Prader_Willi_Angelman综合征的分子遗传学研究进展及其基因诊断
Prader-Willi综合征
家系筛查可能存在一定的局限性，如基因突变检测的灵敏度和特异性 问题，以及家庭成员之间的遗传异质性等。
06
研究进展与展望
新药研发
01 针对PWS的病因，寻找能够激活或补充缺失基因 功能的药物，以改善患者的症状。
02 开发针对PWRK1基因表达调控的药物，以调节食 欲和体重。
03 探索能够改善PWS患者认知和行为症状的药物。
遗传学诊断
基因检测
通过基因检测可以确定是否存在父源染色体15q11-q13的缺失或异常，从而确诊Prader-Willi综合征。
遗传咨询
对于已经确诊的Prader-Willi综合征患者，医生会提供遗传咨询服务，帮助患者了解疾病遗传风险，指导生育决 策。
04
治疗与康复
药物治疗
药物治疗
针对Prader-Willi综合征的症状，医生可能会开具药物治疗，如抗抑郁药、抗精神病药 等，以缓解患者的情绪和行为问题。
03
诊断与鉴别诊断
诊断标准
临床表现
Prader-Willi综合征患者通常表现为食欲亢进、生长发育迟缓、肥胖、智力低下、行为 异常等症状。
实验室检查
实验室检查可能包括生长激素分泌功能、甲状腺功能、肾上腺功能等方面的检查，以排 除其他类似疾病。
基因检测
基因检测是确诊Prader-Willi综合征的重要手段，通过检测是否存在父源染色体15q11q13的缺失或异常，可以明确诊断。
鉴别诊断
1 2
脑性瘫痪
脑性瘫痪也可能导致生长发育迟缓、智力低下等 症状，但通常不会出现食欲亢进和肥胖。
甲状腺功能低下
甲状腺功能低下也可能导致生长发育迟缓、智力 低下等症状，但通常会伴随甲状腺激素水平异常。
PraderWilli综合征
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药物治疗：寻找有效的药物，以改善患者的症状
基因治疗：针对病因的治疗方法，但仍处于研究阶段
临床试验：正在进行针对PraderWilli综合征的多种治疗方法的研究
挑战：该病症的复杂性，需要多学科合作和长期研究
PraderWilli综合征的案例分享
PART FIVE
临床试验结果显示，这些新药在改善患者的食欲、体重和代谢等方面取得了初步成效。
未来还需要进一步的研究和临床试验，以确定这些新药的安全性和有效性。
基因治疗和干细胞治疗
基因治疗：通过修改基因来纠正缺陷基因的表达，从而治疗PraderWilli综合征
干细胞治疗：利用干细胞的分化能力，将健康的细胞移植到患者体内，以替代受损的细胞
预防措施和早期干预
药物治疗：在医生指导下使用药物治疗，如生长激素、甲状腺激素等，以改善患儿的生长发育和代谢异常。
饮食控制：对于患儿的饮食要进行适当的控制和管理，保证营养均衡和充足，避免过度进食和肥胖的发生。
预防措施：加强孕期保健，定期进行产前检查，及早发现并处理孕期并发症和合并症，预防宫内感染。
早期干预：对于新生儿和婴儿进行早期筛查，及早发现PraderWilli综合征的早期症状，并进行早期干预和治疗，以改善患儿的预后和生活质量。
康明显改善，生活质量提高
THANK
性发育障碍
行为问题和智力障碍
语言障碍：发音、语言理解或表达方面的困难
运动障碍：如肌张力不全、动作协调性差等
行为问题：如贪食、偷窃、攻击行为等
智力障碍：不同程度的智力低下，通常在正常范围的下限
PraderWilli综合征的治疗和管理
PART THREE
小胖威利疾病介绍
Prader-Willi综合征(俗称“小胖威利综合征”)一、Prader-Willi综合征概述Prader-Willi综合征，正式医学名为普拉德-威利综合征（英文Prader-Willi Syndrome，简称PWS，俗称小胖威利），是一种罕见的先天性疾病，因第15号染色体长臂（位置15q11-q13）异常导致的终身性非孟德尔遗传的表观遗传性疾病，是多系统化异常的复杂综合征。
此疾病会造成低肌张力、性腺功能减退、智力障碍、言行举止异常及长期的强烈饥饿感导致过度摄食造成威胁生命的肥胖。
目前尚无办法根治，需终身在监管下生活。
发病无种族和性别差异，国内发病率不明，预计中国5-10万患者，每年新增1500-4500例（按照国外发病率1/12000至1/15000估算）。
二、临床症状及特征(临床症状复杂，不同年龄段表现不同，症状和严重程度个体差异大)温馨提醒：PWS易诊断为脑瘫、脊髓性肌萎缩症(SMA)、重症肌无力、软骨病、发育迟缓、单纯性肥胖症等，如有肥胖或以下症状请及时就医做基因检测，早发现早控制早干预！1、新生儿及婴儿期：孕期胎动少、出生时体重偏低、肌张力低下（身体软）、喂养困难（不吃、吸吮和吞咽困难，常需鼻胃管灌食）、哭声微弱（不哭）、四肢活动力差（不动）、生长缓慢、嗜睡、反复呼吸道感染、肺换气不足、肺炎、睡眠窒息、喉头软化症、心脏问题（卵圆孔未闭合）。
2、特殊外观（伴或不伴）：窄脸、前额窄凸、长颅、单眼皮、杏仁眼、斜视、窄鼻梁、薄上唇、嘴角下垂、小嘴、身材矮小、皮肤白、发色较淡偏淡棕色、颌小畸形、耳畸形、小手小脚、手狭窄且尺侧边缘较直、隐睾。
3、食欲问题：因下视丘功能障碍，导致患者无饱腹感并于1岁至6岁出现食欲亢进且无法自控，加之患者的新陈代谢率低，热量消耗慢（PWS患者的热量需求约为同龄正常人的2/3），造成体重急速增长。
过度肥胖将导致各种并发症：代谢紊乱、糖尿病、高血压、冠心病、脑卒中、非酒精脂肪肝、睡眠紊乱、睡眠呼吸暂停（嗜睡/打鼾）、呼吸道梗阻等，会有猝死之虞。
表观遗传与人类疾病
表观遗传与人类疾病辛阳阳 2010458136 10护本2班摘要没有DNA序列变化的基础上，基因表达的可遗传性的改变。
关键词表观遗传学DNA甲基化表观基因异常上个世纪50年代初，Watson和Crick建立了DNA分子结构模型，极大程度地促进了生命科学的发展。
自此遗传学便成为现代医学研究领域中一个重要的分支。
人类已经认识到基因突变可以导致疾病的发生，如慢性进行性舞蹈病(Huntington's chorea, Hc)和囊性纤维化等。
近年来在遗传学中还兴起了一个新的具有深远意义的前沿学科——表观遗传学，主要研究在没有DNA序列变化的基础上，基因表达的可遗传性的改变。
这一迅速发展的学科在分子水平揭示了复杂的临床现象，为解开生命奥秘及征服疾病带来希望。
