2.5酶类药物
酶类制剂
酶类制剂在人类和动植物活的机体中，普遍存在一类特殊蛋白质。
它们参与生化反应，而且使反应进行得极快，这类物质是天然催化剂－－酶类。
酶具有高度专一性和极高的活性，使有机化合物在体内以一定的反应顺序转换。
酶是生物细胞合成的，存在于细胞内的称为胞内酶；由细胞内合成而分泌到细胞外起作用的酶称作胞外酶。
各种动物器官、组织和体液中含有酶的种类和数量差别甚大。
通常所含酶的总量并不很少，但每一种酶的含量却很少，常在百万分之几至百分之几。
因此酶的提取、分离、纯化与确认要靠较高水平的生物化学技术。
酶的发现是十九世纪（1833年）有人从麦芽浸液中提得第一个具有活力的蛋白质－－淀粉酶。
到目前科学家们已从生物体内提纯确认出八百多种酶。
但是应用到医药方面作为医药用的酶类制剂不过才有几十种。
然而，祖国医药学对含酶类药物的记述确很早，如《药品化义》中记载：“大麦芽，炒香开胃，以除烦闷；生用力猛，主消麦面食积，症瘕气结，胸膈胀满，郁结痰涎，小儿伤乳，又能行上焦滞血。
若女人气血壮盛，或产后无儿饮乳，乳房胀痛，丹溪用此二两，炒香捣去皮为末，分作四服立消，其性气之锐，散血行气，迅速如此，勿轻视之”。
又如《本草蒙荃》中记载：牛肚“健脾胃，免饮积食伤”等等。
由于受技术限制，而未能进一步提纯入药。
但由此说明，酶类制剂与中药己早有渊源关系，现在我们讨论酶类制剂，也可认为是中药制剂的发展。
酶类制剂的分类酶制剂按其临床应用来分类，主要有以下几种：消化类：这类酶研究最早，是品种最多的一类酶。
它们的作用是消化和分解食物中各种成分，如淀粉、脂肪、蛋白质等使变成比较简单的物质，便利肠胃道的吸收。
当体内消化系统失调，消化液分泌不足时，服用这一类酶就能够补充和纠正体内消化酶的不足，恢复正常消化机能。
在这一类酶中主要有胃蛋白酶、胰酶、淀粉酶、纤维素酶、木瓜酶、凝乳酶、无花果酶、菠萝酶等。
抗炎净创类：这一类酶是目前在治疗上发展最快，用途最广的一种。
这种酶大多数都是蛋白质水解酶，能够分解发炎部位纤维蛋白的凝结物，消除伤口周围的坏疽、腐肉和碎屑。
感染疾病科常用药物分类汇总表
双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊
210 mg/粒
41
澳泰乐胶囊
0.35 g/粒
42
金菌灵胶囊
0.25 g/粒
43
六味能消胶囊
0.45 g/粒
止血类药物
44
人凝血酶原复合物
200IU/瓶
45
蛇毒血凝酶注射液
1ml：1IU/支
46
注射用血凝酶
1IU/支
47
凝血酶冻干粉
200/500/1000/2000/5000 /10000 IU /瓶
48
卡络磺钠氯化钠注射液
100 ml/瓶
清热解毒利湿类
49
喜炎平注射液
5 ml/支
50
痰热清注射液
10 ml/支
51
双虎清肝颗粒
12g/袋
52
茵芪肝复颗粒
16 g/袋
53
西黄胶囊
0.25g/粒
54
苦参素胶囊
0.1 g/粒
舒肝利胆清热解毒类
55
胆康胶囊
0.38 g/粒
56
茵胆平肝胶囊
0.5 g/粒
调节免疫类
感染疾病科常用药物分类汇总表
抗病毒（核苷酸类似物、干扰素）
1
替比夫定片
600mg/片
2
恩替卡韦分散片
0.5 mg/片或1 mg/片
3
恩替卡韦片（T）
0.5 mg/片
4
恩替卡韦胶囊
0.5 mg/片
5
阿德福韦酯胶囊
10 m g/粒
6
注射用重组人干扰素a1b
10/20/30/40/50/60 ug/支
7
聚乙二醇干扰素a-2a注射液
酶类药物的介绍_实用模板
3
酶类药物的作用机制
酶类药物的作用机制
酶类药物的作用机制主要通过调节机体内的生物化 学反应来实现
下面以两种常见的酶类药物为例，介绍其作用机制
具体来说，酶类药物可以与特定的酶结合，从而改 变其活性或表达水平，进而影响机体的生理功能
酶类药物的作用机制
