2.2.1动物细胞培养和核移植技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
动物细胞特点 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的 提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄， 这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一 个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组 并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终 发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
9.回答下列有关动物细胞培养的问题： ⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目， 最好选用细胞分裂到 中 期的细胞用显微镜进行 观察。 ⑸在细胞培养过程中，通常在 冷冻 条件下保存 细胞，因为在这种条件下，细胞中 酶 的活性 降低，细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发 生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织 当作 抗原 进行攻击。
动物克隆过程的实际是细胞核移植
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。
２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
思考题
5、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找 出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高 产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞； 多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞， 而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体 细胞。 6、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明 理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、 活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像 供体动物，操作也方便
2-2-1 动物细胞培养和核移植技术
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2014-3-7
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【集智研讨】（8min）
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研讨内容：课内探究和自主预习中未 解决的问题。 要求： 1.认真、高效、有序。 2.先对学后群学，并将交流的成果及时整 理到学案上。 3.组长负责宏观调控，负责好结果反馈， 并做好展示、质疑的准备。
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展示内容
展示组/个人
课内探究：1
课内探究：2 课内探究：3 课内探究：4（1）
1组（口头）
2组（口头） 5组（口头） 6组（口头）
课内探究：4（2）
7组（板书）
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1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
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卵细胞 和极体 第一极体 次级卵母细胞
MⅡ期： 减数第二次分裂中期
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显微操作去核法。
细胞核核移植
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体细胞核移植过程
供体细胞 （供核） 卵母细胞 （MⅡ期：供质）
细胞培养
获取供体 细胞 注 入 无核卵母细胞 妊娠
细胞融合 重组 细胞 激 活
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1.动物细胞工程技术的基础是（ B ） LOGO A.动物细胞融合 B.动物细胞培养 C.胚胎移植 D.单克隆抗体 2.用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自 胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织， 其主要原因是这样的组织细胞（ D ） A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
人教版选修三生物课件：2.2.1动物细胞培养和核移植
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养
动物血清、血浆：P补46充旁培栏养题液及中小没有知完识全搞清
楚的补成充分合成培养基中所缺乏的营养物质及激素等。
36.5±0.5℃
细胞代谢
7.2~7.4
培养液的PH7
5.应用: 连线表示动物细胞培养的应用及实例
可根据变异细胞占细胞总数的比 例来判断毒性的大小。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动 物进行了100%的复制吗？为什么？
不是。克隆动物的DNA绝大部分来自供体细胞核，但还有少 量DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞的细胞质。此外， 生物的性状还受环境的影响。
17Biblioteka 思考题1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操 理由：______________________________ 作过程的不同点？ 胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性较容易。
5胚)体胎细细胞胞是核分移化使植程技度细术低得，胞到恢的复克从其隆全牛瓶能从性生壁较殖容胰方上易式。蛋上脱看白属落于酶下来，便于分装后继续培养。
2、克隆动物遗传物质的来源？
10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