表观遗传学的基本原理：DNA甲基化和组蛋白的修饰人类基因组大约含有23000个功能基因，细胞的生长需要这些功能基因在特定的时间条件下准确表达。
真核细胞基因组和组蛋白紧密地包装在一起，形成一个个核小体，核小体是构成染色质的基本单位。
基因的表达需要改变染色质的状态：染色质压缩程度高时基因沉默（即无转录活性），染色质压缩程度较低时基因表达（即有转录活性）。
染色质这种动态的转换是靠DNA甲基化和组蛋白修饰可逆的调节的。
这个表观遗传修饰过程涉到及几个酶，包括：DNA甲基转移酶(DNMTs)、组蛋白去乙酰化酶(HDACs)、组蛋白乙酰化酶、组蛋白甲基转移酶和甲基结构域结合蛋白MECP2。
DNA和组蛋白正常表型的改变调节着功能基因的转录，最终导致临床出现相应的表现。
DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶(DNMTs)的作用下，以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体，将甲基基团转移到胞嘧啶和鸟嘌呤(CpG)二核苷酸的胞嘧啶。
CpG相对集中的区域称为CpG岛。
CpG岛存在于组织特异基因或者管家基因。
生理情况下，CpG 岛是非甲基化的。
当CpGs异常甲基化会导致所在基因沉默，阻遏甲基化敏感蛋白与基因的结合，使基因很容易发生变异。
分子生物学笔记：表观遗传
表观遗传学表观遗传（epigenetics）是指DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。
这种改变是细胞内除了遗传信息以外的其他可遗传物质发生的改变，且这种改变在发育和细胞增殖过程中能稳定传递。
概述在表观遗传中，DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。
DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5'碳位以共价键结合一个甲基基团。
正常情况下，人类基因组中的“垃圾”序列的CpG二核苷酸相对稀少，并且总是处于甲基化状态；与之相反，人类基因组中大小为100-1000 bp左右且富含CpG二核苷酸的CpG岛则总是处于未甲基化状态，并且与56%的人类基因组编码基因相关。
人类基因组序列草图分析结果表明，人类基因组CpG岛约为28890个，大部分染色体每1 Mb就有5-15个CpG岛，平均值为每Mb 含10.5个CpG岛，CpG岛的数目与基因密度有良好的对应关系。
由于DNA甲基化与人类发育和肿瘤疾病的密切关系，特别是CpG岛甲基化所致抑癌基因转录失活问题，DNA甲基化已经成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容。
特点DNA双螺旋结构的发现和重组DNA技术、PCR技术的产生促进了分子遗传学的发展。
几十年来，人们一直认为基因决定着生命过程中所需要的各种蛋白质，决定着生命体的表型。
但随着研究的不断深入，科研人员也发现一些无法解释的现象：马、驴正反交的后代差别较大；同卵双生的两人具有完全相同的基因组，在同样的环境中长大后，他们在性格、健康等方面却会有较大的差异。
这些现象并不符合经典遗传学理论预期的结果，提示在某些情况下，基因的碱基序列不发生改变，但生物体的一些表型却可以发生了变化。
此外，研究还发现有些特征只是由一个亲本的基因来决定，而源自另一亲本的基因却保持“沉默”。
人们对于这样一些现象都无法用经典的遗传学理论去阐明。
遗传学中的一个前沿领域：表观遗传学（Epigenetics），为人们提供了解答这类问题的新思路。
【精选资料】小胖威利普拉德 威利综合征
㈠、饮食行为与营养管理
早期的饮食治疗和长期的营养监测可以改善预后。对于肌张力低下伴进食困难的婴幼儿期患儿，应尽力保证足够的热量摄人。对于吸吮无力者，可给予鼻饲管或特殊奶嘴喂养。对于年长儿，需严格管理食物，包括严格控制饮食规律，甚至将食物储存处上锁。制定三餐计划，在下一餐时间未到之前，不允许给孩子计划外的食物。尽早的饮食治疗和坚持长期的营养监测能改善预后。对饮食行为，至今尚无一种药物可以帮助控制食欲。曾有研究应用奥曲肽(生长抑素类似物)试图降低胃饥饿素水平，结果未能改变饮食行为。胃减容手术能否用于小胖威利尚存争议，有报道该手术后既不能改变患儿的饱腹感，也不能改善过度摄食行为，而且手术的并发症发生率较高。根据我国目前的国情，不推荐该手术用于常规治疗。仅限于个别临床综合技术能力强的中心，在常规保守干预疗法失效的情况下，为挽救患儿极重度肥胖可能产生的致死性危险，谨慎开展探索性手术治疗。
二、临床症状及特征(临床症状复杂，不同年龄段表现不同，症状和严重程度个体差异大)
温馨提醒：小胖威利易误诊为脑瘫、脊髓性肌萎缩症(SMA)、重症肌无力、软骨病、发育迟缓、单纯性肥胖症等，如有肥胖或以下症状请及时就医做基因检测，早发现早控制早干预！
1、新生儿及婴儿期：孕期胎动少、出生时体重偏低、肌张力低下（身体软）、喂养困难（不吃、吸吮和吞咽困难，常需鼻胃管灌食）、哭声微弱（不哭）、四肢活动力差（不动）、生长缓慢、嗜睡、反复呼吸道感染、肺换气不足、肺炎、睡眠窒息、喉头软化症、心脏问题（卵圆孔未闭合）。
PraderWilli与Angelman综合征
中华医学遗传学杂志CHINA JOURNAL OF MEDICAL GENETICS1999年 第16卷 第5期 vol.16 No.5 1999Prader-Willi/Angelman综合征的分子遗传学研究进展及其基因诊断傅俊江 李麓芸 Prader-Willi综合征(Prader-Willi syndrome,PWS)和Angelman综合征(Angelman syndrome,AS)是两种临床上明显不同的神经遗传性疾病。
PWS(MIM176270)的特点为：胎动减少，肥胖，婴儿期肌张力减退，智力障碍，身材短小，促性腺激素分泌不足的性腺机能减退和手足异常。
AS(MIM105830)的特点是严重运动、智力障碍，共济失调，肌张力低下，癫痫，语言障碍和以巨大下颌及张口吐舌为特征的特殊面容。
Bower 和Jeavons于1967年创造了名为愉快木偶综合征(AS)的疾病，称“安琪儿”(Angelman)。
PWS和AS均为染色体15q11-13缺陷，其发病率约为1/15 000。
现对PWS、AS的分子缺陷类别与分子遗传学研究进展及其基因诊断综述如下。
