测定雪碧中的苯甲酸含量实验方案(UV)
生物学综合实验雪碧中苯甲酸钠含量的测定-含色谱知识
高压液相色谱测雪碧中苯甲酸的含量实验原理：高压液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统、和数据处理系统组成，核心部分为分离系统，其机理是在高压的条件下根据被分离的组份在固定相和流动相间分配的平衡将不同的组份分离的一种技术。
从分析原理上讲高效液相色普法和经典液相色谱法没有本质的区别,但由于它采用了新型高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,使经典的液相色谱法焕发出新的活力。
高压液相色谱的优点是明显的,如:分离效果好、选择性高、检测灵敏度高、分离速度快等。
实验步骤：（1）实验仪器的准备：高压液相色谱仪未使用时柱子内充满了纯甲醇，需要先使柱子内充满5%的甲醇和95%的水，然后再使柱子内的流动相换成5%的甲醇和95%的乙酸铵水溶液，当看到基线稳定时，仪器待用。
（2）雪碧的前处理：超声脱气法脱去雪碧中存在的二氧化碳等气体，用0.45微米的滤膜抽滤雪碧，稀释样品待测。
（3）标准品的准备：把标准品稀释成不同的浓度，分别为5,10,20,50，100这五个浓度待用。
（4）样品的测定：样品测定前先测定标准品的浓度，确定保留时间（被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间）。
测定不同浓度的标准品，进样针需要润洗三至四次。
上样品：用样品润洗进样针5-6次，每次需完全润洗，但不能把样品针拔出，润洗完成后，缓慢吸取样品，达到最大刻度处，中间不能出现气泡；打开上样阀门，进样针缓慢插入进样孔指顶部，有阻力后继续前进，至不能前进，把进样针中的样品缓慢推入到样品孔中，拔出进样针，关闭上样阀门。
待测定结果出现后，保存测定结果，测下一样品。
直至测定结束。
（5）实验仪器的关闭：需要先使柱子内充满5%的甲醇和95%的水，然后再使柱子内的流动相换成纯甲醇溶液，关闭仪器，关闭计算机。
实验结果：标准品浓度峰面积5 16565110 32969720 64939650 1665278100 3274058100-2 3351074100-3 3317366样品峰面积369894355354362985标准曲线求得样品的峰面积平均值为：362744.3333，带入公式求得样品中苯甲酸的浓度为：10.95703715分析讨论：⑴如何确定系统的稳定性？答：可对同一个浓度的标准品进行多次测定，若结果无变化则系统稳定。
紫外光谱吸收法测定雪碧中的防腐剂
3、利用上一步测定的最大吸光度处的 λmax 测定苯甲酸标准溶 液的吸光度，平行测三组（苯甲酸标准溶液的浓度为 6.4ug/mL）。
4、绘制雪碧吸收曲线（A-λ）。 5、由朗比定律计算得出配制的雪碧溶液中苯甲酸的浓度
三、 数据记录及处理
1、苯甲酸钠最大吸收峰的寻找
λ（nm） 210
215
220
222
224
226
227
228
吸光度 A
λ(nm)
230
235
240
245
250
255
Байду номын сангаас
260
吸光度 A
2、待测液、标准溶液在 λmax 处的吸光度平行测定
测量液 测量次序
雪碧溶液 标准溶液
1 2 3
3、根据测定数据绘制雪碧吸收曲线（A-λ）如例图所示。
4、浓度计算
由 A∝C 可知 雪碧 = େ雪碧 进而计算出雪碧中苯甲酸的
标准液
େ标准液
浓度（注意：求得的浓度为稀释后的浓度，需换算成原液浓
度）。
实验三：紫外光谱吸收法测定雪碧中的防腐剂
一、 实验目的 1、了解苯甲酸钠的紫外吸收特性，利用该特性检测食物中的
防腐剂 2、进一步掌握朗伯比尔定律
二、实验原理 为防止食物在储藏、运输等过程中变质、腐败等现象的发生，
食品生产者常在食品中加入一定量的防腐剂。苯甲酸和山梨酸以 及它的钠盐都是卫生组织允许的主要防腐剂。
苯甲酸具有芳香结构，在 210nm-260nm 范围内有最大吸收 峰，由朗比定律 A=lg(1/T)=Kbc 可知，吸光度 A 与溶液浓度 C 成正比，可根据苯甲酸钠的吸光度测量雪碧中的苯甲酸含量。 二、 实验步骤
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量
GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量1. 引言雪碧是一种非常受欢迎的碳酸饮料，广泛地消费于全球范围内。
然而，近年来对于食品安全和健康问题的关注有所增加，越来越多的消费者开始关注雪碧饮料中是否含有防腐剂苯甲酸，以及苯甲酸的含量是否达到食品安全标准。
本文将对GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量进行调查和分析。
2. 背景苯甲酸是一种常见的防腐剂，用于保持食品的新鲜和延长其保质期。
然而，过量的苯甲酸摄入可能对人体健康产生负面影响，包括致癌风险。
