昆虫病毒简介
昆虫质型多角体病毒概述
昆虫质型多角体病毒概述13生物技术许勇2013221107120010 早在16世纪，欧洲的养蚕历史中就出现了多角体型昆虫疾病的记载，这种疾病的特征是感染家蚕幼虫细胞内积累了大量晶状物质，约占感染幼虫蛋白总量的17％，其中微米大小的蛋白晶体被称为病毒多角体或包涵体。
质型多角体病毒（Cytoplasmic polyhedrosis virus，简称为CPV ），属呼肠孤病毒科（Reoviridae），质型多角体病毒属（Cypovirus ），多角体一般为四边形、六边形等，大小大致变化在0.5 ～10μm 范围。
病毒粒子为球状正二十面体，具蛋白质包涵体，在宿主细胞质内增殖，病毒核酸为分段双链RNA ，分子量为0.3 ～2.7 ×10道尔顿。
1昆虫质多角体病毒的病毒颗粒结构、分型与命名昆虫质多角体病毒感染昆虫中肠上皮细胞。
CPV病毒粒子为二十面体球形颗粒，直径在50一65 nm之间，为单层衣壳结构，衣壳外表面有2种不同大小的突起；具有3～5种结构蛋白.基因组由10或11个节段dsRNA构成，各节段RNA 相对分子质量范围为0 14×106～3．01× 106，G+含量介于34％～49％之间。
根据病毒基因组dsRNA片段在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中电泳图谱的差异，将CPV 分为15个电泳型，电泳型之间至少有3个基因节段的迁移率不同，国内钱纪放和吕鸿声对棉铃虫CPV北京株在蚕体连续传代及接棉铃虫产生的病毒进行丁基因组图谱分析，发现HaCPV北京株基因组图谱显示10条电泳带，但电泳型与已发表的HaCPV一5型、8型、1l型均不同，而且在棉铃虫体内连续50次传代试验中，基因组表现极其稳定。
通常，CPV的命名常冠以宿主名称，尽管有些昆虫确实与某种特殊CPV类型呈现专一的相互关系，然而却能被不同CPV类型感染，如莎草夜蛾能被CPV一3刑、5型、8型、11刑和12型感染，舞毒蛾能被CPV一1型、11型、和14型感染等等：因此，仅使用宿主昆虫名称并不适于CPV属的分类，所以目前CPV 的命名同时包括基因组电泳型与其原始宿主名。
8、昆虫病毒
(3) 经卵感染（卵表传染、经生殖细胞传染）。
三、昆虫病毒的传播
（1）垂直传播：经昆虫卵表将病毒传给下一代昆
虫；卵内遗传物质传播。
（2）水平传播：病死虫尸、感病寄主昆虫的爬行
（向上，解决顶部喷药难的问题）中的虫粪、唾液
污染树叶等昆虫的食料，使其它昆虫染病；成虫的
迁飞，雨水、风、寄生性昆虫、食虫鸟等可帮助病 毒扩散。其中成虫迁飞可将病毒远距离扩散传播。 （3）人为措施传播和扩散
2、侵染组织：CPV侵染寄主中肠柱状上皮细胞，并在细胞质 中形成多角体。病毒入侵可分为三个阶段：（1）病毒突起 吸附于细胞表面；（2）突起埋入细胞表层；（3）纤维状 髓核被释放入细胞质V病毒感染致死的文山松毛虫幼虫
被CPV病毒感染的思茅松毛虫幼虫
被CPV病毒感染致死的马尾松毛虫幼虫
第四章 昆虫病毒
最早关于昆虫病毒的记载是中国。在1149年 的《农书》中，记载家蚕的“高节”、“脚肿”
病，《蚕经》中描述病蚕“游走而不安箔”，最 后放“白水”而死, 就是现在所称的核型多角体 病毒病。沈公练（1862）在《广蚕桑说辑补》 “达眠起后二三日，有蚕身独短，其节高耸，不 食而常在叶上往来，脚下有白水者，宜即去之， 勿使他蚕沾染”。
第三节 昆虫病毒的感染与传播方式
一、病毒的感染方式
昆虫病毒感染方式有三种 (1)通过害虫取食进入中肠感染，这是最主要的方式。多 角体进入中肠后，在碱性条件下病毒粒子被释放出来， 病毒粒子将其遗传物质注入昆虫细胞，使昆虫细胞受到 病毒遗传信息的控制而复制病毒，最终导致害虫细胞破 坏和害虫死亡； (2) 经虫体的创伤感染（主要是游离病毒粒子的作用）；
杨扇舟蛾颗粒体病 毒和幼虫死亡症状
病毒体和粒子
北京因为有GV而不严重， 中原地区严重
病毒生物防治简介
通过感染试验方法鉴别病毒的存在，比如接 种后能引起健虫发生同样疾病。
电子显微镜观察：
通常包括超薄切片技术、负染色技术和投 影技术等。
血清学方法 ：
该法可确定各个分离株的亲缘关系，鉴别 用一般方法难以区分的病毒。
生物化学及分子生物学研究鉴定：
利用病毒的蛋白和核酸进行分子生物学方面 的鉴定。
4℃冰箱备用。
主要病毒杀虫剂生产实例有：
1、核多角体病毒杀虫剂 2、颗粒体病毒杀虫剂
核多角体病毒杀虫剂
目前，核型多角体病毒是应用最广泛的 昆虫病毒。在中国已进入大田试验的生产 示范的核多角体病毒杀虫剂有：棉铃虫 NPV、斜纹夜蛾NPV、油桐尺蠖NPV、茶黄 毒蛾NPV、舞毒蛾NPV、美国白蛾NPV、杨 尺蠖NPV、甘蓝夜蛾NPV等。
4 应用昆虫病毒防治害虫的状况
较早应பைடு நூலகம்于森林害虫膜翅目叶蜂类的防治，如 欧洲云杉叶蜂、欧洲松叶蜂、斯氏松叶蜂等， 在林区应用NPV等可获得较为持久的防治效果。
