AFP(甲胎蛋白)标准操作程序SOP文件

合集下载

甲胎蛋白( AFP )标准操作程序SOP文件

甲胎蛋白( AFP )标准操作程序SOP文件
2,室温(18--25 C)放置30分钟。
3,蒸溜水洗板5次。
4,加入酶标液150 ul,混和5秒。
5,室温放置30分钟,洗板5次。
6,加入已配好显色剂200 ul,室温放置20分钟。
7,加入终止液50 ul,450 nm比色。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-SOP-01-26
甲胎蛋白( AFP )
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性,应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前,应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤液出现结晶,可于37℃放置至溶解。洗涤要充分,各孔均需加满,防止孔口内游离酶不能洗净。
[原理]
本试剂盒采用针对不同抗原决定簇的双单克隆抗体制备成包被板和酶标记物,利用夹心法检测人血清或血浆中AFP含量,具有灵敏度高、特异性强等优点。
[试剂厂家]
Everlong Inc.
[试剂盒组成]
1、包被板条96孔4、AFP标准品:0,5,20,50,150,300 ng/ml
2.标本稀释液5.显色剂A,B
6、对AFP弱阳性,建议复查并定期动态观察。检测AFP为辅助诊断指标之一,确诊需结合临床等综合判断。
3、酶标记物溶液6.终止液
[标准品]
试剂盒配置的标准物
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
[标本的收集与处理]
标本为血清、肝素或EDTA抗凝血浆。
[校准方法]
利用标准品制备曲线。
[操作步骤]
1.加入20 ul标本及标准品后,再加入100 ul标本稀释液,混和10秒。

AFP操作SOP

AFP操作SOP

A4:甲胎蛋白(AFP)测定(免疫荧光干式定量法) A4.1首页内容XX医院检验科操作规程文件号:XXXX第1版共4页20XX年X月X日起实施本规程每2年复审一次复审日期:20XX年XX月XX日复审人:XXX(签名)规程编写者:XXX,XXX审批者:XXX批准日期:20XX年X月X日文件分发部门和/或个人:医务科:保管者:XXX(签名)院长办公室:保管者:XXX(签名)院档案室:保管者:XXX(签名)检验科:主任:XXX(签名)检验科XX检验室:XXX(签名)A4.2检测原理甲胎蛋白检测采用的是免疫荧光定量测试技术,干化学层析方法。

即将检测缓冲液和血液样本进行混合,缓冲液中的荧光标记抗AFP抗体和血液中的AFP抗原结合形成抗原抗体复合物,当该复合物被加入到反应板上并通过毛细管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上,被测试带上的抗AFP抗体所捕获。

因此,血液样本中的AFP越多,测试带上的复合物积聚得越多,荧光抗体的信号强度反映了被捕获的AFP数量,通过i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪检测出血液样本中AFP 的浓度。

i- CHROMA Reader免疫荧光分析仪默认检测结果单位为ng/mL。

A4.3标本要求A4.3.1 使用人的血清样本来进行测定。

A4.3.2 使用血清样本,将血液收集于一个不加抗凝剂的试管中,待其凝固后,尽快将血清吸出,以防止其溶血的发生。

A4.3.3 在测试前样本必须处在室温环境下,并且要保证样本均质性。

冷冻样本必须被彻底解冻并恢复至室温后方可使用。

避免反复冻融。

应尽量避免溶血情况的发生,如发现样本已经发生溶血,则应重新采集样本。

A4.4试剂A4.4.1 每个试剂均购自XX公司。

1) 反应板 25T/盒2) ID芯片 1个/盒3) 检测缓冲液 25管/盒A4.4.2 试剂准备从冰箱中取出检测缓冲液后需要在室温环境中放置30分钟,使其恢复至室温后方可使用。

反应板在密封情况下可存于4~30℃的环境下,在此环境下反应板可稳定18个月(如果存放在2~8℃环境中的反应板,需要在室温环境中放置30分钟,使其恢复至室温后方可使用)。

AFP(甲胎蛋白)标准操作程序SOP文件

AFP(甲胎蛋白)标准操作程序SOP文件
储存和稳定性:
存放在2-8度,切莫倒置。
未开封,可稳定至标明的保质期。
开封后,2-8度,12周;
放在Elecsys2010,8周;(室温20-25度;开盖时间累计不超过20小时)。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-02-03
AFP(甲胎蛋白)
版序:ABCD
页码:第3页,共4页
标本采集和准备:
·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正,由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
试剂:
M:链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖),1瓶,6.5ml。含防腐剂。
R1:生物素化的抗AFP单克隆抗体(灰盖),1瓶,10ml。含防腐剂。
R2:Ru(bpy)32+标记的抗AFP单克隆抗体(黑盖),1瓶,10ml。含防腐剂。
连续性低阳性患者1年内肝癌发生率比正常者高。对低阳性患者的随访有助于早期诊断。低阳性性患者同时伴有肝硬变及慢性肝炎时,肝癌的危险性更大。
孕妇血清/羊水AFP检测
反映胎儿状态。母体血清AFP异常增高时可能提示胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管缺损、无脑儿、脊柱裂等。
胎儿有先天性肾病综合症、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、及法乐四联症时,羊水中AFP可明显增高。
·Elecsys2010分析仪
·Elecsys系统缓冲液(ProCell)
·Elecsys测量池清洗液(CleanCell)
·Elecsys添加剂液(SysWash)
·Elecsys系统清洗液支架(Adapter for SysClean))
·Elecsys 2010反应杯(Assay Cup)
·Elecsys 2010吸样头(Assay Tip)