因此，不同国家和地区制定了关于食品中苯甲酸含量的限制标准，以确保消费者的食品安全。
3. 调查方法为了研究GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量，我们采取了以下步骤：1.购买GB雪碧饮料样品；2.使用液相色谱法(LC)测定样品中的苯甲酸含量；3.参照食品安全标准，评估GB雪碧饮料中苯甲酸的含量是否符合法规要求。
4. 结果我们针对GB雪碧饮料样品进行了苯甲酸含量的测定，得到以下结果：样品苯甲酸含量 (mg/L)152233445 4.5根据我们所测得的样品数据，我们可以计算出GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的平均含量为3.5 mg/L。
5. 讨论根据我们的测定结果，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量为3.5 mg/L，低于食品安全标准规定的限制。
这说明GB雪碧饮料在防腐剂苯甲酸的使用上符合法规要求，并且对消费者的食品安全没有明显的风险。
然而，需要注意的是，本研究只针对了有限数量的样品进行了测定，无法代表所有GB雪碧饮料的情况。
此外，苯甲酸对于不同人群的健康影响可能存在差异，因此，一般消费者在饮用雪碧饮料时仍需适量并注意个人体验。
6. 结论根据我们的调查研究，GB雪碧饮料中防腐剂苯甲酸的含量在食品安全标准范围内，并且对消费者的食品安全没有明显风险。
然而，消费者在饮用雪碧饮料时仍应注意适量饮用，并注意个人体验。
7. 参考文献[1] Zhang H., Liu L., Li L. (2019). Analysis of benzoic acid in carbonated beverages by HPLC with UV detection. Journal of Food Safety and Quality, 10(2), 233-238.。
雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究【开题报告】
毕业论文开题报告化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、选题的背景、意义食品的营养丰富，极易受微生物污染而腐败变质。
含乳饮料含有丰富的蛋白质类及多种维生素，为了延长保存期和改善口味，一般在产品中添加一些防腐剂，防腐剂便成为重要的食品添加剂之一，防止食品腐败变质，延长食品保存期，抑制食品中微生物繁殖；添加剂在食品加工过程中被广泛使用。
《食品安全法》于2009年6月1日起颁布实施，食品安全引起社会各界的广泛关注，苯甲酸是有机化学防腐剂，添加到食品中用于抑制微生物、糖的生长，但使用量过大对人体会造成一定危害。
能引起哮喘等一系列过敏症状。
因此对食品中苯甲酸的含量进行检测有重要意义。
二、相关研究的最新成果及动态高效液相色谱法测定酸奶中苯甲酸。
高效液相色谱法直接测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠，在国际(GB／TS009 28—1996)和(GB／TSO09 29—1996)方法中只适用于汽水、果汁、配制酒等液体样品．而对固体或半固体的样品前处理多采用有机溶剂提取，操作过程繁琐．有机溶剂对操作者的健康造成危害。
HPLC测定含乳饮料中的山梨酸和苯甲酸含量在我国食品卫生标准对其应用范围和使用限量都有明确的规定[1 ]对文献报道了很多食品添加剂的分析方法,如薄层色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法及传统的高效液相色谱法。
高效液相色谱法在对多种添加剂同时分析方面有其十分有利的条件。
在高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中苯甲酸时，测量速度较慢，往往一针需要7—10 min，做一条工作曲线需要两小时左右，再测样品时仪器的灵敏度发生了改变，所以国家标准采用单点校正法测定，尽量缩短测量时间。
标准溶液的浓度尽量与待测溶液的浓度接近，可以消除仪器非线性影响，否则不在同一·线性范围内，可能引起较大的不确定度，而单点校正法并没有考虑线性影响，认为是绝对线性，不存在不确定度的。
根据小分量不确定度不足最大分量不确定度的1／3时，小分量不确定度可以忽略不计的原则，在本实验中，对于玻璃器皿的膨胀系数、A级吸量器具的不确定度均可以忽略，但对于样品预处理时使用的具塞比色管等给实验带来较大的不确定度，实验时必须加以控制，通过这样分析来源后，对于我们评定HPLC测量其他成分有很大的帮助。
紫外可见分光光度法测碳酸饮料中苯甲酸钠的含量
化学工业科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald112食品添加剂对于改善食品色、香、味,延长食品保质期具有重要作用。
苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛,但都有一定的毒性[1],其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者[2]。
监测它们在饮料中的使用量, 对于保障人们身体健康具有重要的现实意义。
目前主要有气相色谱法、液相色谱法、AOAC 法(氧化法)[3]等。
其中以气相色谱法经常使用,但仪器要求高,不便于基层实验室使用。
该文提出把苯甲酸钠用磷酸酸化后蒸馏出苯甲酸直接于紫外分光光度计上分别在两组分的最大吸收波长处测定,根据吸光度加和性的原理再分别进行定量。
1 实验部分1.1 仪器与试剂北京瑞利U V-1801紫外可见分光光度计1 c m 石英比色皿2只磷酸、氢氧化钠、苯甲酸、重铬酸钾、硫酸均为分析纯试剂苯甲酸标准储备液：称取1.000 ｇ苯甲酸，用0.01 m ol/ＬN a O H 稀释至1000 ｍＬ容量瓶中。
此溶液1 ｍＬ含有1 ｍg的苯甲酸。
苯甲酸标准操作液：移取10.00 ｍＬ苯甲酸标准储备液用0.01 m o l /ＬN a O H稀释至100 ｍＬ此溶液此溶液1ｍＬ含有0.1 ｍg的苯甲酸。
1.2 样品处理取雪碧样品溶液10.00 ｍＬ至于250 m L的蒸馏瓶中，加1 m L磷酸，70 m l 水蒸馏，用预先加有5 m L 0.1 m o l /ＬN a O H 100 m L 容量瓶接收流出液，约收集45 m L时停止蒸馏，用少量的水洗涤冷凝器，最后将容量瓶内蒸馏液稀释至刻度。
吸取20.00 m L 蒸馏液置于另一个250 m L 蒸馏瓶中，加入33 m ol/L重铬酸钾25 m L、2 m o l /Ｌ硫酸溶液6.5 m L ，加热回流10 m i n ，冷却，再加1 m L 磷酸，40 m L 水，蒸馏，收集流出液于100 m L容量瓶，用0.01 mol/ＬNaOH稀释至刻度，摇匀。
实验D 防腐剂测定
实验9（序号待统编）紫外分光光度法测定雪碧中苯甲酸的含量一、目的要求1、掌握用紫外——可见分光光度法测定防腐添加剂的原理和方法2、加深对蒸馏分离不同有机物的方法理解和操作技术的掌握二、原理将样品酸化后进行蒸馏，苯甲酸随蒸汽馏出。
收集馏出的馏分，加入强氧化剂将馏出液中的有机物完全氧化分解，再次蒸馏，并用碱吸收得苯甲酸钠。
用紫外分光光度计于225nm 处进行测定。
采用标准曲线法并计算样品中苯甲酸的含量。
三、仪器与试剂紫外分光光度计，蒸馏装置。
NaOH溶液：0.1mol·L-1, 0.01mol·L-1；K2Cr2O7溶液：0.03333mol·L-1；H2SO4溶液：2 mol·L-1；苯甲酸标准溶液：100mg/L，称取0.1000g苯甲酸（经105℃烘干）于250mL烧杯中，加入0.1mol·L-1NaOH100mL，搅拌溶解后，转移入1000mL容量瓶中，用水定容；Na2SO4（无水）；H3PO4。
四实验步骤1、标准曲线的绘制（1）、移取50.00mL苯甲酸标准液于250mL蒸馏瓶中，加H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水70mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
用50mL容量瓶（预先加有5mL0.1mol·L-1NaOH）收集馏出液。
当馏出液约为40mL时，停止蒸馏，用少量水吹洗冷凝器，洗液并入容量瓶，最后用水定容。
（2）、移取第一次馏出液于另一个250mL蒸馏瓶中，加入0.03333 mol·L-1K2Cr2O7溶液25mL，2mol·L-1H2SO4溶液6.5mL，连接冷凝装置，在水浴上加热约10min，冷却，加入H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水40mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
以下操作同（1）。
（3）、移取第二次馏出液2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1NaOH溶液定容。
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
4、苯甲酸钠溶液0.5mg/ml：
59.02mg苯甲酸，加入100ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入900ml纯化水，浓度为50mg/L；
0.2361g苯甲酸，加入400ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入3600ml纯化水，浓度为50mg/L；
序号
试剂名称
瓶
Байду номын сангаас备注
1
85%磷酸
6
白试剂瓶（60ml），AR（原瓶）分装
2
无水Na2SO4
3
AR（原瓶），用量25g/组
3
NaOH溶液
6
0.1mol/L，白试剂瓶（250ml），用量10ml/组
4
H2SO4溶液
6
2mol/L，白试剂瓶（250ml）
5
K2Cr2O7溶液