在鳞翅目森林害虫中，利用病毒防治有效的实 例也不少。如舞毒蛾，天幕毛虫、松毒蛾、松 带蛾等林木害虫。
目前大约已有50余种昆虫病毒进行过大田防治 试验。
病毒生物防治简介
1 前沿：
昆虫病毒是引起昆虫致病和死亡的重 要病原体。最早关于昆虫病毒的记载是 中国，在1149年出版的《农书》中，就 记载有家蚕的“高节”“脚肿”病，这 就是现在所称的核型多角体病毒病。
到1986年前为止： 国内外已从约1100种昆虫、螨类中分出
约1690种病毒 我国已从约7目26属190种昆虫中分离出
3 生物防治中病毒的生产
病毒为专性寄生病原，至今尚未研究 出能在人工培养基上生长，只能在活细胞 中增殖。因此，目前国内外应用于害虫防 治的昆虫病毒制剂主要是通过活虫体增殖 和细胞培养法繁殖。
09.第十二章 昆虫病毒
一、昆虫病毒分类
昆虫病毒种类繁多，形态结构和形态发生各 异，据国际病毒分类委员会第八次报告的统计， 昆虫病毒有1600多种，几乎涉及昆虫纲所有的目， 这些昆虫病毒分属于13个病毒科、2个病毒亚科 和21个病毒属。按病毒核酸类型划分，可分为； 双链DNA病毒；单链DNA病毒；双链RNA病毒；单 链RNA病毒；DNA和RNA的反转录病毒科。
（二）昆虫病毒与害虫的生物防治
昆虫病毒的能引起有益昆虫的疾病，造成经济损 失，又能杀灭害虫，保护农林作物和人体健康。昆虫 病毒作为生物杀虫剂，具有潜在的应用前景。与化学 农药相比，昆虫病毒杀虫剂具有很多优点。
首先，昆虫病毒本身就是自然界长期存在的，特别 如杆状病毒仅感染昆虫纲，对人体、畜禽、鱼虾等安全 无害，不会造成环境污染问题。其次，病毒的宿主特异 性高，人工散布后可引起种群内大流行，而不会因杀灭 害虫天敌造成害虫再猖獗和次要害虫大发生。第三，昆 虫病毒使用后效明显，因为病虫本身就是繁殖病毒的 “小工厂”，尸体成为新的传染源，遇到适当的条件即 可造成再次大流行，同时有些病毒还能通过带毒成虫产 下的卵引起子代感染发病，可经常性地控制虫口密度。
昆虫病毒杀虫剂的缺点：一是杀虫速度缓慢，害虫 发病至死亡这段时间，作物仍会受到轻度危害；二是病 毒特异性强，寄主范围窄，大多数病毒只能感染一种害 虫，当同一种作物有不同害虫同时存在时，尚需辅以其 它防治措施。针对这些缺点，应用基因工程技术，把一 些昆虫特异性毒蛋白基因导入天然病毒，或者改变病毒 本身的基因结构，可以显著提高防治效果，拓宽昆虫病 毒杀虫剂的杀虫谱。迄今为止，全世界登记注册的病毒 杀虫剂共有近40个品种，其中美国8种，殴共体8种，俄 罗斯11种，中国7种。
第十二章 昆虫病毒
第一节 昆虫病毒研究概况 第二节 昆虫DNA病毒 第三节 昆虫RNA病毒
昆虫病毒种类和应用技术
昆虫病毒种类和应用技术昆虫病毒是昆虫的病原微生物，可以利用昆虫活体作为生物反应器进行扩增，经过适当的加工过程，生产出病毒生物农药（杀虫活性成分主要是杆状病毒）。
早在1892年，德国用松针毒蛾NPV防治松树林上的松针毒蛾（Lymantria monacha）。
发现最早、研究时间最长、防治应用最为广泛的是杆状病毒科的核型多角体病毒（Nucleopolyhedrovirus，简称NPV）和颗粒体病毒（Granulovirus ，简称GV）以及呼肠孤病毒科中的质型多角体病毒（Cytoplasmic Polyhedrosis Virus，简称CPV）。
1975年，美国的Sandoz公司登记了第一个病毒生物农药产品，其商品名叫Elcar，是病毒含量为10亿PIB/克的美洲棉铃虫NPV（Helicoverpa zea NPV，HzNPV）可湿性粉剂。
这一产品的出现，标志了昆虫病毒以农药的身份正式进入农药市场。
上世纪30年代，加拿大为了控制云杉吉松叶蜂（Gilpinia hercyniae）的为害，从斯堪的纳维亚半岛引进寄生蜂进行防治，然而出乎意料的是，云杉吉松叶蜂病毒（NPV）也随之传入，结果导致害虫病毒病的大流行，对云杉吉松叶蜂种群控制的效果维持了50多年。
至今为止，世界各国至少有60多株昆虫病毒进入大田应用，主要是NPV、GV、CPV。
有30多种病毒取得注册、登记，进入生产应用。
在现已发现的1690种病毒中，杆状病毒占到60％以上。
目前已在500多种昆虫中分离到杆状病毒，其中大部分感染鳞翅目昆虫（蛾类和蝶类），少部分感染膜翅目的叶蜂和双翅目的蚊虫等。
世界各国都在开发和应用昆虫病毒防治害虫，如美国主要是Certis：棉铃虫NPV（GemStar），甜菜夜蛾NPV（SPOD-X ），舞毒蛾NPV（Gypchek），苹果蠹蛾GV（CYD-X）。
