临床微生物标本采集方法-可用
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临床微生物标本采集方法
一
导管尖培养标本采集
物品准备: 无菌试管、 标本标签、 无菌剪刀、 无菌手套
操作者进行卫生消毒,戴帽子、外科口罩
戴无菌手套,将拔除的中央导管用无菌剪刀剪长 约5CM,导管尖端放入无菌试管内。
脱手套,洗手, 标本及时送检
二、留置导尿管患者中段尿培养标本采 集
物品准备:治疗车、 速干手消毒剂、治 疗方盘内有盖培养 试管1支、打火机一 支、无菌手套一副、 0.5%碘伏消毒液棉 球(置换药碗内) 数个、无菌镊子1个、 弯盘1个、酒精灯1 盏(A)
6、采样高度: 洁净手术间的手术区采样高度为0.81.2m,周边区在地面或0.8m采样,与 《医院洁净手术部建筑技术规范》要求 高度相符。
7、培养条件: 采样后的培养基按要求送至化验室(细 菌定)在37℃培养箱培养,24h观察结 果。
8、判断结果: (1)百级洁净手术间手术区小于 0.2cfu/30min,周边区小于0.4cfu/30min (2)千级洁净手术间手术区小于 0.75cfu/30min,周边区小于 1.5cfu/30min。 (3)万级洁净手术间手术区小于 2cfu/30min,周边小于4cfu/30min. (4)普通手术间小于5cfu/30min.
六、洁净手术室空气沉降菌采样
一、采样前准备 1、当日术毕,按常规对手术间所有物表 及地面进行湿式清洁和擦拭。 2、检查净化空调系统运作是否正常,当 日完成手术间清洁后,调节空调系统处 于待机状态,次晨打开系统运行30min。 自净后采样。
二、采用平板沉降法 1、采样时间: 在净化空调开启30min进行采样,采样时洁净 手术室大门应保持关闭,以维持手术室正压 状态和洁净度。 2、采样护士准备: 在采样前应洗手(或手消毒) 戴口罩,帽子,穿无菌衣。操作时应轻稳, 避免污染培养皿。
五、消毒剂染菌量采样
用物准备:碘伏、含9ml中和剂试管、无菌注 射器、酒精灯、手消毒剂、记号笔
手消毒:按六步洗手法搓揉至干燥
消毒试管口:将试管放在酒精灯上旋转进行消毒, 此为重要步骤。
无菌法取注射器
用无菌注射器抽取使用 中的消毒剂1ml
将抽取的消毒剂注入含 9ml中和剂的试管内,注 意不接触试管口
百级手术间
千级手术间
万级手术间
十万级手术间
注意事项: 1、平皿的取送与放置方法: 拿取平皿时,大在下,小在上,采样时要大 在上,小在下,大的斜盖在小的平皿上,不 能两个平皿同时向上。 2、在化验单上注明平皿暴露时间。
七、非洁净环境空气沉降菌采样
待测房间准备,静止至少10min
物品准备
九、卫生手消毒效果采样
医务人员手采样的意义: 1、引起医源性感染的因素很多,医务人员手可以 充当医源性感染的媒介,手的微生物污染是造成 医院感染的最直接的传播途径,由于医务人员的 手传播的细菌而造成的医院感染约占30%。因此 医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染的重 要措施之一。 2.促进医务人员手卫生的依从性。 3.进行流行病学调查。
物品准备
酒精灯外焰烧灼采样试管管口,用无菌棉签 蘸取中和试剂
被检者卫生手消毒后,双手五指并拢,用棉拭子在 一手曲面从指跟到指端往返涂擦2遍,涂擦过程中同 时转动棉拭子;同法采集另一只手
取无菌剪刀,酒精灯外焰烧灼采样试管管口
剪去棉拭子手接触部分投入10ml含相应中和 剂的无菌洗脱液试管内;酒精灯外焰烧灼试 管管口后盖上瓶盖
再次用酒精灯消毒试管 口
将消毒剂与中和剂振荡 充分混匀
用记号笔在试管壁编写 号码,送检
备注:中和剂的选择: 1、醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。 2、含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒 剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂。 3、氯与定、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3卵磷脂的中和剂。 4、醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。 5、含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中 加入吐温-80到0.3%,也可使用经该消毒剂消毒 效果监测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。
3、采样方法: 把琼脂平板放在室内各采样点,采样时 把平板盖打开扣放于平板少许边沿上, 同时培养皿下垫灭菌疗巾,暴露30min 后,盖上平板盖,并作好手术间标志及 平板上注明手术区和周边区,固定培养 皿,放指定容器内。防再次污染。
4、采样顺序: 采样时平板应从科室最靠内的房间放置, 依次向外布放,每个手术间也是从最靠 里的位置放置平板,最后放置最靠门的 采样点。采样点分布均匀,收取平板顺 序相反。
八、物体表面采样