1 PWS和AS的分子缺陷类别1.1 缺失 约70%的PWS及AS患者均发现有染色体15q11-13的缺失。
PWS为父源染色体15q11-13的缺失、母源基因不表达，而AS为其母源染色体15q11-13的缺失、父源基因不表达。
1.2 单亲二体(uniparental disomy, UPD) PWS和AS患者的两条15号染色体均正常，但PWS患者的两条15号染色体均来自母亲，即母亲单亲二体(UPD)；而AS患者的两条15号染色体均来自父亲，即父亲单亲二体(UPD)。
PWS的UPD发生率较普遍(25%)，而AS 的较低(2%)。
1.3 印迹突变 印迹，也叫基因组印迹或遗传印迹，指源自双亲的子代等位基因的差异表达。
印迹突变是在世代传递过程中，由于控制印迹的基因发生突变导致在配子形成中发生重新设定和转换失败。
缩宫素在Prader-Willi综合征中应用的研究进展
缩宫素在Prader-Willi综合征中应用的研究进展张梦奇;马明圣【摘要】缩宫素(OXT)是一种神经肽,在情绪控制、食欲和社交等方面发挥重要作用.缩宫素缺乏与Prader-Willi综合征(PWS)中吮吸困难、食欲亢进、社交困难等多种症状相关.短期鼻腔内滴入OXT可明显缓解PWS患儿新生儿期严重的吮吸困难,此外,也可改善年幼患儿社交困难,但对于年长PWS患儿无效并出现脾气暴躁的不良反应.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2018(038)008【总页数】5页(P1178-1182)【关键词】Prader-Willi综合征;缩宫素;肌张力低下【作者】张梦奇;马明圣【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科,北京100730;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科,北京100730【正文语种】中文【中图分类】R720.5Prader-Willi综合征(Prader-Willi syndrome, PWS)是一种罕见的、涉及基因印记的遗传性疾病。
PWS由父源染色体15q11-q13区域印记基因缺陷所致，主要的遗传类型包括父源染色体15q11-q13片段缺失、母源同源二倍体或者印记中心微缺失及突变。
该病主要的临床表现包括严重的新生儿期肌张力低下、喂养困难、随后出现的食欲亢进、病态肥胖、内分泌紊乱、固执和脾气暴躁等性格特点、学习障碍及行为、社会和心理障碍。
该病治疗需多科协作，根据不同年龄患儿的特点，进行营养运动管理、性激素替代以及生长激素等治疗[1]。
缩宫素(oxytocin, OXT)是一种神经肽，主要由下丘脑室旁核合成、分泌，储存在垂体后叶，由垂体后叶释放入血，或可扩散入脑脊液，作用于神经细胞或者外周器官[2]。
既往认为，OXT主要的生理作用是促进子宫、乳腺肌上皮细胞及精曲小管平滑肌收缩。
临床中应用于第三产程及产后预防子宫收缩乏力和产后出血。
近20年来，越来越多的研究表明，OXT在情绪控制、食欲、社会交往等方面发挥重要作用[3]。
Angelman综合征
Angelman综合征Angelman综合征（AS），又称天使综合征或快乐木偶综合征，是由母源15号染色体q11-13上的印记基因缺陷导致的一种神经发育性疾病。
新生儿通常具有正常表型，发育迟缓最早出现在六个月左右，典型特征一般一岁之后方才显现。
患者临床表现为重度精神发育迟滞、小头畸形、共济失调、不合时宜的大笑、癫痫、言语发育障碍、喜欢水和睡眠障碍等。
目前，国外报道AS的发病率约为1/15,000-1/20,000。
调查研究结果提示，不同人群AS发病率存在明显差异。
目前，对于中国人群的AS发病率尚未有系统性的研究。
UBE3A基因定位在AS关键区域15q11-13中，含有16个外显子，覆盖的基因组约120kb，编码由865个氨基酸组成的泛素蛋白连接酶，相对分子质量为100，000，其表达具有组织特异性，仅限于脑组织。
UBE3A基因属母源性，即来自母亲的UBE3A基因有表达，其表达缺失导致AS，来自父源的UBE3A基因被甲基化而不表达。
目前研究表明，4种明确机制会导致AS的发生：a. 母源缺失(75%)：在UBE3A基因区域母源染色体15q11.2-13关键区域发生4-6Mb的大片段缺失，致此母源UBE3A基因表达缺失；b.父源单亲二倍体（1-2%）：15号染色体父源UPD，因此缺乏母源的UBE3A基因，父源UBE3A基因不具表达活性;c. 病例为印迹缺失（imprinting defect）（3%）：母源15q11.2-13区域异常印记状态，引起UBE3A基因表达异常；d. 母源UBE3A基因发生突变（5-10%），无法正常表达。
这四种机制都会直接或间接引起UBE3A基因低表达或不表达；10-15%病例致病性未知。
Angelman综合征与Prader-Willi 综合征的致病区段相同，都为15q11-q13，不同的是Angelman综合征由母源15q11-q13缺失引起，Prader-Willi 综合征则由父源15q11-q13缺失引起。
天使综合征的发病机制与治疗研究进展
天使综合征的发病机制与治疗研究进展赵炳昊;涂怀军;殷小平【期刊名称】《中国神经精神疾病杂志》【年(卷),期】2017(043)005【总页数】4页(P310-313)【关键词】天使综合征;UBE3A基因;靶向治疗【作者】赵炳昊;涂怀军;殷小平【作者单位】南昌大学第二附属医院神经内科南昌 330031;南昌大学第二附属医院神经内科南昌 330031;南昌大学第二附属医院神经内科南昌 330031【正文语种】中文【中图分类】R748天使综合征（angelman syndrome，AS）是一种较为罕见的严重神经精神系统疾病，多见于儿童，临床上主要表现为发育迟缓、智力低下、孤独内向、吞咽困难、语言和运动功能障碍、癫痫等症状。
染色体15q11-q13区段的UBE3A基因异常是该病发生的主要因素，但是对该病的发病机制尚未形成统一的学说，并且这种神经精神性疾病的治疗仍然是临床中难点之一，目前已有资料反映出分子靶向治疗具有更好的前景，可能会是未来工作的重点与突破点。
本文就天使综合征的发病机制与治疗研究进展进行综述，提取出目前较为有价值的发病机制假说，探讨潜在的治疗方案，并着重关注本病的分子靶向治疗，借以帮助临床医生加深对本病的认识。