归纳：克隆动物的基因型、性别、主要性状、染色体组成均与供核个体相同。
10~50 5)体细胞核移植技术得到的克隆牛从生殖方式上看属于
2.相关概念: (1)细胞贴壁:细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。 (2)细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__时, 细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养:指动物组织消化后的_初__次__培__养__。 (4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现_接__触__抑__制__后,需要重新用 _胰__蛋__白__酶__等处理,然后分瓶继续培养,让细胞_继__续__增__殖__的培 养过程。
高中生物_2.2.1动物细胞培养和核移植技术教学设计学情分析教材分析课后反思
动物细胞培养和核移植技术教学设计高二年级多数学生已经掌握了一定的生物学基础知识,具备了独立思考和判断能力，合作性学习的、能力也比较强，但是个体之间还是存在着较大的差异。
因此本节课以学生的学习为主，以教师的组织引领为辅。
加强教材与生活的联系，引导和调动学生的情感体验，关注学生的心理变化，培养学生对事物有正确的情感态度。
本节课通过设计的探究问题，加强了学生的小组合作意识，提高了学生分析问题的能力。
视频的播放，给学生展示了中国在克隆技术上的发展，增强了学生的兴趣和爱国意识。
同时，每个知识点都留出记忆巩固的时间，强化了知识。
《动物细胞培养和核移植》是人教版高中生物选修三《现代生物科技专题》第2章第2节《动物细胞工程》第1节课的教学内容，主要学习动物细胞培养这一基础技术和核移植技术的过程和应用。
本节内容是本章的重点同时又是近几年的热点，又是后面学习动物细胞融合和单克隆抗体的基础。
通过本节的学习让学生充分理解和认识生物工程的前沿技术，以此激发学生热爱科学、努力学习、积极探索的精神。
专题二细胞工程动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术班级：____________姓名：_____________编写：谭静审核：潍坊中学生物组【练习】（1）、在动物细胞培养过程中，下列哪种现象是不可能的（）A．细胞一直在细胞悬液中分裂生长B．有少部分细胞可能在培养条件下无限地传代下去C．有部分细胞核型会发生变化D. 个别细胞会发生基因突变（2）、下列过程与细胞培养无关的是（）A.检测有毒物质B.生产单克隆抗体C.筛选抗癌药物D.杂交育种（3）、世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。
请仔细看图后回答问题：⑴写出ａ所指的细胞工程名称：ａ⑵实施细胞工程ａ时，⑶多莉面部的毛色是，判断依据：。
⑷若黑面绵羊的基因型为AA,白面绵羊的基因型为aa，则克隆羊的基因型为。
【跟踪训练】一、选择题1、动物细胞工程技术的基础是（）A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植2、在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A．使动物组织分散为单个细胞进行培养B．去掉细胞壁成为原生质体C．去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D．促进蛋白质水解为多肽3、在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（）A、衰老退化的动物组织细胞B、成熟动物个体的体细胞C、动物的受精卵细胞D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞4、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状（）A、难以预测B、像甲C、像乙D、像丙5、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
高中生物专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术学案新人教版选修3
2．2.1 动物细胞培养和核移植技术[学习目标] 1.归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。
方式一2003年，四川少年小林点燃鞭炮，导致面部、四肢被严重烧伤并感染。
为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求“割皮救儿”，烧伤整形科主任魏平最终同意进行这场罕见的亲体皮肤移植手术。
为了全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的皮块，儿子和爸爸的皮肤相隔相嵌，估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来了生机，孩子的痊愈指日可待。
思考：1．小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2．选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？3．自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？方式二古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事，表达了人类对复制自身的幻想。
1978年，美国科幻小说家罗维克(D.Rorvick)写了一本名叫《克隆人》(The Cloning of a man)的书，内容是一位富商将自己的体细胞核移植到一枚去核卵中，然后将其在体外卵裂成的胚胎移植到母体子宫中，经过足月的怀孕，最后生下了一个健康的男婴，这个男婴就是一个克隆人。
现在，克隆人已经不是科幻小说里的梦想，而是呼之欲出的现实。
由于克隆人可能带来复杂的后果，一些生物技术发达的国家，现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。
克隆人，真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗？我们应该怎样正确看待克隆技术呢？一、动物细胞工程和动物细胞的培养1．动物细胞工程2.动物细胞培养 (1)概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
(2)过程动物组织块或器官――――――――――→剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理单个细胞――→加培养液细胞悬液――→初次培养原代培养―→传代培养。
生物：2.2.1《动物细胞培养和核移植技术》教案(2)(新人教版选修3)
动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.