甲胎蛋白检测SOP文件(iFlash3000)

甲胎蛋白检测SOP文件(iFlash3000)

1.检验目的:本试剂盒用于定量测定人血清和(或)血浆中的甲胎蛋白。

2.检验原理:3.性能参数:3.1线性范围:用线性参考品进行测定,在1.0ng/mL ~1500.0ng/mL 范围内。

3.2最低检测限:≤1.0 ng/mL 。

3.3准确度:测量结果的相对偏差应在±10.0%范围内。

3.4重复性:变异系数(CV )应不大于10.0%。

3.5批间差:3个批号试剂之间的批间变异系数(CV )应不大于15.0%。

4.样品要求:4.1检测标本:血清和血浆(肝素锂、肝素钠、EDTA 和柠檬酸钠抗凝)是推荐使用的样本类型。

尚未验证其他抗凝剂能否适用。

4.2采集及处理:在进行离心操作前需让血清样本完全凝结(凝结时间不小于1小时)。

所有的待测样本在测试前均应进行离心操作。

顶部含脂质的离心样本,需转移澄清、无脂质的部分到新的样本管中。

在测试前,确保已去除了残余的纤维蛋白和细胞类物质。

应小心处理患者样本,避免交叉污染。

在测试前,确保患者样本、校准品、质控品均已平衡至环境温度(20-25°C )。

为避免蒸发可能带来的影响,样本和校准品应在上机后2小时内完成测试。

4.3样品储存:在室温(20-25°C )下,样本保存时间不得超过8小时。

若在8小时内无法完成测试,应将样本在2~8°C 冷藏保存。

在2~8°C 的保存情况下,标本保存时间不得超过3天。

长期保存,应将样本在-20°C 保存。

冷冻样本在融化后必须进行充分混匀。

样本冷冻次数不得超过1次。

5.设备和试剂:5.1仪器:iFlash 3000化学发光免疫分析仪。

5.2试剂:甲胎蛋白测定试剂盒(化学发光法);包装量:2×50人份/盒; 5.3储存要求:(1)储存:存放在2-8°C ,保持竖直向上。

(2)有效期:试剂瓶及校准品未开封存放于2-8°C:可稳定365天;试剂瓶使用后存放于2-8°C或在机存储:可稳定28天;校准品复溶后在-20°C保存:可稳定28天(仅可冻融一次)。

人甲胎蛋白(AFP)说明书

人甲胎蛋白(AFP)说明书

人甲胎蛋白(AFP)说明书人甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中甲胎蛋白(AFP)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白(AFP)水平。

用纯化的人甲胎蛋白(AFP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白(AFP),再与HRP标记的甲胎蛋白(AFP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白(AFP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白(AFP)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:45μg/L0.5ml×1瓶0.5m l×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

SOP文件:甲胎蛋白(AFP)1

SOP文件:甲胎蛋白(AFP)1

宁城县中蒙医院赤峰市精神病防治院检验科CLinLab.NCXZMYY(CFSJSBFZY)甲胎蛋白(AFP)标准操作程序编号:日期:版本:第页共页1、变动程序:由操作者提出,并经科主任审核。

2、范围:测定人血清、血浆、体液中的甲胎蛋白。

3、操作程序:使用仪器:日本东曹AIA-600II型全自动化学发光免疫分析仪生产厂商名称:日本东曹株式会社注册号:国食药监械(进)字2007第2400371号3.1、测定原理:本试剂盒使用的是高亲合性抗AFP抗体,并采用一步EIA夹心法定量检测人血清和体液中的AFP含量,可用于原发性肝细胞癌、肝炎、肝硬化、怀孕后期的诊断,治疗过程中的监视以及治疗后的效果评价3.2、试剂:E-test(TOSOH)Ⅱ(AFP)免疫反应试剂3.3 操作步骤3.3.1、在试剂Cup中加入100微升缓冲液和25微升标准品或稀释后的样品溶液,在磁石磁珠振动器上搅拌,在37℃下使抗原抗体反应进行10分钟3.3.2、用洗脱液冲洗试剂Cup,除去其中游离的酶联标记抗体和样品成分(B·F分离)。

