各期梅毒试验诊断方法
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密螺旋体属
钩端螺旋体 回归热螺旋体 奋森螺旋体 伯氏疏螺旋体 梅毒螺旋体 雅司螺旋体 品他螺旋体 地方性梅毒螺旋体
钩端螺旋体病 回归热 奋森咽峡炎 莱姆病 梅毒 雅司 品他 地方性梅毒
广东省皮肤性病防治中心 WWW.GDVDC.COM
1，病原学检测： 1）暗示野镜检： 方法：渗出液混于盐水中，暗示野镜观察 结果：可见典型梅毒螺旋体和特殊运动方式
病原体检测
WHO推荐暗示野镜检诊断早期梅毒，早于抗 体出现前数日至数周
organisms/mL required for visualization 敏感性80%，但阴性不能排除梅毒
[3]Larsen S, et al. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin Microbiol Rev 1995;8:1–21.
PCR敏感性特异性高.适宜早期诊断。
二、血清学检查 1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验
VDRL、USR、RPR、TRUST 2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验
FTA-ABS、TPHA、 TPPA、ELISA、TP-RT IgM
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放 的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗 体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
各期梅毒实验诊断方法
广东省皮肤病医院 广东省皮肤性病防治中心
郑和平 PhD
“广东疮”
广东与全国梅毒比较 1995-2011(incidence/100,000)
年份
广东
全国
1995
1.78
0.96
1996
6
1.81
1997
9.93
2.78
1998
13.79
4.37
60
发病率(1/10万)
1999
梅毒螺旋体血清学检测用试剂的 敏感性和特异性 2011年国家公布
一期梅毒血清学 非梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性(<1:8) 梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性（<1:320) 单次阳性结果应结合临床病史慎重诊断，阴性
并不能排除梅毒，需连续观察抗体滴度↑。 IgM抗体早于IgG抗体，常为阳性反应
practice of clinical immunology, 2nd ed. Mosby, St. Louis, Mo.
二，梅毒血清学筛查策略：
梅毒筛查策略 I RPR/TRUST阳性 TPPA/FTA阳性
梅毒
特点：传统方法，漏检高（15%），现症。
梅毒筛查策略 II：
TP-ELISA阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
2010
47.1
28.9
2011
48.94
32.04
1995 1997 1999 2001 2003 2005 2007 2009 2011
广东省梅毒发病率 全国梅毒发病率
年份
广东省和全国梅毒发病趋势比较
1995-2011年 广东省各期梅毒发病情况
病例数
1111999999995678 122222222900000000900000000901234567 2222000000118901
并不能排除梅毒，需连续观察抗体滴度↑。 IgM抗体早于IgG抗体，常为阳性反应
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
J. CLIN. MICROBIOL. 2009,47（6）：1668
病人87例:41梅毒（19例一期,9例二期,10例潜伏,3例先天）
靶基因：T. pallidum tpp47, bmp, polA，23S rRNA gene
结果：
结论：溃疡拭子样本适合于一期梅毒的PCR检测 二期血液样本中50%活动性梅毒可检测到TP-DNA
某省疾控中心共核查后天梅毒164例，其中， 未做RPR定性的43例，未进行RPR定量的64例， 根据临床表现但无症状记录的92例。核实7例 先天梅毒均不符合国家确诊标准。
诊断技术的掌握和正确应用很重要
梅毒诊断的准确性如何？
先天梅毒血清学的随访研究
5年上海市99例报道先天梅毒患儿
TPPA随访
1个月 3个月 6个月 12个月 18-24月
方法：VDRL (venereal disease research laboratory test)
USR (unheated serum reagin test)
RPR (rapid plasma reagin circle card test)
TRUST (tolulized red unheated serum test)
特点：批量检测，敏感性高 ，需现症鉴别
梅毒筛查策略 III：