动物细胞的培养过程
见书：
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
•思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？
答：胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分
蔗糖植物激素
葡萄糖动物血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无病毒植株
获得细胞或细胞分泌蛋白
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
核移植技术
1.克隆羊培育过程
胚胎移植技术
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
课后笔记：有了第一节的基础，学生对本节内容易于理解，因此，在教学中我采用讲授、自学、讨论等相结合的教学方法。
学生在比较中学习知识，加深对知识的理解
学习这部分内容
可先让学生列举所知道的克隆动物
课堂巩固
学案与测评的反馈练习
作业
学案与测评练习
板书设计：动物细胞培养和核移植技术
一、动物细胞培养
1.发展历史:
2、动物细胞培养的应用和概念：
3.动物细胞培养的条件:
4.动物细胞培养技术的应用:
5．植物组织培养和动物细胞培养的比较
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
2.2.1 动物体细胞核移植技术
思考与讨论
③. 你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物， 是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物的线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些 行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动 物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同， 其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同， 从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。
◆此实验应用到的技术： 动物细胞培养、动物体细胞核移 植、胚胎移植
电脉冲刺激
重组胚胎
胚胎移植
代孕母体 供体奶牛遗 传基础相同 的牛
思考与讨论
①. 在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须 先去掉受体卵母细胞的核？ 为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价 值的动物提供的体细胞。 ②. 用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞， 想一想，这是为什么？ 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，能保证供体细 胞正常的遗传基础。
较植物组织培养基，动物细胞培养液的独特之处？
维持培养液的PH
①液体培养基
②成分中有动物血清等
想一想
为什么对动物细胞进行培养时要添加血清？
血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋 白质为白蛋白和球蛋白；氨基酸有多种，是细胞合成蛋 白质的基本成分，有些动物细胞不能合成，必须由培养 液提供；激素有胰岛素、生长激素等促进细胞的生长、 增殖、贴附，还有很多未知的促细胞生长因子等其他活 性物质。因此，细胞培养要保证细胞能顺利生长和繁殖， 一般要添加10%----20%的血清。
4.体细胞核移植技术存在的问题
出生率非常低＜10％ 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议
动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术原创
（三）体细胞核移植的过程（以高产奶牛为例）
无性生殖
甲牛
乙牛
体细胞
MⅡ卵 母细胞
克隆牛
培养 体细胞群
取出核
细胞核移植
去除核 显微操作法
去核卵 母细胞
核植入
代孕母牛丙
移植
胚胎移植
重组 卵细胞
物理或化学方法激活
卵裂
早期 胚胎
供体细胞（供核）
细胞培养
卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质）
去核
体细胞
注入
无核卵母细胞
• 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含 有保持物种遗传性所需的全套基因， 而且并没有因细胞分化而丢失基因， 因此高度分化细胞的细胞核仍具有全 能性
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
（一）概念
动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的 细胞核，移入到一个已经 去掉细胞核的中卵，母细使胞其 重组并发育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育 成完整的动物个体。 利用核移植技术得到的动物称为 克隆动物。
遗传物质未改变
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生 长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改 变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种 传代细胞为细胞系。
遗传物质改变 具癌细胞特点
培养器皿
一动物细胞培养
3、条件：
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等
从动物机体中取出相关的 组织 ，将
它分散成 单个细胞 ，然后，放在适宜
的培养基中，让这些细胞 生长和增殖。
原理：细胞增殖
动物细胞培养和核移植技术-课件
■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易 于帖附。
强调三：接触抑制
■当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时, 细胞就会停止分裂增 殖，这种现象称为细 胞的接触抑制。
P46讨 论
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中， 根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：