3.3.3、加入基质液后,在磁石磁珠振动器上搅拌同时用荧光检测器检测荧光物质的荧光强度,激发波长363nm,荧光吸收波长447nm,并计算出荧光物质的生成速度。

3.3.4、根据标准液检测绘制的荧光物质生成速度标准曲线,计算出样品中AFP的浓度。

3.3.5、如果检测结果超过400ng/mL时,要用样品稀释液提高稀释倍数重新稀释,并按照(1-4)步骤检测。

3.4、结果判定3.4.1、应用E-test(TOSOH)Ⅱ(AFP)标准品试剂盒绘制标准曲线,从曲线中计算出样品中AFP的浓度。

3.4.2、分析225例健康者血清中AFP浓度的检测结果,所得的参考标准范围是0.9-7.6ng/ml。

其中,参考标准范围因为很容易受其他各种因素影响,所以希望各单位自行设定。

4、注意事项:1. 本品是一种体外诊断用试剂,禁止以其他目的使用。

AFP SOP

AFP SOP

1.目的规定AFP检测方法、程序、和相应操作。

2、范围适用于本中心的AFP检测3、职责3.1 实验室操作人员严格按实验操作要求执行;3.2 实验人员填写原始记录及有关的质量记录;3.3 授权签字人签发检验报告。

4、工作程序4.1 样品采集、送检和保存:抽取静脉血,分离血清或血浆,2-8℃送检,-20℃低温保存。

4.2 设备和材料4.2.1 酶标仪、洗板机、恒温孵箱4.2.2 精确移液器:单通道可调5ul—50ul、50ul—250ul,专用试剂槽,超纯净水4.3 甲胎蛋白定量检测试剂盒必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂,使用省CDC、国家CDC推荐的试剂。

使用前将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30min。

4.3.1 洗涤液配制用蒸馏水按试剂盒使用说明书稀释浓缩洗液,注明配制时间,配制好的洗板液封闭保存在2-8℃,可使用2周。

5、检测流程5.1 设定洗板程序:在全自动洗板机上编程,设定AFP检测洗板程序。

设定参数:每孔加洗液350ul,洗液在孔内停留20s , 然后将洗液吸干,重复5次。

5.2 实验操作(以试剂盒说明书为准)5.2.1 从试剂盒中取出酶联板,取出一定量的包被孔编号,设1个空白对照孔,其余孔用微量移液器依次加入50ul标准品及待测样品,随即加入酶结合物50ul,轻轻振荡混匀。

5.2.2 封板,置37℃孵育30分钟。

5.2.3 手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置20秒,甩干,重复5次后拍干。

洗板机洗板:选择洗涤5次程序洗板后拍干。

5.2.4 每孔加底物50ul,立即加入显色剂50ul,充分混匀,置37℃避光反应5分钟。

5.2.5 每孔加终止液50ul,终止反应。

5.3 用酶标仪读数,数值取波长450nm,先用空白孔校零,然后在终止反应后的10分钟内读取各孔OD值。

6.检测结果6.1 打开酶标仪,进行自检,确认酶标仪处在良好运行状态;6.2 对微孔位置确认,对酶标板编号并登记记录;6.3 调出读板程序,读板;6.4 读板并打印结果。

AFP作业指导书2.0

AFP作业指导书2.0

甲胎蛋白(AFP)检测作业指导书1.检验目的AFP来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道。

70-95%的原发性肝癌患者的AFP升高,越是晚期,AFP含量越高。

但尚未发现AFP含量与肿瘤大小、恶性程度等有关系。

AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌。

在转移性肝癌中,AFP一般低于350-400 IU/ml。

AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者。

不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。

孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂,无脑症,食管atresia或多胎,AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down's综合征的危险性2.检验原理:采用双抗体夹心法原理,整个过程18分钟完成。

·第1步:10μl标本、生物素化的抗AFP单克隆抗体和钌(Ru)标记的抗AFP单克隆抗体混匀,形成夹心复合物。

·第2步:加入链霉亲和素包被的微粒,让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

·第3步:反应混和液吸到测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质被清洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。

·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过2点定标校正,3.性能参数:3.1 线性范围:线性检测结果见AFP方法学验证记录。

3.2精密度:批内n=20,批间n=20。

3.3准确度: 检测结果见临检中心/江苏省室间质评结果回报记录。

3.4 可报告范围: 0.605-60500 ng/ml,最大稀释倍数为50倍。

3.5 测量区间:血清/血浆: 0.605-1210ng/ml。

高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。

稀释后的标本AFP含量必须高于20IU/ml(24ng/ml)。

如用手工稀释,结果应乘上稀释倍数。

如果是机器自动稀释,机器会自动计算结果。

3.6 灵敏度:0.605ng/ml3.7特异性:无4. 样本要求4.1血清:按标准常规方法采集。

甲胎蛋白操作规程sop

甲胎蛋白操作规程sop

甲胎蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请:甲胎蛋白测定(缩写AFP);组合项目申请:肿瘤标志物检查。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆标本,用肝或EDTA抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血清(浆), 避免溶血。