澳大利亚的Ag Biotech Australia Pty Ltd公司主要生产棉铃虫NPV（ViVus, ViVus Gold）；瑞士的Andermatt Biocontrol公司主要产品是茶小卷蛾GV（Capex），苹果蠹蛾GV（Madex），棉铃虫NPV（Helicovex），甜菜夜蛾NPV（Spexit）等；法国Natural Plant Protection主要病毒产品为甘蓝夜蛾NPV （Mamestrin），AgriVirion Inc.，苜蓿银纹夜蛾NPV（AcMNPV)；印度的AJAY Bio Tec. LTD.主要开发甜菜夜蛾NPV（Spodopterin），棉铃虫NPV（Heliokill）国内的主要产品包括原药产品棉铃虫NPV、甜菜夜蛾NPV、小菜蛾GV、菜青虫GV；制剂产品有：棉铃虫NPV、甜菜夜蛾NPV、斜纹夜蛾NPV、茶尺蠖NPV、茶毛虫NPV、甘蓝夜蛾NPV、小菜蛾GV、菜青虫GV、松毛虫质型多角体病毒，以及一些同其它杀虫剂混配的病毒制剂。
第五讲 昆虫病毒
核衣壳
＋
封套
衣壳粒
病毒粒子
特征：
个体微小：纳米 核酸：单（双）链DNA，单（双）链RNA，
蛋白：保护核酸，与侵染有关，含有酶，破坏细胞膜结构
封套：可以是细胞质膜，也可以是核膜，可以被重组 复制：病毒的繁殖方式为复制 病毒是专性细胞内寄生生物
烟草花叶病毒
噬菌体
昆虫核型多角体病毒
二、病毒分类
植物病毒 专门寄生在植物细胞里的病毒。 动物病毒 专门寄生在人或动物细胞里的病毒。 细菌病毒（噬菌体） 专门寄生在细菌细胞里面的病毒。
1）双链DNA：杆状病毒科、痘病毒科、多分病毒科、泡囊病毒 科和虹彩病毒科； 2）单链 DNA 病毒中的细小病毒科； 3）双链 RNA病毒，其中有呼肠孤病毒科、二分 RNA 病毒科； 4）单链 RNA 病毒，其中有微 RNA 病毒科、野田村病毒科和 T 四病毒科； 5）DNA 和 RNA 的反转录病毒，包括前病毒科和变位病毒科
增效蛋白是由病毒基因编码的一种磷脂蛋白。
目前研究认为，增效蛋白主要通过二种方式达到增效 作用：一是发挥金属蛋白酶的活性,降解昆虫中肠围食
膜上的肠粘蛋白和糖蛋白,从而破坏围食膜的物理屏障,
使病毒粒子更易进入中肠细胞,增加病毒的相对感染量; 二是改变中肠围食膜的通透性和孔径大小,使毒力蛋白 和病毒粒子更易通过围食膜,感染宿主昆虫
Associate Professor Wang's research has shown in vitro and in vivo, that the baculovirus is an excellent vector for carrying therapeutic genes into the brain-enabling the therapeutic genes to reach their targets to eliminate tumour cells.
昆虫病理学 昆虫病毒
·颗粒体病毒的专化性较强，交叉感染的情况甚为少见，一般认为颗粒 体病毒是包涵体病毒含DNA的各类中专化性最强的一类。
·以往尚无颗粒体病毒能在植物或其他动物细胞中增殖的报道。近年我 国用小菜蛾细胞系BCIRL-Px2-HNU3复制小菜粉蝶GV和用家蚕细胞 系Bm-21E-HNU5复制小菜蛾GV成功。
3 重要昆虫病毒的概述
3.3 质型多角体病毒(CPV)
·质多角体病毒（cytoplasmic polyhedrosis virus，简称CPV）的 发现比NPV和GV都要迟。日本蚕病学家石森直人早于1934年就观 察到家蚕的中肠上皮细胞内存在有多角体，但当时并未确定是由一 种新型病毒引起的。 ·CPV可感染鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目、脉翅目5目昆虫， 但主要见于鳞翅目和双翅目。
NPV病毒粒子结构图
3.1 核型多角体病毒(NPV)
（1）NPV的理化性状：
• 不溶于水及多种有机溶剂如乙醇、乙醚、三氯甲烷、苯、丙酮等 • 强酸或强碱溶液处理，能使多角体蛋白质溶解。 • 病毒粒子外有包涵体的保护，可在自然条件下存活多年仍不失效。对低温
有较高的忍受力。
如家蚕NPV在–135℃～–150℃条件下反复冻结融解5次，其感染力不变。对高 温的抵抗力较差，如粉纹夜蛾NPV的失活温度为82～88℃10min，棉铃虫NPV的失 活温度为75～80℃10min，粘虫的NPV在100℃经10min失活。
MNPV感染鳞翅目昆虫感染 模型
3.1 核型多角体病毒(NPV)
4、NPV的选择性与专化性
·杆状病毒曾以选择性和专化性高而著称，但试验证明一种昆虫的杆 状病毒能感染其他昆虫的事例并不少见。
·家蚕NPV能侵染柞蚕等11种昆虫。欧洲云杉卷叶蛾(Choristoneura murinana)的NPV能侵染云杉卷叶蛾(C．funiiferana)、苹果囊蛾、 李食心虫、欧洲松梢卷叶蛾等。红棕灰夜蛾(Sarcopolia illoba)NPV 能侵染银纹夜蛾、黄地老虎、粘虫等12种夜蛾科害虫。
昆虫病毒是什么
昆虫病毒是什么
顾名思义，以昆虫为宿主并对昆虫有病原性的病毒称为昆虫病毒。
既能在脊椎动物体内或高等植物体内增殖，又能在昆虫体内增殖的病毒很多，如动物病毒中的布尼亚病毒科、披膜病毒科的甲病毒属与黄病毒属、呼肠孤病毒科的环状病毒属、弹状病毒科的水疱性口炎病毒属与狂犬病毒属，以及植物呼肠孤病毒组与植物弹状病毒组的许多成员。