➢ 抗癌药物长春新碱：长春新 碱是一种典型的酶抑制剂， 能够抑制蛋白质合成过程中 的关键酶——微管蛋白合成 酶。通过抑制微管蛋白合成 酶的活性，长春新碱可以破 坏肿瘤细胞的细胞骨架结构 ，进而抑制肿瘤细胞的生长 和增殖。此外，长春新碱还 可以诱导肿瘤细胞凋亡和免 疫反应，从而增强其抗癌效 果
67 LOREM
酶类药物具有高效、低毒、特异性 强的特点，因此在临床治疗中具有 广泛的应用前景
10 LOREM
2
酶类药物的分类
酶类药物的分类
按照作用机制 分类
酶类药物的分类
01
02
03
04
05
1.1 酶抑制剂
1.1 酶抑制剂
酶抑制剂是能够与 酶结合并降低其活 性的药物。通过抑 制酶的活性，酶抑 制剂可以调节机体 的生理功能，从而 达到治疗疾病的目 的。例如，抗癌药 物长春新碱就是一 种典型的酶抑制剂， 能够抑制蛋白质合 成过程中的关键酶， 从而抑制肿瘤细胞
酶类药物的临床应用
酶类药物的生产 酶类药物的生产需要严格遵守药品生产质量管理规范(GMP)，确保生产过程的安全性和 质量稳定性。在生产过程中，需要对原材料进行严格的质量控制，确保原料的质量符合 标准。同时，生产工艺也需要不断优化，以提高生产效率和产品质量 此外，为了满足不同患者的需求，酶类药物还需要进行剂型和包装的改进。例如，对于 一些需要长时间保存的药物，需要采用稳定性更好的包装材料和储存条件 六、酶类药物的未来发展 随着生物技术的不断发展和创新，酶类药物的研发和应用前景非常广阔。未来，酶类药 物将更加注重个性化治疗和精准医疗的发展。通过基因测序等技术手段，可以更加准确 地了解患者的基因变异情况，为患者提供更加个性化的药物治疗方案 同时，随着蛋白质组学、代谢组学等技术的不断发展，可以更加深入地了解酶的种类和 功能，为酶类药物的研发提供更多的线索和方向。此外，随着合成生物学、生物信息学 等交叉学科的发展，可以为酶类药物的设计和优化提供更加有效的方法和技术支持
13(2)核酸、酶类药物
加5％S DS 溶液至1/1 0体积
粗品DNA加水溶解 搅拌1h，离心1h
Na Cl 至1M 冷乙醇
DNA沉淀
上清液
二．核苷酸的制备
• 酶解法：从DAN,RNA经酶或化学降解的方 法制备
• 发酵法：选育某种特定遗传性状的菌种经 发酵法生产
• 半合成法：核苷经化学方法磷酸化生产核苷酸
（一 ）酶解法及碱水解法制备核苷酸
• GMP不被分解（分解能力微弱） • GMP合成酶活力要强（抗生素激动剂抗狭霉素或德夸菌
素强化其活性） • 增加细胞通透性（在Mn2＋过量的培养基中需添加表面活
性剂改变通透性） • 供给NH4+维持培养基PH7.5－8.0
（三）半合成法制备核苷酸
发酵法生产核苷成本低，产率高，工业生 产的呈味核苷酸一半左右是由发酵法生产核苷后 经提取精制后，直接在5’－羟基上磷酸化
1.酶解法制备脱氧核苷酸
酶解法: DNA或RNA为原料制备5′－核苷酸
常用的酶：橘青霉产生的5′－磷酸二酯酶
橘青霉 压滤 培养液 除菌体
酶液
DNA溶液【酶解】酶解液
加热、调pH9.0 过滤
DNA降解液
【离子交换】 分部洗脱 脱氧核苷酸
吸附于氯型阴离子树脂
(dCMP、dAMP、dTMP、dGMP)
RNA 降解 进一步分离 戊糖核苷酸
取RNA配成3％～3.5％的水溶液，加氢氧化 钠达0.3mol/L浓度，升温38℃，保温16-20 小时，用6mol/L盐酸中和至pH7.0，从RNA 水解成2’，3’－核苷酸，降解率达95％以上
发酵法生产核苷酸
产氨短杆菌发酵生产肌苷酸（IMP） 腺嘌呤营养缺陷型嘌呤核苷酸生物合成途径和代谢调控
25酶类药物
放酶。
目录
二 药用酶的制备方法
? 直接提取法 ?微生物发酵法 ?动植物细胞培养法
目录
天然提取酶原料的选择要点
? 不同原料酶含量的差异（0.0001%~1%） ? 不同生长发育情况及生理状态 ? 简单、易得 ? 取材迅速
目录
酶活性测定的主要指标：活力单位
?酶活力：酶催化化学反应的能力。 ?活力单位：特定条件下酶促反应在单位时间内 生成一定量的产物或消耗一定数量的底物所需 要的酶量。
目录
?国际单位(U)：在特定条件下，每分钟催化 1μmol 底物转化为产物所需要的酶量为 1 U.