医院物体表面采样的对象: 一切与医疗活动相关的物体表面均可以作为采 样的对象:治疗台、治疗车、器械车、器械台、 麻醉机、新生儿暖箱、诊疗仪器、床头柜、床 尾桌、监护仪按钮、血压器袖带、听诊器、床 栏、遥控器、门把手、电脑键盘、鼠标、电话 机、病历夹等。
采样时间: 常规:消毒处理后进行采样 暴发流行:未处理表面,随机采样 采样面积:常规:<100cm² 时,全部表面; ≥100cm²时取100cm² 。 暴发流行:不限,尽可能多采。
操作人员准备:着装规范(卫生手消毒、帽子、口罩、 口罩、); 患者准备:确认患者(核对姓名、床号、腕带),导尿管已夹住
松开患者导尿管,弃其前段尿液
使用0.5%碘伏溶液棉球消毒导尿管的采样部位
操作者用速干手消毒剂手消毒后戴无菌手套, 使用无菌注射器斜刺入导尿管的采样部位抽 取10-20ml尿液,退出注射器
剪去棉签手接触部位,两个 棉签投入10ml含相应中和剂 的无菌洗脱液试管内
试管塞用酒精灯烫后塞住试 管口
在试管上标记被检者姓名、 采样时间
填写手卫生消毒效果检测申 请单,及时送检
三、开放性伤口培养标本采集
物品准备
用生理盐水彻底冲洗伤口
用拭子深入伤口基底部或伤口与正常组织边缘处采 集两个标本,分别用于革兰染色和培养
将用于革兰染色的标本置于无菌标本杯中
将用于培养的标本置于需氧运送培养基中, 密闭保存
分别标注患者及标本信息,30min内送检,否则置4℃冰 箱冷藏,24h内送检
十、外科手消毒效果采样
物品准备:无菌棉拭子、试 管架、含中和剂的无菌洗脱 液、灭菌剪刀、酒精灯、打 火机、采样单、采样记号笔、 手消毒剂
被检者着装规范,外科手消 毒后保持双手位于胸前并高 于肘部
取无菌棉签2根浸蘸含相应 中和剂的洗脱液
一根棉签,涂擦一手五指曲 面,从指跟开始至指端,每 指跟到指端往返转动涂擦2次, 一个手涂擦面积约30c㎡;另 一只手同样涂擦
四、使用中紫外线灯辐照度值测定法
方法:紫外线强度照射指示卡测定法
百度文库
物品准备:标尺、紫外线强度照射指示卡
放好标尺,开启紫外线灯
开启紫外线灯5min后,将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1m处, 有图案一面朝上
照射1min后,关掉紫外线灯,观察指示卡色块的颜色,进行结果 判定。将指示卡色块的颜色与“灯管强度90uW/CM² ”、“灯管 强度70uW/CM² ”标准色块进行比较,判定测定结果
田
根据待测房 间面积大小, 按GB15982 要求放置培 养皿
• 暴露时间 • 产房.导管房.新生儿.重症监护室.器官移植 房.血液病病区.烧伤病房:15min • 普通病房:5min
从里到外逐个打开培养皿盖,扣放于平皿旁 (注:手、头等严禁从培养基上方越过)
暴露规定时间后,按打开反方向盖上平皿盖,及时送 检
5、布点要求: 百级手术间,手术区(手术台两侧0.9m以内,两 端0.4m内)呈对角线,东南西北中5点,周边区 (距墙1m,每边2个)8点,共需13个培养皿;千 级手术间,手术区(手术台两侧0.6m以内,两端 0.4m以内)呈单角线3点,周边区(距1机,长边 2个,短边1个)6点,共需9个培养皿;万级手术 间:手术区(手术台4边,0.4m以内)呈对角线3点, 周边区(距离1m每边1个)4点,共需7个培养皿。 检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作 将一个对照皿打开后立即封盖,两个对照结果必 须为阴性,整个操作过程应符合无菌要求。
协助者点燃 酒精灯,用 燃烧法消毒 试管管口和 盖子
将注射器内尿液注入试管(避免污染)
协助者再次用燃烧法消毒试管管口和盖子, 随即盖紧试管(标本不得倒置,以免污染), 熄灭酒精灯,贴好检验单标签
清理好用物,手卫生,尿标本及时送检
注意事 项
1、采集指征:怀疑有尿路感染时,应考虑做尿培养。 2、采集时机:抗菌药物使用之前,留置导尿管者须 夹管30min以上。 3、采样部位:应选择尿管采样口或靠近尿道的导尿 管管壁。 4、采样部位的消毒:使用0.5%碘伏液棉球沿采样点 由内而外消毒,每个棉球只使用一次。 5、无菌物品需检查包装和有效期,确保合格。 6、采样过程中避免污染。
一
导管尖培养标本采集
物品准备: 无菌试管、 标本标签、 无菌剪刀、 无菌手套
操作者进行卫生消毒,戴帽子、外科口罩
戴无菌手套,将拔除的中央导管用无菌剪刀剪长 约5CM,导管尖端放入无菌试管内。
脱手套,洗手, 标本及时送检
二、留置导尿管患者中段尿培养标本采 集
物品准备:治疗车、 速干手消毒剂、治 疗方盘内有盖培养 试管1支、打火机一 支、无菌手套一副、 0.5%碘伏消毒液棉 球(置换药碗内) 数个、无菌镊子1个、 弯盘1个、酒精灯1 盏(A)
6、采样高度: 洁净手术间的手术区采样高度为0.81.2m,周边区在地面或0.8m采样,与 《医院洁净手术部建筑技术规范》要求 高度相符。
7、培养条件: 采样后的培养基按要求送至化验室(细 菌定)在37℃培养箱培养,24h观察结 果。
8、判断结果: (1)百级洁净手术间手术区小于 0.2cfu/30min,周边区小于0.4cfu/30min (2)千级洁净手术间手术区小于 0.75cfu/30min,周边区小于 1.5cfu/30min。 (3)万级洁净手术间手术区小于 2cfu/30min,周边小于4cfu/30min. (4)普通手术间小于5cfu/30min.