TP-RT阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
特点：简便快速，敏感性高 ，需现症鉴别
互为确证试验
RPR阳性 TPPA阳性 TPPA阳性 RPR阳性
梅毒 梅毒
梅毒确诊
一期梅毒血清学 非梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性(<1:8) 梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性（<1:320) 单次阳性结果应结合临床病史慎重诊断，阴性
假阳性:与口腔肛周其他螺旋体相似，不推 荐口腔肛周标本
[4]Tramont E. Syphilis in adults: from Christopher Columbus to Sir Alexander Fleming to AIDS. Clin Infect Dis 1995;21:1361–71
一期梅毒
1-3月
二期梅毒
1-3月
潜伏梅毒
28%三期梅毒 梅毒树胶肿
2-50年
心血管梅毒
72% 终生潜30伏% 梅毒
脊髓痨, 麻痹性痴呆
[2]Gjestland, T. 1955. The Oslo study of untreated syphilis; an epidemiologic investigation of the natural course of the syphilitic infection based upon a re-study of the Boeck-Bruusgaard material. Acta Derm. Venereol. 35:3–368;
特点：非特异性反应
2、梅毒螺旋体抗原血清试验
原理：基于TP特异性抗原，检测TP抗体 方法：
1. 凝集法：TPHA， TPPA 2. FTA－ABS 3. ELISA 4. 19sIgM 5. TP-RT（胶体金法）
• [19]S Ratnam. The laboratory diagnosis of syphilis. Can J InfectDis Med Microbiol 2005;16(1):45-51.
临床：用于梅毒筛查。 注意：
高敏感性，特异较差。
4) 19sIgM: 原理：ELISA，
WB等
临床：早期梅毒诊断
先天梅毒诊断
5）TP-RT胶体金法： 原理（见图）
临床：筛查 注意：
高敏感性，特异较差。
[11]Reactivity of Microhemagglutination, Fluorescent Treponemal Antibody bsorption, and Venereal Disease Research Laboratory Tests in Primary Syphilis
[11] JOHN D. DYCKMAN, J. CLIN. MICROBIOL. 1980,12（4）：629
VDRL、FTA-ABS、TPHA关系
[12]S Ratnam. The laboratory diagnosis of syphilis. Can J InfectDis Med Microbiol 2005;16(1):45-51.
2）暗示野与PCR检测.
[5] Clinical Value of Treponema pallidum RealTime PCR for Diagnosis of Syphilis
[5]R. Heymans, et al. J. CLIN. MICROBIOL.2010 48(2):497
[6]Molecular Characterization of Syphilis in Patients in Canada: Detection of Treponema pallidum DNA in Whole-Blood Samples versus Ulcerative Swabs
1）TPPA/TPHA 原理： 超声裂解TP抗原或基因工程抗原，致敏明胶颗粒/
家禽RBC，与血清中抗TP抗体结合，发生凝集反应 。
临床：梅毒确证 注意 存在交叉（1：80） 低滴定时候，FTA-ABS确证
2）FTA-ABS(fluoresent treponemal
antibody absorption test)
Annex I-LVI.
一期梅毒的临床表现与实验室诊断
入 侵 部 位
临床表现
一期梅毒实验室诊断
临床特点 取材部位
检查方法
硬下疳
溃疡、
腹股沟淋巴结病 淋巴结
血液
病原检测：（暗示野、 镀银染色、荧光染色、 PCR） 同上
血清学试验
一，梅毒病原学检测
致病性螺旋体
螺旋体属名 螺旋体名
疾病
细（钩端）螺旋体属 疏（包柔）螺旋体属
原理：血清经吸收剂（Reiter)去非特异性抗
体，与TP反应，形成Ab+Ag复合物；再加TITC标 记的抗人IgG/IgM抗体，形成荧光复合物，荧光 镜下，TP呈苹果绿色荧光。
临床：最可靠确证试验 特点：高度特异，
3）ELISA： 原理：TP特异性抗原包备酶标板，与血清
中TP抗体结合，加入酶标抗体，底物显色 。
practice of clinical immunology, 2nd ed. Mosby, St. Louis, Mo.