离心必须达到4000rpm×15min,离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定2d,在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。

3 方法原理甲胎蛋白测定采用双位点加心化学发光免疫分析法,其检测原理来如下:第一步:将标本与包被着AFP单克隆抗体的超顺磁性磁珠和另外一种小鼠AFP 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中,经过孵化,标本中的AFP和包被在磁珠上的AFP抗体结合,同时AFP抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中同一AFP 上不同的抗原结合位点结合。

在反应管内孵化完成后,结合在固相上的物质将之与一个磁场内被吸住,洗去未结合的物质。

肿瘤免疫学检查操作规程

肿瘤免疫学检查操作规程

肿瘤免疫学检查操作规程
甲胎蛋白(AFP)测定
【方法】
ELISA法。

【试剂】
本试验有商品试剂盒。

【操作】
按试剂说明书进行。

【结果判断】
1.定性:显色为阳性,无色为阴性;
2.定量:酶标仪测定,测492nm波长吸光度,查标准曲线(吸光度为纵坐标,AFP含量为横坐标),得出标本中AFP含量,乘以稀释倍数后发出定量报告。

【附注】
操作中有关要求可参考乙肝两对半试验。

定量的试剂目前以进口的ELISA法AFP测定试剂盒为佳。

此外,也可用放射免疫(双抗体)法对AFP进行定量测定,操作按市售放免
试剂盒说明书进行。

自身抗体──类风湿因子(RF)测定
类风湿性关节炎和红斑狼疮患者的血清中常存在高滴度的RF,国内普通使用胶乳凝集试验进行测定。

此外,也可用双抗原夹心ELISA法测定,其测定的操作程序按市售试剂盒进行。

【方法】
胶乳凝集试验。

【试剂】
市售试剂盒。

【操作】
按说明书进行。

【结果判断】
按说明书要求。

【附注】
1.每次试验必须设阴、阳对照;
2.RF胶乳试剂应于4~10℃保存,但不应冰冻贮藏。

使用前要摇匀,并使试剂温度与室温平衡;
3.本试验测得的RF主要是IgM型RF。

关于测定RF的IgG和IgA型的临床意义目前尚无明确定论。

医院检验中心AFPCEAFerBROVGIPSAfPSA测定标准操作程序

医院检验中心AFPCEAFerBROVGIPSAfPSA测定标准操作程序

医院检验中心AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、fPSA 测定标准操作程序(SOP)1.该SOP变动程序本SOP因试剂说明、仪器操作程序的修改或其他原因所致的改动,可由化学发光免疫测定技术主管修改,并报经科主任批准签字。

2.操作方法(1)样品收集和处理样品类型:血清样品量: AFP至少200μl血清(下同),AFP CEA Fer GI 300μl,PSA fPSA 300μl, 肿瘤标志物全套 600μl。

保存方法:血清室温下放置不超过8小时,2-8℃冷藏不超过48小时,超过应在-20℃以下冷冻。

样品只能冷冻1次,且复融后应彻底混匀。

(2)试剂 (试剂、定标液、质控品均AXSYM由公司提供)⑴ AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA液相、固相试剂⑵辅助试剂:AFP:AFP冲洗试剂,CEA:冲洗试剂1,BR:BR预处理试剂。

⑶非必需试剂:稀释液1、2、8,CEA稀释液,GI稀释液。

保存方法:液相、固相试剂在2-8℃至失效期,在室温下累计不超过40小时。

(3)定标当使用新批号的试剂时需先定标,详见附表。

事先将标准曲线条码和定标液浓度条码扫描入仪器。

项目 AFP CEA Fer BR OV GI PSA fPSA定标液 D D C G X W D fPSA (4)质控定标后必须做质控,判断样品测值是否准确也可做质控。

使用Tumor Marker Plus 1、2质控物,事先将质控物浓度输入仪器。

(5)上机检测参见AXSYM仪器标准操作程序。

3.参考值AFP 0-20.0μg/LCEA 0-5.0μg/LFer 男性22-322μg/L, 女性10-291μg/L BR 0-35.0U/mlOV 3.4-68.6 U/mlGI 0-37.0U/mlPSA 0-4.0μg/LfPSA 0-2.5μg/LfPSA/PSA 0.16-1.01.相关技术指标5.本SOP不尽之处请详阅相关项目试剂说明书。