AS又称“快乐木偶综合征”，英国医师HARRY ANGELMAN最先在儿童中发现该病并且进行系统的报道，该病也以他的名字命名[1]。
从世界范围内的发病情况分析，AS的发病率约为1/50000~1/24000，而我国尚未对AS进行流行病学研究，所以AS在我国的发病率还没有一个明确的数值[2]。
从本质上讲AS属于神经遗传性疾病，以儿童多见，患病儿童多表现为快乐表情、发育迟缓、语言障碍、孤独内向、智力较同龄儿童低下，有癫痫阵发性发作；从外观分析，大多数AS患者会将双手举高，不断挥舞，并出现脚下不稳、枕部扁平的情况，而且喜欢吐舌[3]。
由于其存在吮吸或者吞咽功能障碍，所以喂养的过程非常困难。
Prader-Willi综合症一例报告
1232019.12临床经验Prader-Willi 综合症一例报告张 蕾山西省临汾市人民医院儿科 山西省临汾市 041000【摘 要】目的：探讨Prader-Willi 综合症典型临床表现、诊断标准、最新治疗进展和预后，为早期诊断和治疗提供参考。
方法：观察1例Prader-Willi 综合症的临床表现，结合体格检查、辅助检查和基因检测等对其进行诊断和鉴别。
结果：患者为11月女性，因喘息1天，发热，惊厥5次就诊；全外显子测序结果显示：患者基因组chr15:23684645-28344504的位置上，MKRN3、SNRPN、ATP10A、MAGEL2、GABRG3、NDN、NPAP1、GABRB3、GOLGA6L2、GABRA5、OCA2等基因均发生杂合缺失突变，基因所在区域缺失片段大小约4.6MB，该区域包含PWS 和Angekman 综合征微缺失范围；分子遗传检测结果：PWS&AS 关键区域（15q11-q13）的父源片段的丢失，符合PWS 特点。
结论：PWS 是最早被证实涉及基因组印记的遗传性疾病，临床诊断易受多因素影响，确诊需分子遗传检测，治疗个体需控制体重和着重改善性征，早期应用生长激素联合饮食控制可获得较好疗效。
【关键词】普拉德-威利综合征；分子遗传；突变；激素治疗普拉德-威利综合征（Prader-Willi syndrome ，PWS ）主要表现为子宫内张立减退、智力迟缓和促性腺激素分泌不足所致性腺机能减退等临床特征，又称为低肌张力-低智力-性腺发育低下-肥胖综合征和小胖综合征[1]，此类患者在从新生儿期到2岁左右通常难以喂养、生长缓慢，但2岁后开始无节制饮食，从而导致严重肥胖，并可能因肥胖而并发如糖尿病、高血压和高血脂等症状[2]，其病因是由于第15号染色体基因缺陷导致，值得注意的是，患者虽然智商低于正常人，但却拥有正常的语言表能力。
临床多通过高分辨率染色体分析和荧光原位杂交法等对患者进行基因检测作为确诊依据，1 病历资料患儿，女，11月，因“喘息1天，发热，惊厥5次”入院。
可治性罕见病—Prader-Willi综合征PWS
可治性罕见病—Prader-Willi综合征PWS一、疾病概述Prader-Willi综合征(PWS)是一种罕见的遗传性疾病，又称肌张力低下一智能障碍一性腺发育滞后一肥胖综合征，由Prader等[1]于1956年首次报道。
国外报道PWS发病率约为1/10 000～1/30 000[2]，我国目前尚缺乏流行病学资料。
PWS是最早被证实涉及基因组印记的遗传性疾病[3]，为父源染色体15q11.2～ql3区域印记基因功能缺陷所致，其主要遗传类型包括：父源染色体15q11. 2～q13片段缺失(占65%～75g)、母源同源二倍体（占20%～30%）、印记中心微缺失及突变（占1%～3%）[2]。
二、临床特征PWS 临床表现复杂多样，主要临床特点包括婴儿期肌张力低下、吸吮能力差、喂养困难、无生长加速、性腺发育不良，儿童期逐渐出现运动及认知发育落后、贪食引起肥胖、葡萄糖耐量异常及2型糖尿病、生长激素缺乏及成年身高受损、青春期发育延迟、甲状腺功能减退、肾上腺皮质功能低下等[4]。
中国PWS患者与国际上普遍描述的以西方人群为主体的临床表现不尽相同(详见表1[5])，中国PWS患儿在胎儿期活动减步，新生儿期均存在肌张力低下，婴儿期喂养困难，但只有12. 9%的患者身材矮小， 54. 8%具有典型面容，35.5%表现出自我皮肤损伤[6]。
三、诊断1．临床评分诊断目前’国际上通行的PWS临床评分标准主要根据Holm等[7]于1993年捉出、Cassidy等于2012年修正后的标准：年龄<3岁总评分5分以上，主要诊断标准达4分即可诊断；年龄≥3岁总评分8分以上，主要诊断标准达5分即可诊断2．分子遗传诊断PWS确诊需依据分子遗传诊断，诊断方法包括染色体核型分析技术、荧光原位杂交(FISH)、微卫星连锁分析(short tandem repeat，STR)和甲基化分析等[9]。
四、鉴别诊断不同年龄段的PWS表现不一，需要按照就诊年龄进行相应鉴别[5]：1．婴儿期出现肌张力低下的鉴别诊断①新生儿败血症、中枢神经系统继发性异常如缺血缺氧性脑病。
新生儿Prader—Willi综合征5例临床报道
新生儿Prader—Willi综合征5例临床报道作者：刘虎钟家蓉来源：《中外女性健康研究》2015年第16期【摘要】目的：分析新生儿期Prader-Willi综合征（PWS）的典型临床表现，加强临床医师对本病的认识。
方法：回顾性分析2007年1月至2014年12月期间重庆医科大学附属儿童医院确诊为PWS的5例，检查和分析患儿的临床表现，并行全基因分析。
结果：5例患儿均有肌张力低下、喂养困难、外生殖器发育不全、皮肤色素减退的临床表现。
5例患儿行头颅MRI检查、脑电图、心脏彩超、血培养、甲状腺功能、血/尿遗传代谢筛查机高分辨染色体检查均阴性。
5例患儿全基因检查结果显示15号染色体q11-13区域微缺失。
结论：新生儿期出现无明显诱因的肌张力低下、喂养困难及生殖器发育不全的患儿，临床上应高度警惕本病，早期进行基因分析对该病的诊断以及预后有积极意义。
【关键词】Prader-Willi综合征；肌张力低下；新生儿；临床表现Prader-Willi综合征（Prader-Willi Syndrome，PWS）又称为肌张力低下-智能障碍-性腺发育滞后-肥胖综合征，由学者Prader Cabbant和Willi于1956年首次报道并命名，其主要临床特征包括：新生儿期肌张力低下、发育迟缓、身材矮小、行为异常、童年期开始肥胖、下丘脑性性发育不良及特征性外貌[1-2]。
人类父源15号染色体q11-13区域的缺失是导致该病发生的原因之一[3]。
