蛋白质分子量标准(高)使用说明书

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06 生物化学实验--SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量

SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量【目的】1 ．掌握 SDS-PAGE 测定蛋白质分子量的操作方法。

2 ．熟悉 SDS-PAGE 测定蛋白质分子量的原理。

【原理】带电粒子在电场中向着与其自身电荷方向相反的电极移动，称为电泳。

不同蛋白质分子具有不同的大小、形状，在一定的 pH 环境中带有不同的电荷量，因而在一定的电场中所受的电场引力及介质对其的阻力不同，二者的作用结果使不同蛋白质分子在介质中以不同的速率移动，经过一定的时间后得以分离，这就是电泳分离蛋白质及核酸生物大分子的基本原理。

聚丙烯酰胺凝胶电泳就是以聚丙烯酰胺凝胶作为电泳介质的电泳。

在电泳时，蛋白质在介质中的移动速率与其分子的大小，形状和所带的电荷量有关，为了使其只与蛋白质分子的大小有关，从而利用蛋白质在介质中的迁移率来测定蛋白质的分子量，就需要消除蛋白质分子的形状和所带电荷量的不同对迁移率的影响或减小到可忽略不计的程度。

SDS 是十二烷基硫酸钠（ sAium dAecyl sulfate ）的简称，它是一种阴离子表面活性剂，加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开，并结合到蛋白质分子上（在一定条件下，大多数蛋白质与 SDS 的结合比为 1.4 g SDS/ 1 g 蛋白质），使各种蛋白质 -SDS 复合物都带上相同密度的负电荷，其数量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量，从而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差别，使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素，于是根据标准蛋白质分子量的对数和迁移率所作的标准曲线，可求得未知物的分子量。

SDS 与蛋白质结合后引起蛋白质构象的改变。

SDS- 蛋白质复合物的流体力学和光学性质表明，它们在水溶液中的形状，近似于雪茄烟形状的长椭园棒，不同蛋白质的 SDS 复合物的短轴长度都一样（约为 18? ，即 1.8 nm ），而长轴则随蛋白质分子量成正比的变化。

说明， SDS 和蛋白质的结合所形成的 SDS- 蛋白质复合物消除了由于天然蛋白质形状不同而对电泳迁移率的影响。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量

精选2021版课件
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5.“SDS — 聚丙稀酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量”一实验的开设达到了与国内同类院校相当的较高水平。
对本科生的实验教学、本科生的论文设计、研究生的高级生化实验等方面都充实了内容。
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8
（二）特点：
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基磺酸钠）。
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蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物。
蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，因此在进行电泳时，
电泳分类：移动界面电泳、区带电泳等。
区带电泳是在半固相或胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液，然后加电场，分子在支持介质上或支持介质中迁移。
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区带电泳使用不同的支持介质，有
滤纸、纤维素粉、聚氯乙烯树脂、淀粉凝胶、琼脂凝胶、醋酸纤维素膜，现在则多用聚丙烯酰胺（PAGE）和琼脂糖凝胶。
球蛋白（去年完成的基金项目）
（三）纯化免疫球蛋白G DEAE-离子交换纤维素法纯化免疫球蛋白G子量（连续四个单项实验）。
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（1）制胶（简单叙述）（双层胶，摸索胶浓度）
A.将玻璃板用蒸馏水洗净晾干, 准备2个干净的锥形瓶。把玻璃板在灌胶支架上固定好。
开封后溶于200µl蒸馏水，置-20℃保存，使用前室温融化，沸水浴中加热3-5分钟后上样。
。样品1：称3mg样品1，加2 ml蒸馏水溶解

Amicon Ultra 超滤离心管说明书

本说明仅供参考超滤离心管蛋白浓缩和换Buffer 通常会使用到超滤管，有多种不同MWCO 和处理量的型号可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。

超滤离心管具有快速超滤功能，能够达到较高的浓缩系数，易于从稀释液和复杂的样本组合中进行浓缩回收。

其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率（通常大于90%的初始溶液），并能进行多倍浓缩。

竖式设计将溶质极化之后造成的滤膜结垢降至最低，过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本的损失。

浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集，而超滤出液则收集到所提供的离心管中。

该装置可在离心机中进行。

装置未经消毒，只供一次使用（但是国内众多科研院所及科研单位的老师，都在重复使用，毕竟使用一次就扔掉太浪费。

）超滤离心管储存在15-30°C 下，保质期自生产之日起3年。

整套装置包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管，如右图所示：一、使用方法：1预清洗：超滤离心管的过滤薄膜含有微量甘油。

如果此材料干扰分析，可用缓冲液或超纯水预清洗。

如果干扰仍然存在，用0.1M NaOH 清洗，然后用缓冲液或超纯水再次清洗后甩干。

注意：Amicon®Ultra 超滤离心管中的滤膜一旦润湿后应避免重新干燥。

若在预清洗后没有立即使用该装置，则应保持滤膜湿润，直到使用该装置为止。

瑞达恒辉恒辉恒辉瑞达恒辉瑞达瑞达恒辉2.向超滤离心管加入不超过处理量的样品。

3.将盖好盖子的超滤离心管放入离心转子中。

4.适当转速离心。

（关于旋转时间，请参见图1和图2以及表1和表2）5.如要回收浓缩后的样品，在超滤离心管底部插入一个移液管，然后左右摇摆着吸取样本，以确保完全回收。

超滤液可以保存在离心管中。

二、除盐或渗滤举例：除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。

可以在超滤离心管中，通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式，去除盐分或更换缓冲液。

P0061蛋白质分子量标准

蛋白质分子量标准产品简介：碧云天生产的蛋白质分子量标准(Protein Molecular Weight Marker)包含了从14.4 kD到116 kD共7种纯化的蛋白质(见右图)，适合作为SDS-PAGE的蛋白质分子量标准。

本蛋白质分子量标准已经配制在1X的SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用。

根据上样孔的大小，本蛋白质分子量标准通常每次上样5-10微升，就可以用染色观察到非常清楚的蛋白条带。

保存条件：-20℃保存，一年有效。

注意事项：本蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制，不适用于非变性PAGE胶。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1. 将蛋白质分子量标准置于沸水浴或100℃加热3-5分钟，以充分变性蛋白。