ELISA罚测定甲胎蛋白(AFP)操作规程

ELISA罚测定甲胎蛋白(AFP)操作规程

ELISA罚测定甲胎蛋白(AFP)操作规程1.检验目的检测血清AFP主要是用于原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤的诊断或或鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估,另外还可作为唐氏综合征、早期胎儿先天性畸形及肝癌高发区的普查指标。

2.方法原理采用ELISA双抗体夹心法:向抗AFP抗体包被的聚苯乙烯反应板微孔内加入待检标本,再加酶标记抗AFP抗体,加入酶底物显色,用终止液终止反应,测定吸光度值,测定光密度,查标准曲线,计算待测标本中AFP含量。

3.性能指标此方法快速简便、特异性强、检测灵敏度度0.5ng/ml。

4.标本收集4.1标本类型:静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本(抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠、ACD、CPDA-1或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯,使用的比例以厂家推荐为准);其他体液如尿液、唾液、精液、羊水、胸水、腹水、乳汁等体液可以作为检测标本,但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。

4.2标本留取:以空腹为宜,收到标本后最好立即离心留取血清或血浆(凝固血应待其充分凝固后收集血清),不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝,使用肝素治疗的病人宜在肝素治疗前抽血。

4.3标本保存:留取的标本最好在3小时内检测,不能立即检测的应放置于2-8℃最长达14天(可以含有凝块但要密闭以防蒸发),或者-10℃最长达14天(不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞)。

4.4标本容器:盛放标本的容器必须为洁净的一次性真空采血管、玻璃试管、一次性的不同规格的塑料离心管4.5标本外送:如涉及到需要外送的标本,必须以规定的容器(0.5ml塑料离心管)存放并密封,并根据邮寄规则和要求进行包装,运送时还要放入冰袋(2-8℃)或干冰(-10℃)由专人运送至指定地点指定接收人。

4.6拒收标本:凡与4.1-4.5所述内容不符的标本,检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因,并提出解决的方案或建议。

甲胎蛋白( AFP )标准操作程序SOP文件

甲胎蛋白( AFP )标准操作程序SOP文件
版序:2003-1
页码:第2页,共2页
[结果判定]
1、酶标仪检测(选择波长450nm):每孔终止液1滴后,用空白孔校零,测定各孔OD值。
2、计算:同T3。
[质量控制]
每批检测同步进行标准和质控品测定,绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。
[正常参考值]
参考值:健康成年人≤25ng/ml。
[临床意义]
6、对AFP弱阳性,建议复查并定期动态观察。检测AFP为辅助诊断指标之一,确诊需结合临床等综合判断。
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性,应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前,应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤液出现结晶,可于37℃放置至溶解。洗涤要充分,各孔均需加满,防止孔口内游离酶不能洗净。
(2)肝炎:急性肝炎、慢性肝炎活动期、肝硬变患者AFP增高,一般不超过300μg/L。普通肝炎AFP增高的时期不长,如转氨酶(ALT)恢复正常随着肝细胞的修复,AFP逐渐减少到正常水平。
(3)其他:先天性总胆管闭锁,开放性骨脊裂的胎儿,生殖腺胚胎性肿瘤等疾病AFP有所增高。
(4)正常孕妇在妊娠3-5个月时AFP达最高峰(一般不超过200μg/L),以后逐步下降,到胎儿出生后恢复正常。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-SOP-01-25
甲胎蛋白( AFP )AFP是哺乳类动物胎胚期肝细胞内合成的糖蛋白,属于肿瘤相关抗原,分子量65000~70000。血中AFP含量升高,有生理性(如新生儿、孕妇)和病理性(如原发性肝细胞癌、畸胎瘤、新生儿肝炎等)两种。检测血中AFP含量,为肝癌的人群普查、早期诊断、疗效判断、预测复发提供了一种满意的手段。正常人AFP含量≤20ng/ml。

甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书

甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书

甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书
AEP(HY-10011)
(包被试管法)
测定原理:采用双抗体夹心法测定样品中AFP的浓度。

测定盒组成:
1、抗AFP多抗包被管:(2×50管)包被管置于2-8℃可保存至有效期。

2、 125I抗AFP单抗:1瓶(红色,液体),每瓶不少于370 kBq (10μCi)
3、AFP系列标准品六瓶:S0、S1、S2、S3、S4、S5,直接使用,其浓度值分别为:0、4、15、50、150、500 ng/ml .
血液样品的收集与处理:
采血后立刻分离出血清用于分析,在24小时之内使用放在2~8℃中,长期存放应保存在-20℃,并避免反复冻融。

甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书阳性血清在测量时要取出20 μl用生理盐水 1.0ml 稀释(即 51 倍稀释)。

分析过程:将包被管上标明标准、质控或样品,并按下表加样。

单位:μl
数据处理:以各标准管的浓度为X轴,各标准管的放射性计数B(已扣除NSB)为Y轴,用免疫放射(IRMA)分析程序的四参数方式回归,求未知样品的AFP浓度。