6
0.033mol/L，白试剂瓶（250ml）
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
仪器：10组（2-4人/组）
序号
仪器名称
个
备注
1
紫外可见分光光度计
2
411仪器室，配擦镜纸、滤纸条、比色皿（1cm）
2
蒸馏装置
20
2个/组，单口圆底烧瓶（250ml、磨口24#）
10
平衡管（磨口24#），胶管连接
10
蛇形冷凝管（40cm、磨口24#），配胶管
6
苯甲酸钠溶液
6
0.1mg/ml，棕试剂瓶（500ml），用量30ml/组
7
玻璃珠
3
白试剂瓶（广口，60ml）
8
高效液相色谱法测定饮料中山梨酸和苯甲酸含量
高效液相色谱法测定饮料中山梨酸和苯甲酸含量实验八、高效液相色谱法测定饮料中山梨酸和苯甲酸含量【目的与要求】1．掌握高效液相色谱法测定碳酸饮料中苯甲酸和山梨酸的原理和方法2．了解高效液相色谱仪的基本结构和使用方法3．熟悉碳酸饮料样品的处理方法【方法原理】苯甲酸和山梨酸广泛用于食品防腐剂，能够引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏等。
因此国家严格限制其使用量。
在本实验中，样品首先经过超声和加热处理，以除去二氧化碳和乙醇。
然后经滤膜过滤后注入高效液相色谱仪，通过反相C18液相色谱柱分离后，紫外检测器230nm波长处检测。
以色谱峰的保留时间定性，色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量分析。
【仪器和材料】1．仪器与器皿高效液相色谱仪（Waters，美国）：2487紫外检测器、1525高压输液系统、717进样系统、Waters Breeze色谱工作站；超声震荡仪；100ml烧杯（3个）；1.00ml 和100μL移液枪；离心管若干个；离心管架；微孔滤膜（0.22μm）。
2．试剂（1）甲醇（色谱纯）；醋酸铵溶液（0.02mol/L，色谱纯）；流动相使用前均超声脱气处理10min。
（2）山梨酸储备溶液(1.0 mg/ml）：准确称取0.2500g山梨酸，加超纯水定容至250ml。
（3）苯甲酸储备液（1.0 mg/ml）：准确称取0.2500g苯甲酸，加超纯水定容至250ml。
【操作步骤】1．样品处理碳酸饮料（雪碧）：移取10ml碳酸饮料于烧杯中，超声处理5min。
然后用微孔滤膜（0.22 μm）过滤于另一烧杯中，滤液备用。
吸取100 μL滤液于离心管中，并加入900 μL超纯水，混合均匀标记为样品。
2．标准溶液配制（1）取一定量的苯甲酸储备液，经滤膜过滤于离心管中。
吸取50 μL 滤液于另一离心管并加入950μL 超纯水，得到50 μg/ml 的苯甲酸标准品，混合均匀后标记为苯甲酸标准品。
（2）同理得到50 μg/ml 的山梨酸标准品，做好标记。
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析
碳酸饮料中笨甲酸钠含量的测定与分析摘要碳酸饮料中苯甲酸钠添加含量不仅影响着企业的品牌效益还会影响到消费者安全问题，然而目前国家标准中苯甲酸钠含量的测定方法不太适合测定实验研究，本实验提供了两种比较实用便捷和低成本的分析测定技术。
碱滴定法测定笨甲酸钠用标准氢氧化钠溶液滴定处理液至初显粉红色为终点，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积，再运用公式计算出样品中苯甲酸钠含量。
紫外分光光度法测碳酸饮料中的苯甲酸钠在酸性条件下经乙醚提取分离后,测定样品中苯甲酸钠的吸光度, 通过标准曲线的回归方程查得样品中苯甲酸钠的含量。
这两种方法不需要贵重的气相或液相色谱仪, 样品处理简单易于操作, 检验结果与国家标准中高效液相色谱法测定结果基本一致。
可作为饮料产品中苯甲酸钠含量监控的有效方法。
关键词：碳酸饮料苯甲酸钠碱滴定法紫外分光光度计1、前言苯甲酸钠又称安息香酸钠，分子式为C7H5NaO2，性状白色颗粒或结晶性粉末。
无臭或微带安息香气味,味微甜,有收敛性;易溶于水（常温）53.0g/100ml 左右,PH在8左右；是酸性防腐剂,在碱性介质中无杀菌,抑菌作用;其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好.苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进,细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。
苯甲酸钠是用于内服液体药剂的防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。
我国食品防腐剂主要采用苯甲酸钠及山梨酸钾，由于苯甲酸钠价格便宜，在碳酸饮料等饮品中作为防腐剂被广泛使用。
但苯甲酸钠用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌。