? 酶纯度测定的主要指标：比活力 ? 比活（specific activity）是指每毫克酶蛋白
目录
2、有机溶剂法 某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶 ，由于和脂
质牢固结合 ，为此必须除去结合的脂质，且不能使酶 变性，最常用的 有机溶剂是丁醇 。
3、表面活性剂法 表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，故
可用于提取结合酶。
目录
（四）酶的纯化
? 评价纯化工艺主要看二个指标，一是 酶比活，二是总活力回收。
第五节
酶类药物
目录
酶的概念
? 酶是一类由活细胞产生的，对其特异底物 具有高效催化作用的蛋白质。 ? 目前将生物催化剂分为两类 酶 、 核酶（脱氧核酶）
目录第一节 药用酶分类及应用? 早期酶制剂主要用于治疗消化道疾病， 烧伤及感染引起的炎症疾病，现在国内 外己广泛应用于多种疾病的治疗，其制 剂品种已超过700余种。
常用护肝药物分类
QD 副作用：恶心、呕吐（需慢滴）、胸闷、严重
肾功能不全禁用
促肝细胞生长素药
作用机制：刺激肝细胞DNA合成，促进肝细胞 再生
剂量：威佳（120g QD），申特（200mg QD） 副作用：个别病例低热、皮疹
抗肝纤维化药
片 TID 五酯胶囊：降酶；2片 TID 双环醇 ：降酶；1-2片 TID
退黄药
腺苷蛋氨酸 熊去氧胆酸 中成药：苦黄、茵栀黄颗粒、茴三硫 前列地尔 激素 其他：
腺苷蛋氨酸
作用机制：提供甲基供体和生理性巯基前体， 治疗肝内胆汁淤积
剂量：思美泰（0.5），喜美欣（0.5），1.02.0QD
安珐特、复方鳖甲软肝片、扶正化瘀胶囊 作用机制：中成药 剂量：安珐特 1-2片 TID；复方鳖甲软肝片 4
片 TID；扶正化瘀胶囊 3片或5片 TID 副作用：不详
低血钾。
解毒剂
还原型谷胱甘肽针、硫普罗宁针 作用机制：提供巯基，解毒，抗氧化 剂量：还原型谷胱甘肽（1.2-1.8g QD），硫
普罗宁（0.2 QD） 副作用：硫普罗宁：可有皮疹，瘙痒，消化道
症状；还原型谷胱甘肽：偶有皮疹。
多烯磷脂酰胆碱针
作用机制：磷脂，保护肝细胞，转化中性脂肪 和胆固醇
避免驾车、空中作业。
门冬氨酸钾镁
作用机制：提高细胞内钾、镁的浓度，加速肝 细胞三羧酸循环，对改善肝功能、降低血清胆 红素浓度有一定作用
剂量：20—40ML加入液体中静滴 副作用：滴速过快可能出现恶心、呕吐，血管
疼痛，心率减慢。
抗肝性脑病药
门冬氨酸鸟氨酸 作用机制：分解为门冬氨酸和鸟氨酸，解毒氨，
常用护肝药物分类
达克罗宁胶浆联合二甲硅油散 及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果分析
达克罗宁胶浆联合二甲硅油散及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果分析【摘要】本文针对达克罗宁胶浆联合二甲硅油散及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果进行分析。
在我们介绍了研究背景、研究目的和研究意义。
接着在分别介绍了达克罗宁胶浆的作用机制、二甲硅油散在胃镜检查中的应用、链霉蛋白酶在胃镜检查中的作用，以及达克罗宁胶浆联合二甲硅油散在胃镜检查中的应用效果分析和链霉蛋白酶在胃镜检查中的配合应用。
在我们对研究结果进行了分析，探讨了临床意义，并展望了未来研究方向。
通过本文的分析，我们可以得出结论，达克罗宁胶浆联合二甲硅油散及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果较好，具有重要的临床应用价值。
【关键词】关键词：达克罗宁胶浆、二甲硅油散、链霉蛋白酶、胃镜检查、应用效果分析、研究结果、临床意义、未来研究方向1. 引言1.1 研究背景胃镜检查是一种常用的内窥镜检查方法，可以直接观察胃黏膜的变化，帮助医生诊断疾病。
胃镜检查过程中可能会出现不适感、疼痛等问题，影响检查的顺利进行。
寻找一种能够减轻患者不适感并提高检查效果的方法就显得尤为重要。
达克罗宁胶浆是一种能够增加胃肠蠕动、减少胃肠管道内的气体积聚的药物，可以帮助提高胃镜检查的顺利程度。
二甲硅油散可以在胃镜检查中形成一层润滑膜，减少胃镜进入食道的摩擦感。
链霉蛋白酶则可以降解食物残渣，帮助清晰观察胃黏膜情况。