国内近几年陆续有关于本病的报道，但多为学龄期及青春期儿童，关于小婴儿，尤其是新生儿的报道很少。
本研究通过总结重庆医科大学附属儿童医院诊断的5例新生儿PWS的临床资料，以加强临床医师，尤其是临床儿科医师对本病在新生儿期的认识。
1 资料与方法1.1 一般资料重庆医科大学附属儿童医院于2007年1月至2014年12月收治的PWS新生儿共5例，均在新生儿期因反应差、少哭、少动入院；其中4例男性，1例女性，年龄在1.5～2个月，平均（1.8±0.2）个月。
Prader—Willi综合征合并糖尿病1例病例报道
Prader—Willi综合征合并糖尿病1例病例报道本文报告1例Prader-Willi综合征（PWS）合并糖尿病患者，本例患者于1996年诊断为糖尿病，2015年行基因检查明确诊断为PWS。
本次入院主要表现为多食、肥胖和难以控制的高血糖。
治疗方面，严格控制饮食并结合运动，起始降糖方案为口服降糖药物联合胰岛素，治疗效果不明显，后加用GPL-1类似物，血糖水平较前有明显改善。
PWS是一种比较少见的遗传性肥胖综合征，因相关基因表达缺失导致下丘脑功能不全，引起神经内分泌功能紊乱进而出现多食、肥胖、生长发育不良等复杂的临床表现，早期诊断和及时干预对本病的预后至关重要。
[Abstract] This paper reports a case of Prader-Willi syndrome （PWS）with diabetes mellitus，the patient was diagnosed with diabetes in 1996 and was diagnosed with PWS by genetic examination in 2015，the major clinical manifestations are overeating，obesity，and uncontrollable hyperglycemia. In terms of treatment，strict diet control and exercise，the initial hypoglycemic program for oral hypoglycemic drugs combined with insulin，but the efficacy of this treatment is not obvious，and after the use of GPL-1 analogues，the patient’s blood glucose levels improved significantly. PWS is a rare syndrome of genetic obesity，due to lack of related gene expression of hypothalamic dysfunction caused by neuroendocrine dysfunction and polyphagia，obesity，poor growth and development of such complicated clinical manifestations. The early diagnosis and timely intervention is important for prognosis of the disease.[Key words] Prader-Willi syndrome；Obesity；Diabetes；GLP-1 analogues Prader-Willi综合征（PWS）是一种比较少见的遗传性肥胖综合征，其发病基础是15q11-q13位點父源染色体上的候选基因表达缺失[1]。
Angelman综合征发病机制、分型及治疗进展
Angelman综合征发病机制、分型及治疗进展刘依竞;肖农(综述)【摘要】Angelman综合征(AS)是以严重发育迟缓、智力低下、语言障碍、共济失调、癫痫发作、愉快表情为特征的神经遗传性疾病。
成年AS患者生活质量低下，对家庭及社会造成极大负担。
目前已知AS有4种基因型，不同基因型患者的临床表现存在差异。
文章综述近年对AS发病机制、基因缺陷分型、治疗的研究进展。
%Angelman syndrome (AS) is a neurodevelopmental disorder characterized by severe developmental delay, intellectual disability, speech impairment, gait ataxia, epileptic seizures, and exuberant behavior with happy demeanor. The ma-jority of patients have poor quality of life and cause great burden to family and society. It is known that AS is caused by four gen-otypes which have different clinical manifestations. In this article, the recent advances in pathogenesis, the relationship between genotype and symptoms, and the treatment strategies of AS will be reviewed.【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】5页(P668-672)【关键词】天使综合征;泛素蛋白酶基因;治疗【作者】刘依竞;肖农(综述)【作者单位】重庆医科大学附属儿童医院康复科儿童发育疾病研究部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆 400014;重庆医科大学附属儿童医院康复科儿童发育疾病研究部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆 400014【正文语种】中文Angelman综合征(Angelman syndrome，AS)又称天使综合征，是以15q11～13染色体区域基因异常引起的以严重发育迟缓、智力低下、语言障碍、共济失调、癫痫发作、愉快表情为特征的神经遗传性疾病[1]。
