瓶/组
4. 2 g/L固蓝盐B溶液(显色剂):准确称取0.2g固蓝盐B,加蒸馏水溶液于100 ml棕色容量瓶中,稀释至刻度(室温下贮存可稳定3d以上)。
分装,1瓶/组
5. 抗坏血酸标准储备液(0.1 g/L):精密称取纯Vc粉末0.2000g,加20 mL2mol/L乙酸溶液溶解后移入100 mL棕色容量瓶中并定容,摇匀。
冷藏保存(<10℃下冷藏保存稳定2d)。
分装,1瓶/组
6. 抗坏血酸标准使用溶液(0.1 g/L):精密吸取 5. 0 mL抗坏血酸标准储备溶液(2..0g/L)于1 00 mL棕色容量瓶中,加5 mL乙酸溶液(2 mol/L),用水稀释至刻度,混匀。
此溶液每毫升相当于100μg抗坏血酸。
临用时配制。
分装,1瓶/组
7. 异戊醇:除生食物匀浆时产生的气泡 2-3滴/次
8. 蒸馏水 1瓶/组
五、实验步骤
1. 蔬菜、水果:
样品采来后,整棵菜(不掰开)洗净吹干,均匀取样,稍切碎。
称取可食部分50.0 g于捣碎机内,加同倍量的乙酸溶液(2mol/L)捣成匀浆。
用烧杯称取10.0 g 匀浆(含0.2 g /kg以下抗坏血酸)于100m L棕色容量瓶内,加5mL乙酸溶液(2mol/L),用水稀释至刻度,混匀。
滤纸过
滤,滤液备用。
不易过滤的试样可用离心机离心后,上清液测定。
2 标准曲线的绘制
精密吸取0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.5, 2.0m L抗坏血酸标准使用液(相当于抗坏血酸0, 10.0, 20.0 ,40.0, 60.0, 80.0 ,100.0 ,150.0, 200.0µg),分别置于10 mL比色管中。
各加0.3 mL EDTA二钠溶液(0.25m ol/L),0.5 mL乙酸溶液(0.5mol/L),1.25mL固蓝盐B溶液(2g /L),加水稀释至刻度,混匀。
室温(20℃ -25℃)下放置20 min后,移入1cm比色皿内,以零号
管调节零点,于波长420 nm处测定吸光度A,绘制标准曲线。
3 试样的侧定精密吸取按1.0 mL样液(约相当于抗坏血酸200µg以下)于
10mL比色管中,以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。
加水稀释至刻度,混匀。
室温(20℃ -25℃)下放置20 min后,移入1 cm比色皿内,以零号管调节零点,于波长420 nm处测定吸光度A。
从标准曲线上查出样液中抗坏血酸含量。
七、数据处理
C
X = ———————× 100
v1
m ×——× 1000
V2
式中:
X —试样中抗坏血酸的含量, mg/100g;
V1—测定时所取溶液体积,mL;
V2 —试样处理液总体积, mL;
M —试样质量,g;
C—试样测定液中抗坏血酸的含量,µg;。