AFP(甲胎蛋白)标准操作程序SOP文件

连续性低阳性患者1年内肝癌发生率比正常者高。对低阳性患者的随访有助于早期诊断。低阳性性患者同时伴有肝硬变及慢性肝炎时，肝癌的危险性更大。
孕妇血清/羊水AFP检测
反映胎儿状态。母体血清AFP异常增高时可能提示胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管缺损、无脑儿、脊柱裂等。
胎儿有先天性肾病综合症、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、及法乐四联症时，羊水中AFP可明显增高。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-03
AFP（甲胎蛋白）
版序：ABCD
页码：第4页，共4页
定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：
·一个月（同一批号试剂）
·7天（放置仪器上的同一试剂盒）
·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。
3）年龄因素：AFP对原发性肝癌的诊断率随患者年龄的增加而逐渐下降。对老年人AFP正常或轻微升高不能排除肝癌的可能性。
4）预后：原发性肝癌血清AFP水平与预后有关。肝癌切除后AFP能否正常或上升是判断预后的关键因素。
其他肿瘤
部分卵黄囊肿患者血清AFP上升；
胃癌、结肠癌等内胚层衍生的组织发生的癌，即使未发生肝转移也合成AFP；
·Elecsys2010分析仪
·Elecsys系统缓冲液（ProCell）
·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）
·Elecsys添加剂液（SysWash）
·Elecsys系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）
·Elecsys 2010反应杯（Assay Cup）
·Elecsys 2010吸样头（Assay Tip）
储存和稳定性：
存放在2-8度，切莫倒置。
未开封，可稳定至标明的保质期。
开封后，2－8度，12周；
放在Elecsys2010，8周；（室温20－25度；开盖时间累计不超过20小时）。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-03
AFP（甲胎蛋白）
版序：ABCD
页码：第3页，共4页
标本采集和准备：
原理：
采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。
·第1步：标本、生物素化的抗AFP单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗AFP单抗混匀，形成夹心复合物。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
ABห้องสมุดไป่ตู้D医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-03
AFP（甲胎蛋白）
版序：ABCD
页码：第1页，共4页
概述：
AFP是单一多聚体肽键糖蛋白，590个氨基酸，MW为70000D。含糖为4%。AFP的编码基因位于第4对染色体的4q11-q22区域。与血清白蛋白、维生素结合蛋白属同一基因家族。AFP主要在胎肝合成，其次是卵黄囊、胃肠道粘膜，肾脏也少量合成。胎儿于6周开始合成，12-15周达到高峰。出生后1-2年降至成人水平。
质控：
ElecsysAFP质控品（PreciControlCardiac）1和2或其它合适的质控品。
各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
计算：
对每一个标本，仪器会自动计算结果，单位是ng/ml或mg/L。
血清：按标准常规方法采集。
血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。（不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。确保标本不被肝素污染。）标本在2－8度可稳定24小时，-20度可稳定12个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。
正常成人肝细胞不产生AFP，而合成白蛋白。当肝细胞癌变后，AFP又重新表达。
临床应用：
原发性肝癌
1）AFP增高为原发性肝癌重要指标之一。特异性强、灵敏度高。AFP常用于原发性肝癌临床检查及普查。大部分患者呈持续性高水平升高，部分患者呈低水平增高。
2）AFP阴性并不排除原发性肝癌，据统计18%-20%的原发性肝癌患者血清AFP正常。此时需结合临床及其他检测指标来降低假阴性。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-03
AFP（甲胎蛋白）
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
血清AFP水平降低
孕妇血清AFP浓度降低可作为胎儿染色体异常的指标
原发性肝癌手术彻底切除后，血清中AFP浓度将迅速下降，1周内可降至正常水平。若增高则可能复发，这中增高比肝功能异常出现得更早。
持续性低阳性AFP与肝癌
检测范围：
稀释：
高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。
正常参考范围(Roche Elecsys系统)：
< 15ng/ml
建议各实验室建立自己的正常参考范围
而非内胚层衍生组织的癌，即使转移到肝脏也不合成AFP；
血清AFP是否上升与癌的原发部位有关，少数消化道肿瘤，如胃癌和胃癌肝转移，血清AFP增高；
与绒毛膜促性腺激素联合检测有助于生殖细胞肿瘤的分类与分期。
肝脏良性病变
肝脏良性病变时，AFP也可增高。病毒性肝炎患者AFP轻度增高，慢性肝炎患者约有20%AFP增高。暴发性肝炎患者AFP明显增高。病理检查时可发现AFP升高与肝细胞再生，同时肝脏受损有关系。
方法：
按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条阅读条形码，可以手工输入15位数字。
将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。
定标：
每批AFP试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CalSet定标液定标。
干扰因素：
该方法不受黄疸（胆红素<27mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.1g/dl）、脂血（脂质<1500mg/dl）和生物素<50ng/ml干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2000U/ml）。50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。AFP测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。
·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。含防腐剂。
R1：生物素化的抗AFP单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。含防腐剂。
R2：Ru(bpy)32＋标记的抗AFP单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。含防腐剂。
检测步骤：
提供的材料：
货号：100人份的Elecsys AFP试剂盒包含：
·M链霉亲和素包被的微粒
·R1生物素化的抗AFP抗体
·R2三联吡啶钌标记的抗AFP抗体
需要的材料（未提供）：
·ElecsysAFP定标液（CalSet）
·ElecsysAFP质控品（PreciControl Cardiac）
·Elecsys通用稀释液