二期梅毒的临床表现与实验室诊断
临床表现
二期梅毒实验室诊断
临床特点
取材部位
检查方法
皮疹 扁平湿疣 黏膜损伤等
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
《中国预防与控制梅毒规划 （2010-2020年）》
加强梅毒检测质量控制和实验室能力建设，充 分利用现有资源，开展梅毒检测实验室质量考 评和技术指导，提高梅毒实验室检测的准确性 和梅毒确证检测的可及性”
各期梅毒实验诊断方法
未经治疗的梅毒病人的自然病程
感染梅毒螺旋体
感染梅毒螺旋体
2-6周
中枢神经系统感染
wenku.baidu.com
15.07
6.5
50
2000
13.47
6.43
40
2001 2002
13.89 14.25
6.11 5.8
30
2003
11.2
5.63
20
2004
12.94
7.7
10
2005
14.46 10.96
0
2006
19.69 14.24
2007
23.13 17.16
2008
37.11 21.06
2009
40.58 24.66
60000 50000 40000 30000 20000 10000
0
梅毒 Ⅰ期 Ⅱ期 Ⅲ期 胎传 隐性
年份
1995年-2011年广东省各期梅毒发病趋势
2011年，全省21个地市报告梅毒51,051例，报告数占全国 报告总数的11.88%，位居全国第一
GD STD LG Yang
梅毒诊断的准确性如何？
转阴率
1.14％ 17.65％ 39.91%
40％ 23.08％
累计阴转率
1.14％ 18.59％ 44.57% 66.74％ 74.42％
[1]顾伟鸣等，先天梅毒的血清学随访，中华传染病杂志 2007，25（2）：117-119
误诊率？？？？ 检测能力差！！
2011年梅毒诊断试剂临床评估结果
中国性病控制中心，广西皮肤病防治研究所、北京市CDC、云南省 CDC、甘肃省CDC、浙江省皮肤病防治研究所等
钩端螺旋体 回归热螺旋体 奋森螺旋体 伯氏疏螺旋体 梅毒螺旋体 雅司螺旋体 品他螺旋体 地方性梅毒螺旋体
钩端螺旋体病 回归热 奋森咽峡炎 莱姆病 梅毒 雅司 品他 地方性梅毒
广东省皮肤性病防治中心 WWW.GDVDC.COM
1，病原学检测： 1）暗示野镜检： 方法：渗出液混于盐水中，暗示野镜观察 结果：可见典型梅毒螺旋体和特殊运动方式
病原体检测
WHO推荐暗示野镜检诊断早期梅毒，早于抗 体出现前数日至数周
organisms/mL required for visualization 敏感性80%，但阴性不能排除梅毒
[3]Larsen S, et al. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin Microbiol Rev 1995;8:1–21.
PCR敏感性特异性高.适宜早期诊断。
二、血清学检查 1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验
VDRL、USR、RPR、TRUST 2. 梅毒螺旋体抗原血清学试验
FTA-ABS、TPHA、 TPPA、ELISA、TP-RT IgM
1. 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：
原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放 的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗 体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
各期梅毒实验诊断方法
广东省皮肤病医院 广东省皮肤性病防治中心
郑和平 PhD
“广东疮”
广东与全国梅毒比较 1995-2011(incidence/100,000)
年份
广东
全国
1995
1.78
0.96
1996
6
1.81
1997
9.93
2.78
1998
13.79
4.37
60
发病率(1/10万)
1999
梅毒螺旋体血清学检测用试剂的 敏感性和特异性 2011年国家公布
一期梅毒血清学 非梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性(<1:8) 梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性（<1:320) 单次阳性结果应结合临床病史慎重诊断，阴性
并不能排除梅毒，需连续观察抗体滴度↑。 IgM抗体早于IgG抗体，常为阳性反应
practice of clinical immunology, 2nd ed. Mosby, St. Louis, Mo.