【7A文】华大基因遗传咨询认证习题
第二门：人类遗传学原理1.通常情况下，R-连锁隐性遗传病女性发病率很低，在哪种特殊情况下可以引起女性发病？A．LRon化-正确B．多倍体C．女性年纪大D．近亲结婚LRon假说：R染色体失活假说1）两条R染色体中只有一条在遗传上是有活性的，其结果是R连锁基因得到了剂量补偿，保证雌雄个体具有相同的有效基因产物。
2）失活是随机的，发生在胚胎发育早期，某一细胞的一条染色体一旦失活，这个细胞的所有后代细胞中的该条R染色体均处于失活状态3）杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体，即某些细胞中来自父方的伴性基因表达，某些细胞中来自母方的伴性基因表达，这两类细胞镶嵌存在。
2.杂合子（Aa）在不同条件下，可以表现为显性，即表达出相应的表型；也可以表现为隐性，即不表达出相应的性状。
这种情况叫做：A．延迟显性B．共显性C．不规则显性-正确D．不完全显性3.Prader–Willi综合征，PWS和Angelman综合症的分子缺陷类别不包括以下哪项A．重组-正确B．缺失C．单亲二体D．印记突变天使综合症的病因是是由基因缺陷引起，是15号染色体q11-q13缺失所致。
本病由母系单基因遗传缺陷所致。
由于来自母亲的第15号染色体印迹基因区15q部份缺陷，或同时拥有两条来自父亲的带有此缺陷的第15号染色体。
相反，若基因缺陷来自父亲，或同时拥有两条来自母亲的基因缺陷，则会造成普瑞德威利综合症（Prader-WillisRndrome）4.以下哪个不是R连锁的遗传病？A.地中海贫血-正确（常染色体隐性遗传）B.假肥大型肌营养不良C.血友病D.脱色性色素失调症5.线粒体基因的特点不包括以下哪点？A.位于细胞浆内B.环状双链DNA（裸露的DNA双链分子）C.有自身独特的密码子D.46条染色体-正确判断题1.生殖腺嵌合发生在减数分裂过程中。
错错，生殖腺嵌合发生在有丝分裂过程中2.在一位DMD男性患儿中检测到了几个外显子的缺失，该突变一定来自患者的母亲。
遗传印记与人类疾病的研究进展
遗传印记与人类疾病的研究进展根据孟德尔经典遗传定律，双亲的基因和性状具有等同的遗传性。
随着研究的深入，越来越多的研究资料表明，来自父母双方的同源染色体或等位基因存在着功能上的差异。
由不同性别的亲体传给子代的同一染色体或基因，可以引起不同的表型。
这种现象称为遗传印记。
随着研究的进一步深入，人们发现部分染色体畸变、单基因遗传病以及肿瘤易患性与遗传印记相关。
本文综述了遗传印记与人类疾病关系的研究进展。
标签：遗传印记表观遗传【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）11-0792-02遗传印记与疾病一遗传印记和Prader-williand 和Angelman 综合征染色体15Q11-q13区域的遗传印记和两种临床表现不同的遗传病相关。
Prader-williand 和Angelman 综合征均伴随性别发育缺陷及生长行为和智力发育迟缓。
大约70%的PWS患者存在染色体15Q11-q13区域缺失，而这种缺失总是发生在父源染色体上，另外25%的PWS患者则存在母源的UPD。
AS患者存在染色体15Q11-q13区域缺失，而这种缺失总是发生在母源染色体上，4%的AS 患者存在父源的UPD。
二遗传印记对疾病表现度和外显率的影响由于印记效应，一些单基因遗传病的表现度和外显率受突变基因的亲代来源的影响。
例如，Huntington 舞蹈症的基因如果经母亲传递，那么，子女的发病年龄与母亲的发病年龄一样。
如果经父亲传递，多数家系子女的发病年龄比父亲的发病年龄略有提前。
三遗传印记和Beckwith-wiedemann综合征，Wilms瘤Beckwith-wiedemann综合征（BWS），临床上表现为普遍地过度生长，伴随半肥大巨舌和巨大内脏。
人们首先怀疑BWS存在基因组印记是由于在一些BWS 家系中母源突变被优先传递。
另外，约10%-20%的BWS患者诱发胚胎性瘤，其中频率最高的是Wilms瘤，在BWS患者得Wilms瘤的几率是正常人群的1000倍，而且，这些肿瘤中常表现出母源染色体11p15.5区域的缺失。
Prader-Willi和Angelman综合征的分子遗传学诊断研究
Prader-Willi和Angelman综合征的分子遗传学诊断研究李璃;刘安;王艳;周静;马定远;许争峰;胡平【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2014(32)12【摘要】目的用全基因组单核苷酸多态性微阵列芯片(SNP-array)对疑似Prader-Willi综合征(PWS)和Angelman综合征(AS)患儿进行细胞分子遗传学诊断,并根据检测结果对其家系下一胎进行产前遗传学诊断.方法对3位疑似PWS和AS患儿进行常规G显带染色体核型分析;提取患者外周血DNA进行SNP-array扫描,阳性结果进行父母样本的SNP-array检测用以溯源.提取患儿母亲羊水细胞的DNA进行产前诊断.结果 3位患儿常规G显带染色体核型分析未见异常,SNP-array结果显示其在15q1 1.2-13.1区域均存在杂合性染色体微缺失,缺失片段大小分别为5 782 312、4 846 881、4 881 390 bp;3位患儿双亲检测结果正常,提示这3个微缺失均为新发的从头(起始,de novo).通过父母和患儿15q11.2-13.1区域的SNP 基因型比较分析,判断1例缺失为父源性,另2例为母源性,结合临床症状和分子诊断结果,诊断1例为PWS,2例为AS.羊水细胞的SNP-array检测结果显示,3个孕妇的胎儿未见染色体微缺失、微重复.结论 SNP-array技术可用于缺失型PWS和AS 的分子遗传学诊断,为遗传咨询和产前诊断提供重要的遗传学信息.