为确保食品添加剂的绝对安全使用, 根据GB2760- 1996国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
在中国大多数地区,碳酸饮料生产企业众多,规模较大,对防腐剂苯甲酸钠的添加控制水平较高,然而也有可能会发生防腐剂苯甲酸钠超标的情况。
测定雪碧中苯甲酸含量实验方案(滴定)
北京化工大学检测雪碧中的苯甲酸含量实验方案实验0901 王昊刘嘉林2010/4/25实验目的：用简单可行的办法定量检测雪碧中的苯甲酸含量，并与国家标准进行对比。
实验原理：将雪碧中的苯甲酸钠酸化为苯甲酸，先蒸发浓缩，再用萃取的方法将苯甲酸富集起来，最后用酸碱滴定的方法测定苯甲酸含量。
苯甲酸沸点为249℃，水的沸点为100℃，因此在蒸发过程中苯甲酸基本不会挥发。
柠檬酸的分解温度为175℃，在200℃左右的环境中加热可以保证苯甲酸不挥发且柠檬酸分解完全。
利用这个原理可以除去柠檬酸。
实验仪器和试剂：仪器：500ml容量瓶，酒精灯，石棉网，大烧杯，碱式滴定管，5ml移液管，100ml量筒，温度计，长直导管等试剂：待检测雪碧5L，草酸固体，2mol/L NaOH，2mol/L HCl，乙醚（分析纯），中性乙醇（分析纯），甲基橙，酚酞，甲基硅油等实验步骤：一．苯甲酸的富集与柠檬酸的除去：1．取500ml雪碧，置于烧杯中，在石棉网上加热至煮沸，直至剩余少量液体为止。
2．重复第一步操作，至处理完5L雪碧为止（约共剩余小于1L液体）。
3．向蒸馏后的剩余液体中加入2mol/L 10ml HCl 酸化。
4．将酸化后的溶液分几次分装在分液漏斗中，用乙醚进行反复，多次萃取。
5．加热萃取液，除去乙醚得苯甲酸溶液。
6．将得到的苯甲酸在如右图所示的装置中用200℃左右的油浴恒温加热10min，使柠檬酸基本分解。
7．将最终得到的苯甲酸溶于中性乙醇中。
二．NaOH滴定溶液的配制与标定：1．用分析天平称取0.09g——0.135g的草酸固体，溶于去离子水中，在500ml容量瓶中定容。
并计算草酸溶液浓度。
2．用移液管移取2mol/L NaOH溶液5ml，用乙醇稀释至500ml。
再用量筒量取稀释后的溶液100ml，稀释到200ml。
得到约0.01mol/L的NaOH溶液3．取50ml草酸溶液，以甲基橙作指示剂用配好的NaOH 乙醇溶液滴定草酸，滴定三次，取平均值，计算出NaOH溶液浓度。
雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究【文献综述】
毕业论文文献综述化学工程与工艺雪碧饮料中防腐剂苯甲酸含量的分析研究一、前言部分目前市场上各类饮料越来越多的得到人们的青睐，由于其含有丰富的蛋白质、糖类及多种维生素，已成为小朋友的首选饮品。
一般这类产品中都要添加一些苯甲酸(防腐剂)来延长产品的保质期但使用量过大对人体会造成一定危害，能引起哮喘等一系列过敏症状。
随着人民生活水平的提到，人民群众越来越关注食品安全。
二、主题部分原理去除试样中的脂肪和蛋白质，甲醇稀释，过滤后，采用反相液相色谱法分离测定。
试剂和材料除非另有规定，本方法所使用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
甲醇（CH3OH）：色谱纯。
亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O] 106 g，用水溶解于1000 mL 容量瓶中，定容到刻度后混匀。
乙酸锌溶液（183 g/L）：称取乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]219 g，加入32mL乙酸，用水溶解于1000 mL容量瓶中，定容到刻度后混匀。
磷酸盐缓冲液（pH=6.7）：分别称取2.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）和2.5 g 磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）于1000 mL 容量瓶中，用水定容到刻度后混匀，用滤膜过滤后备用。
氢氧化钠溶液（0.1 mol/L）：称量4g氢氧化钠（NaOH），用水溶解于1000 mL容量瓶中，定容到刻度后混匀，硫酸溶液（0.5mol/L）：移取30 mL的浓硫酸（H2SO4）到500 mL 水中，边搅拌边缓慢加入，冷却到室温后转移到1000 mL 容量瓶，定容到刻度后混匀。
甲醇水溶液：体积分数为50%。
标准溶液苯甲酸和山梨酸标准贮备液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各500μg。
准确称取苯甲酸、山梨酸标准品各50.0 mg，分别置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解，并稀释至刻度。
摇匀后，冷藏于冰箱中，有效期2个月。
GB21703—2010苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液：每毫升含苯甲酸、山梨酸各10μg。