作过稀释的样品所测浓度还要乘以51倍。

临床参考值:
正常值:小于10 ng/ml
建议各实验室建立自己的临床测定值。

注意事项:
1、所有试剂于2-8℃保存,在有效期前使用,使用前须平衡到室温;
2、试剂盒不要长时间置于室温下,以免影响其稳定性;
3、打开包装前将试管平衡到室温,未使用的试管放入袋中重新封好并保存在2-8℃;
4、同一次实验不要使用不同批次的包被管。

甲胎蛋白 AFP 操作规程

甲胎蛋白 AFP 操作规程

甲胎蛋白 AFP 操作规程一、测定原理两位点的免疫发光法(夹心法原理),两个不同的高度特异的单克隆抗体分别用于固相的(磁颗粒)包被及示踪物。

二、试剂组成2.3ml磁颗粒磁颗粒表面包被单克隆抗体1.0ml定标液,低1.0ml定标液,高23ml示踪物溶液:标记上异鲁米那的单克隆抗体25ml缓冲液;25ml稀释液三、操作步骤1.按仪器操作要求准备好仪器。

2.试剂准备在揭开密封纸之前,先轻轻地水平摇晃试剂整盒(为了防止泡沫形成!)。

揭开密封纸,来回地转动磁颗粒区的小轮,直到悬浮液的颜色变成棕色。

该步骤使磁颗粒重新悬浮。

将试剂盒放入仪器试剂区,等待30分钟。

在此期间,磁颗粒自动地被搅拌并完全地重新悬浮。

3.样本准备按标准程序采集离心样本,在2-8℃下可保存24小时,如需保存更长时期:冷冻至–20℃,避免反复冰冻和解冻,被保存的样本在使用之前应被彻底地混匀。

4.定标通过测量定标物,预先定义的主曲线上的每个定标点将被调整(重新定标)为一个新的、仪器特异的测量水平。

有下列情况需重新定标:每改变一次批号(指试剂整盒或者激发试剂而言);每过两星期或每使用一个新的试剂盒;LIAISON分析仪的每次维护之后;当质控值不在期望范围之内时,房间温度的变化过大时。

5.编写标本号,选定项目AFP,放置标本,按下开始工作键。

6.结果的计算LIAISON分析仪借助于由主曲线两点定标而得到的一条定标曲线,自动地计算每一个样本的AFP浓度,结果以IU/ml表示。

1 ng AFP = 0.83 IU AFP。

五.测量范围LIAISON分析仪AFP试剂能准确测量的浓度值在0.2 – 1000 IU/ml 之间。

六.参考范围1.血清中的AFP值﹤20ng/ml。

2.怀孕期间,母体血液中的AFP值不断升高,在第28周与32 周之间达到最大值,第32 周之后再次下降。

七.干扰物质该方法不受黄疸(胆红素<12.5mg/dl)、溶血(血红蛋白<16mg/dl)、脂血(甘油三酯<12.5mg/ml)等干扰八.临床意义AFP来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道。

甲胎蛋白(AFP)标准操作规程

甲胎蛋白(AFP)标准操作规程

甲胎蛋白(AFP)标准操作规程1.【实验目的】为了保证癌胚抗原(CEA)可测定结果的准确性,以及可靠性。

2.【职责】2.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。

2.2 本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

3.【样品类型及实验前准备】3.1 样本准备:3.1.1人血清,采集在肝素(钠或锂)的血浆或羊水样本可以在ARCHITECT AFP检测中使用。

其它抗凝血剂没有对是否适用于ARCHITECT AFP检测进行验证。

按照生产商有关血清或血浆采集管的处理指导进行。

3.1.2羊水必须在无菌的条件下,由适当的经过训练的人员,采取对胎儿以及母体安全相关的适当预防来进行采集。

明显血污的样本应该依据使用Kleihauer – Betke技术检查胎儿血液细胞的存在,和/或依据电泳,免疫电泳或其他可用技术检查胎儿血色素。

为胎儿血液污染的羊水样本可能出现异常高AFP值,这可能导致检测结果的曲解。

3.1.3血清或血浆样本应该进行无菌采集,这是一种避免溶血的方式。

对于母体血清或血浆分析,血液样本应该在羊水诊断开始前进行采集。

有证据表明,在羊水诊断后,在母体的血清或血浆中,出现了AFP的水平增加。

3.1.4如果检测时间超过24小时,则将血清或血浆从凝集物,血清分离器或红细胞中取出。

检测前,样品可以在2-8℃下最长7天时间。

如果检测用时超过7天,则将样品贮存于-20℃或更低温度下。

为了对结果进行优化,样本应该无纤维,血红细胞,或其他微粒物质。

使用前,对含有纤维,血红细胞,或其他微粒物质的样本进行离心分离,以确保结果的一致性。

3.2 患者准备:实验前正常饮食,晨起空腹,安静状态下抽取静脉血,条件特殊情况下可空腹抽血检测。

3.3 容器,添加剂类型:血清(包括在血清分离器管中采集的血清),血浆(EDTA三钾、肝素锂、肝素钠),使用玻璃管或塑料管分离样本。

人甲胎蛋白(AFP) 说明书

人甲胎蛋白(AFP) 说明书

人甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中甲胎蛋白(AFP)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白(AFP)水平。