3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动 物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 为什么？
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有 少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵 母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的 一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系， 核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境 不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和 核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物 不会是核供体动物100%的复制。
该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多， 尤其是在小范围内不能无限的繁殖，以避免奶牛 群出现近亲繁殖而引起种质衰退。
（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交 给你，你将如何对它进行克隆？ 从卢辛达耳朵（也可用别的组织、器官，耳朵 在活体上容易取）上剪取一小块组织，在体外 培养获得该组织（如软骨组织）的细胞。从屠 宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养 成熟。用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细 胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与 体细胞融合，这时供体核就进入了受体卵母细 胞，再用电刺激或化学物质激活注入了体细胞 核的卵母细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。 核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵 裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内。
2.2 动物细胞工程
动物细胞工程常用的技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
接触抑制 传代培养
原代培养 (primary culture)
• 定义：把第1代细胞的培养与传10代以内的细 胞培养统称为原代培养。 •过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一 次培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细 胞
先用剪刀剪碎,后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处 理。
动物细胞培养过程 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细 胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6 时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适 宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜 pH为7.2～7.4。
一.动物细胞培养
(一)概念
从动物机体中取出相关组织，将它们 分散成单个细胞，然后放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增殖。
(二)、动物细胞培养过程 阅读“动物细胞培养过程”并思考： 1、动物细胞培养的技术实施的原理是什么？ 特点 是什么？ 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞 分散？ 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间 的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料？ 6、简述动物细胞培养的操作过程。
原代培养与传代培养的区别
原代培养：
分装之前，10代以前பைடு நூலகம்
传代培养：
分装后继续培养，10代以后
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。
课时作业4：2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2．2动物细胞工程2．2.1动物细胞培养和核移植技术基础巩固1．在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是()A．使动物组织分散为单个细胞B．去掉细胞壁，使其成为原生质体C．去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合D．促进蛋白质水解为多肽答案A解析在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。
2．进行动物细胞培养时，最好选用的培养材料是()A．衰老退化的动物组织细胞B．成熟动物个体的体细胞C．动物的受精卵细胞D．健康动物胚胎或幼龄动物个体的体细胞答案D解析健康动物胚胎或幼龄动物体的体细胞分裂能力强，而衰老退化的动物组织细胞、成熟动物个体的体细胞分裂能力差，一般不用。
3．下列哪种营养物质不是动物细胞培养所需要的()A．淀粉B．氨基酸C．无机盐D．水答案A解析动物细胞培养过程中需要从外界吸收多种营养物质，如氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素等。
淀粉是大分子有机物，动物细胞一般不能吸收大分子有机物。
4．动物细胞培养过程的顺序是()①原代培养②传代培养③用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液A．①②③B．①③②C．②①③D．③①②答案D解析动物细胞培养过程的顺序为选取幼龄动物或早期胚胎组织作培养材料→用胰蛋白酶处理组织，制备细胞悬液→原代培养→传代培养。
5．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性答案C解析动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。
故C正确。
