枸杞的提取工艺研究

摘要
枸杞为茄科植物枸杞的干燥成熟果实，主产于河 北与宁夏，是一种食药两用植物，味甘、性平、 入甘、肾经，具有多种药理作用和生物功能。枸 杞多糖是枸杞中的主要活性成分之一。其中有关 枸杞多糖的化学、药理与临床研究十分瞩目，已 有不少研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、 防衰老、增强造血功能、防止遗传损伤、抑制肿 瘤生长和细胞突变等作用。鉴于枸杞多糖具有多 种药理作用和生理功能，引起了人们的广泛关注。 本试验是为了研究超声辅助法对枸杞多糖的提取 的影响。
1.1.2 多糖与枸杞多糖的药理作用
70年代以来，科学家们发现多糖及糖复合物参与和介导了细胞各 种生命现象的调节，特别是调节免疫力。80年代，现代生物技术 如分析、测序、合成和结构诸方面研究的成熟，带动了多糖研究 的深入，人们发现多糖的糖链能控制细胞分裂和分化，调节细胞 的生长和衰老，在分子生物学中起着决定性作用，80年代末，糖 蛋白的糖链与细胞识别，免疫保护等诸多生理功能相关的发现， 使得多糖的研究形成了“糖生物学”和“糖工程学”两个新型学 科，且发展极为迅速。近年来，多糖特别是中药多糖因具有增强 免疫力、抗肿瘤及抗衰老等药理作用。而枸杞多糖(LBP) 是枸杞 的有效成分之一。经研究发现，枸杞多糖既是保健功能因子,又 是一种非特异性免疫增强剂，具有调节免疫功能、降血糖、抗疲 劳、抗衰老、抗肿瘤、增加造血功能、防止遗传损伤等作用[7～ 11]。现代医学研究证明：枸杞有免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗 肿瘤、抗疲劳、降血脂、降血糖、降血压、补肾、保肝、明目、 养颜、健脑、排毒、保护生殖系统、抗辐射损伤十六项功能。中 药现代科学研究表明，枸杞子滋补肝肾，兼有人参、当归、黄花、 肉桂等优点，其养价值很高，所以既是食品，又是药品。
枸杞多糖的提取工艺研究
学院：步长医药学院 专业；药物制剂 姓名：罗丽 指导老师：张爽
目录
摘要 Abstraet 第一章 概述 1.1 多糖和枸杞多糖的概述 1.1.1 多糖与枸杞多糖 1.1.2 多糖与枸杞多糖的药
理作用 1.2 本研究的目的与意义 1.3 多糖的提取方法 第二章 枸杞多糖的提取 2.1 实验材料与仪器 2.2 实验步骤与方法 2.2.1 多糖含量标准曲线的
1.2 本研究的目的与意义
本实验采用正交试验方法研究超声辅助提 取法在枸杞多糖提取中的应用，并筛选出 提取的最佳工艺条件。
1.3 多糖的提取方法
多糖常用的提取方法有：热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法和酶 法。其中前三种为化学方法，酶法为生物法。在提取多糖之前， 首先要根据多糖的存在方式及提取部位的不同，决定是否作预处 理。动物多糖和微生物的细胞内多糖多有脂质包围，一般需先加 入醇或醚进行回流脱脂，释放多糖，然后依多糖性质(如酸碱性、 胞内或胞壁多糖)再将脱脂后的残渣采用冷水、热水、冷或热的 氢氧化钠、乙酸或苯酚等溶液提取。溶剂性质、浸提温度、时间 等均影响提取效果。提取多糖常用的酶有纤维素酶、果胶酶、蛋 白酶和复合酶。杨云等用蛋白酶提取大枣多糖[12]，孟庆繁等用纤 维素酶、果胶酶、蛋白酶的复合酶提取百合多糖[13]，林宇野、杨 虹将其用于提取银耳多糖[14]，都取得了很好的效果，不仅提高了 多糖的得率，而且缩短了提取时间。
Methods: using the method of orthogonal experiment, the ultrasonic assisted extraction of Lycium barbarum polysaccharides by water, extraction time, extraction temperature and ultrasonic power were studied, in order to LBP rate as evaluation index, find the optimal extraction conditions of. Results: The amount of water to 20 times, the extraction time was 40, the extraction temperature was 80, the ultrasonic power 250W wolfberry polysaccharide yield,up to 3.06%. Conclusion: ultrasound assisted extraction of Lycium barbarum polysaccharides extraction can be used as an effective method. Key words: LBP; extraction; orthogonal experiment
第一章 概述
1.1 多糖和枸杞多糖的概述 1.1.1 多糖与枸杞多糖 多糖(Polysaccharide)又称多聚糖，
由是由十个以上的单糖基通过普键 连接而成的一类结构复杂的大分子 化合物。一般多糖都由100个以上甚 至几千个单糖组成，分子量为数万 到数百万，是构成生命活动的4大基 本物质之一，与生命的多种生理功 能密切相关[1]。多糖不是一种纯粹 的化学物质，而是聚合程度不同的 物质的混合物。多糖类一般不溶于 水，无甜味，不能形成结晶，无还 原性和变旋现象。多糖可以水解， 在水解过程中，往往产生一系列的 中间产物，最终完全水解得到单糖 [2]。
绘制
2.2.2 枸杞多糖得率计算 2.2.3 超声辅助提取枸杞多糖 第三章 试验结果与分析 3.1 多糖含量标准曲线的绘制 3.2 单因素试验结果 3.3 超声辅助提取的枸杞多糖
的正交试验结果与分析 3.4 正交试验结果验证 3.5总结 第四章 结论 第五章 前景展望 参考文献 致谢