本研究将探讨达克罗宁胶浆联合二甲硅油散及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果，以期为提高胃镜检查的舒适度和准确性提供参考。
1.2 研究目的研究目的是为了探讨达克罗宁胶浆联合二甲硅油散及链霉蛋白酶在胃镜检查中的应用效果，并对比其单独应用的效果，为临床医生提供更多治疗选择和指导。
通过本研究，旨在深入了解这些药物在胃镜检查中的作用机制，揭示其对患者的诊断和治疗带来的益处和风险，为临床实践提供科学依据。
通过对达克罗宁胶浆、二甲硅油散和链霉蛋白酶在胃镜检查中单独及联合应用的效果进行分析，探讨它们之间的相互作用和优势，为进一步优化临床治疗方案提供参考。
《酶类药物》课件
THANKS
汇报人：PPT
酶类药物的市场需求持续增长
酶类药物的未来发展方向
开发新型酶类药物：针对特定疾病，开发具有更高活性和选择性的酶类药物
提高酶类药物的稳定性：通过化学修饰、蛋白质工程等方法，提高酶类药物的稳定性和半衰期
研究酶类药物的靶向性：通过基因工程、纳米技术等方法，提高酶类药物的靶向性和特异性
研究酶类药物的副作用：通过药理学、毒理学等方法，研究酶类药物的副作用和毒性，降低其 对人体的损害
酶类药物的作用机制
酶类药物通过与体内特定酶结合，改变酶的活性，从而影响生物化学反应 的进程。
酶类药物可以促进或抑制特定酶的活性，从而调节生物体内的代谢过程。
酶类药物可以改变生物体内的信号传导过程，从而影响细胞的生长、分化 和凋亡。
酶类药物可以影响生物体内的免疫反应，从而调节免疫系统的功能。
Part Three
心律失常。
钙离子通道阻 滞剂：如硝苯 地平、维拉帕 米等，用于治 疗高血压和心
绞痛。
抗肿瘤酶类药物
作用机制：通过抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡等方式发挥抗肿瘤作用 常见药物：如阿霉素、紫杉醇、顺铂等 应用范围：广泛应用于各种肿瘤的治疗，如乳腺癌、肺癌、结直肠癌等 副作用：可能引起骨髓抑制、胃肠道反应、肝肾功能损害等副作用
酶类药物的发展历 程
酶类药物的发现
19世纪末，科学家发现 酶具有催化作用
20世纪初，酶类药物开 始应用于临床
1926年，胰岛素首次用 于治疗糖尿病
1940年代，胰蛋白酶、 胃蛋白酶等酶类药物相 继问世
1960年代，酶类药物在 生物制药领域得到广泛 应用
1980年代，酶类药物在 基因工程、蛋白质工程 等领域取得突破性进展
《生物制药》酶类药物1解析74页文档
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别பைடு நூலகம்所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
《生物制药》酶类药物1解析
16、人民应该为法律而战斗，就像为 了城墙 而战斗 一样。 ——赫 拉克利 特 17、人类对于不公正的行为加以指责 ，并非 因为他 们愿意 做出这 种行为 ，而是 惟恐自 己会成 为这种 行为的 牺牲者 。—— 柏拉图 18、制定法律法令，就是为了不让强 者做什 么事都 横行霸 道。— —奥维 德 19、法律是社会的习惯和思想的结晶 。—— 托·伍·威尔逊 20、人们嘴上挂着的法律，其真实含 义是财 富。— —爱献 生
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
生化药物制造工艺酶类药物(1)
2.结晶的条件选择
晶种
酶的纯度 酶的浓度
金属离子
温度、时间 pH
酶的分离纯化工作中的注意事项
1. 防止酶蛋白变性
2. 防止复因子丢失
3. 防止酶被蛋白 水解酶降解
超氧化物歧化酶 （Superoxide dismutase, SOD）
结构特点：金属酶
Cu、Zn-SOD: Mw32000，2个亚基，每个亚基含1个Cu，1个
2. 消炎（抗炎）、粘痰溶解酶类 胰蛋白酶、糜蛋白酶、糜胰蛋白酶、胶原酶、SOD、菠萝 蛋白酶、溶菌酶、玻璃酸酶、DNase
3. 循环酶类 抗凝酶：链激酶、尿激酶、纤溶酶 止血酶：人凝血酶、蛇毒凝血酶、促凝血酶原激酶 血管活性酶：激肽释放酶、弹性蛋白酶
4. 抗肿瘤酶 天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶
5. 其它生理活性酶 青霉素酶、尿酸酶、细胞色素 C
牛肝【洗涤】
生理盐水
【匀浆】 pH7.8PBS
【离心】上清液【6热5℃变5性m】in
【离心】
上清液
