植物膜蛋白提取方法的研究(2D电泳用)
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植物膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
货号:BB-31841 V2.16
试剂盒组成:
产品组成 BB-31841-1 BB-31841-2 组份编号
规格 50T 100T
试剂A:植物膜蛋白提取液A 25ml 50ml 31841A
试剂B:植物膜蛋白提取液B 250ul 500ul 31841B
试剂C:膜蛋白溶解液C 10ml 20ml 31841C
试剂D:蛋白酶抑制剂混合物 100ul 200ul 31841D
使用说明书 1 1
知识产权: 贝博TM BBproExtra TM试剂盒及其使用方法包含专有技术。
产品简介:
膜蛋白承担各种生物功能,扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
贝博TM BBproExtra TM植物膜蛋白提取试剂盒(二维电泳用)是一种基于化学方法的高产膜蛋白提取试剂盒。植物膜蛋白提取试剂盒可以从各种植物中提取膜蛋白,可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒,请联系贝博,选用其它产品号的产品。
使用方法:
1、试剂准备:
每500ul膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2、取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎,加
入500ul提取液A,用组织匀浆机/匀浆器充分匀浆。
3、匀浆或研磨后加入500ul提取液A,混匀后于一个干净离心管中在2-8℃振荡1小时。
4、将提取液在2-8℃条件下12000g离心5分钟,取上清。
5、在上清中加入5ul提取液B,充分混匀。
6、在37℃水浴10分钟。
7、在37℃ 1000g离心3分钟。
8、此时液体分为2层,小心移除上层部分,吸取下层管底部大约50ul液体。
9、用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下层溶液,即得膜蛋白样品。
10、将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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