生物材料检验复习资料教学提纲

生物材料检验复习资

料

生物材料检验：分析检验生物材料中化学物质及其代谢物的含量或因化学物质引起的的生物效应指标变化。

生物材料：是人体体液（如血液）、排泄物（如呼吸气、尿液）、毛发，指甲以及组织脏器等的总

称。

生物标志物：指生物系统接触外源性物质后出现的一种变化。分为三类：接触性生物标志物、效应性生物标志物，敏感性生物标志物。

接触性标志物：生物体内可分析测定的有害物质，代谢产物，以及他们同生物体内分子或细胞相互作

用形成的中间物

效应性标志物：那些同健康危害或疾病有关的可测定性的生化，生理行为以及其他生物学变化

敏感性标志物：生物体内先天固有或后天获得的对外界有害因素所引起的有害效应的反应能力

生物转化：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解产物的过程

生物接触限值（BEL ）:大体相当于健康人吸入接触最高允许浓度的毒物时生物材料中被测物的水平。

尿液可分为全日尿，晨尿，定时尿和随时尿。

生物半减期：指进入生物体内的化学物质的里量通过各种途径消除一半所需要的时间，又代谢半减

期。

一、检验方法的一般要求：

1. 方法的一般要求1）灵敏度选择符合生物监测的基本要求2）操作简便3）试剂易得、价廉4）效率高5）符合国情，易推行、

2 •选择和建立生物检测方法必须考

测成分①溶解性，稳定性②含量水平高g/L水平低ug/L

二、方法研制准则的基本内容

1 •取样、运输、保存的原则

1）取样：（1）容器工具材质不干扰测定（2）取样的操作要防止污染

（3）取样时间根据半减期判断决定（4）取样的体积尿液＞=50ml静脉血＞=5ml末梢血500ul

2）保存时间：一天，三天，一周，两周一般只要求两周

3）运输过程：保证分析物稳定，必要时要冷藏和冷冻运输

4）防腐剂（尿）和抗凝剂（血）

2. 样品预处理原则

1）尿液浓度按比重校正尿标准比重1.020，＞1.030及＜1.010的尿液应弃去

2）样品预处理的目的是消除干扰

（1）测定无机物时①用稀释液稀释后测定②混合酸消化

（2）测定有机物成分：先水解，再分离（3）回收率＞=75%

3. 制定分析方法的程序

1）分析条件选择、优化

2）确定检出限

（1）影响检出限的因素：试剂的纯度，仪器的工作状态，电源稳定性光源的温度变化、污染等不可控制的因素。

（2）检出限的确定一般用统计法，一般用空白值的3倍标准差计算；色谱法用3倍噪音水平，检出限应小于0.3倍生物接触限值。

（3）检出限的表示方法浓度或绝对量表示，用浓度表示时要说明方法取样体积。

3）精密度：同一个人用同一方法重复测定同一均匀样品测定结果的符合程度通常在线性范围内取

高、中、低三个浓度水平分别重复测定3~5次。用RSD表示或用变异系数表示复杂方法RSD＜=20简单

方法＜=10.

4）准确度（1）分析高低浓度水平和国家级标准物质各一组，测定值应在标准值的不确定范围内。

（2）用接触表样品的加标回收率表示回收率＞=75%若＞105%表明存在明显的系统误差。

（3）用标准方法或权威方法比较：①两个方法均值相对误差应小于10%②t检验

在确定一个置信水平条件，两方法测定无明显差异

5）干扰试验：如果有干扰，要找出消除干扰的方法

6）样品的稳定性实验：时间：当天，3天，1周，2周温度：室温，普通冰箱冷藏（4C），冷

冻保存（-8C），低温冰箱（-20C）

4方法的验证1）新方法的验证：必须是另一单位①研制方提供方法所有技术材料②验证内容：四项线性范围，精密度，准确度，样品的稳定性。2）引进国外标准方法或权威方法，引进

方就是验证方。

5现场应用①首先要观察检出率②观察检测结果与环境污染的符合程度③同时取非接触样品进行对照

、确定生物监测指标的依据

（一）化学物质在体内的动力学过程

1. 吸收1）呼吸道吸收①气体物质通过肺泡

壁及周围毛细血管吸收②固体物质，溶解时吸收的前提2）皮肤①有些有机物很容易被皮肤吸收F=C/15 *（0.038-0.153p）exp（-

0.016MN） F 皮肤吸收量mg/c m 2/h C化学物质在水中的饱和度mg/ml P辛醇-

水的分配系数MN相对分子质量②许多农药易被皮肤吸收如有机磷

2. 体内分压和贮存 1 ）起始主要分布于血液中最终分布取决亲和力 2 ）血液侧得量是反映

新近吸收量或机体组织的水平3 ）血液中毒物或其他被测物并非均匀分布 4 ）一般脂溶

性溶剂及卤代烃会分布在脂肪组织中，乳汁是检测有机氯农药最好的样品 5 ）体内储存

毒物的形式大多为结合状态，测定尿液中的代谢物需要先水解

3. 生物转化1 ）概念：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解

产物的过程。2 ）有关生物转化的讨论①是毒物发生质的变化②生物转化的数量关

系，个体差异很大③是一种动态过程，对时间的了解是确定采样时间的基础，生物半衰期。

4•排出易挥发性有机溶剂从呼吸气中排出较多。长期蓄积的有机氯农药可从乳汁中排出及耵聍（耳屎）中排出，易代谢的有机毒物大多以结合态从尿中排出。

（二）、个体差异

1、毒物在生物体内的动力学过程有种属家族和个体的差异，其中生物转化过程变异极大；

2、生物

监测的个体差异可用监测结果的变异系数表示；

3、个体差异降低了生物监测的精确性，却可帮助检出特殊敏感人群或耐受人群。

（三）、接触水平（剂量）一效应（反应）关系

1、是确定一次生物监测指标的关键依据；

2、生物监测结果与空气毒物浓度之间的相关资料，可作为选择生物监测指标的替代依据。

四、检验指标的选择与分类

（一）、选择的基本要求1、特异性好；2、具有良好的剂量一效应关系；3、稳定性好；4、有准确可靠的检验方法。（二）、生物材料检验指标的分类1、化学物质原形：①化学物质在生物体内不进行生物转化或转化速度很慢；②缺乏毒物代谢动力学资料；③代谢产物在体内没有特异性

2、化学物质代谢产物

3、生物效应指标。

五、样品的采集与保存

一）、生物材料样品的选择

（一）、种类及特点