至l986年止，已经分离出1671种昆虫病毒。
分属于12个病毒科，侵染鞘翅目、双翅目、半翅目、同翅目、膜翅日、等翅目、鳞翅目、腺翅目、蜻蜓目、直翅目、毛翅目等11个目的昆虫。
其中绝大部分在鳞翅目中发现（900余种），而膜翅目中数量较少（60余种）。
我国现已发现200种昆虫病毒，其中为我国首次发现的有130多株。
目前在膜翅目的11个科中发现病毒。
即：蜜蜂科、叶蜂科、锯角蜂科、三节叶蜂科、茧蜂科、蚂蚁科、集蜂科、姬蜂科、切叶蜂科、卷叶锯蜂科、树蜂科。
依据1982年国际病毒分类委员会（ICTV）1986年版的昆虫和蜱螨类病毒病目录，昆虫病毒现被分成12科15属。
据39蜂疗网的资料了解，中国劳动人民最早描述了昆虫核型多角体病毒病的发病特征，虽然当时并不知道其发病的病原。
早在12 世纪中叶，中国就有家蚕脓病发病特征的记载，此病由家蚕核型多角体病毒引起。
可以杀灭害虫的昆虫病毒类群有许多，核型多角体病毒只是其中研究较多，应用技术比较成熟或较有应用前景的一类。
昆虫病毒简介-课件
约1690种病毒 • 我国已从约7目26属190种昆虫中分离出
234株病毒
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3 重要昆虫病毒的概述
• 已知昆虫病毒的寄主有鳞翅目、膜翅目、双翅 目、鞘翅目、直翅目、半翅目、同翅目、脉翅 目、革翅目、毛翅目、蜉蝣目、蜻蜓目等，尤 以鳞翅目为主要寄主。
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3.3 质型多角体病毒(CPV)
• 质多角体病毒（cytoplasmic polyhedrosis virus， 简称CPV）的发现比NPV和GV都要迟。日本 蚕病学家石森直人 于1934年就观察到家蚕的 中肠上皮细胞内存在有多角体，但当时并未确 定是由一种新型病毒引起的。
• CPV可感染鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目、 脉翅目5目昆虫，但主要见于鳞翅目和双翅目。 到1986年前国内外已发现CPV228株，代表种 为家蚕CPV。
杉卷叶蛾(C．funiiferana)、苹果囊蛾、李食心
虫、欧洲松梢卷叶蛾等。红棕灰夜蛾 (Sarcopolia illoba)NPV能侵染银纹夜蛾、黄地 老虎、粘虫等12种夜蛾科害虫。
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NPV的交叉感染性
• 一种昆虫也可合并感染两类不同的病毒， 如黄地老虎、菜粉蝶、粘虫、粉纹夜蛾、 云杉卷叶蛾等可合并感染核型多角体病 毒和颗粒体病毒。粘虫合并感染NPV和 GV时，GV能增强NPV的感染，有协同增 效作用。有些合并感染则有干扰作用，如 云杉卷叶蛾先感染的病毒妨碍后感染 病 毒的发展。
• 根据国际病毒分类委员会（ICTV） 1981 年通过的分类方案，所有已知病毒分为 54个科和群，此外还包括5个建议的或可 能的科和群。
• 目前已经明确分类地位的昆虫病毒有11科。
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昆虫病毒文档
昆虫病毒引言昆虫病毒是一类可以感染昆虫宿主并导致疾病的病毒。
它们通过接触、摄食或注射等途径进入昆虫体内并复制自身，在宿主体内进行生命周期的各个阶段。
昆虫病毒的传播和疾病发作对昆虫群体的生态与农业产量具有重要影响。
昆虫病毒的种类目前已知的昆虫病毒有数百种，属于不同的病毒家族。
常见的昆虫病毒家族包括：多角体病毒科、单纯病毒科、趋化病毒科、环状病毒科等。
每个家族中都有不同种类的病毒，它们可以感染不同的昆虫宿主，并在其体内繁殖传播。
昆虫病毒的传播途径昆虫病毒的传播途径多种多样。
其中，最常见的传播途径包括：1.直接接触：感染病毒的昆虫宿主与健康昆虫直接接触，病毒通过接触传播。
2.口部摄食：病毒通过昆虫摄食时进入其消化系统，并从中复制自身。
3.注射传播：某些昆虫病毒可以通过宿主的口器或尾部注射病毒颗粒，将病毒直接注入健康昆虫体内。
4.垂直传播：昆虫病毒还可以通过母体传递给子代，称为垂直传播。
昆虫病毒的生命周期昆虫病毒的生命周期通常包括以下几个阶段：1.吸附：病毒颗粒通过与宿主细胞表面受体的结合，进入宿主细胞内。
2.寄主内扩增：病毒在宿主细胞内复制自身，产生大量新的病毒颗粒。
3.组装：新形成的病毒颗粒在宿主细胞中自组装为完整的病毒颗粒。
4.裂解：宿主细胞破裂释放出已经组装好的病毒颗粒。
5.传播：释放出的病毒颗粒可以通过不同的方式传播给其他昆虫宿主。
昆虫病毒与农业昆虫病毒在农业生产中具有重要作用。
作为昆虫的天敌，病毒可以帮助农民控制害虫数量，减少化学农药的使用。
在一些农业生产系统中，昆虫病毒还被用作生物农药的重要组成部分，用于农业害虫的防治。
然而，昆虫病毒也可能对农业产生负面影响。
某些昆虫病毒可以感染农作物的昆虫传播媒介，导致农作物产量下降或病害的传播。