6．用于动物体细胞核移植的供体细胞一般都选用()A．受精卵B．传代10代以内的细胞C．传代10～50代以内的细胞D．处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞答案B解析培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。
动物细胞培养和核移植
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
克 隆 羊 “多 利 ” 的 产 生 过 程
思考：克隆技术最关键的环节？
克隆发展和应用
细胞贴壁过程
动物细胞培养过程
幼龄或胚胎动物组织块 剪碎
胰（胶原）蛋白酶处理
细胞系
50代以上 代以上
单个细胞 培养液 培养瓶 细胞悬液 原代培养
贴壁生长、接触抑制 胰蛋白酶处理、换瓶
专题二 细胞工程
2.2.1动物细胞培养和核移植技术一 Nhomakorabea学习目标
• 简述“动物细胞培养技术”的过程、条件和应用。 • 简述“动物体细胞核移植（克隆）技术”的过程 和应用前景。
二、动物细胞培养技术
自学讨论
1、皮肤细胞体外培养的原理、过程、条件？ 2、动物细胞培养的应用有哪些？ 3、“自体移植”的好处是什么？ 4、试想想还有什么技术既能生产人的可移植 器官，还能保证移植成功？
细胞株
40~50代 代
传代培养
动物细胞工程和核移植技术1
课题：2.2.1动物细胞工程和核移植技术 授课时期：11月 日 姓名：班级：编号【学习目标】1、了解动物细胞培养的过程及条件。
2、比较动物细胞培养与植物组织培养区别3、掌握动物体细胞核移植技术的过程和意义【学习重点】1、动物细胞培养的过程及条件。
2、用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
【学习难点】用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
【学习指导】设置问题情境，本节课学生从动物细胞培养和克隆的目的入手，通过绘图熟练掌握动物细胞培养和核移植技术的过程图，最后熟读体细胞核移植的应用为高考材料题提供相关知识储备。
【知识链接】免疫学的应用 体液免疫过程 植物细胞工程 【学习过程】知识点一：动物细胞细胞培养阅读课本44页动物细胞培养过程，完成以下内容：1、动物细胞培养：从动物有机体中取出_______,将它分散成________,然后,放在___________中,让这些细胞_______________.2、过程：A 级：1、动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于（ ） A 、培养基不同 B 、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C 、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D 、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株2、美国食品和药物管理局2008年1月15日宣布，经过克隆的牛、猪和山羊以及它们的后代均可以安全食用，克隆牛产的奶也可安全食用。
除个体水平的克隆外，还有分子、细胞、器官等水平的克隆，下列不属于克隆技术的是（ ）A 、从出生不久的小鼠心脏取下细胞在体外离休培养成细胞系B 、使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达C 、农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D 、将单个B 淋巴细胞进行无性繁殖阅读课本46页“动物细胞培养条件”相关内容，完成以下内容： (1)、的环境：(2) 营养：合成培养基成分：糖、、、、，通常需加入、血浆等。
(3)、温度、P H ：哺乳动物多以为宜，适宜PH 为。
(4)、气体环境：通常采用 或,将置于含有和的混合气体的培.养箱中进行培养回答以下问题：氧气和二氧化碳的作用分别是什么？ 知识点三：动物细胞培养技术的应用阅读46页“动物细胞培养技术的应用”的相关内容，完成以下内容： 1、生产生物制品 如、、等。
课件9：2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
细胞增殖
3. 材料
用培养的动物细胞与组织大多数取自动物胚胎 或出生后不久的幼龄动物的器官或组织。
4.动物细胞培养的过程
（1）原代培养 （2）传代培养
（1）原代培养
胚胎或幼龄动物器官组织
定义：人们通常 将动物组织消化 后的初次培养称 为原代培养。
取出组织
剪碎
胰蛋白酶处理
单个细胞
原代培养
。
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要 注意选择抗生素的 种类和剂量 ，以保证抗生素对肝
脏无害。
08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题： ⑴在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到 细胞表面 相互接触 时，细胞会停止分裂增殖，这种 现象称为细胞的 接触抑制 。此时，瓶壁上形成的细胞 层数是 单层 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来， 需要用酶处理，可用的酶是 胰蛋白酶 。
10代细胞
传
少数
代 培
继续传代培养少部分细胞获得不死性，
40-50代细胞
养
细胞突变，遗传物质已经改变，等同于
少数
癌细胞。
无限传代
5.动物细胞培养条件
（1）无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
（2）营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
（3）温度和PH 36.5±0.5℃, 7.2-7.4
细胞悬液
转入培养瓶内培养 ( 贴壁生长长成单层细 胞。有接触抑制现象)。
图示
强调一：细胞贴壁
■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在 瓶壁上，称为细胞贴壁。
■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于帖附。
(完整版)动物体细胞核移植技术
2.2.1动物细胞培养和核移植技术第二课时动物体细胞核移植技术和克隆动物学习目标：１、简述克隆动物的概念和原理２、简述体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景３、关注体细胞克隆技术的安全性和伦理性问题学习重点和难点：动物体细胞核移植技术克隆动物的过程教学过程：二、动物体细胞核移植技术和克隆动物阅读教材47页相关文字思考：1、对动物来说，为什么不能用类似植物组织培养的方法获得完整的个体？2、根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?（一）动物体细胞核移植：是将动物的一个细胞的,移如入一个已经去掉细胞核的细胞中.使其并发育成一个新的,这个新的胚胎最终发育为动物哺乳动物核移植分为和。