根据存在的状态多糖可分为游离多糖和结合多糖(如蛋白多 糖、脂多糖等)。根据分子结构的组成不同多糖可分为同多 糖和杂多糖。同多糖是由一种单糖分子缩合而成的多糖， 自然界中存在的如淀粉和搪原(分别是植物和动物中葡萄糖 的贮存形式)、纤维素(植物细胞主要的结构组分)，都是由 葡萄糖组成。杂多糖是由两种以上的单糖缩合而成的多糖， 如透明质酸、硫酸软骨素等。有一些杂多糖由含糖胺的重 复双糖系列组成，称为糖胺聚糖，又称氨基多糖，粘多糖 等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要组分，根据重复双糖单位 的不同可分为五类:硫酸软骨素、硫酸用层酸、透明质酸、 肝素、硫酸皮肤素、硫酸乙酞肝素[5，6]。
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第二章 枸杞多糖的提取
2.1 实验材料与仪器
材料、试剂与仪器
表1实验材料、仪器
产地或者厂家
葡萄糖标准品(Purity=99％UV) 枸杞子
司(宁夏) 石油醚(分析纯) H2SO4 (分析纯) 苯酚（分析纯） 乙醇(分析纯) 氯仿(分析纯) KQ5200DE型数控超声波清洗器 RE．52A型旋转蒸发器 HH．S2S数显示恒温水浴锅 DHC．9502A型电热恒温鼓风干燥箱 SHB一Ⅲ循环水真空泵 精密电子天平 UV752型紫外可见分光光度计
关键词:枸杞多糖; 超声辅助提取; 正交实验
Abstraet
Ch．Wolfberry is the mamre fruitage and mostly planted in Hebei and Ningxia．It is a kind of edible and officinal plant and has various pharmacological effect and biological function．Ch．Wolfberry polysaccharide is the main functional component in Ch．Wolfberry．The study of Ch．Wolfberry focus attention upon chemistry, pharmacology and clinic．It is reported that Ch．Wolfberry be able to buildup immunity capability, resist cancer, prevent consenescence，enhance hematopoietic function，avold genetic trauma，restrain tumour grow and cell mutation.Ch．Wolfberry polysaccharide is broad attended because of its various pharmacological effect and biological function． This experiment is to study the ultrasonic assisted method of Lycium barbarum polysaccharides extraction effect.
多糖的分类[3]：根据多糖的来源不同，可将多糖分为植物性多糖， 动物性多糖和微生物性多糖三大类。常见的植物性多糖有淀粉、 纤维素、葡聚糖、果聚糖、半纤维素、树胶、粘液质、卡拉胶 等[4]。常见的动物性多糖有肝糖元、甲壳素、肝素、硫酸软骨 素、透明质酸等；常见的微生物性多糖有黄原胶等。根据生物 功能多糖可分为储能多糖和结构多糖，结构多糖是一种水不溶 性多糖，分子呈直糖链型，如纤维素、甲壳素等;贮能多糖可溶 于热水成胶体溶液，可经酶催化水解释放单糖以供应能量，分 子为支糖链型，如淀粉、肝糖原等。根据多糖在微生物体内分 泌的部位又可分为胞内多糖、细胞壁多糖和胞外多糖。胞外多 糖是由微生物大量生产的多糖，易于与菌体分离，故可实现工 业化生产。
目的:研究超声辅助提取法在枸杞多糖提取中的应用， 并筛选出提取枸杞多糖的最佳提取条件。 方法:采用正交实验的方法，对超声辅助提取法提取枸 杞多糖的加水量、提取时间、提取温度及超声功率进 行考察，以枸杞多糖得率作为评价指标，找出最适提 取条件。 结果:加水量为20倍，提取时间为40min，提取温度为 80℃，超声功率为250W时枸杞多糖得率最高,可达到 3.06%。 结论:超声辅助提取法可作为枸杞多糖提取的一种有效 方法。
2.2 实验步骤与方法
2.2.1 多糖含量标准曲线的绘制
采用H2SO4－苯酚法对其加以改良。 精密称取无水葡萄糖标准品25.0mg，置于25ml容量瓶
中，以蒸馏水定容至刻度，配成1mg／ml的储备液，分 别精密吸取储备0、0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml，置 25ml容量瓶中,加5％苯酚溶液1.0ml,摇匀，用移液管迅 速垂直滴加浓硫酸各5.0ml，立即摇匀，再用蒸馏水稀 释至刻度，充分摇匀，沸水浴中煮沸15min；冷却后用 分光光度计在490nm波长处测定其吸光度值；以试样糖 含量C (mg／ml)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标 准曲线，并计算回归方程。
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•此外，利用超声波、微波等技术有效的提高了多糖的得率和 产品质量，并缩短了反应时间。李钟玉等用超声波提取灵芝多 糖[15]，刘霞等用其提取甘草多糖[16]，都显著提高了多糖的得 率。此外，李芙蓉、吕波用微波提取刺五加多糖[17]，孙萍等 用微波提取甘草多糖[18]，也取得了较好的效果。
•根据多糖性质和结构可以采用热水提法、酸提法、碱提法、 超声波提取法、微波提取法、超声辅助提取法以及微波辅助提 取法[19]等方法，前三种方法不但耗时，而且酸和碱易破环多 糖的化学结构；而超声波提取的时间较短，参考赵盈在柿子多 糖的提取、分离、结构分析及体外抗氧化作用研究的文献[20]， 我采用超声辅助提取法。