黄精玛咖片缓解体力疲劳的研究
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2.2 实验动物
NIH 小鼠, SPF 级, 雄性, 体重为 17.1~25.6 g; 实验动 物使用许可证号: SYXK(粤)2013-0002。自由进食饮水。
2.3 样 品
黄精玛咖片, 每片的质量为 900 mg, 由汤臣倍健股份 有限公司提供, 推荐人体日服用量为 3.6 g。
2.4 剂量选择和受试物给予方式
Study on alleviating physical fatigue effect of Polygonatum-maca tablet
HUANG Yuan-Ying*, WANG Yu-Fang
(By-Health Co., Ltd., Guangzhou 510663, China)
ABSTRACT: Objective To study the effect of Polygonatum-maca tablets on alleviating physical fatigue of mice. Methods The experimental mice were divided into 3 dose groups treated with low, medium and high dose of Polygonatum-maca tablets and a negative control group. The doses of gastric lavage of 3 dose groups were 0.3, 0.6, 1.2 g/kg·BW, respectively. The loading swimming test, serum urea, serum lactic acid and hepatic glycogen detection of mice were conducted after the treatment with Polygonatum-maca Tablets for 30 days consecutively. Results The loading swimming time of mice in high dose group was longer than that of control group (P<0.05). The content of hepatic glycogen of mice in medium and high dose group was higher than that in control group (P<0.05). And the area under the curve of serum lactic acid of mice in high dose group was less than the control group (P<0.05). Conclusion The Polygonatum-maca tablets have the function of alleviating physical fatigue of mice under the conditions of this experiment. KEY WORDS: Polygonatum; maca; alleviation of physical fatigue; NIH mice
分别称取受试物 0.15、0.3、0.6 g 置于研磨器中, 加 入少量去离子水研磨均匀, 用去离子水定容至 10 mL, 充 分混匀, 配制成低、中、高 3 个剂量组的供试液。
阴性对照组灌胃去离子水。
2.5 试验方法[10]
将实验小鼠分成４批, 每批 40 只, 每批设阴性对照 组和低、中、高剂量组, 每组 10 只。各剂量组小鼠经口给 予黄精玛咖片 30 d 后, 分别进行如下测定:
第 7 卷 第 12 期 2016 年 12 月
食品安全质量检测学报 Journal of Food Safety and Quality
Vol. 7 No. 12 Dec. , 2016
黄精玛咖片缓解体力疲劳的研究
黄远英*, 汪玉芳
(汤臣倍健股份有限公司, 广州 510663)
摘 要: 目的 研究黄精玛咖片对于缓解小鼠体力疲劳的作用。方法 将试验小鼠分为黄精玛咖片低、中、 高 3 个剂量组和阴性对照组, 其中低、中、高剂量组的灌胃剂量分别为 0.3、0.6、1.2 g/kg·BW。小鼠连续给予 受试物 30 d 后分别进行负重游泳试验、血清尿素测定、血乳酸测定和肝糖原测定。结果 黄精玛咖片高剂量 组小鼠的负重游泳时间长于对照组(P<0.05), 黄精玛咖片中、高剂量组小鼠的肝糖原含量高于对照组(P<0.05), 黄精玛咖片高剂量组小鼠运动时的血乳酸曲线下面积小于对照组(P<0.05)。结论 黄精玛咖片在本试验条件下 具有缓解小鼠体力疲劳的作用。 关键词: 黄精; 玛咖; 缓解体力疲劳; NIH 小鼠
称“大黄精”、“鸡头黄精”或“姜形黄精”。黄精具有补气养 阴、健脾润肺、益肾之功效, 可用于治疗脾胃气虚、体倦 乏力、胃阴不足、口干食少、肺虚燥咳、精血不足、腰膝 酸软、须发早白和内热消渴等[1,2]。