45％、65％（NH4）2SO4饱和度 沉淀【溶解】 溶液【透析】 透析液 【分级 盐析】【离心】
【柱层析】
【超滤】【冻干】
流出液
冻干粉
DE-52
感谢下 载
酶的纯化：凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化
注意两个问题：1.建立快速的测定酶活力的方法 2.建立活力回收表
从大肠杆菌中提取天冬酰胺酶活力回收表
步骤
总蛋白 总活力单位 比活力 回收率 纯化倍数
（mg） （×106） （u/mg） （％）
匀浆
1.43×108
286
2
100
1
乙醇粗沉淀 4.1×106
【去血红蛋白】
必须了解的药界大家族——磷酸二酯酶抑制剂
必须了解的药界大家族——磷酸二酯酶抑制剂合理用药百科环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP）是细胞内重要的第二信使，磷酸二酯酶（PDEs）可将cAMP和cGMP水解为无活力的5'-AMP和5'-GMP，降低细胞内cAMP和cGMP含量，从而调控机体多种生理病理过程。
PDEs是一个庞大而复杂的家族，由11种同工酶组成，每种同工酶各具特性，PDE4、7、8主要特异性水解cAMP，PDE5、6、9特异性水解cGMP，而PDE1、2、3、10、11则对cAMP和cGMP均起作用。
各个亚型在细胞内分布、表达、调节方式以及对抑制剂的敏感性均不同，参与了炎症、哮喘、抑郁、勃起功能障碍等多种病理过程的发生发展，因此磷酸二酯酶抑制剂大家族应运而生，在临床上得到了广泛的应用。
为了让大家更了解药界中PDEs抑制剂大家族，特此举办了PDEs 抑制剂检阅仪式，由淄博市中心医院静脉用药调配科承办，累了困了就喝白开水冠名播出。
由于PDE6抑制剂、PDE7抑制剂、PDE8抑制剂、PDE9抑制剂、PDE10抑制剂和PDE11抑制剂研究较少，未在临床广泛应用，故没有收到我们的邀请，对此我们表示非常的遗憾！好了，我们的检阅仪式马上开始。
男播报员：首先迎面向主席台走来的是PDE1抑制剂代表队，他们迈着矫健的步伐，喊着响亮不整齐（路人太多）的口号，这是一支以长春西汀为代表的成熟稳重的队伍。
长春西汀，又名长春乙酯、康维脑，可选择性抑制钙离子—钙调蛋白依赖的cGMP-磷酸二酯酶，增加血管平滑肌松弛信使cGMP作用，选择性地增加脑血流量，此外还能抑制血小板聚集，改善血液流动性和微循环。
适用于改善脑梗塞后遗症脑出血后遗症、脑出血后遗症、脑动脉硬化症等诱发的各种症状。
静脉滴注，开始剂量每天20mg，根据病情可增至每天30mg，静滴治疗后，推荐口服长春西汀片继续治疗，进行长期治疗应注意检查血象变化。
不能和肝素同时应用。
女播报员：接着向我们走来的是PDE2抑制剂代表队，他们昂首阔步，英姿飒爽，听他们坚定有力而又杂乱的脚步声（如同下饺子声），这是一支以双嘧达莫为代表具有坚定信念的队伍，有着誓与血栓栓塞斗争到底的执着！双密达莫可抑制磷酸二酯酶对cAMP的降解作用，使血小板内cAMP浓度增高而产生抗血小板作用，抑制血小板的第一相聚集和第二相聚集，高浓度（500ug/ml）可抑制血小板的释放反应。
酶类药物
4、SOD的性质
对热稳定：天然牛血SOD可75℃加热数分钟，对热稳定性与溶液离 子强度有关 对pH的稳定性：一般pH5.3~9.5较稳定，猪血SOD在pH7.6～9较稳 定
金属辅基与酶活性关系 Cu、Zn-SOD：Zn与分子结构有关，与催化活性无关 Cu与活性有关，对酶活力是必需的 Mn-SOD：Mn对酶活力是必需的 Fe-SOD：Fe对酶活力是必需的
三、酶类药物的制备
1、原料选择
（1）不同酶的用料选择(含量低）
减少肝糖原）
（2）注意不同生长发育情况及营养状况 （3）原料来源丰富 （4）从简化提纯步骤着手（鸽肝中提取乙酰化酶，需将动物饥饿，
（5）如用动物组织作原料，应在此动物宰杀后立即取材。
随着酶应用日益广泛和需求量的增加，工业生产的重点已 逐渐转向微生物。
溶菌酶由129个氨基酸残基组成的碱性球蛋白，
等电点在pH10.8左右， 分子量为14000， 化学性质非常稳定，当PH值在1.2-11.3的范围剧烈变 化时，其结构几乎不变， 在酸性环境下，溶菌酶对热的稳定性很强，pH4.0- 7 时，100 ℃处理1min仍能保持原油酸活性；pH值低于4 时，能耐100℃加热处理， 在空气湿度较低时，溶菌酶可以长期在室温下存放。
6、SOD的检测
SOD酶活力测定 采用邻苯三酚自氧化法,25℃自氧化速率 0.07,pH8.2 ,50mM Tris-HCl缓冲液.