二，梅毒血清学筛查策略：
梅毒筛查策略 I RPR/TRUST阳性 TPPA/FTA阳性
梅毒
特点：传统方法，漏检高（15%），现症。
梅毒筛查策略 II：
TP-ELISA阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
2010
47.1
28.9
2011
48.94
32.04
1995 1997 1999 2001 2003 2005 2007 2009 2011
广东省梅毒发病率 全国梅毒发病率
年份
广东省和全国梅毒发病趋势比较
1995-2011年 广东省各期梅毒发病情况
病例数
1111999999995678 122222222900000000900000000901234567 2222000000118901
并不能排除梅毒，需连续观察抗体滴度↑。 IgM抗体早于IgG抗体，常为阳性反应
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
J. CLIN. MICROBIOL. 2009,47（6）：1668
病人87例:41梅毒（19例一期,9例二期,10例潜伏,3例先天）
靶基因：T. pallidum tpp47, bmp, polA，23S rRNA gene
结果：
结论：溃疡拭子样本适合于一期梅毒的PCR检测 二期血液样本中50%活动性梅毒可检测到TP-DNA
某省疾控中心共核查后天梅毒164例，其中， 未做RPR定性的43例，未进行RPR定量的64例， 根据临床表现但无症状记录的92例。核实7例 先天梅毒均不符合国家确诊标准。
诊断技术的掌握和正确应用很重要
梅毒诊断的准确性如何？
先天梅毒血清学的随访研究
5年上海市99例报道先天梅毒患儿
TPPA随访
1个月 3个月 6个月 12个月 18-24月
方法：VDRL (venereal disease research laboratory test)
USR (unheated serum reagin test)
RPR (rapid plasma reagin circle card test)
TRUST (tolulized red unheated serum test)
特点：批量检测，敏感性高 ，需现症鉴别
梅毒筛查策略 III：
TP-RT阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
特点：简便快速，敏感性高 ，需现症鉴别
互为确证试验
RPR阳性 TPPA阳性 TPPA阳性 RPR阳性
梅毒 梅毒
梅毒确诊
一期梅毒血清学 非梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性(<1:8) 梅毒螺旋体抗体常为阴性或弱阳性（<1:320) 单次阳性结果应结合临床病史慎重诊断，阴性
假阳性:与口腔肛周其他螺旋体相似，不推 荐口腔肛周标本
[4]Tramont E. Syphilis in adults: from Christopher Columbus to Sir Alexander Fleming to AIDS. Clin Infect Dis 1995;21:1361–71
一期梅毒
1-3月
二期梅毒
1-3月
潜伏梅毒
28%三期梅毒 梅毒树胶肿
2-50年
心血管梅毒
72% 终生潜30伏% 梅毒
脊髓痨, 麻痹性痴呆
[2]Gjestland, T. 1955. The Oslo study of untreated syphilis; an epidemiologic investigation of the natural course of the syphilitic infection based upon a re-study of the Boeck-Bruusgaard material. Acta Derm. Venereol. 35:3–368;
特点：非特异性反应
2、梅毒螺旋体抗原血清试验
原理：基于TP特异性抗原，检测TP抗体 方法：
1. 凝集法：TPHA， TPPA 2. FTA－ABS 3. ELISA 4. 19sIgM 5. TP-RT（胶体金法）
• [19]S Ratnam. The laboratory diagnosis of syphilis. Can J InfectDis Med Microbiol 2005;16(1):45-51.
临床：用于梅毒筛查。 注意：
高敏感性，特异较差。
4) 19sIgM: 原理：ELISA，
WB等
临床：早期梅毒诊断
先天梅毒诊断
5）TP-RT胶体金法： 原理（见图）
临床：筛查 注意：
高敏感性，特异较差。
[11]Reactivity of Microhemagglutination, Fluorescent Treponemal Antibody bsorption, and Venereal Disease Research Laboratory Tests in Primary Syphilis
[11] JOHN D. DYCKMAN, J. CLIN. MICROBIOL. 1980,12（4）：629
VDRL、FTA-ABS、TPHA关系
[12]S Ratnam. The laboratory diagnosis of syphilis. Can J InfectDis Med Microbiol 2005;16(1):45-51.