因此，昆虫病毒的研究与控制对于农业生产的可持续发展至关重要。
结论昆虫病毒是一类能够感染昆虫宿主并导致疾病的病毒。
它们通过直接接触、摄食、注射等途径传播，并在宿主体内进行生命周期的各个阶段。
3.7 昆虫病毒
昆虫病毒的感染与传播方式
昆虫病毒的感染： 口器感染，通过害虫取食进入中肠感染，这是最主要的方式； 伤口和气孔感染（主要是游离病毒粒子的作用）； 经卵感染（卵表传染、经生殖细胞传染）；
昆虫病毒的传播： 垂直传播：经昆虫卵表将病毒传给下一代昆虫； 水平传播：感病昆虫、成虫迁飞使起它昆虫染病或将病毒 远距离扩散；
第七节类 ➢ 昆虫病毒的传播特点 ➢ 昆虫病毒的应用
昆虫病毒的分类
昆虫病毒：以昆虫为宿主的病毒。能够在宿主细胞内形成包含 体(包含体本质为蛋白质);按照含病毒粒子个数又分为多角体 （ 含很多病毒粒子）、颗粒体（只含一个或两个病毒粒子）；
根据包含体在宿主细胞中的部位，可以把昆虫病毒分为 •核型多角体病毒（NPV） •质型多角体病毒（CPV） •颗粒体病毒（GV） • 无包含体病毒
人为措施传播和扩散；
昆虫病毒杀虫剂的应用
病毒杀虫剂的优缺点
优点 专一性强，对其他生物昆虫安全； 可以垂直传递和感病虫体的水平传播，在控制病害持续 流行的使用上不受温度等条件限制； 保质期长； 不产生抗性；
缺点 杀虫谱窄； 潜伏期长，杀虫速度慢； 只能在活体昆虫或细胞中繁殖；
思考题 昆虫多角体病毒包含体主要成分是蛋白质，对 碱性环境非常敏感，这一特点对于病毒感染昆 虫有什么重要意义？
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核型多角体病毒
核型多角体病毒：是一类主要寄生在昆虫细胞核的 病毒，核型多角体病毒呈十二面体、四角体、五角 体、六角体等,病毒粒子呈杆状，长度一般是300330 nm，直径35-45 nm。 核型多角体病毒包含两种类型： 单核衣壳型多角体病毒（SNPV） 多核衣壳型多角体病毒（MNPV）
核型多角体病毒的复制
质型多角体病毒
感病中肠
松毛虫CPV
昆虫病毒 (2)
昆虫病毒1. 简介昆虫病毒是一类寄生于昆虫体内的病毒，可以引起昆虫的疾病和死亡。
这些病毒通过昆虫的体液传播，并在昆虫的不同组织和细胞中进行复制。
昆虫病毒的研究对于昆虫生物学、农业和医学等方面具有重要意义。
2. 分类根据不同的分类系统，昆虫病毒可以被分为多个科、属和种。
根据病毒的形态和基因组特点，昆虫病毒可被分类为单链RNA病毒、双链RNA病毒、单链DNA病毒和双链DNA病毒等。
3. 病毒的感染昆虫病毒通过多种方式感染昆虫。
常见的感染途径包括经口摄取、体液传播和气味感染等。
昆虫感染后，病毒会侵入昆虫的细胞，并利用昆虫细胞内的生物机制进行复制和传播。
4. 病毒的复制昆虫病毒的复制过程包括病毒侵入细胞、基因组复制和蛋白质合成等。
病毒侵入细胞后，它会利用细胞内的酶和核酸合成机制进行基因组复制。
随后，病毒会合成蛋白质，并通过细胞内的运输系统组装成完整的病毒颗粒。
5. 病毒的传播昆虫病毒可以通过多种途径传播。
当感染昆虫的体液接触其他昆虫时，病毒可以通过体液传播到其他昆虫体内。
此外，昆虫病毒还可以通过败血症的昆虫体液分泌物、昆虫的粪便和昆虫死亡后的尸体传播。
6. 病毒的封闭为了控制昆虫病毒的传播，防止病毒引起更大的疫情，人们常常采取一系列措施进行病毒的封闭或控制。
例如，在农业中，使用昆虫病毒的杀虫剂可以有效地控制农作物上的害虫感染。
7. 病毒与昆虫的关系昆虫病毒与昆虫之间存在复杂的相互作用关系。
一方面，病毒可以通过感染昆虫将自身传播到其他宿主。
另一方面，昆虫也可以通过免疫系统抵御病毒的感染。
这种相互作用关系对于昆虫病毒的研究和控制具有重要意义。
8. 应用前景昆虫病毒在农业、医学和环境保护等领域有广泛的应用前景。
在农业领域，利用昆虫病毒进行害虫的生物防治可以有效地减少农作物的损失。
在医学领域，昆虫病毒也可以作为一种载体，用于基因传递和基因治疗。
此外，昆虫病毒还可以用于环境保护，例如用于控制蚊子等传播疾病的昆虫种群数量。
5.昆虫病毒的应用
影响病毒防治害虫效果的环境因素
1. 温度 田间条件下温度不是影响病毒毒力的主导因素。温度影响 疾病潜伏期的长短，NPV和CPV等的传播适温约为25℃等。 2. 光线 紫外线对病毒的致病力有影响。昆虫病毒制剂在田间的失 效与日光特别是紫外线是关系最大，因此制剂中加入紫外线保 护剂或其他辅剂可延长滞留而有助于增效，试用的此类物质有 聚乙烯醇、活性炭、二氧化钛聚合物、黑烟灰、寄主血淋巴、 糖浆等。病毒制剂中加入少量硼酸、硫酸铜等可增强活性和侵 染。 3. pH和土壤 病毒的活性与其繁殖环境的pH有关，如棉铃虫NPV保存在 pH7下为宜。病毒在土壤中有很高的稳定性。
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缺点：
1. 宿主范围小，主要是鳞翅目，少数是膜翅目、