2. 在上样时根据加样孔的大小每孔上样5-10微升蛋白质分子量标准。

3. 通常电泳至蓝色的溴酚蓝基本上到达凝胶的底部时停止电泳。

4. SDS-PAGE胶用常规考马斯亮蓝染色，或用碧云天生产的考马斯亮蓝快速染色液(P0017)染色后，对于蛋白质分子量标准可以观察到如右图的清晰条带。

5. 如果采用银染方法检测蛋白条带，上样量应该适当减少。

使用本产品的文献：1.Lin X, Zhao J, Qian J, Mao Y, Pan J, Li L, Peng H, Luo Y, Yan J.Identification of immunodominant B- and T-cell combined epitopes in outer membrane lipoproteinsLipL32 and LipL21 of Leptospira interrogans.Clin Vaccine Immunol. 2010 May;17(5):778-83.2. Lin X, Sun A, Ruan P, Zhang Z, Yan J.Characterization of conserved combined T and B cell epitopes in Leptospira interrogans majorouter membrane proteins OmpL1 and LipL41.BMC Microbiol. 2011 Jan 26;11(1):21.3. Yang Y, Xia T, Zhi W, Wei L, Weng J, Zhang C, Li XPromotion of skin regeneration in diabetic rats by electrospun core-sheath fibers loaded with basicfibroblast growth factor.Biomaterials. 2011 Jun;32(18):4243-54.4. Yang Y, Xia T, Chen F, Wei W, Liu C, He S, Li X.Electrospun fibers with plasmid bFGF polyplex loadings promote skin wound healing in diabeticrats.Mol Pharm. 2012 Jan 1;9(1):48-58.5. Sun Q, Xiong J, Lu J, Xu S, Li Y, Zhong XP, Gao GK, Liu HQ.Secretory TAT-peptide-mediated protein transduction of LIF receptor α-chain distal cytoplasmicmotifs into human myeloid HL-60 cells.Braz J Med Biol Res. 2012 Jun 21..6. He S, Xia T, Wang H, Wei L, Luo X, Li X.Multiple release of polyplexes of plasmids VEGF and bFGF from electrospun fibrous scaffolds towardsregeneration of mature blood vessels.Acta Biomater. 2012 Jul;8(7):2659-69. doi: 10.1016/j.actbio.2012.03.044. Epub 2012 Apr 3.7. Wang H, Zhang Y, Xia T, Wei W, Chen F, Guo X, Li X.Synergistic Promotion of Blood Vessel Regeneration by Astragaloside IV and Ferulic Acid from ElectrospunFibrous Mats.Mol Pharm. 2013 Jun 3;10(6):2394-403. doi: 10.1021/mp400031y. Epub 2013 May 8.8.Liu Q, Liu L, Zhou J, Shin HD, Chen RR, Madzak C, Li J, Du G, Chen J.Biosynthesis of homoeriodictyol from eriodictyol by flavone 3'-O-methyltransferase from recombinant Yarrowia lioplytica: Heterologous expression, biochemical characterization, and optimal transformation.J Biotechnol. 2013 Sep 20;167(4):472-8. doi: 10.1016/j.jbiotec.2013.07.025. Epub 2013 Jul 29.9. Zhao L, Liu Q, Yan S, Chen Z, Chen J, Li X.Multimeric immobilization of alcohol oxidase on electrospun fibers for valid tests of alcoholic saliva.J Biotechnol. 2013 Oct 10;168(1):46-54. doi: 10.1016/j.jbiotec.2013.08.015. Epub 2013 Aug 19.10.Chen F, Wan H, Xia T, Guo X, Wang H, Liu Y, Li X.Promoted regeneration of mature blood vessels by electrospun fibers with loaded multiple pDNA-calcium phosphate nanoparticles.Eur J Pharm Biopharm. 2013 Nov;85(3 Pt A):699-710. doi: 10.1016/j.ejpb.2013.07.009. Epub 2013 Jul 24.11.Luo X, Jia G, Song H, Liu C, Wu G, Li X.Promoting antitumor activities of hydroxycamptothecin by encapsulation into acid-labile nanoparticles using electrospraying.Pharm Res. 2014 Jan;31(1):46-59. doi: 10.1007/s11095-013-1130-4. Epub 2013 Jul 25.12.Cai C, Zhao D, Ma C, Zhang Y, Wu X, Wei G, He D.Connexin 43 expression in Sprague-Dawley rat seminiferous epithelium after in utero exposure to flutamide.Syst Biol Reprod Med. 2014 Oct;60(5):257-62. doi: 10.3109/19396368.2014.921738. Epub 2014 May 27.13.Liu Y, Lu J, Li H, Wei J, Li X.Engineering blood vessels through micropatterned coculture of vascular endothelial and smooth muscle cells on bilayered electrospun fibrous mats with pDNA inoculations.Acta Biomater. 2014 Oct 7. pii: S1742-7061(14)00446-2. doi: 10.1016/j.actbio.2014.10.004.。

Millipore 超滤管 0.5ml 中文说明书

Amicon® Ultra-0.5产品系列包括5种不同的截留分子量（即标称分子量限值，NMWL）。这些超滤管仅供研究使用，不适用于诊断程序。
• Amicon® Ultra 3K 超滤管 — 3,000 NMWL • Amicon® Ultra 10K 超滤管 — 10,000 NMWL • Amicon® Ultra 30K 超滤管 — 30,000 NMWL • Amicon® Ultra 50K 超滤管 — 50,000 NMWL • Amicon® Ultra 100K 超滤管 — 100,000 NMWL
用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。
如何使用Amicon® Ultra-0.5超滤离心管
1. 将Amicon® Ultra-0.5超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。 2. 向Amicon® Ultra内管中加入不超过500 μL的样本，并盖上盖子。 3. 将盖好盖子的超滤管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的超滤管平衡。 4. 以14,000 x g离心约10-30分钟，具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。为了确定合适的离心时
≥ 90 ≥ 90 ≥ 95
PCR引物去除率（%）
≥ 90 ≥ 85 ≥ 75
≥ 90 ≥ 90 ≥ 80
≥ 90 ≥ 90 ≥ 90
≥ 90 ≥ 95 ≥ 95
TE洗涤（次数）
0 1 2
0 1 2
0 1 2
0 1 2
离心条件：40º固定角度转子，14,000 x g，室温，100 μL PCR样品和400μL TE缓冲液合计起始体积500 μL，20-30 μL终体积，10分钟离心，n = 12。
2
74
7
42
12

