第07章 尿液分析仪学习指导

七章临床尿液检验仪器首页基本要求重点难点讲授学时内容提要1．基本要求

1.1了解

(1)尿液分析的临床意义

(2)国内、外尿液分析技术的进展

(3)尿液分析仪的常见故障与维修

(4)自动染色尿有形成分分析仪的主要功能和特点

1.2 熟悉

(1)尿液分析仪、尿有形成分分析仪的类型

(2)试剂带的结构和使用注意事项

(3) 尿液分析仪、尿有形成分分析仪检测项目

(4) 尿液分析仪、流式细胞术尿有形成分分析仪的结构

(5)尿液分析仪的光学系统

(6)尿液分析仪、尿有形成分分析安装注意事项及调校

(7)尿液分析仪、尿有形成分分析的维护和保养

1.3 掌握

(1)试剂带的反应原理

(2尿液分析仪的检测原理

(3) 流式细胞术尿有形成分分析仪的工作原理

2．重点难点

2.1重点

(1)试剂带的反应原理

(2)尿液分析仪的检测原理

(3)流式细胞术尿有形成分分析仪的工作原理

2.2 难点

(1)尿液分析仪的检测原理

(2)流式细胞术尿有形成分分析仪的工作原理

3．讲授学时

建议4~6学时

4．内容提要

4.1尿液分析仪

4.1.1 尿液分析仪的分类

（1）按工作方式分类

可分为湿式尿液分析仪和干式尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要用于自动评定干试纸法的测定结果，因其结构简单、使用方便，目前临床普遍应用。

（2）按测试项目分类

可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪、12项尿液分析仪和13项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C、尿液颜色和浊度。

（3）按自动化程度分类

可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。。

4.1.2 尿液分析仪工作原理

尿液分析仪的试剂带

①试剂带的结构单项试剂带以滤纸为载体，将各种试剂成分浸渍后干燥，作为试剂层，再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。尿液浸入试剂带后，与试剂发生反应，可产生颜色变化。

多联试剂带是将多种项目试剂块集成在一个试剂带上，使用多联试剂带，浸入一次尿液可同时测定多个项目。

②试剂带的反应原理

pH测定：采用pH指示剂原理，常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂，呈色范围从pH4.5～pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色，由此反映尿液的pH值。

尿蛋白质测定：利用pH指示剂蛋白质误差的原理。

尿葡萄糖测定：当前有两种完全不同的检测尿糖的方法，一种是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特异地检出尿中的葡萄糖；另一种是基于铜还原法的原理，能检测葡萄糖和其他还原性物质。

尿酮体测定：采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。

尿隐血测定：利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用，能催化过氧化氢释放出新生态氧，使色原氧化而显色，其颜色深浅与血红蛋白含量有关。

尿胆红素测定：采用重氮反应法原理。

尿胆原测定：采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。

尿亚硝酸盐测定：尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性。

尿白细胞测定：利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理；或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色，颜色深浅与粒细胞量的多少有关。

尿比密测定：基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。

尿维生素C测定：采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C进行反应，形成钼蓝，颜色由蓝色变成紫色，颜色深浅与尿中维生素C含量有关。

尿液颜色测定：采用反射法，不同类型的仪器采用不同的波长对空白垫进行检测。

尿浊度测定：通过透光指数原理，采用尿液与蒸馏水的透射和折射光相比较，计算出尿液的浊度。

③试剂带的应用不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。试剂块要比测试项目多一个空白块，有些仪器还多一个位置参考块。各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差，提高测量准确度而设置的。固定块是为了消除在测试过程中为免每次测定试剂块的位置不同产生测试误差设置的，每次测定前，检测头都会移到参考位置进行自检，必要时，自动调整发光二极管的亮度和灵敏度，以提高检测的信噪比。

4.1.3 尿液分析仪的检测原理

把试剂带浸入尿液中后，除了空白块外，其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关，颜色越深，相应某种成分浓度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越小；反之，反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系，而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系，所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。

尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。一种波长为测定波长，它是被测试剂块的敏感特征波长；另一种为参比波长，是被测试剂块不敏感的波长，用于消除背景光和其他杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长，其中亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆素原的测定波长为550nm，pH、葡萄糖、蛋白质、维生素C、潜血的测定波长为620nm。各试剂块所选用的参考波长为720nm。

试纸块颜色的深浅除了随各被测成分的不同而变外，还与尿液本身的颜色有关。空白试纸块随着尿

由式7-1计算：

液的颜色而变化。试纸块的反射率R

试纸