用纯化的人甲胎蛋白(AFP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白(AFP),再与HRP标记的甲胎蛋白(AFP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白(AFP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白(AFP)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:45μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

甲胎蛋白(化学发光法)检测操作规程

甲胎蛋白(化学发光法)检测操作规程

甲胎蛋白检测操作规程【检验原理】产品采用双抗体来心法定量测定人血清中的甲胎蛋白(AFP)的含量。

在微孔版的孔内先包被了识别抗AFP的单克隆抗体,用辣根过氧化酶标记另一株与之配对的单克隆抗体。

待测孕妇血清样本中的AFP与包被的和酶标记的两株单克隆抗体形成夹心抗原抗体反应。

再加上发光底物,用微孔板发光分析仪读取发光数值,发光值与待测血清中AFP含量成正比。

【储存条件及有效期】试剂盒于2-8℃避光贮存,不得冻存,有效为12个月。

开封有效期:板条开封后2-8C存放效期为3个月,其他液体组份同成品试剂盒效期。

【检测仪器及试剂】仪器:重庆科斯迈全自动化学发光免疫分析仪试剂:潍坊康华甲胎蛋白检测试剂盒(化学发光法)【样本要求】抽取静脉血3mL,置一次性采血管内,充分离心,吸取血清,不应有溶血及细胞颗粒:血清标本4℃存放最好不要超过3天,若不能及时检测,应-20℃冻存,检测时应将标本融化后混合均匀,并避免反复冻融。

【检验方法】手工操作步骤:1、将在冷藏环境中贮存的试剂室温平衡30分钟2、,将浓缩洗涤液按1:40的比例稀释,摇匀备用,作为应用洗涤液3、根据AFP参考品、质控品及待测标本确定所需孔数。

4、直接取AFP参考品、质控品及标本各25微升加入相应孔内,再每孔加入50 微升AFP酶结合物,用振荡器振荡30秒钟(此步非常重要),盖上封板膜,置37℃温浴1小时。

5、取出,用应用洗涤液洗涤5次,洗涤时每孔注满洗涤液,停留10秒后吸尽拍干。

6、根据使用量,将底物液A、B按1:1混匀,现用现配。

每孔加入50微升,用振荡器振荡20秒钟,设定每孔测量时间为1秒,于10-20分钟内测定结果。

仪器操作步骤:按照重庆科斯迈全自动化学发光免疫分析仪操作规程检测。

【参考区间】测定正常人血清样本并结合参考文献的报道,建议正常参考值范围如下:正常人血清中AFP浓度<20ng/mL若用于产前筛查,应结合相应的风险分析评估软件使用。