双翅目、鞘翅目、脉翅目
2. 潜伏期较长（5-12天），杀虫速度慢，对老
龄害虫效果较差；
3. 需活体培养
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昆虫病毒的使用技术和方法
1. 单独使用病毒杀虫剂 直接将感病的死虫捣烂加水喷洒使用或使用生产提纯的 商品制剂。 2. 与化学农药的混用 印度谷螟GV+马拉硫磷、棉铃虫NPV+西维因/灭幼脲3 号/菊酯类农药、舞毒蛾NPV+DDT等。 3. 与微生物农药的混用 应用最多的是B.t与NPV混合使用，美国白蛾GV+B.t； 病毒的混用应考虑干扰作用和增效作用，如CPV和NPV 的混用，表现干扰作用，GV和NPV混用表现为增效作用等。
虫，目前国内外发现GV约130株，
我国发现42株，其中26株为首次 发现，有8株已进入田间应用，如
小菜蛾GV、黄地老虎GV、茶小
卷蛾GV、小菜粉蝶GV等。
蔌状体，含与NPV相似的杆状病毒粒
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GV对寄主的侵染
• GV入侵中肠上皮细胞与NPV相似（脱壳位置不同）， 也可穿过中肠侵染其它组织；
昆虫病毒简介 PPT课件
3.1 核型多角体病毒(NPV)
• 核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis viruse,简称NPV)是研究得最早和最为详 细的一类昆虫病毒。
• 到1986年为止，国内外发现464株，中国 约124株，其中78株为首次发现。
• 在分类上为杆状病毒属（Baculovirus） 的A亚组。
昆虫病毒应用简介
主要内容
• 1 前言 • 2 昆虫病毒的类群 • 3 重要昆虫病毒概述 • 4 昆虫病毒的生产 • 5 昆虫病毒在害虫防治上的应用
1. 前言
• 昆虫病毒是引起昆虫致病和死亡的重要 病原体。最早关于昆虫病毒的记载是中 国，在1149年出版的《农书》中，就记 载有家蚕的“高节”“脚肿”病，这就 是现在所称的核型多角体病毒病。
• 生物鉴定方法：
通过感染试验方法鉴别病毒的存在，比如接种 后能引起健虫发生同样疾病。
2.3 昆虫病毒的诊断鉴定
• 电子显微镜观察
通常包括超薄切片技术、负染色技术和投影技 术 般方法难以区分的病毒。
• 生物化学及分子生物学研究鉴定
3 重要昆虫病毒的概述
NPV对昆虫的侵染
感病特征： 以鳞翅目为例：
感病初期无明显异常变化 行动迟缓食欲减退，体色变淡或呈油光 病虫常爬向寄主植物高处，死前体躯变软 以腹足紧附枝叶倒挂而死 皮肤则脆弱易裂，破后流出乳白色或褐色的 浓稠液体，内含大量新形成的核多角体。
NPV的感染途径
• 卵期被病毒污染的虫卵在幼虫孵化时因吞食卵 壳而感染。
不同种类病毒的结构
2.1 昆虫病毒的基本特征
昆虫病毒的侵染活动：
• 在寄主外存在时没有代谢、生长和繁殖，只保 留在适宜条件下侵染寄主的潜在能力。
• 在不适宜的环境下活性较易丧失。
昆虫病毒文档
昆虫病毒概述昆虫病毒是一类以昆虫为宿主的病毒。
它们可以引起一系列疾病，影响昆虫的生长和繁殖。
昆虫病毒具有许多特殊的特征，使得它们成为研究和应用的热点领域。
本文将介绍昆虫病毒的分类、结构、传播方式和应用前景。
分类根据病毒的性质和形态，昆虫病毒可以分为很多种类。
在昆虫病毒分类中最广为人知的是六大科，分别是：Iridoviridae科、Baculoviridae科、Reoviridae科、Nodaviridae科、Retroviridae科和Flaviviridae科。
每个科都有其特有的特征和传播方式。
结构昆虫病毒的结构主要由核酸和蛋白质组成。
核酸包括DNA 和RNA，这取决于特定病毒所属的科。
蛋白质包括壳蛋白和非壳蛋白，它们组成了病毒的外壳和内部结构。
一些昆虫病毒还具有额外的结构，如嵌合蛋白和纤毛。
传播方式昆虫病毒的传播方式多种多样。
常见的传播方式包括直接接触、口腔摄食、刺吸、空气传播和垂直传播等。
直接接触是指病毒通过昆虫身体表面的感染途径进入宿主。
口腔摄食是指昆虫在进食过程中摄入带有病毒的植物或其他昆虫。
刺吸则是指病毒通过昆虫的口器或针状器官直接进入宿主。
空气传播是指病毒在空气中传播，通过昆虫的翅膀或跳跃等方式扩散病毒。
垂直传播是指病毒通过亲代昆虫传递给下一代。
应用前景昆虫病毒在农业、生物农药和基因工程等领域具有广阔的应用前景。
在农业上，昆虫病毒可以作为一种有效的生物农药，用于控制害虫。
由于昆虫病毒对非目标生物和环境影响较小，被广泛认为是一种环境友好的农药。
在生物农药领域，研究人员还通过对昆虫病毒的改造和优化，开发了具有更强的杀虫活性的新产品。
另外，昆虫病毒还被用于基因工程研究。
由于昆虫病毒在昆虫体内的复制和表达特性，研究人员可以利用昆虫病毒作为载体将目标基因导入昆虫宿主，实现基因工程的目的。
这项技术为研究昆虫的生理过程以及有关昆虫的分子机理提供了有力工具。