荧光分析法测定雪碧防腐剂苯甲酸的含量
荧光分析法测定雪碧防腐剂苯甲酸的含量星夜钢琴手小豆2011年12月23日一、实验目的1.掌握荧光分析法的基本原理；2.掌握荧光光谱仪的使用方法；3.学习如何建立一个分析方法；4.测定雪碧中苯甲酸的含量。
二、实验原理荧光是光致发光。
当物质的分子吸收光以后，从基态跃迁到激发态，为激发态分子，这一过程经历的时间约为10－15s。
处于激发态的分子不稳定，它可能通过辐射跃迁和非辐射跃迁的衰变过程返回基态，也可能经由分子间的作用过程而失活。
辐射跃迁伴随着光子的发射，即产生荧光；非辐射跃迁的衰变过程包括振动松弛（VR）、内转化（ic）和系间窜越（isc），这些衰变过程导致激发能转化为热传递给介质。
激发态的分子在10－12～10－14s后通过非辐射去活，回到第一电子激发态的最低振动能级，再以发射辐射的形式去活，跃迁回至基态的各个振动能级则发出荧光，如图1所示。
图1 分子发光示意图有芳环或具有多个共轭双键体系的有机化合物易产生荧光，具有刚性平面结构的有机物分子易产生荧光。
大多数无机盐金属离子不产生荧光，而一些金属螯合物能产生很强的荧光。
取代基的性质，溶剂的极性，体系的pH和温度，都会影响荧光体的荧光特性或荧光强度。
溶液的荧光强度与该溶液对光吸收的程度以及溶液中荧光物质的荧光效率以及浓度有关。
如下式：F＝2.303ΦI0εbc式中F为荧光强度，2.303为ln2，Φ为荧光量子产率（发射的光子数与吸收的光子数之比），I0为激发光强度，ε为摩尔吸光系数，b为光程长度，c为荧光物质浓度。
当入射光强度一定时，荧光强度与荧光物质浓度成正比，即F＝Kc。
上式只有在c较小时才使用，即低浓度时，荧光强度F与溶液荧光物质的浓度c成正比例关系，因为当浓度较大时（εbc≥0.05），推导公式时幂级数中的二次项甚至三次项就不能忽略了。
随着浓度进一步增大，还会出现荧光强度随着浓度的增加反而降低的现象，这是因为内滤效应、自猝灭等因素造成的[2]。
测定碳酸饮料中苯甲酸钠含量
碳酸饮料中苯甲酸钠含量的测定与分析[实验日期]：年月日——月日[实验操作人]：[实验地点]：[实验目的]：1.学习使用双相滴定法进行饮料中苯甲酸钠的测定操作2.学习使用紫外—可见分光光度计，并将测定结果与双相滴定法进行比较。
3.体会化学分析方法和仪器分析方法在低含量测定中的优缺点[实验原理]：本实验采用双相滴定法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量。
本实验选做紫外-可见分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量，并将结果与双相滴定法进行对照苯甲酸钠的测定可以使用HCl滴定，但因为生成的苯甲酸常温下溶解度很小，几乎不溶于水，由此造成滴定终点的pH突越不够明显，另外游离的苯甲酸附着在容器和液面表面会影响观察滴定结果，并在一定程度上吸附少量的指示剂，不利于终点判断。
而苯甲酸在常温下难溶于水（0.34g/100ml），在空气中微挥发，有吸湿性，溶于热水，也溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。
苯甲酸钠常温易溶于水（53.0g/100ml，PH≈8）。
综合考虑，在本实验中采用乙醚来吸收水相中的游离苯甲酸，将苯甲酸提取入乙醇溶液中，之后在乙醇溶液中使用0.01mol/L的标准NaOH溶液以PP为指示剂滴定碳酸饮料样品至显粉红色，根据滴定消耗的NaOH标准溶液的体积计算碳酸饮料中苯甲酸钠的含量。
1注：选作部分相关内容见后。
[实验仪器]：50ml酸式滴定管，50ml碱式滴定管，250ml锥形瓶×3，500ml分液漏斗，1000ml1根据最新GB2760- 2003国家卫生标准规定,碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
烧杯，250ml容量瓶×n，25ml移液管，10ml量筒，100ml量筒，玻璃棒，表面皿，带橡胶塞的细口瓶×2，50ml具塞量筒×2，2ml吸量管，10ml移液管。
电子分析天平（0.0001g），紫外-可见分光光度计，电热恒温水浴锅（室温+5℃~99℃）。
[实验试剂]：HCl溶液（1+1），40%NaOH溶液，草酸/邻苯二甲酸氢钾基准试剂，苯甲酸基准试剂，PP，无水硫酸钠(分析纯)，乙醚(分析纯)，NaCl(分析纯)，乙醇(分析纯)。
反相高效液相色谱法测定雪碧中的苯甲酸
分析化学实验报告实验名称：反相高效液相色谱法测定雪碧中的苯甲酸专业：化学教育班级： 11化学班姓名：指导教师：郭老师日期： 2013.9.7一、实验目的1、学习高效液相色谱仪的操作。
2、了解高效液相色谱法测定苯甲酸的基本原理。
3、掌握高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法。
一、实验原理苯甲酸为具有苯或甲醛的气味的鳞片状或针状结晶，具有苯或甲醛的臭味。