【总页数】3页(P906-908)【作者】李璃;刘安;王艳;周静;马定远;许争峰;胡平【作者单位】南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004;南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心,南京210004【正文语种】中文【中图分类】R596.04【相关文献】1.Prader-Willi综合征的分子遗传学诊断与机制研究 [J], 朱丽娜;何玺玉;王春枝;杨晓;刘欣;王蔚;马宁;刘海洪;王艳;封志纯2.Prader-Willi综合征分子分型诊断方法的初步研究 [J], 李洪义;李海飞;孟舒;邹小兵;郑辉;陈争;段红蕾3.Prader-Willi综合征及Angelman综合征的遗传学分析方案及广东的临床实践[J], 汪安石; 尹爱华; 刘畅; 王继成; 黄演林; 张彦; 丁红珂; 刘玲; 杨杰; 吴菁4.小儿Prader-Willi综合征1例报告——附临床及遗传学诊断 [J], 李秀蓉;谭跃球;郭青;李麓芸;卢光琇5.Prader-Willi综合征四例报道(附临床及遗传学诊断) [J], 张豫文;洪洁;贾慧英;戈岩;李小英;宁光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Prader-Willi综合征1例报道
Prader-Willi综合征1例报道
扈雯雯
【期刊名称】《基层医学论坛》
【年(卷),期】2017(021)013
【摘要】Prader-Willi综合征为染色体微小缺失、15q11-13缺失,可表现为严重肌张力低下、喂养困难、过食、逐渐发生病态的肥胖、性发育不良、认知和行为障碍,半数患儿可无特殊面容。
本病大部分为新生突变,发病率低,临床表现不典型,容易漏诊,需要行染色体检查或分子遗传学检查确定诊断。
【总页数】1页(P1681)
【作者】扈雯雯
【作者单位】威海市中心医院,山东威海 264400
【正文语种】中文
【相关文献】
1.青年Prader-Willi综合征1例报道并文献复习
2.Prader-Willi综合征合并糖尿病1例病例报道
3.Prader-Willi综合征两例报道并文献复习
4.新生儿Prader-Willi综合征1例报道并文献复习
5.早产儿Prader-Willi综合征及16P13.11微缺失1例报道
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#综述# Prader2Willi/Angelman综合征的分子遗传学研究进展及其基因诊断傅俊江李麓芸Prader2Willi综合征(P rader2Willi syn2 drome,P WS)和Angelman综合征(Angel2 man syndr ome,AS)是两种临床上明显不同的神经遗传性疾病。
PWS (MIM176270)的特点为:胎动减少,肥胖,婴儿期肌张力减退,智力障碍,身材短小,促性腺激素分泌不足的性腺机能减退和手足异常。
AS(MIM105830)的特点是严重运动、智力障碍,共济失调,肌张力低下,癫痫,语言障碍和以巨大下颌及张口吐舌为特征的特殊面容。
Bower和Jeav2 ons于1967年创造了名为愉快木偶综合征(AS)的疾病,称/安琪儿0(Angelman)。
PWS和AS均为染色体15q11213缺陷,其发病率约为1/15000。
现对PWS、AS的分子缺陷类别与分子遗传学研究进展及其基因诊断综述如下。
1PWS和AS的分子缺陷类别1.1缺失约70%的PWS及AS患者均发现有染色体15q11213的缺失。
P WS为父源染色体15q11213的缺失、母源基因不表达,而AS为其母源染色体15q11213的缺失、父源基因不表达。
1.2单亲二体(uniparental disomy,UPD) P WS和AS患者的两条15号染色体均正常,但PWS患者的两条15号染色体均来自母亲,即母亲单亲二体(UPD);而AS 患者的两条15号染色体均来自父亲,即父亲单亲二体(UPD)。
PWS的UP D发生率较普遍(25%),而AS的较低(2%)。
1.3印迹突变印迹,也叫基因组印迹或遗传印迹,指源自双亲的子代等位基因的差异表达。
印迹突变是在世代传递过程中,由于控制印迹的基因发生突变导致在配子形成中发生重新设定和转换失败。
约5%的PW S和AS患者虽然从双亲各遗传作者单位:410078长沙,湖南医科大学生殖工程研究室了1条15号染色体,但是它们在印迹的染色体15q11213区域呈现异常DNA的甲基化和基因表达,提示这类患者在自身的印迹过程中发生了突变。
其中的一半(包括家族性的)为微缺失,P WS缺失的共同最小区域在SNRPN基因的第1外显子(4kb),而AS在SNRPN基因的第1外显子的上游(2kb),从而确定这类患者为印迹中心(impr inting center,IC)发生突变)))印迹突变引起。
PWS的共同缺失区与AS的并不重叠,因此认为IC具有双重结构[1,2]。
为何印迹突变导致沿15q11213区域呈现异常DNA的甲基化和基因表达,目前并不清楚。
但有人提出顺式作用的父母一方基因组的/遗传外标记0(epi2genetic mark)被甲基化,从而调节增强子与哪一个启动子结合的/增强子2竞争0(enhancer competition)模型[123]。
也可能在配子形成中,IC和SNRP N基因的启动子元件对于在控制双亲印迹在15q11213的重新设定和启动印迹转换中起了重要的作用。
遗传印迹与DNA的甲基化有关。
探讨PWS和AS在印迹转换过程中突变,不仅对于了解15q11213区域印迹的分子机理,而且对于了解染色体其它区域,如各种肿瘤及Beckwith2Wiedeman syndrome(BWS)的印迹突变的分子机理都是有帮助的。
在生命世代的循环过程中,印迹在每一代都必须进行转换和在发育的生殖细胞中进行重新设定,只有这样才能保证不同性别的个体特异地发生父系或母系印迹。
当母源印迹突变通过男性传递,母源表基因型(epigenotype)如果不能在男性精子中重新设定为正常父源表基因型,则阻碍了从母源到父源(mat y pat)的印迹转换,因而将母源印迹传递给他的半数配子,所生的后代基因型除了遗传正常的母源表基因型外还从父亲那儿遗传了异常配子的表基因型。
这样所生的后代是母源表基因型的纯合子,因而产生了PWS;同样,当父源印迹突变通过其女儿传递时发生印迹转换失败,从而患者从母亲那儿遗传了异常的父源表基因型,导致其后代是父源印迹的纯合子,因而产生了AS。
对于这些PWS和AS,突变并不会直接影响其本人,而是突变阻碍了双亲配子发生祖辈印迹转换,其后果是半数后代致病。
这是家族性PWS和AS的印迹突变为何能在同性后代中默默传递不致病、而在异性后代中传递就发病的根本原因。