蛋白质浓度测定 采用Lowry法,以250μg/ml BSA作标准曲线.
分子量测定 采用SDS-PAGE电泳法,浓缩胶3.5%分离胶10%.
紫外吸收光谱检测 扫描波长范围230~300 nm.
第十三章-酶类药物的分析
标准品溶液1.0ml
加混合溶液0.4ml
立即摇匀计时，反应系统应在30～45秒内凝结， 当凝块内小气泡上升到系统体积一半时作为反应 终点。
以尿激酶的浓度为横坐标，以反应时间的对数为
纵坐标。
35
二、脂键水解酶－胰脂肪酶
胰脂肪酶是一种水解酶，在一定条件下把甘 油三脂类脂肪逐步水解，最后生成甘油及相 应的脂肪酸。
24
第五节 酶类药物的检测
肽键水解酶
1、胰蛋白酶 2、弹性蛋白酶 3、尿激酶（气泡上升法）
脂键水解酶——胰脂肪酶 糖苷键水解酶 ——溶菌酶 其它（超氧化物歧化酶）
25
一、肽键水解酶
1、胰蛋白酶 2、弹性蛋白酶 3、尿激酶
26
1、胰蛋白酶—比色法
胰蛋白酶：由牛、羊、猪等动物的胰脏中提取 的一种蛋白水解酶。
酶活力单位定义：在规定的条件下，每分 钟能转化1μmol底物所需要的酶量，称一 个酶的活力单位。
酶的比活力 每毫克酶蛋白所含酶活力， U/mg。
6
Michaelis-Menten快速平衡学说
底物浓度的增加，反应 速度上升呈双曲线。
在低底物浓度时，反应 速度呈直线上升，表现 为一级反应。
在高浓度时，反应速度 达到一个极限值，呈现 零级反应。
7
米氏方程
酶反应动力学方程式：
V——反应初速度 Vm——最大反应速度 K表s示—酶米与氏底常物数的，亲K和s力=K。－1/K1， Ks为ES的解离常数， Ks为反应速度V是最大反应速度Vm一半时所需底物浓
度，即V=1/2 Vm时，Ks=[S]。
8
Briggs-Haldane稳态学说
ES的形成速度与ES的解离速度相等，达到动态平
1．酶-底物复合物的形成 在酶促反应中，反应 底物首先与酶分子上活性部位结合，形成酶-底 物复合物，降低反应的活性能，使酶促反应顺 利进行。
临床常用药物
122 培氟沙星胶囊(倍宁) ★ 0.2g*6 盒
123 甲磺酸培氟沙星针(君立明) 0.4g支 乙
124 左氧氟沙星片(特夫比克) 0.1g*12 盒 乙
125 乳酸左氧氟沙星注射液(来立信) 0.2g*100ml 瓶 乙 乙
126 左氧氟沙星针(左克) 0.1g*2ml 支 乙
149 乙胺丁醇片 0.25g*100 瓶 甲
150 异烟肼片(雷米封) 0.1g*100 瓶 甲
1.4抗真菌药
1.4.1咪唑类
151 酮康唑片(里素劳) ★ 0.2g*10 盒 乙
152 氟康唑氯化钠注射液 0.2g*100ml 瓶 乙 限浅表感染二线用药及系统真菌感染
153 氟康唑片(氟来妥) 50mg*3 盒 乙 限浅表感染二线用药及系统真菌感染
143 奥硝唑针(普司立)★ 0.25g:5ml 支 乙 限二线用药
1.3抗分枝杆菌药
1.3.1抗结核病类
144 吡嗪酰胺片 0.25g*100 瓶 甲
145 利福平胶囊 0.15g*100 瓶 甲
146 利福霉素钠针★ 0.125*2ml 支
147 利福霉素针(立复欣) ★ 25mg 支
148 硫酸链霉素针 100万u 支 甲
44 头孢孟多酯钠针 0.5g支 乙
45 头孢美唑钠针 0.5g支 乙
头孢美唑钠针 1.0g 支 乙
头孢替安针 0.5g 支 乙
46 头孢替安针 1.0g支 乙
47 头孢西丁钠针 1.0g支 乙
头孢西丁钠针 1.0g 支 乙
48 头孢尼西钠针 1.0g支
头孢尼西钠针 2.0g 支
49 头孢克肟颗粒 50mg*6 盒 乙 限序贯治疗
《生物制药》酶类药物1解析
• 3.影响酶产生的一些因素
除培养基，发酵工艺参数对产酶的 影响也十分明显。 (1) 温度
(2) pH
(3) 通气
(4) 搅拌
• (5)泡沫 发酵过程中，由于发酵液受到强烈 的通气搅拌，培养基中某些成分的变化及 代谢中产生气体，会形成较多的泡沫，而 且气泡不易消失，是由于培养基中蛋白质 分子排在气泡表面形成一层吸附膜，聚集 成泡沫层之故。 消泡剂：天然油类，醇类，脂肪酸类， 胺类，酰胺类，磷酸酯类，金属皂类，聚 硅氧烷等。