熔点122.13℃，沸点249℃，相对密度1.2659（15/4℃）。
在100℃时迅速升华，它的蒸气有很强的刺激性，吸入后易引起咳嗽。
微溶于水，易溶于乙醇、乙醚等有机溶剂。
苯甲酸是弱酸，比脂肪酸强。
苯甲酸是重要的酸型食品防腐剂。
在酸性条件下，对霉菌、酵母和细菌均有抑制作用，但对产酸菌作用较弱。
抑菌的最适pH值为2.5～4.0，一般以低于pH值4.5～5.0为宜。
在食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁，最大使用量不得超过2.0g/kg；在果酱(不包括罐头)、果汁(味)型饮料、酱油、食醋中最大使用量1.0g/kg；在软糖、葡萄酒、果酒中最大使用量0.8g/kg；在低盐酱菜、酱类、蜜饯，最大使用量0.5g/kg；在碳酸饮料中最大使用量0.2g/kg。
用高效液相色谱法将饮料中的苯甲酸与其它组分（如：柠檬酸（钠）、蔗糖等）分离后，将已配制的浓度不同的苯甲酸标准溶液进入色谱系统。
如流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的，测定它们在色谱图上的保留时间tR 和峰面积A后，可直接用tR定性，用峰面积A作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定饮料中的苯甲酸含量。
三、仪器和试剂1、Agilent 1220高效液相色谱仪。
2、色谱柱：Kromasil C18，5µ 150×4.6mm。
3、流动相：75%甲醇（色谱纯）+25%PH=3.3的磷酸缓冲溶液（过三次）。
4、苯甲酸标准贮备溶液：准确称取0.0109g含量99.5%苯甲酸，用过三次的蒸馏水溶解，定量至50mL容量瓶中，并稀释至刻度。
紫外-可见分光光度计法测定饮料中苯甲酸钠的含量
紫外-可见分光光度计法测定饮料中苯甲酸钠的含量一、实验目的1.了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV-2501的操作。
2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，根据GB2760- 1996规定，碳酸饮料中苯甲酸钠的允许最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸钠的含量。
三、仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV-2501（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶。
2.NaOH溶液（0.1mol/L）3.苯甲酸钠标准溶液的配制(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间。
(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于5个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/L NaOH溶液1.00mL后，用蒸馏水稀释定容。
得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.雪碧（500mL）5.蒸馏水四、实验步骤1.吸收曲线的绘制（1）系列标准溶液的配制50mL瓶编号 1 2 3 4 5 6 100.0mg/L苯甲酸钠标准溶液体积（mL）0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.000.1mol/L NaOH溶液体积（mL） 1.00用蒸馏水容量50.0系列标准溶液浓度（mg/L）0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 记录吸光度A值（2）吸收曲线的测定用某一浓度较高的标准液如4号或5号溶液，于210nm~300nm波长范围内扫描，即的苯甲酸钠的吸收曲线。
用高效液相色谱法测定苯甲酸和山梨酸的含量
2分钟出现的可能是溶剂峰脱机文件调用实验结果
推一针浓度峰面积
提取10ml雪碧（只含苯甲酸）稀释至50ml 稀释五倍六个芒果（只含山梨酸）
4,5组雪碧样品
4,5组芒果样品
数据处理：
雪碧检测样品中苯甲酸含量y=2257 代入标准曲线y=73.548x-47.704
得x=31.33 ug/ml
由于检测样品为稀释了五倍的雪碧， ml ug c v v v c v c /33.31,5,
2122211==⋅=⋅
所以c 1=5*31.33=156.5ug/ml
芒果饮料检测样品中山梨酸含量y=5736 代入标准曲线y=84.55x-21.065
得x=68.10 ug/ml 由于检测样品为稀释了五倍的原饮料，
所以c 3=340.5ug/ml
由GB 中饮料的山梨酸含量不得超过200ug/ml ，
碳酸饮料中苯甲酸含量不得超过500ug/ml ，
可知测得样品符合国家标准。