2）暗示野与PCR检测.
[5] Clinical Value of Treponema pallidum RealTime PCR for Diagnosis of Syphilis
[5]R. Heymans, et al. J. CLIN. MICROBIOL.2010 48(2):497
[6]Molecular Characterization of Syphilis in Patients in Canada: Detection of Treponema pallidum DNA in Whole-Blood Samples versus Ulcerative Swabs
1）TPPA/TPHA 原理： 超声裂解TP抗原或基因工程抗原，致敏明胶颗粒/
家禽RBC，与血清中抗TP抗体结合，发生凝集反应 。
临床：梅毒确证 注意 存在交叉（1：80） 低滴定时候，FTA-ABS确证
2）FTA-ABS(fluoresent treponemal
antibody absorption test)
Annex I-LVI.
一期梅毒的临床表现与实验室诊断
入 侵 部 位
临床表现
一期梅毒实验室诊断
临床特点 取材部位
检查方法
硬下疳
溃疡、
腹股沟淋巴结病 淋巴结
血液
病原检测：（暗示野、 镀银染色、荧光染色、 PCR） 同上
血清学试验
一，梅毒病原学检测
致病性螺旋体
螺旋体属名 螺旋体名
疾病
细（钩端）螺旋体属 疏（包柔）螺旋体属
原理：血清经吸收剂（Reiter)去非特异性抗
体，与TP反应，形成Ab+Ag复合物；再加TITC标 记的抗人IgG/IgM抗体，形成荧光复合物，荧光 镜下，TP呈苹果绿色荧光。
临床：最可靠确证试验 特点：高度特异，
3）ELISA： 原理：TP特异性抗原包备酶标板，与血清
中TP抗体结合，加入酶标抗体，底物显色 。
practice of clinical immunology, 2nd ed. Mosby, St. Louis, Mo.
二期梅毒的临床表现与实验室诊断
临床表现
二期梅毒实验室诊断
临床特点
取材部位
检查方法
皮疹 扁平湿疣 黏膜损伤等
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
《中国预防与控制梅毒规划 （2010-2020年）》
加强梅毒检测质量控制和实验室能力建设，充 分利用现有资源，开展梅毒检测实验室质量考 评和技术指导，提高梅毒实验室检测的准确性 和梅毒确证检测的可及性”
各期梅毒实验诊断方法
未经治疗的梅毒病人的自然病程
感染梅毒螺旋体
感染梅毒螺旋体
2-6周
中枢神经系统感染
wenku.baidu.com
15.07
6.5
50
2000
13.47
6.43
40
2001 2002
13.89 14.25
6.11 5.8
30
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11.2
5.63
20
2004
12.94
7.7
10
2005
14.46 10.96
0
2006
19.69 14.24
2007
23.13 17.16
2008
37.11 21.06
2009
40.58 24.66
60000 50000 40000 30000 20000 10000
0
梅毒 Ⅰ期 Ⅱ期 Ⅲ期 胎传 隐性
年份
1995年-2011年广东省各期梅毒发病趋势
2011年，全省21个地市报告梅毒51,051例，报告数占全国 报告总数的11.88%，位居全国第一
GD STD LG Yang
梅毒诊断的准确性如何？
转阴率
1.14％ 17.65％ 39.91%
40％ 23.08％
累计阴转率
1.14％ 18.59％ 44.57% 66.74％ 74.42％
[1]顾伟鸣等，先天梅毒的血清学随访，中华传染病杂志 2007，25（2）：117-119
误诊率？？？？ 检测能力差！！
2011年梅毒诊断试剂临床评估结果
中国性病控制中心，广西皮肤病防治研究所、北京市CDC、云南省 CDC、甘肃省CDC、浙江省皮肤病防治研究所等