总之，昆虫病毒在农业和生物技术领域具有巨大的应用潜力。
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• CPV作为杀虫剂应用的不多，主要原因 是只侵染中肠上皮细胞，在自然界中以 慢性感染的地方病出现。如广泛用于生 物制剂尚须进一步进行安全试验研究。 • 当前CPV用于害虫防治实践的有日本赤 松毛虫(Dendrolimus spectabilis) CPV、。
CPV的一般形态特征
• 其包涵体和NPV相似，也是多角体，但只在被 感染细胞的细胞质内形成。质型多角体呈六角 形、四角形、球形、椭圆形等。 • 质型多角体的直径为0.5μm～25μm， 1个多角 体可包埋100～10 000个病毒粒子。病毒粒子为 球形二十面体，直径为30nm～60nm，有内、 外两个二十面壳，每个壳有12个小单位构造。
NPV对昆虫的侵染
感病特征： 以鳞翅目为例：
感病初期无明显异常变化 行动迟缓食欲减退，体色变淡或呈油光 病虫常爬向寄主植物高处，死前体躯变软 以腹足紧附枝叶倒挂而死 皮肤则脆弱易裂，破后流出乳白色或褐色的 浓稠液体，内含大量新形成的核多角体。
NPV的感染途径
• 卵期被病毒污染的虫卵在幼虫孵化时因吞食卵 壳而感染。 • 舞毒蛾刚孵化出的幼虫常因食人染有LdNPV的 卵壳而致死。病死的初孵幼虫又为后期幼虫提 供接种源。在幼虫期因LdNPV引起的死亡率常 出现两个高潮，一是在孵化后1～2周，一是在 末龄幼虫期。
GV对昆虫的侵染
• 感病特征： 感染初期无明显病征 之后出现反应迟钝和停止取食 随后虫体颜色发生改变，血液渐变乳白 感病虫体可能膨大或收缩 已死幼虫体壁脆弱，破后流出大量颗粒体。 染病幼虫可存活较长时间。 病死虫体有时用腹足倒挂枝叶上，呈“Λ”形。
GV的感病特征
• 染病幼虫常于幼虫期即死，有时也可活 至蛹期或成虫期。从染病到死亡所经时 间因虫而异。一般4～5天，可长至34天， 如粘虫。幼虫龄期、侵染剂量、温度等 因素也能影响这段时期的长短。
核型多角体病毒在电镜下的照片
NPV病毒粒子的形态结构
病毒粒子杆状，所以又称为病毒杆状体。 病毒粒子由外到内： 囊膜（内膜）——一层脂质膜 衣壳（内膜）——主要成分是蛋白质 髓核——由DNA组成，呈螺旋状 后两者加在一起成为核衣壳。 在NPV中，通常一个囊膜内由多个排列成束的核衣 壳，称为病 毒束。 一个品系的NPV，可能每个囊膜内均只有一个核衣壳，也由可能 每个囊膜内由1到多个核衣壳而成为“病毒束”，前者称为单粒 包埋型病毒，后者称为多粒包埋型病毒。
3 重要昆虫病毒的概述
目前已知至少有20余类的昆虫病毒，但研 究历史最长、防治应用最广的是杆状病 毒科中的核型多角体病毒和颗粒体病毒 以及呼肠孤病毒科中的质型多角体病毒。
3.1 核型多角体病毒(NPV)
• 核型多角体病毒(nuclear polyhedrosis viruse,简称NPV)是研究得最早和最为详 细的一类昆虫病毒。 • 到1986年为止，国内外发现464株，中国 约124株，其中78株为首次发现。 • 在分类上为杆状病毒属（Baculovirus） 的A亚组。
• 生物鉴定方法：
通过感染试验方法鉴别病毒的存在，比如接种 后能引起健虫发生同样疾病。
2.3 昆虫病毒的诊断鉴定
• 电子显微镜观察
通常包括超薄切片技术、负染色技术和投影技 术等。
• 血清学方法
该法可确定各个分离株的亲缘关系，鉴别用一 般方法难以区分的病毒。
• 生物化学及分子生物学研究鉴定
3 重要昆虫病毒的概述
2.2 昆虫病毒的分类
2.2.1分类依据：
①形态学特征
囊膜的有无；病毒粒子的形状、大小；亚显微结构等
②生物化学和生物物理学特征
核酸类型、核酸特性、蛋白质构成以及隔成分的含量、 分子量、浮力密度和沉降系数等
③生物学特征
病毒入侵生物体的复制过程、寄主范围和传递方式等
2.2 昆虫病毒的分类
• 2.2.2昆虫病毒的类群：
3.1 核型多角体病毒(NPV)
• 一般形态特征：
- 具有较大的包涵体，称为多角体 (polyhedra，简称IB或PIB)，在被感染的 细胞核内形成。 - 多角体大小常因寄主昆虫种类的不同而不同，
甚至在统一寄主细胞内，多角体的形状大小也 有区别。常见的形状有三角形、四角形、五角 形、立方体、不规则形等。
NPV的交叉感染性
• 一种昆虫也可合并感染两类不同的病毒， 如黄地老虎、菜粉蝶、粘虫、粉纹夜蛾、 云杉卷叶蛾等可合并感染核型多角体病 毒和颗粒体病毒。粘虫合并感染NPV和 GV时，GV能增强NPV的感染，有协同 增效作用。有些合并感染则有干扰作用， 如云杉卷叶蛾先感染的病毒妨碍后感染 病毒的发展。
3.2 颗粒体病毒(GV)
• 颗粒体病毒（granulosis virus，简称GV） 在分类上属杆状病毒科B亚组，是有包涵 体的昆虫病毒。 • 目前为止国内外发现GV约130株，中国 发现约42株，其中26株为首次发现。
GV的一般形态特征