芒果饮料的速溶图中5min 处出现峰，并非苯甲酸。
因为笨甲酸的峰出现时间为6.293min,
查配料表及其他数据可推出其为乙酰胺酸钾。
紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸
实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器1.1 试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水1.2 仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3 实验步骤3.1 苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。
3.2 标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。
以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。
3.3 样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λmax 处测定吸光度。
4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度 0.000 0.139 0.283 0.683 0.887图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为0.357=4.612μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1V: 所取样品体积为 25ml2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故4.612μg/ml≈4.612μg/g=4.612mg/kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度4.612mg/Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。
雪碧中苯甲酸钠的测定.ppt
（一）实训目的与要求
• ⒈学习及了解高效液相色谱仪的工作原理及操作 要点。 • ⒉掌握高效液相色谱法定糖精钠、苯甲酸钠的原 理及方法。 • ⒊学会使用高效液相色谱仪，学会识别色谱图。 • (二)基本原理 • 样品加热除去二氧化碳和乙醇，调节pH至近中性 后，过滤，然后经高效液相色谱仪反相色谱分离， 根据保留时间和峰面积进行定性定量。
三 (仪器与试剂)
⒈仪器：高效液相色谱仪、紫外检测器。 ⒉试剂：雪碧试样
测定方法
将样品配置成一定的体积，经滤膜过滤，滤液用 HPLC分析。 然后用微量注射器吸取大于20uml的试样，排除气 泡，注射于自动进样器。
样品含量分析
序号 保留时间 名称 浓度（mg/ml) 校正因子 峰面积 峰标志 峰分离度 理论 塔板数 ────────────────────────────────────────────────── 1 4.967 苯甲酸钠 0.04 7.78945e-007 51352 LMV 0.61 4792 ────────────────────────────────────────────────── 总计 0.04 51352
mV 49 48 47 46 45 44 43 42
2.850' (1) 4.967' 苯甲酸钠
41 40 39 0.9 1.8 2.7
3.6
4.5
5.4
6.3
7.2
8.1
9
min
序号 保留时间 名称 浓度 （mg/ml） 校正因子 峰面积 峰标志 峰分离度 理论塔 板数 ──────────────────────────────────────────────── 1 3.669 雪碧 0.1712 41820 0.56 2753 ──────────────────────────────────────────────── 总计 0.1712 41820
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北京化工大学
雪碧中苯甲酸含量的测定
实验0901 刘嘉林王昊
2010/6/10
雪碧中苯甲酸含量的测定
实验目的：
用简单可行的办法定量检测雪碧中的苯甲酸含量，并与
国家标准进行对比。
实验原理：
雪碧中的苯甲酸含量很低，只能利用紫外吸收法检测。
将苯甲酸标样配制成不同浓度，作为对比，再检测待测样品
吸光度，即可计算出苯甲酸的含量。
实验药品：
苯甲酸标准溶液；待测雪碧溶液
实验仪器：
25ml容量瓶6个；722型紫外分光光度计；500ml烧杯；
100ml量筒
实验步骤:
1.配制标准溶液。
2.取25ml雪碧溶液于容量瓶中定容。
3.将配制好的标准溶液依次用紫外分光光度计测量其
吸光度，绘制出标准曲线。
4.测量待测溶液吸光度，计算其中苯甲酸含量。
1。