酶类药物在疾病治疗方面的应用
酶
淀粉酶 蛋白酶 脂肪酶 纤维素酶 溶菌酶 尿激酶 链激酶 青霉素酶 L-天冬酰胺酶 超氧化物歧化酶 凝血酶 胶原酶 右旋糖酐酶 胆碱酯酶 溶纤酶 弹性蛋白酶 核糖核酸酶 尿酸酶
名
来
源
用
治疗消化不良，食欲不振
途
胰脏、麦芽、微生物 胰脏、胃、植物、微生物 胰脏、微生物 霉菌 蛋清、细菌 人尿 链球菌 蜡状芽孢杆菌 大肠杆菌 微生物，植物，动物 动物，蛇，细菌，酵母等 细菌 微生物 细菌 蚯蚓 胰脏 胰脏 牛肾Fra bibliotek消化酶类
第二节 酶类药物的制造过程
• 一、原料的选择
• 1. 不同酶的用料选择
乙酰化酶（鸽肝）、凝血酶(牛 血）、透明质酸酶（羊睾丸）、溶菌酶 （鸡蛋清），超氧化物歧化酶（血、肝）
• 2. 注意不同生长发育情况及营养状况
• 3. 原料来源丰富
• 4. 从简化提纯步骤着手 • 5. 如用动物组织作原料，应在此动物宰 杀后立即取材。
能使细胞中颗粒及整个细胞破碎，使酶释放出来。
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加强体内组织的通透性 消除蛋白浮肿 消除炎症
目录
（三）治疗心脑血管疾病有关的酶类
作用 ➢ 防止血小板凝聚 ➢ 阻止血纤维蛋白形成 ➢ 促进血纤维蛋白溶解 ➢ 主要有链激酶、尿激酶、纤溶酶、凝血
酶和曲菌蛋白酶。
目录
（四）抗肿瘤的酶
酶能治疗某些肿瘤， ✓ 天冬酰胺酶，它是利用该酶选择性地消耗某些类
第五节
酶类药物
目录
酶的概念
酶是一类由活细胞产生的，对其特异底物 具有高效催化作用的蛋白质。 目前将生物催化剂分为两类 酶 、 核酶（脱氧核酶）
目录
第一节 药用酶分类及应用
早期酶制剂主要用于治疗消化道疾病， 烧伤及感染引起的炎症疾病，现在国内 外己广泛应用于多种疾病的治疗，其制 剂品种已超过700余种。
目录
从动物或植物中提取酶受到原料的限制，随着 酶应用日益广泛和需求量的增加，工业生产的重点 已逐渐转向微生物。用微生物发酵法生产药用酶， 不受季节、气候和地域的限制，生产周期短，产量 高，成本低，能大规模生产。
目录
微生物酶制剂高产菌株的选育
自然界筛选 人工诱变 基因工程育种
目录
酶类药物的提取和纯化
辐射、消炎方面也有疗效。 治疗青霉素引起过敏反应的青霉素酶； 分解粘多糖的玻璃酸酶； 预防龋齿的葡聚糖酶 治疗与血管收缩有关循环障碍的激肽释
放酶。
目录
二 药用酶的制备方法
直接提取法 微生物发酵法 动植物细胞培养法
目录
天然提取酶原料的选择要点
不同原料酶含量的差异（0.0001%~1%） 不同生长发育情况及生理状态 简单、易得 取材迅速
生化提取工艺
生物原料
预处理
提取
纯化
目录
一、生物材料的预处理
（一）动物材料的预处理 1、机械处理 用绞肉机绞，一般细胞并不破碎 。有
的酶必须细胞破碎后才能有效地提取， 在实验室常用的是玻璃匀浆器和组织捣 碎器。
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2、反复冻融 冷到-10℃左右，再缓慢溶解至室温，如此反复多次。
由于细胞中冰晶的形成，及剩下液体中盐浓度的增高， 能使细胞中颗粒及整个细胞破碎，从而使某些酶释放 出来。
所具有的酶活力，一般用单位/毫克蛋白来 表示。
目录
随着酶纯化的进行，酶的总活力单位数下降， 但比活会越来越高，当酶已被纯化至纯酶时， 比活是个恒定值。所以比活是酶纯化程度的 指标。
目录
酶的纯化
一杂质的去除
pH和加热沉淀法 蛋白表面变性法 选择性变性法 酶与底物结合，加热变性法。
目录
二 脱盐、浓缩 与结晶
目录
酶活性测定的主要指标：活力单位
酶活力：酶催化化学反应的能力。 活力单位：特定条件下酶促反应在单位时间内 生成一定量的产物或消耗一定数量的底物所需 要的酶量。
目录
国际单位(U)：在特定条件下，每分钟催化1μmol 底物转化为产物所需要的酶量为1 U.
