免疫组化在肿瘤诊断的应用

（四）肿瘤细胞增殖活性与细胞凋亡标记抗体 瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性， 瘤细胞增殖指数反应细胞增殖活性 ， 是瘤细胞新 恶性） 状况的客观指标， 生 （ 恶性 ） 状况的客观指标 ， 与凋亡指数呈反比关 系。常用抗体有： 常用抗体有： 1 ． 增 殖 细 胞 核 抗 原 （ p r olif e r a t iv e n e u c le a r Antigen，PCNA），核阳性。 ， ） 核阳性。 2．Ki-67，Brdu抗体：原要求新鲜组织，新近有 ． 抗体： ， 抗体 原要求新鲜组织，新近有Ki67石蜡切片标记抗体问世。 石蜡切片标记抗体问世。 石蜡切片标记抗体问世
2．上皮膜抗原（Epithelial membrane antigen， ．上皮膜抗原（ ， EMA）：这亦是常用的上皮细胞标记抗体，细胞膜 ） 这亦是常用的上皮细胞标记抗体， 阳性， 阳性 ，用 Zanker’s、Bouin或B5固定液中固定为 ’ 、 或 固定液中固定为 好 。 其在低分化和未分化上皮中表达好 ， 但亦可在 其在低分化和未分化上皮中表达好， 间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤中表达。 间变性大细胞淋巴瘤、恶性横纹肌样瘤中表达。
3．细胞凋亡 （ Apoptosis）标记抗体 ： 开始发现 ． 细胞凋亡（ ） 标记抗体： 细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。 细胞凋亡发生于正常细胞受基因调控性自然性死亡。 后发现肿瘤细胞亦可发生，而且某些药物放、 后发现肿瘤细胞亦可发生，而且某些药物放、化疗 亦可诱发细胞凋亡，故成了研究肿瘤发生、发展、 亦可诱发细胞凋亡，故成了研究肿瘤发生、发展、 治疗的热点。其标记抗体有： 治疗的热点。其标记抗体有： （ 1） 凋亡抑制基因蛋白抗体 ： Bcl-2、 Bcl-XL、 ） 凋亡抑制基因蛋白抗体： 、 、 mtp53。 。 系统， （2）促凋亡基因蛋白抗体：Fas/FasL系统， ）促凋亡基因蛋白抗体： 系统 wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel标记。 、 标记。 、 、 等 标记
有时这些抗体用于这种目的诊断中并不完全 理想，如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白， 蛋白， 理想，如分化差的癌可显示 或 蛋白 有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原， 有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原，一些黑色素瘤 表现出角蛋白， 表现出角蛋白，除黑色素瘤以外的一些肿瘤有时 也可以表达HMB-45，这就强调了在肿瘤诊断中 也可以表达 ， 应使用一组抗体而不是单个抗体。 应使用一组抗体而不是单个抗体。
免疫组化在肿瘤诊断中的应用
（一）对“未分化”恶性肿瘤的分类 如在HE(苏木精-伊红染色法)切片上由于肿瘤的“未 分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征，不能分类，但临床 上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断，这种情 况下可用到免疫组化。在进行免疫组化前病理医生应根 据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地 选择抗体。如发生于直肠的上皮样包含大细胞的未分化 肿瘤，其鉴别诊断主要考虑为未分化癌、淋巴瘤、恶性 黑色素瘤， 可以使用表X-1列出的免疫组化抗体：
X-3 鉴别腺癌与间皮瘤的抗体
腺癌 细胞角蛋白（cytokeratin CK） 波形蛋白（Vimentin） 癌胚抗原（CEA M7072） LeuM1 B72.3 Ber-Ep4 钙网膜蛋白（Calretinin） CK5 HBME-1 *血小板调节素（TM） **上皮膜抗原（EMA） 分泌成分 人胎盘产乳素 Lewis blood group antigen + + + + +/+/+/+ + + + + +/+/+ 间皮瘤 + +/-
表X-1
未分化癌、 未分化癌、淋巴瘤和恶性黑色素瘤的免疫组化抗体
未分化癌 淋巴瘤 恶性黑色素瘤