六、洁净手术室空气沉降菌采样
一、采样前准备 1、当日术毕,按常规对手术间所有物表 及地面进行湿式清洁和擦拭。 2、检查净化空调系统运作是否正常,当 日完成手术间清洁后,调节空调系统处 于待机状态,次晨打开系统运行30min。 自净后采样。
二、采用平板沉降法 1、采样时间: 在净化空调开启30min进行采样,采样时洁净 手术室大门应保持关闭,以维持手术室正压 状态和洁净度。 2、采样护士准备: 在采样前应洗手(或手消毒) 戴口罩,帽子,穿无菌衣。操作时应轻稳, 避免污染培养皿。
五、消毒剂染菌量采样
用物准备:碘伏、含9ml中和剂试管、无菌注 射器、酒精灯、手消毒剂、记号笔
手消毒:按六步洗手法搓揉至干燥
消毒试管口:将试管放在酒精灯上旋转进行消毒, 此为重要步骤。
无菌法取注射器
用无菌注射器抽取使用 中的消毒剂1ml
将抽取的消毒剂注入含 9ml中和剂的试管内,注 意不接触试管口
百级手术间
千级手术间
万级手术间
十万级手术间
注意事项: 1、平皿的取送与放置方法: 拿取平皿时,大在下,小在上,采样时要大 在上,小在下,大的斜盖在小的平皿上,不 能两个平皿同时向上。 2、在化验单上注明平皿暴露时间。
七、非洁净环境空气沉降菌采样
待测房间准备,静止至少10min
物品准备
九、卫生手消毒效果采样
医务人员手采样的意义: 1、引起医源性感染的因素很多,医务人员手可以 充当医源性感染的媒介,手的微生物污染是造成 医院感染的最直接的传播途径,由于医务人员的 手传播的细菌而造成的医院感染约占30%。因此 医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染的重 要措施之一。 2.促进医务人员手卫生的依从性。 3.进行流行病学调查。
物品准备
酒精灯外焰烧灼采样试管管口,用无菌棉签 蘸取中和试剂
被检者卫生手消毒后,双手五指并拢,用棉拭子在 一手曲面从指跟到指端往返涂擦2遍,涂擦过程中同 时转动棉拭子;同法采集另一只手
取无菌剪刀,酒精灯外焰烧灼采样试管管口
剪去棉拭子手接触部分投入10ml含相应中和 剂的无菌洗脱液试管内;酒精灯外焰烧灼试 管管口后盖上瓶盖
再次用酒精灯消毒试管 口
将消毒剂与中和剂振荡 充分混匀
用记号笔在试管壁编写 号码,送检
备注:中和剂的选择: 1、醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。 2、含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒 剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂。 3、氯与定、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3卵磷脂的中和剂。 4、醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。 5、含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中 加入吐温-80到0.3%,也可使用经该消毒剂消毒 效果监测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。
3、采样方法: 把琼脂平板放在室内各采样点,采样时 把平板盖打开扣放于平板少许边沿上, 同时培养皿下垫灭菌疗巾,暴露30min 后,盖上平板盖,并作好手术间标志及 平板上注明手术区和周边区,固定培养 皿,放指定容器内。防再次污染。
4、采样顺序: 采样时平板应从科室最靠内的房间放置, 依次向外布放,每个手术间也是从最靠 里的位置放置平板,最后放置最靠门的 采样点。采样点分布均匀,收取平板顺 序相反。
八、物体表面采样
医院物体表面采样的对象: 一切与医疗活动相关的物体表面均可以作为采 样的对象:治疗台、治疗车、器械车、器械台、 麻醉机、新生儿暖箱、诊疗仪器、床头柜、床 尾桌、监护仪按钮、血压器袖带、听诊器、床 栏、遥控器、门把手、电脑键盘、鼠标、电话 机、病历夹等。