酶纯度测定的主要指标：比活力 比活（specific activity）是指每毫克酶蛋白
（1）脱盐 透析 凝胶过滤
（2）浓缩 冷冻干燥 离子交换 超滤 凝胶吸水
（3）结晶 盐析 有机溶剂沉淀 复合结晶 有机溶剂透析 等电点
目录
酶分离和纯化中的注意事项
防止酶变性 防止辅因子流失 防止蛋白水解酶分解产物
目录Leabharlann 重要的酶类药物的性质及生产方法
目录
超氧化物歧化酶
（Superoxide dismutase SOD） 超氧化物歧化酶是一种重要的氧自由基清除剂，作
目录
第一节 药用酶分类及应用
按其对疾病的防治，可将酶类药物分为以下几 个方面。
（一）促进消化酶类 （二）消炎酶类 （三）治疗心脑血管疾病有关的酶类 （四）抗肿瘤的酶 （五）其它药用酶
目录
(一) 促进消化酶类
利用酶作为消化促进剂，改善胃肠道功 能早已为人们所采用。这类酶的作用是 水解和消化食物中的各种成分，如蛋白 质，脂质类和糖类。
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（二）微生物的预处理
要是酶是胞外酶，则可除去菌体后再直 接从发酵液中吸附提取酶。但对胞内酶 则需将菌体细胞破壁，制成无细胞的悬 液后再行提取。
菌体用生理盐水洗涤除去培养基后， 应深冻保存。
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（三）酶的提取
1、水溶液法 常用稀盐溶液或缓冲液提取。一般在低温下操作。
盐浓度一般以等渗为好，相当于0.15mol／L NaCl的 离子强度是最适宜于酶的提取。
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2、有机溶剂法 某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶，由于和脂
质牢固结合，为此必须除去结合的脂质，且不能使酶 变性，最常用的有机溶剂是丁醇。
3、表面活性剂法 表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，故
可用于提取结合酶。
目录
（四）酶的纯化
评价纯化工艺主要看二个指标，一是 酶比活，二是总活力回收。
胰酶、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂 肪酶
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（二）消炎酶类
蛋白酶作为消炎剂使用最初是在1952年由
Znnerfield用胰蛋白酶静脉注射，治疗静脉血栓取得成
功的。当时是想用胰蛋白酶溶解血栓，但进行了种种
试验后，却发现对炎症有作用，以后蛋白酶便作为消
炎剂而应用了。
➢ 蛋白水解酶
消炎作用表现
➢ 多糖水解酶 ➢ 核酸水解酶
为药用酶在美国、德国、澳大利亚等国有产品，此酶 属金属酶，它催化的化学反应是：
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由 于 SOD 能 专 一 清 除 超 氧 阴 离 子 自 由 基 （O2-）；故引起国内外生化界和医药界的极大 关注。
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3、丙酮粉 组织经丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉，不仅可减
少酶的变性，同时因细胞结构成份的破碎使蛋白质 与脂质结合的某些化学键打开，促使某些结合酶释 放到溶液中。
常用的方法是将组织糜或匀浆悬浮于0.0lmol／L， pH6.5的磷酸缓冲液中，在0℃下一边搅拌，一边徐 徐倒入10倍体积的-15℃无水丙酮内，10分钟后，离 心过滤取其沉淀物，反复用冷丙酮洗几次，真空干燥 即得丙酮粉。丙酮粉在低温下可保存数年。
型瘤组织的营养成分，而正常细胞能自身合成天 冬酰胺酶故不受影响。天冬酰胺酶能治疗多种白 血病和实体瘤。 ✓ 神经氨酸苷酶是一种良好的肿瘤免疫治疗剂。 ✓ 尿激酶可用于加强抗癌药物如丝裂霉素C的药效 ✓ 米曲溶栓酶也能治疗白血病和肿瘤。
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（五）其他酶类
细胞色素C、SOD、过氧化物酶等 参与生物的氧化还原代谢，在抗衰老、