蛋白质分子量标准(宽)

●保存条件
制品原液可在-20℃下长期保存，制品的 20 倍稀释液可在-20℃下保存 2～3 个月，制品的原液和制品的 20 倍稀释液都应避免多次反复冻融。
●制品中的各种蛋白质种类
蛋白种类
肌球蛋白 β 半乳糖苷酶磷酸酶 b 牛血清蛋白卵清蛋白碳酸苷酶胰蛋白酶抑制剂溶菌酶抑肽酶
来源
猪大肠杆菌兔子肌肉
3. 均匀混合后，100℃加热处理 5 分钟，然后取 5 μl 进行 5～20％的聚丙烯酰胺凝胶电泳（for SDS-PAGE mini gel）。
4. 5~20%聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、12%聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经考马斯亮蓝 R-250 染色后的结果如下。
KDa 200
116 97.2 66.4
蛋白质分子量标准（宽）
Protein Molecular Weight Marker (Broad)
使用说明书
TaKaRa Code：D532A
●浓度：18 μg/μl
●制品内容（约 200 次量）
Protein MW Marker（Broad） 50 μl
5×Loading Buffer
1000 μl
KDa 210106 97.2 66.4
44.3
44.3
29.0
29.0 20.1
20.1
14.3
14.3
6.5
6.5
5~20%
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
12%
V2010.04
●使用方法
1. 首先按以下方法配制“稀释液”。
1 M DTT 5×Loading Buffer
* 稀释液可于室温下放置一个月左右。
2 μl 20 μl

生化实验七 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量

实验七 SDS —聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量一、实验原理了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理，学会用这种方法测定蛋白质的相对分子量二、实验原理带电的颗粒(蛋白质)在电场的作用下，移动的速度是根据此公式，在同一电场强度(v ／d)和电极缓冲液(η)条件下，带电的各种蛋白质成分，移动的速度决定于各蛋白质的带电量(q)和自身分子的大小(6πr)。

若使各蛋白质成分的带电量(q)相近似时，则各蛋白质成分移动的速度就只决定于各蛋白质成分自身分子的大小(6πr)。

1967年Shapiro 等人发现，在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate ，SDS)，不影响凝胶的形成，而蛋白质的电泳迁移率则主要取决于它的自身分子量的大小。

加入SDS 之所以能获得如此的效应，是因为SDS 能打开蛋白质分子间的氢键和疏水键，使蛋白质变性成为松散的线状。

同时大多数蛋白质的每个氨基酸都能与固定量的SDS 相结合[溶液中的SDS 总量，至少要比蛋白质的量高3倍以上，大多数蛋白质与SDS 按1:1.4(W ／W)的比例结合]，形成SDS 一蛋白质复合物。

其结果： (1)由于SDS 解离后带有很强的负电荷，致使SDS 一蛋白质复合物都带上了相同密度的负电荷，其电量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，基本掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差异。

(2)SDS 与蛋白质结合后，改变了蛋白质原有构象，使所有蛋白质水溶液中的形状都近似椭圆柱形。

不同SDS 一蛋白质复合物的短轴直径都一样，约为18nm ，而长轴则与蛋白质分子的大小成正比。

这样SDS 一蛋白质复合物在凝胶电泳中的迁移率，就不再受蛋白质原有电荷及其形状的影响了，而只取决于椭圆柱长度，即蛋白质分子的大小。

需要注意的是：为使SDS 与蛋白质能充分的按比例结合，必须将蛋白质间的二硫键完全打开。

因此，在用SDS 处理蛋白质样品时，必须同时用巯基乙醇处理。

蛋白质电泳分子量标准(蛋白marker 14.4-97.4 kd)

蛋白质电泳分子量标准（蛋白marker 14.4-97.4 kd）【篇名】：探究蛋白质电泳分子量标准1. 引言在生物学研究中，蛋白质电泳是一种重要的实验方法，用于分离和分析蛋白质。