这是一种全新的遗传疾病发病机理[124]。
1.4基因突变过去认为P WS和AS均是由于染色体微缺失而引起的邻近基因综合征,而不是单个基因异常引起的。
但发现有20%的AS患者既无15号染色体的缺失,也无UP D和印迹突变,而是基因突变。
Ki shno和Matsuura等在4例AS患者中检测到UBE3A基因突变,其中包括一个新生的5bp的重复,一个2bp的缺失,导致框架移动;一个由母亲遗传的剪切突变,导致转译提前终止和一个错义突变[5,6]。
UBE3A基因定位在P WS及AS所在的15q11213区域,它至少含有16个外显子,覆盖的基因组约120kb,转录方向是从端粒至着丝粒,其mRNA大小为528kb,由于选择剪切作用而至少有5个以上的转录本,编码区约2.6kb[7]。
人和小鼠的研究表明,UBE3A基因仅在脑中发生特异性印迹[8],至于为何在脑中缺乏UBE3A蛋白就出现AS的临床症状目前还不清楚。
UBE3A编码一种遍在蛋白2蛋白质连接酶,它的功能是识别遍在蛋白转移的底物的特异性并且直接催化遍在蛋白转移到底物上[9,10]。
目前,人们仍未在PWS患者中检测到某个基因的突变,不过在15q11213区域鉴定了仅父源染色体表达的基因至少7个(SNR PN,ZNF127,NDN,IC,PAR5,PAR1,I PW)和多个EST[4]。
印迹中心图1 Prader 2willi 和Angelman 综合征的分子类别P:父源性染色体;P(M):因IC 突变而具有固定母本表基因型的父源性染色体;M:母源性染色体;M (P):因IC突变而具有固定父本表基因型的母源性染色体图2 由胞嘧啶转换成尿嘧啶的亚硫酸氢基反应流程图第1步胞嘧啶硫化作用而成为硫化胞嘧啶;第2步硫化胞嘧啶水解脱氨而成为硫化尿嘧啶;第3步硫化尿嘧啶碱性脱硫而成为尿嘧啶(IC)突变的小鼠模型研究证明,SNRP N 基因内缺失鼠表型正常,表明SNR PN 基因突变并不能足以使鼠患PWS;而大片段缺失,包括SNR PN 基因和推定的鼠IC 缺失则表现出类似P WS 患儿的严重表型[11]。
因而认为P WS 与AS 不同,即可能不是单基因病,而是节段非二倍体综合征(segmental aneusomy syndrome,SAS)或俗称的邻近基因综合征[12]。
除此之外,还有极少数患者为染色体平衡易位等(图1)。
2 PWS 和AS 的基因诊断PWS 和AS 最常见的细胞遗传学异常为15q11213缺失,极少数为染色体易位、倒位、重复等。
当临床疑为PWS 或AS 时,则可做550条带以上的高分辨染色体检查,以辨别各种类别的染色体畸变。
而对于高分辨染色体检查也不能发现的染色体更微小的缺失及如上所述的各种分子缺陷类别的异常,则只有通过更加有效的技术:F ISH 和分子遗传学技术进行诊断和产前诊断。
2.1 15q11213缺失的检测 大约有70%的患者均发现有染色体15q11213的缺失,而覆盖该区域的各种DNA 克隆,如YACs 、PACs 、Cosmids 已经有了,因而应用这些染色体单一序列(USP )探针进行F ISH,能够快速有效地检测该区域的缺失,甚至高分辨染色体显带技术未能发现的微缺失。
同时具有在间期核中即可检测是否存在缺失的优点。
Ligon 等[13]成功地应用鉴定SNRPN 位点的Comsidsc102和c106及其它一些克隆子,作为探针进行M 2FI SH 来检测包括PWS 及AS和其它SAS 或微缺失综合征患者的缺失。
2.2 DNA 甲基化检测 对于缺失、UPD 和印迹突变,均导致相关染色体15q11213区域DNA 的异常甲基化,检测15q11213区域DNA 的异常甲基化是P WS 和AS 基因诊断检出率最高的一种方法。
2.2.1 Southern blotting 分析 SNR PN 基因是最早发现,并且被认为是PWS 的最佳候选基因。
也是最佳Southern blot 2ting 分析的基因[14]。
它包含有两个被DNA 甲基化印迹区域:外显子1,表达的父源等位基因非甲基化而沉默的母源等位基因甲基化;内含子7,父源等位基因甲基化而母源等位基因非甲基化。
具体方法是,用DNA 甲基化敏感的酶如Not I 及另外一种酶如XbaI 双酶完全消化基因组DNA,1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,South 2ern 转移到尼龙膜上,同位素标记的SNRP N 基因外显子A 片段与尼龙膜进行杂交,放射自显影,PWS 患者仅出现4.2kb 父源杂交带,AS 患者仅出现0.9kb 母源的杂交带,而正常人则4.2kb 和0.9kb 杂交带均出现,从而对PWS 及AS 进行准确的诊断和产前诊断[15]。
但是在使用该法的时候需要将基因组DNA 完全消化,否则会出现额外的杂交带,影响结果分析。
其解决办法是使用包含有载体多克隆位点上Not Ñ的DNA 作为内对照,以证实是否消化完全。
使用该法的优点是诊断结果可靠,可用于培养的羊水和绒毛的产前基因诊断[14]。
其缺点是需要DNA 量多、需要使用同位素、操作繁琐。
2.2.2 甲基化特异性PCR (methylation 2specific P CR,MS 2PCR )检测 在推定的SNRP N 基因启动子区含有CpG 岛,该区域上父源等位基因甲基化而母源等位基因非甲基化。
在P WS 患者中仅存在甲基化的等位基因,而AS 患者中仅存在非甲基化的等位基因,因而可以应用MS 2PCR来检测SNRP N基因CpG岛的甲基化状态,对PWS及AS进行快速诊断[15]。
其原理是:化学试剂如亚硫酸氢钠将所有未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而SNRPN基因CpG二核苷酸上的胞嘧啶因甲基化而不变(图2)[16]。
基于这种差异性,设计两对特异性的引物:一对甲基化特异性引物(MET)和一对非甲基化特异性引物(UNMET),就可将甲基化等位基因化学修饰的DNA序列与非甲基化等位基因区分。
化学修饰的PWS患者DNA 仅MET引物扩增,而化学修饰的AS患者仅UNMET引物扩增;化学修饰的正常人DNA则两对引物均扩增。
由此可对几乎全部PWS和大约80%AS患者进行快速有效的基因诊断和产前诊断[14]。
2.3基因点突变的检测[5,6,17]UBE3A 基因突变导致AS[5,6]。