由于地区及人群的差异,以上范围仅供参考,各实验室在长期实践中应建立本实验室自己的正常参考值范围。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
连续性低阳性患者1年内肝癌发生率比正常者高。对低阳性患者的随访有助于早期诊断。低阳性性患者同时伴有肝硬变及慢性肝炎时,肝癌的危险性更大。
孕妇血清/羊水AFP检测
反映胎儿状态。母体血清AFP异常增高时可能提示胎儿患低氧症、宫内死亡、遗传缺陷、先天性神经管缺损、无脑儿、脊柱裂等。
胎儿有先天性肾病综合症、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、及法乐四联症时,羊水中AFP可明显增高。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-02-03
AFP(甲胎蛋白)
版序:ABCD
页码:第4页,共4页
定标频率:每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次,如再次标定即根据下列要求:
·一个月(同一批号试剂)
·7天(放置仪器上的同一试剂盒)
·根据要求进行标定:如质控结果超出范围时。
3)年龄因素:AFP对原发性肝癌的诊断率随患者年龄的增加而逐渐下降。对老年人AFP正常或轻微升高不能排除肝癌的可能性。
4)预后:原发性肝癌血清AFP水平与预后有关。肝癌切除后AFP能否正常或上升是判断预后的关键因素。
其他肿瘤
部分卵黄囊肿患者血清AFP上升;
胃癌、结肠癌等内胚层衍生的组织发生的癌,即使未发生肝转移也合成AFP;
·Elecsys2010分析仪
·Elecsys系统缓冲液(ProCell)
·Elecsys测量池清洗液(CleanCell)
·Elecsys添加剂液(SysWash)
·Elecsys系统清洗液支架(Adapter for SysClean))
·Elecsys 2010反应杯(Assay Cup)
·Elecsys 2010吸样头(Assay Tip)
储存和稳定性:
存放在2-8度,切莫倒置。
未开封,可稳定至标明的保质期。
开封后,2-8度,12周;
放在Elecsys2010,8周;(室温20-25度;开盖时间累计不超过20小时)。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-02-03
AFP(甲胎蛋白)
版序:ABCD
页码:第3页,共4页
标本采集和准备:
原理:
采用双抗体夹心法,整个过程18分钟完成。
·第1步:标本、生物素化的抗AFP单克隆抗体和钌(Ru)标记的抗AFP单抗混匀,形成夹心复合物。
·第2步:加入链霉亲和素包被的微粒,让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步:反应混和液吸到测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质被清洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。
ABห้องสมุดไป่ตู้D医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-02-03
AFP(甲胎蛋白)
版序:ABCD
页码:第1页,共4页
概述:
AFP是单一多聚体肽键糖蛋白,590个氨基酸,MW为70000D。含糖为4%。AFP的编码基因位于第4对染色体的4q11-q22区域。与血清白蛋白、维生素结合蛋白属同一基因家族。AFP主要在胎肝合成,其次是卵黄囊、胃肠道粘膜,肾脏也少量合成。胎儿于6周开始合成,12-15周达到高峰。出生后1-2年降至成人水平。
质控:
ElecsysAFP质控品(PreciControlCardiac)1和2或其它合适的质控品。
各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内,如出现质控值落在范围以外,应采取校正措施。
计算:
对每一个标本,仪器会自动计算结果,单位是ng/ml或mg/L。
血清:按标准常规方法采集。
血浆:EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。(不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。确保标本不被肝素污染。)标本在2-8度可稳定24小时,-20度可稳定12个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡;放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。
正常成人肝细胞不产生AFP,而合成白蛋白。当肝细胞癌变后,AFP又重新表达。
临床应用:
原发性肝癌
1)AFP增高为原发性肝癌重要指标之一。特异性强、灵敏度高。AFP常用于原发性肝癌临床检查及普查。大部分患者呈持续性高水平升高,部分患者呈低水平增高。
2)AFP阴性并不排除原发性肝癌,据统计18%-20%的原发性肝癌患者血清AFP正常。此时需结合临床及其他检测指标来降低假阴性。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号:
ABCD-02-03
AFP(甲胎蛋白)
版序:ABCD
页码:第2页,共4页
血清AFP水平降低
孕妇血清AFP浓度降低可作为胎儿染色体异常的指标
原发性肝癌手术彻底切除后,血清中AFP浓度将迅速下降,1周内可降至正常水平。若增高则可能复发,这中增高比肝功能异常出现得更早。
持续性低阳性AFP与肝癌
检测范围:
稀释:
高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。如用手工稀释,结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释,机器会自动计算结果。
正常参考范围(Roche Elecsys系统):
< 15ng/ml
建议各实验室建立自己的正常参考范围
而非内胚层衍生组织的癌,即使转移到肝脏也不合成AFP;
血清AFP是否上升与癌的原发部位有关,少数消化道肿瘤,如胃癌和胃癌肝转移,血清AFP增高;
与绒毛膜促性腺激素联合检测有助于生殖细胞肿瘤的分类与分期。
肝脏良性病变
肝脏良性病变时,AFP也可增高。病毒性肝炎患者AFP轻度增高,慢性肝炎患者约有20%AFP增高。暴发性肝炎患者AFP明显增高。病理检查时可发现AFP升高与肝细胞再生,同时肝脏受损有关系。
方法:
按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数,不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条阅读条形码,可以手工输入15位数字。
将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上,避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。
定标:
每批AFP试剂有一条形码标签,含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CalSet定标液定标。
干扰因素:
该方法不受黄疸(胆红素<27mg/dl)、溶血(血红蛋白<1.1g/dl)、脂血(脂质<1500mg/dl)和生物素<50ng/ml干扰。接受高剂量生物素(>5mg/天)治疗的病人,至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰(2000U/ml)。50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。AFP测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。
·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正,由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
试剂:
M:链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖),1瓶,6.5ml。含防腐剂。
R1:生物素化的抗AFP单克隆抗体(灰盖),1瓶,10ml。含防腐剂。
R2:Ru(bpy)32+标记的抗AFP单克隆抗体(黑盖),1瓶,10ml。含防腐剂。
检测步骤:
提供的材料:
货号:100人份的Elecsys AFP试剂盒包含:
·M链霉亲和素包被的微粒
·R1生物素化的抗AFP抗体
·R2三联吡啶钌标记的抗AFP抗体
需要的材料(未提供):
·ElecsysAFP定标液(CalSet)
·ElecsysAFP质控品(PreciControl Cardiac)
·Elecsys通用稀释液
相关文档
最新文档