而蛋白质电泳分子量标准（蛋白marker）则是在蛋白质电泳实验中用来确定待测蛋白分子量的重要工具。

本文将探讨蛋白质电泳分子量标准的概念、应用以及其在生物学研究中的重要性。

2. 蛋白质电泳分子量标准的概念蛋白质电泳分子量标准是一系列已知分子量的蛋白质，它们被用作电泳实验中的参照物。

常见的蛋白marker包括14.4-97.4 kd等不同分子量的标准物质，通过蛋白电泳实验，可以通过蛋白marker的分离情况来确定待测蛋白的分子量。

3. 蛋白质电泳分子量标准的应用蛋白质电泳分子量标准可用于验证电泳实验的准确性，评估蛋白质分子的大小和形状，以及在分析未知蛋白质时提供参照标准。

通过与已知分子量的蛋白marker进行对比，未知蛋白的分子量可以被确定，从而为后续的生物学研究提供重要参考。

4. 蛋白质电泳分子量标准在生物学研究中的重要性在生物学研究中，蛋白质电泳分子量标准的应用极其重要。

它不仅可以帮助科研人员确定蛋白质标准品的分子量，还可以作为蛋白质分析实验的质量控制工具，确保实验结果的准确性和可靠性。

蛋白marker在蛋白质电泳实验中的使用，也有助于扩大科学家对蛋白质研究的视野，从而推动生物学领域的进步。

5. 个人观点作为生物学研究领域的从业人员，我深刻理解蛋白质电泳分子量标准的重要性。

对于生物学实验来讲，实验结果的准确性是至关重要的，而蛋白marker作为质量控制的一个重要环节，能够有效提高实验数据的可信度，也为科研人员提供更可靠的实验结果。

6. 总结蛋白质电泳分子量标准在生物学研究中具有重要作用。

通过对蛋白marker的使用，科研人员可以准确地确定蛋白质的分子量，从而为生物学研究提供可靠的数据和结果。

深入了解和掌握蛋白质电泳分子量标准的实验原理和应用方法，对于开展生物学研究具有重要的意义。

SDSPAGE测量蛋白质分子量解析

150µl
10%Ap
150µl
TEMED
500µl
浓缩胶(5% 5ml)
3.2ml
0.85ml
0.5mol/L pH=6.8 Tris-HCl 0.65ml
50µl
50µl
200µl
3.样品及MW标准参照物溶液的制备
样品溶液和上样缓冲液混匀，使用前在100℃水浴 1min，以除去可能出现的亚稳态聚合物。
Tris0.6g，加入50ml水，用1mol/L盐酸调pH6.8，最后用蒸馏水容至100ml。
2.实验试剂
（7）10%过硫酸铵(AP) （8）TEMED（四甲基乙二胺）（9）样品溶解液：SDS（100mg）+巯基乙醇（0.1ml）+
溴酚蓝（2mg）+甘油（2g） +0.05mol/L pH8.3TrisHCl（2ml），最后定容至10ml。（10）固定液：取50%甲醇454ml，冰乙酸46ml混匀。（11）染色液：称取考马斯亮蓝R250 0.125g，加上述固定液 250ml，过滤后备用。（12）脱色液：冰乙酸75ml，甲醇50ml，加蒸馏水定容至1000ml。（13）电极缓冲液（内含0.1%SDS，0.05mol/LTris- 0.384mol/L甘氨酸缓冲液pH8.3）：称Tris6.0g，甘氨酸28.8g，加入SDS1g，加蒸馏水使其溶解后定容至1000ml。
4.上样。 15μl/孔
5.电泳
上槽接负极，下槽接正极，打开电泳仪开关，开始时将电流调至10mA，待样品进入分离胶时，将电流调至20-30mA。待指示剂染料靠迁移至下沿1～1.5cm 处停止电泳，需2～3h。
6.凝胶板剥离与染色：电泳结束后，撬开玻璃板，将凝胶板做好标记后放在大培养皿内，将凝胶放入0.05% 考马斯亮蓝R250（内含20％磺基水杨酸）染色液中，