细胞角蛋白（ ） 细胞角蛋白（CK） 上皮细胞膜抗原（ 上皮细胞膜抗原（EMA） ） 波形蛋白（Vimentin） 波形蛋白（ ） HMB45 S-100 白细胞共同抗原（ 白细胞共同抗原（LCA） ） -
*血小板调节素（Thrombomodulin TM）在内皮细胞、间皮细胞、巨噬细胞、室管膜细胞、缄默细胞阳性。 **EMA间皮瘤以胞膜阳性为主，腺癌以胞浆阳性为主。
X-4
鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体
血管源性肉瘤 恶性（纤维型）间皮瘤 良性（局限纤维型）间皮瘤 CK ACTIN CD34 第八因子 +/+ + + + + -
（二）、对不同器官与组织交界处肿瘤进一步分类 在一些组织器官交界处，由于重叠的特征，难以仅凭组织学 基础对肿瘤进行分类，其中有些特征（至少目前）在理论界 较感兴趣（如胃肠道梭形细胞肉瘤是肌肉起源平滑肌肉瘤， 还是神经起源神经鞘瘤，还是间质起源的胃肠道间质瘤 （gastrointestinal stromal tumor GIST），其鉴别见下表：
X-2 平滑肌瘤、神经鞘瘤、GIST和Kaposi肉瘤鉴别的免疫组化抗体 Des 平滑肌瘤 神经鞘瘤 GIST Kaposi肉瘤 + MSA + SMA + + + CD34 + CD31 S-100 +
1. 结蛋白（Desmin，Des）：平滑肌、横纹肌 结蛋白（ ）：平滑肌 ， ）：平滑肌、 均可阳性。 均可阳性。 2. 肌特异性肌动蛋白(muscle-specific 肌特异性肌动蛋白 actin,MSA):平滑肌为阳性。 平滑肌为阳性。 平滑肌为阳性 3. 平滑肌肌动蛋白 (smooth muscle actin,SMA)：平滑肌为阳性。 ：平滑肌为阳性。 4. 第8因子Ⅷ，CD34：对血管内皮细胞肿瘤， 因子Ⅷ 因子 ：对血管内皮细胞肿瘤， 胃肠道间质瘤标记较特异。 胃肠道间质瘤标记较特异。 注：（1）国际上将百余种标记抗体统称为 ：（ ）国际上将百余种标记抗体统称为CD （Cluster Designation）系列。 ）系列。 细胞多数为膜阳性， （2）淋巴细胞标记与 ）淋巴细胞标记与R-S细胞多数为膜阳性， 细胞多数为膜阳性 而Ig与组织细胞标记为胞浆阳性。 与组织细胞标记为胞浆阳性。 与组织细胞标记为胞浆阳性
（五）癌基因与抗癌基因，促转移与转移抑制基因蛋 癌基因与抗癌基因， 白抗体标记。 白抗体标记。 目前应用很多，因方法比分子生物学技术简单， 目前应用很多，因方法比分子生物学技术简单， 但是这种结果不能直接反应肿瘤基因的活性，只能间 但是这种结果不能直接反应肿瘤基因的活性， 接反应肿瘤基因代谢活性，要注意正确评价它的价值。 接反应肿瘤基因代谢活性，要注意正确评价它的价值。
（三）、对恶性间皮瘤的鉴别 病理医生常碰到的问题是发生于胸、 病理医生常碰到的问题是发生于胸 、 腹膜的 肿瘤是转移性腺癌或是其它浆膜腔肿瘤， 肿瘤是转移性腺癌或是其它浆膜腔肿瘤，还是恶 性间皮瘤。 性间皮瘤。 可以鉴别腺癌与间皮瘤的一组抗体 可以鉴别腺癌与间皮瘤的一组抗体 可以鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体 可以鉴别间皮肿瘤和血管源性肉瘤的抗体
+ + -
+/+ + +
+
-
1．角蛋白（Keratin）：一种中间丝蛋白，分为： ．角蛋白（ ） 一种中间丝蛋白，分为： （1）表皮角蛋白（Epidermal keratin，EK）—— ）表皮角蛋白（ ， ） 鳞状上皮或高分化鳞癌标记； 鳞状上皮或高分化鳞癌标记； （2）细胞角蛋白（cytokeratin，CK）——低分子 ）细胞角蛋白（ ， ） 低分子 角蛋白， 对腺癌、 移行细胞部及低分化鳞癌标记。 角蛋白 ， 对腺癌 、 移行细胞部及低分化鳞癌标记 。 一般用广谱型角蛋白抗体为好，常用。 一般用广谱型角蛋白抗体为好，常用。
3．波形蛋白（Vimentin，Vim）：是一种细胞中间 ．波形蛋白 蛋白（ ， ） 丝蛋白抗体， 在多数软组织肿瘤均可表达， 但纤维 丝蛋白抗体 ， 在多数软组织肿瘤均可表达 ， 细胞较明显， 在一些上皮性肿瘤也有阳性反应。 细胞较明显 ， 在一些上皮性肿瘤也有阳性反应 。 常 用作间叶源与上皮源肿瘤的第一线鉴别抗体 4. S-100蛋白：是一种周围神经雪旺氏细胞特异标 蛋白： 蛋白 记抗体，后发现对脂细胞、朗格罕氏细胞、 记抗体，后发现对脂细胞、朗格罕氏细胞、肌上皮 细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。 细胞、黑色素细胞及其肿瘤Biblioteka Baidu可阳性。