思考：1、核移植得到的动物叫什么？2、体细胞核移植和胚胎核移植比较那个难度低一点？为什么？（二）体细胞核移植的培育过程1、【动手设计】1、体细胞核移植过程流程图：（以P48为例）2、回顾克隆多莉羊的生产流程:（多莉的性状和B羊完全相同说明什么问题? ）（多莉体内的遗传物质全部来自B羊吗?为什么? ）思考：1、核移植的原理是什么？2、为什么要去掉受体卵母细胞的核？3、用于核移植的细胞一般都选用10代以内的细胞，这是为什么？4、核移植获得克隆动物是百分之百对供体细胞的复制吗？（三）体细胞核移植技术的应用前景：1、在畜牧业生产中：可以加速进程，促进优良畜群繁育2、在保护濒危物种方面：利用体细胞核移植技术增加这些动物的数量3、在医药卫生领域：转基因克隆动物可以作为，生产许多珍贵的医用4、在治疗人类疾病时：转基因克隆动物细胞、组织、器官可以作为异种移植的。
5、对克隆动物和细胞的研究，使人类深入了解发育及衰老过程6、用克隆动物做疾病模型，使人们更好的追踪研究过程和疾病（四）体细胞核移植技术存在的问题：1、成功率比较2、绝大多数动物还存在许多克隆动物表现出缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等3、克隆动物食品的问题也存在质疑练一练：1、绵羊的乳腺细胞是高度分化的细胞．但用乳腺细胞的细胞核与去核卵细胞的细胞质重组成一个细胞后，这个细胞核仍然保持着全能性，这主要是因为（）A．细胞核内含有保持物种发育所需要的全套遗传物质B．卵细胞的细胞质内含有生物发育所需要的全套遗传物质C．卵细胞的细胞质为细胞核提供营养物质D．细胞核中的基因在卵胞质中才能表达2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
专题2 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
A.原理
B．培养基区别
C．结果
【尝试解答】 【解析】 A
D．培养目的
本题考查的是植物组织培养和动物细胞
培养相关知识的比较，动物细胞培养的目的是获得 更多细胞或细胞产物。而不是获得个体，其原理只
涉及细胞增殖(细胞分裂)。
【误区警示】
误认为动物细胞培养也是为了获
得一个完整的个体，而得出错误答案“D”，但却 忽略了动物细胞培养只是为了得到细胞或细胞产
此没有产奶量高的优良性状。
【探规寻律】 体细胞核移植的过程必须弄清的 几个问题： (1)动物细胞的全能性会随着动物体的发育而逐渐 受到限制，其主要原因是细胞的分化。 (2)克隆高产奶牛所用的受体细胞是去核的卵母细 胞，处于减数第二次分裂中期。因为卵母细胞中 含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 (3)克隆高产奶牛过程所利用的生物技术有：细胞 核移植、动物细胞培养、胚胎移植。 (4)目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微 操作法。
制，细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞，A错；
克隆培养法中细胞都是由一个细胞经过有丝分裂而
得的，所以细胞的基因型相同，多数不会发生改变, B错；二倍体细胞传代培养至10代多数会死亡，只 有少数的细胞能够培养至50代以后成为细胞系，C 错；恶性细胞系的细胞具有癌变的特点，能够无限
增殖，可以进行传代培养，D正确。
解析：选A。对动物细胞培养和植物组织培养的知 识理解程度不够，造成了概念上的混淆，认为动物 细胞培养和植物组织培养具体过程相差不大，故误
选B或C或D。动植物细胞培养时培养基的成分差
别较大，动物培养基需加入血清，植物培养基需加
入激素和琼脂。
动物体细胞核移植 1．原理：细胞核的全能性。 2．供核细胞：一般选优良动物的传代培养10代以 内的细胞。 3．受体细胞：去核的MⅡ期卵母细胞。
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专题二2.2.1动物细胞培养和核移植技术
一、教材分析
《动物细胞培养和核移植》是人教版高中生物选修三《现代生物科技专题》第2章第2节《动物细胞工程》第1节课的教学内容，主要学习叶绿体动物细胞培养这一基础技术和核移植技术的过程和应用。
本节内容是本章的重点同时又是近几年的热点，，又是后面学习动物细胞融合和单克隆抗体的基础。
二、教学目标
1．知识目标：
（1）．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
（2）．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
2．能力目标：
(1)运用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础
(2)通过小组间的交流与合作，提高学生的语言表达能力及思维的严密性。
3．情感、态度和价值观目标：
(1)通过对动物细胞培养和核移植的学习体会生物科学技术的发展和进步。
(2)通过联系知识与生产实践的关系，激发学生对生物学科的兴趣热爱。
三、教学重点难点
重点：（1）动物细胞培养的过程及条件。
（2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
难点：用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
四、学情分析
我们的学生基础较差，有些学生必修模块的知识掌握不牢固，所以本节知识的学习有一定的难度，讲解时需要详细。
并且这一节的知识离现实生活较远，需仔细分析，但学生对这一块的学习兴趣很浓厚。
五、教学方法
1．讲授法：对细胞培养和核移植的过程进行疑难讲解。
2．自学法：学生先自学基本知识。
3．学案导学：见后面的学案。
4．新授课教学基本环节：预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习
六、课前准备
1．学生的学习准备：预习实验“动物细胞培养和核移植”，初步把握过程和条件及应用2．教师的教学准备：多媒体课件制作，课前预习学案，课内探究学案，课后延伸拓展学案。
七、课时安排：1课时
八、教学过程
(一)预习检查、总结疑惑
检查落实了学生的预习情况并了解了学生的疑惑，使教学具有了针对性。
（二）情景导入、展示目标。
教师首先提问：利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程
（三）合作探究、精讲点拨。
探究一：动物细胞培养
教师：大家提出的这些问题很好，看得出课前认真预习了。
那么我们今天主要来解决这些问题。
多媒体展示动物细胞培养的过程，教师对过程进行简单介绍并提出思考问题，并让学生对所提出的问题进行讨论，四人一组，相互交流。
多媒体展示探究思考题。
(1)动物细胞培养的概念要点有哪些?