即用型蛋白质分子量标准(高)使用说明书

即用型蛋白质分子量标准（高）Premixed Protein Marker (High)
使用说明书
Takara Code : DPP531A
浓度: 0.5 μg/μl
制品内容（约100次量）
Premixed Protein Marker (High) 500 μl
制品说明
Premixed Protein Marker (High) 是由加热变性好的五种不同分子量的蛋白质组成，它的分子量范围为：44.3 KDa～200 KDa。

本制品使用时无需任何处理，可以直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，经考马斯亮蓝R－250染色后的各种蛋白质的条带强度均一。

每微升本制品的蛋白量为0.5 μg，每次电泳取5 μl（for SDS-PAGE mini gel）。

以每次使用5 μl计算时本制品约可使用100次。

保存条件: -20℃
使用注意
推荐使用7.5～10％的聚丙烯酰胺凝胶。

浓度太高，高分子量的蛋白分离效果不好，有可能聚集于分离胶的上部。

使用方法
1. 直接取5 μl本制品进行7.5％～10％的聚丙烯酰胺凝胶电泳（for
SDS-PAGE mini gel）。

2.7.5%、10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经考马斯亮蓝R-250染
色后的结果如下。

V2012.01 KDa
200.0
116.0
97.2
66.4
44.3
200.0
116.0
97.2
66.4
44.3
KDa
7.5% 10%。

人血白蛋白说明书

人血白蛋白说明书-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1人血白蛋白说明书【药品名称】人血白蛋白【成份】用乙型肝炎疫苗免疫的健康人血浆，经提取，灭活病毒制成。

【用法用量】用量由医师酌定。

冻干制剂可用5%葡萄糖液或灭菌注射用水溶解，液量据需要而定。

一般根据瓶签所载蛋白量加入适量溶解液使成10%（g/ml）白蛋白溶液，可在15分钟内溶解完毕。

当需要获得20%～25%（g/ml)高浓度白蛋白时，则溶解时间较长。

一切稀释、注射操作，均应按严格的消毒手续进行。

输注方法一般采用静脉滴注，宜使用有滤网的输液器。

滴注速度以每分钟不超过2ml(约60滴）为宜，但在开始的15分钟内，速度要缓慢，以后逐渐增加至上述速度。

药理作用本品具有很强的亲水活性，血浆中70%的胶体渗透压靠它维持，输入本品后提高胶体渗透压，扩充血容量，改善微循环，并补充蛋白质。

也可作为低蛋白血症的替代疗法。

每5g/20ml白蛋白可维持机体渗透压的能力，相当于100ml血浆或200ml全血。

【适应症】本品对增加循环血容量和维侍血浆渗透压起主要作用。

每5g白蛋白溶解后，在维持机体胶体渗透压方面，约相当于100ml血浆或200ml全血的功能。

用于治疗因失血、创伤及烧伤等引起的休克、脑水肿及大脑损伤所致的脑压增高，防治低蛋白血症以及肝硬化或肾病引起的水肿和腹水，有良好疗效。

①低血容量性休克和急性脑水肿，大脑损伤的颅内压增高；②某些疾病如肝硬化、肾病和吸收不良等引起的低蛋白血症及所引起的水肿、腹水、心包积液等。

静注、静滴，使用剂量及浓度视病情定。

【不良反应】①注射量过大时，因本品的高渗作用会引起循环血量过大和组织脱水：心静衰竭、肺水肿：②使用中如发现寒战、发热、恶心、弥散性荨麻疹等不适反应，应立即停止使用！③发现药液混浊、沉淀、异物，不得使用。

本品不得与含有蛋白水解酶或酒精的注射液混合使用，以免蛋白沉淀。

【规格】注射剂：5g/20m1，10g/50m1。

蛋白质分子量标准(14.4-116kd, 非预染)

蛋白质分子量标准(14.4-116kd, 非预染)
蛋白质分子量标准（14.4-116 kd，非预染）指的是一组用于电泳分析的标准蛋白质混合物，其分子量范围在14.4千道尔顿（kd）到116千道尔顿（kd）之间。