采样时间: 常规:消毒处理后进行采样 暴发流行:未处理表面,随机采样 采样面积:常规:<100cm² 时,全部表面; ≥100cm²时取100cm² 。 暴发流行:不限,尽可能多采。
操作人员准备:着装规范(卫生手消毒、帽子、口罩、 口罩、); 患者准备:确认患者(核对姓名、床号、腕带),导尿管已夹住
松开患者导尿管,弃其前段尿液
使用0.5%碘伏溶液棉球消毒导尿管的采样部位
操作者用速干手消毒剂手消毒后戴无菌手套, 使用无菌注射器斜刺入导尿管的采样部位抽 取10-20ml尿液,退出注射器
剪去棉签手接触部位,两个 棉签投入10ml含相应中和剂 的无菌洗脱液试管内
试管塞用酒精灯烫后塞住试 管口
在试管上标记被检者姓名、 采样时间
填写手卫生消毒效果检测申 请单,及时送检
三、开放性伤口培养标本采集
物品准备
用生理盐水彻底冲洗伤口
用拭子深入伤口基底部或伤口与正常组织边缘处采 集两个标本,分别用于革兰染色和培养
将用于革兰染色的标本置于无菌标本杯中
将用于培养的标本置于需氧运送培养基中, 密闭保存
分别标注患者及标本信息,30min内送检,否则置4℃冰 箱冷藏,24h内送检
十、外科手消毒效果采样
物品准备:无菌棉拭子、试 管架、含中和剂的无菌洗脱 液、灭菌剪刀、酒精灯、打 火机、采样单、采样记号笔、 手消毒剂
被检者着装规范,外科手消 毒后保持双手位于胸前并高 于肘部
取无菌棉签2根浸蘸含相应 中和剂的洗脱液
一根棉签,涂擦一手五指曲 面,从指跟开始至指端,每 指跟到指端往返转动涂擦2次, 一个手涂擦面积约30c㎡;另 一只手同样涂擦
四、使用中紫外线灯辐照度值测定法
方法:紫外线强度照射指示卡测定法
百度文库
物品准备:标尺、紫外线强度照射指示卡
放好标尺,开启紫外线灯
开启紫外线灯5min后,将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1m处, 有图案一面朝上
照射1min后,关掉紫外线灯,观察指示卡色块的颜色,进行结果 判定。将指示卡色块的颜色与“灯管强度90uW/CM² ”、“灯管 强度70uW/CM² ”标准色块进行比较,判定测定结果
田
根据待测房 间面积大小, 按GB15982 要求放置培 养皿
• 暴露时间 • 产房.导管房.新生儿.重症监护室.器官移植 房.血液病病区.烧伤病房:15min • 普通病房:5min
从里到外逐个打开培养皿盖,扣放于平皿旁 (注:手、头等严禁从培养基上方越过)
暴露规定时间后,按打开反方向盖上平皿盖,及时送 检
5、布点要求: 百级手术间,手术区(手术台两侧0.9m以内,两 端0.4m内)呈对角线,东南西北中5点,周边区 (距墙1m,每边2个)8点,共需13个培养皿;千 级手术间,手术区(手术台两侧0.6m以内,两端 0.4m以内)呈单角线3点,周边区(距1机,长边 2个,短边1个)6点,共需9个培养皿;万级手术 间:手术区(手术台4边,0.4m以内)呈对角线3点, 周边区(距离1m每边1个)4点,共需7个培养皿。 检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作 将一个对照皿打开后立即封盖,两个对照结果必 须为阴性,整个操作过程应符合无菌要求。
协助者点燃 酒精灯,用 燃烧法消毒 试管管口和 盖子
将注射器内尿液注入试管(避免污染)
协助者再次用燃烧法消毒试管管口和盖子, 随即盖紧试管(标本不得倒置,以免污染), 熄灭酒精灯,贴好检验单标签
清理好用物,手卫生,尿标本及时送检
注意事 项
1、采集指征:怀疑有尿路感染时,应考虑做尿培养。 2、采集时机:抗菌药物使用之前,留置导尿管者须 夹管30min以上。 3、采样部位:应选择尿管采样口或靠近尿道的导尿 管管壁。 4、采样部位的消毒:使用0.5%碘伏液棉球沿采样点 由内而外消毒,每个棉球只使用一次。 5、无菌物品需检查包装和有效期,确保合格。 6、采样过程中避免污染。