(2 )什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？
(3) 如何打破接触抑制？
(4)细胞传代培养代数有什么特点？
(5) 如何保证无菌、无毒环境？
(6) 动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？
(7) 为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？
(8) 为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？
(9) 动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？
在学生分组讨论的过程中教师巡回指导。
(课堂实录)
小组讨论完毕，老师组织学生分小组回答问题，并在黑板上记录每个小组的得分，得分分为三种，回答、补充、质疑。
老师对回答不完整的问题进行补充和解释。
设计意图：通过引导，学生能深入领会动物细胞培养的过程和培养过程中的特点，同时对细胞株、细胞系进行补充，并引导学生对植物组织培养进行比较，来加深知识间的连贯，使学生触类旁通，对细胞工程有一个整体的认识。
探究二：动物体细胞核移植技术和克隆动物
多媒体展示核移植的过程，教师对过程进行简单介绍并提出思考问题，并让学生对所提出的问题进行讨论，四人一组，相互交流。
多媒体展示探究思考题
1、为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？
2、概念要点有哪些？
3、受体细胞为什么选用卵母细胞？
4、细胞胞核移植技术的意义是什么？
5、细胞核移植技术存在哪些问题？
教师组织学生分组讨论，最后师生总结。
(课堂实录)
设计意图：通过多媒体展示给了学生一个直观认识，通过问题讨论来提高学生的表达能力和合作意识，通过意义和存在问题的讨论让学生认识到科技发展带来的利益和存在的弊端，提高了学习生物的兴趣。
（四）反思总结，当堂检测。
教师组织学生反思总结本节课的主要内容，并进行当堂检测。
设计意图：引导学生构建知识网络并对所学内容进行简单的反馈纠正。
（课堂实录）
（五）发导学案、布置预习。
我们已经学习了动物细胞培养和核移植技术，对动物细胞工程有了初步的了解，下一节可，我们将学习动物细胞融合与它的应用，单克隆抗体的制备。
这节课后大家可以先预习这一部分，着重预习单克隆抗体的制备过程及特点。
并完成本节的课后练习及课后延伸拓展作业。
设计意图：布置下节课的预习作业，并对本节课巩固提高。
教师课后及时批阅本节的延伸拓展训练。
九、板书设计
动物细胞培养和核移植技术
一、动物细胞培养
1、动物细胞培养的应用和概念：
2、.动物细胞培养的条件:
3、动物细胞培养技术的应用:
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
核移植技术
1.胚胎移植技术
2.体细胞核移植技术的应用前景
3.体细胞核移植技术存在的问题
十、教学反思
本课的设计采用了课前下发预习学案，学生预习本节内容，找出自己迷惑的地方。
课堂上师生主要解决重点、难点、疑点、考点、探究点以及学生学习过程中易忘、易混点等，最后进行当堂检测，课后进行延伸拓展，以达到提高课堂效率的目的。
本节课的动物细胞培养是动物细胞工程的基础，学生需要掌握其过程和特点，为以后的学习打下基础，所以通过多媒体展示给学生一个整体的认识，然后通过小组讨论来加深理解，教师对常考内容进行补充。
核移植技术是近几年的热点问题，尤其是克隆羊多利在初中的时候就已经学习过，但具体操作过程不明确，学生有一定的兴趣，通过本节课的学习进行解疑，同时让学生注意到克隆技术还不太完善，存在一些问题，需要大家以后去解决，培养学生的学科兴趣。
本节课时间45分钟，其中情景导入、展示目标、检查预习5分钟，多媒体展示动物细胞培养技术和教师简单介绍6分钟，学生分组讨论回答问题8分钟，核移植技术的展示讨论回答约13分钟，反思总结当堂检测5分钟左右，其余环节8分钟，能够完成教学内容。