这些标准蛋白质通常用于凝胶电泳（如SDS-PAGE）中，以评估未知蛋白质的分子量大小。

这些标准蛋白质的分子量是已知的，因此可以通过与未知蛋白质在电泳凝胶上的迁移速度进行比较，来估算未知蛋白质的分子量。

这对于蛋白质研究和分析非常重要，因为分子量是蛋白质的一个重要属性，与其功能、结构和相互作用密切相关。

“非预染”指的是这些标准蛋白质没有预先用染料染色，因此在使用时需要与染料一起孵育，以便在凝胶上可视化。

常见的用于蛋白质染色的染料包括考马斯亮蓝和银染剂等。

请注意，具体的蛋白质分子量标准可能会因供应商和批次而异，因此在使用时应参考相关说明书和建议。

此外，对于某些特定的电泳条件和应用，可能需要使用不同分子量范围或类型的标准蛋白质。

蛋白质marker

●使用方法
1. 首先按以下方法配制“稀释液”。
1 M DTT 5×Loading Buffer
* 稀释液可于室温下放置一个月左右。
2 μl 20 μl
2. 按以下方法稀释本制品。
Protein MW Marker（Low）稀释液灭菌蒸馏水
5 μl 22 μl 73 μl
* 20 倍的制品稀释液可在-20℃下保存 2～3 个月，但应避免多次反复冻融。如果一次稀释量较多时，可以小量分装后在-20℃下保存，以避免反复冻融。
50 μl 300 μl
30 μl
●制品说明
Protein Molecular Weight Marker（Low）是由六种纯化好的不同分子量的蛋白质组成的，它的分子量范围为：14.3 KDa～97.2 KDa。进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，经考马斯亮蓝 R－250 染色后的各种蛋白质的条带强度均一。每微升本制品的蛋白量为 12 μg，稀释 20 倍后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，每次取 5 μl（for SDS-PAGE mini gel）。以每次使用 5 μl（20 倍稀释液）计算时本制品约可使用 200 次。
蛋白质分子量标准（低）
Protein Molecular Weight Marker (Low)
使用说明书
TaKaRa Code：D530A
●浓度：12 μg/μl
●arker（Low） 5×Loading Buffer 1 M DTT（Dithiothreitol）
3. 均匀混合后，100℃加热处理 5 分钟，然后取 5 μl 进行 10％～15％的聚丙烯酰胺凝胶电泳（for SDS-PAGE mini gel）。
4. 10%、12%、15%的聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经考马斯亮蓝 R-250 染色后的结果如下。

预染次高分子量蛋白质Marker(43kD-200kD)说明书

北京索莱宝科技有限公司
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页预染次高分子量蛋白质Marker（43kD-200kD)说明书
货号：PR1700
保存：-20℃可保存至少一年。

避免反复冻融，建议分装冻存。

规格：10T
产品简介：
本产品包含5种预染的已知分子量的标准蛋白质，分子量范围为43kD-200kD。

本产品为冻干粉，每种蛋白的含量约为20ug，可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。

经SDS-PAGE凝胶电泳后转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的5条蓝色为的蛋白条带。

使用说明：
1.开封后，取100μL 1×上样缓冲液溶解冻干粉，可根据需要进行小量分装，每管10μL，-20℃贮存，
每次取一管使用。

2.
如长期贮存后使用，使用前最好取分装后的小管沸水浴预热3-5分钟后再上样电泳。

3.建议分离胶浓度为7%。

电泳示意图说明：
蓝色预染次高分子量标准蛋白质经7%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳后，转移至PVDF膜上。

注意：上样前，蛋白Marker 65℃预热是必需的，否则电泳后一些蛋白会沉积在分离胶的上沿，出现一条蛋白质杂带。

核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准及常用试剂的配制

核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准及常用试剂的配制•一、核酸及蛋白质常用数据1．核苷三磷酸的物理常数2．常用核酸的长度与分子量3．常用核酸蛋白换算数据〔1〕重量换算1μg=10-6g 1pg=10-12g 1ng=10-9g 1fg=10-15g 〔2〕分光光度换算：1A260双链DNA=50μg/ml 1A260单链DNA=30μg/ml 1A260单链RNA=40μg/ml 〔3〕DNA摩尔换算：1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol 1pmol 1000bp DNA=0.66μg 1pmol pBR322=2.8μg 1kb双链DNA〔钠盐〕=6.6×105道尔顿1kb 单链DNA〔钠盐〕=3.3×105道尔顿1kb单链RNA〔钠盐〕=3.4×105道尔顿〔4〕蛋白摩尔换算：100pmol分子量100，000蛋白质=10μg 100pmol分子量50，000蛋白质=5μg 100pmol分子量10，000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿〔5〕蛋白质/DNA换算：1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10，000MW蛋白质=270bp DNA 30，000MW蛋白质=810bp DNA 50，000MW蛋白质=1.35kb 100，000MW蛋白质=2.7kb DNA4．常用蛋白质分子量标准参照物5．常用DNA分子量标准参照物a：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。