• 包涵体称颗粒体(granule) 或荚膜(capsule)。 • 先在被感染细胞的核内形成，但当核膜破裂后 可溢出到细胞质内。 • 包涵体很小。在电子显微镜下观察，颗粒体的 形状有卵形、椭圆形、长卵形等，通常直径为 0.1～0.3μm，长0.3～1.0μm。每个包涵体内一 般只有一个病毒粒子。有时也出现不正常的形 状。
1
2
3 4
1 BmCPV的包涵体形态，右下为该包涵体的模式图 2 家蚕质型CPV的包涵体形态，右上角为此包涵体的模式图 3 扬雪毒蛾CPV的多角体扫描电镜图像 4 舞毒蛾CPV包涵体的扫描电镜图像
CPV的理化性状
• 不溶于水，但在水中经较长时间可被蚀 刻，而从表面失去粒子。 • 在碱液中的溶解度比NPV多角体的溶解 度为小，如以稀Na2CO3液或其他稀碱液 处理，能失去表面病毒粒子，剩下不溶 解的多角体，呈多孔的海绵状。 • 在碱液中很快被破坏，在从多角体中分 离提纯时须加注意。
左图：霜天蛾GV的形 态
右图：小菜蛾GV经 碱处理后的病毒粒子
GV的理化性状
• 不溶于水和一般的有机溶剂如乙醚、乙 醇、丙酮、二甲苯等。 • 遇强酸或强碱，包涵体能迅速溶解，并 可使病毒粒子变性而失去侵染力。
GV的理化性状
• 可在室温下保存5年以上而不失侵染力。 • 高温可使其失活。 • 冰冻无多大危害。较低的温度有可能延 长贮存的时期。 • 紫外线或其他辐射线能使完整的病毒失 活。 • 用稀碱处理后可获得完整和具侵染性的 病毒粒子。
不同种类病毒的结构
2.1 昆虫病毒的基本特征
昆虫病毒的侵染活动：
• 在寄主外存在时没有代谢、生长和繁殖，只保 留在适宜条件下侵染寄主的潜在能力。 • 在不适宜的环境下活性较易丧失。
对温度很敏感，在55℃ －60℃时，病毒悬液几分钟内就会变性。 X-射线、γ-射线和紫外线照射能使病毒变性失活。 有囊膜的病毒容易被脂肪溶剂破坏。一般常用甲醛等消毒剂来消 毒被病毒污染的器皿和空气。
• 根据国际病毒分类委员会（ICTV） 1981 年通过的分类方案，所有已知病毒分为 54个科和群，此外还包括5个建议的或可 能的科和群。 • 目前已经明确分类地位的昆虫病毒有11 科。
2.3 昆虫病毒的诊断鉴定
• 一般的形态学和组织学方法：
根据染病虫体的症状进行诊断。凡是产生多角 体的病毒类型，用一般光学显微镜观察而明确 病毒的存在，并可采用某些染色方法来鉴别是 哪一类具包涵体的病毒。
2 昆虫病毒的类群
• 病毒virus：一类形态最小，结构最简单 的微生物。由单一的核酸(RNA或DNA) 组成中心核、核外包裹一层外壳蛋白组 成。 • 病毒病viral disease：由病毒病原体引起 的疾病。
2.1 昆虫病毒的基本特征
昆虫病毒的一般构造：
- 昆虫病毒是一类没有细胞构造的生物体 - 主要组成是核酸和蛋白质。 - 病毒个体称为病毒粒子(virion)，由两部分构成：内面 是核心（core），成分为核酸；外层是衣壳(capsid)， 成分是蛋白质。 有些衣壳外包被有囊膜。成分为脂类。 核酸的功能是携带遗传信息，决定病毒的遗传变异性 和传染性。 蛋白质的功能是保护核酸，并决定病毒的抗原性。
• 幼虫被感染后直至出现症状和病征的这段潜伏期受多 种因素的影响。 • 接种量少则潜伏期长。 • 幼虫龄期越后易感性一般较小，潜伏期也延长。 • 温度显著影响潜伏期长短，如家蚕在正常室温下5～7 天就出现病征，16 ℃ ～17时15天内不出现病征。 • 较高的相对湿度也能诱发某些昆虫发生病毒病 。
3.3 质型多角体病毒(CPV)
• 质多角体病毒（cytoplasmic polyhedrosis virus， 简称CPV）的发现比NPV和GV都要迟。日本 蚕病学家石森直人早于1934年就观察到家蚕的 中肠上皮细胞内存在有多角体，但当时并未确 定是由一种新型病毒引起的。 • CPV可感染鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目、 脉翅目5目昆虫，但主要见于鳞翅目和双翅目。 到1986年前国内外已发现CPV228株，代表种 为家蚕CPV。
到1986年前为止： • 国内外已从约1100种昆虫、螨类中分出 约1690种病毒 • 我国已从约7目26属190种昆虫中分离出 234株病毒
3 重要昆虫病毒的概述
• 已知昆虫病毒的寄主有鳞翅目、膜翅目、双翅 目、鞘翅目、直翅目、半翅目、同翅目、脉翅 目、革翅目、毛翅目、蜉蝣目、蜻蜓目等，尤 以鳞翅目为主要寄主。 • 昆虫病毒中的包涵体病约占90％以上，其中鳞 翅目寄主约为80％，双翅目10％。在无包涵体 病毒中，鳞翅目寄主占33％，双翅目23％，鞘 翅目18％，膜翅目2.5％
GV的交叉感染现象
• 鳞翅目幼虫可合并感染NPV和GV两种病 毒。如黄地老虎、菜粉蝶、粘虫等可同 时感染颗粒体病毒和NPV。粘虫的六龄 幼虫如单感染NPV，死亡率3.4％，单感 染颗粒体病毒，死亡率20%，如二种合 并感染，则死亡率为80％，死体为NPV 病征，体内主要是核型多角体，也有些 同时存在颗粒体。