理化检测中的校准曲线的获得

理化检测中的校准曲线的获得

校准曲线

校准曲线包括标准曲线和工作曲线，标准曲线用标准溶液系列直接测量，被测样品没有经过预处理过程，这对于基体复杂的样品往往造成较大误差：而工作曲线所使用的标准溶液经过了与被测样品相同的前处理、测量等全过程，并且使标准溶液的基体组成与被测样品匹配。凡应用校准曲线的分析方法，都是在测得样品信号值后，从校准曲线上查得其含量(或浓度)。因此，绘制好的校准曲线，直接影响到样品分析结果的准确度。此外，校准曲线也确定了方法的测定范围。

1．校准曲线的绘制

①对以纯溶剂配制的标准溶液系列，应测量纯溶剂的空白值，作空白校正后再绘制标准曲线；

②标准溶液一般可直接测定，但如被测试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，标准溶液应和试样同样处理后再测定，在测定组成复杂的样品时中十分重要，此时应做工作曲线。

③校准曲线的斜率常随实验条件的改变而变动。因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对。方法精密度高时，相对差值不得大于5％；方法精密度低时，相对差值不得大于10％，否则应重新绘制校准曲线。

2．校准曲线的检验

①线性检验：即检验校准曲线的精密度。对于以4～6 个浓度值所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数r ≥0.9990 ，否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。通常至少作5个点（不包括空白）。

②截距检验：即检验校准曲线的准确度，在线性检验合格的基础上，对其进行线性回归，的出回归方程y=a+bx ，然后将所的截距a 与0 作t 检验，当取95％置信水平，经检验无显著性差异时，a 可作0处理，方程简化为y=bx ，移项得x=y b 。在线性范围内，可代替查阅校准曲线，直接将样品测量信号值经空白校正后，计算出试样浓度。当a 与0有显著性差异时，表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高，应找出原因并予以校正后，重新绘制校准曲线并经线性检验合格，再计算回归方程，经截距检验合格后投入使用。回归方程如不经上述检验和处理，就直接投入使用，必将给测定结果引入差值相当于截距d的系统误差。

③斜率检验：即检验分析方法的灵敏度，方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下，仅由于操作中的随机误差所导致的斜率变化不应超出一定的允许范围，此范围因分析方法的精度不同而异。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相对差值

小于5％，而原子吸收分光光度法则要求其相对差值小于10％等等。