所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。

b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基〔如LB培养基〕。

五、常用贮存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。

分子量(还原型SDS-PAGE)测定标准操作规程

细胞因子分子量（还原型SDS-PAGE）测定标准操作规程依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。

范围：适用于细胞因子蛋白质分子量测定。

目的：测定待检品分子量是否符合《中华人民共和国药典》2005年版要求原理：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是利用丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合成大分子凝胶后再进行电泳。

因此它兼具了分子筛效应与电泳效应。

其催化系统为过硫酸铵-TEMED系统。

而SDS这种阴离子表面活性剂的加入，它能使蛋白质氢键、疏水键打开，并按一定比例与蛋白质分子结合成带负电的复合物，其负电荷远远超过了蛋白质原有的电荷，因而掩盖了不同种类的蛋白质间原有的电荷差别。

这样就使电泳的迁移率只取决于分子量大小这一因素，从而达到分离不同组分的蛋白质的目的，并在还原剂巯基乙醇的存在下，（定量的巯基乙醇可以使蛋白质分子内的二硫键彻底还原；以使SDS定量的结合到蛋白质分子上去，使蛋白质具有相同的构象），可以检测到是否有蛋白质聚合体的产生。

内容：1材料1．1样品：经二人复核批号无误后检测1．2试剂甲醇 CH3OH 分析纯无水乙醇 C2H5OH 分析纯浓盐酸 HCl 分析纯甘油 C3H8O3分析纯硝酸银 AgNO3分析纯重铬酸钾 K2Cr2O7分析纯正丁醇 C4H9OH 分析纯甲醛 HCHO 分析纯丙烯酰胺 CH2CHCONH2分析纯甲叉双丙烯酰胺 [（CH2CHCONH2）2]CH2分析纯过硫酸铵（NH4）2S2O8分析纯TEMED （四甲基乙二胺）(CH 3)2N(CH 2)2N(CH 3)2 分析纯甘氨酸 C 2H 5NO 2 分析纯 SDS （十二烷基硫酸钠）C 12H 25O 4SNa 分析纯乙酸 CH 3COOH 分析纯碳酸钠 Na 2CO 3 分析纯 β-巯基乙醇 HSCH 2CH 2OH 分析纯溴酚蓝 C 19H 10Br 4O 5S 分析纯 1．3分子量标准品：法玛西亚公司。

1．4注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求 1．5设备扭力天平上海第二天平仪器厂垂直板状电泳槽北京东方仪器厂恒温恒流电泳仪法玛西亚公司快速电泳槽 BIORAD USA 全自动扫描仪 CS-930日本岛津TS-1型摇床1．6器皿：500ml 瓶、100ul 移液器、1ml 吸管、10ml 吸管、3000ml 三角瓶、平皿、1000ml 烧杯、80ml 烧杯，以上器皿经本室洗刷组处理。

蛋白标准 marker 每年用量

蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。

在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。

这个Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。

总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。

以下是关于蛋白分子量标准的小叙：一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。

由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。

现在的Marker多数都选用预混和的Marker，方便不同大小的蛋白比较。

预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。

所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。

不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。

在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。

如果你的蛋白不幸在两条跨度较大Marker条带之间，选别的Marker吧。

预混的Marker使用上不如预染Marker(pre-stained)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才“开蛊”，无法对实验起预示参照作用。

完全属于“后知后觉”型的，当然还是比“不知不觉”不做对照的要好。

①宽分子量蛋白标准如果从实验室总体考虑的，就选范围尽量宽，条带分布比较均匀的，这样你的蛋白无论在哪个区间都容易判断，避免正好落在一段空白区的危险。