黄精的主要活性成分有糖类、甾体皂苷、黄酮、蒽醌 类化合物、氨基酸和微量元素。现代药理研究表明, 黄精 具有补脾润肺、养阴生津、补中益气等功效和抑菌、抗病 毒、抗肿瘤、抗衰老以及降糖降脂等作用[3,4]。在功能食品
2.6 统计分析及结果判定
2.6.1 统计方法 对小鼠的体重、负重游泳时间、尿素含量、磷酸肌酸
第 12 期
黄远英, 等: 黄精玛咖片缓解体力疲劳的研究
4993
激酶含量、肝糖原含量、血乳酸曲线下面积进行统计处理; 将原始数据以平均值±标准差表示( x s ), 采用 SPSS 21.0 软件进行方差分析, LSD 统计方法进行空白对照组与给药 组间的差异显著性检验。若肝糖原含量方差检验不齐, 采 用秩和检验。
1引言
黄精为百合科黄精属多年生草本植物, 是药食两用 中药, 在我国使用历史悠久, 分布广泛。《中国药典》(2015 年 版 ) [1] 中 黄 精 的 定 义 为 百 合 科 植 物 滇 黄 精 (Polygonatumkingianum Coll.et Hemsl.) 、 黄 精 (Polygonatumsibiricum Red.) 或 多 花 黄 精 (Polygonatumcyrtonema Hua.)的干燥根茎。按形状不同, 习
(4)小鼠血乳酸测定试验 末次给药 30 min 后, 进行第一次尾巴采血, 用乳酸仪 测定小鼠的血乳酸含量; 在温度为 30 ℃的水中不负重游 泳 10 min 后停止, 然后进行第 2 次尾巴采血, 用乳酸仪测 定小鼠的血乳酸含量; 休息 20 min 后进行第 3 次尾巴采血, 用乳酸仪测定小鼠的血乳酸含量。计算 3 个时间点的血乳 酸曲线下面积: 血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值 +3×游泳后 0 min 的血乳酸值+2×游泳后休息 20 min 的血乳 酸值)。
2.4.1 剂量选择 将实验小鼠随机分组, 按照给药剂量分组: 人体推荐
剂量的 5、10、20 倍为低、中、高 3 个剂量组, 即给药剂
量分别为 0.3、0.6、1.2 g/kg·BW, 同时设阴性对照组。 2.4.2 受试物给予方式
灌胃给药, 剂量为 0.2 mL/10 g 体重。 2.4.3 受试物配制
4992
食品安全质量检测学报
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第7卷
和医疗保健方面具有良好的发展和应用前景[5]。 玛咖(Lepidiummeyenii, maca)为十字花科(Brassicaceae)
独 行 菜 属 (Lepidium) 一 年 生 草 本 植 物 , 原 产 于 秘 鲁 海 拔 3500~4500 m 的安第斯山区[6,7]。传统上作为食物和草药食 用, 无任何毒副作用[7]。在当地民间有“秘鲁人参”和“南美 人参”的美誉。玛咖含有丰富的蛋白质、氨基酸、还原糖、 矿物质、不饱和脂肪酸尤其是牛磺酸、矿物质锌、支链氨 基酸(亮氨酸, 缬氨酸, 异亮氨酸)等抗疲劳营养物质, 它们 在消除运动中枢疲劳和机体疲劳中有重要作用[6,8]。玛咖还 含有玛咖生物碱、芥子油苷、异硫氰酸酯、玛咖酰胺和甾 醇等, 具有提高生育力、促进性欲、促进荷尔蒙代谢合成 及影响荷尔蒙平衡的功效[7,9]。以玛咖为主要原料生产的各 类保健品近年来在欧美、日本等市场上已经受到越来越多 消费者的青睐[7]。
(1)小鼠负重游泳试验 若给药组小鼠的负重游泳时间明显长于空白对照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (2)小鼠血清尿素测定试验 若给药组小鼠的尿素含量明显低于空白对照组, 且 差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (3)小鼠肝糖原测定试验 若给药组小鼠的肝糖原含量明显高于空白对照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (4)小鼠血乳酸测定试验 若任一给药组小鼠的血乳酸曲线下面积小于空白对 照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 2.6.2 综合判定 负重游泳实验结果为阳性, 且血乳酸、血清尿素、肝 糖原 3 项生化指标中任 2 项指标为阳性, 可判定受试样品 具有缓解体力疲劳的作用。
黄精玛咖片由黄精和玛咖制成, 本研究旨在通过小 鼠负重游泳实验, 测定黄精玛咖片对小鼠相应生化指标的 影响, 包括血清尿素、血乳酸和肝糖原等含量的变化, 从而 研究黄精玛咖片对缓解体力疲劳的作用。
2 材料与方法
2.1 主要仪器与试剂
JEA3001 电子天平(精度 0.1 g, 上海浦春计量仪器有 限公司); BS223S 型电子天平(精度 0.0001 g, 赛多利斯科学 仪器(北京)有限公司); 自制游泳箱(约 50 cm×35 cm×36 cm); 7020 型全自动生化仪(日本 HITACHI 公司); Multiskan Go 型全波长酶标仪(美国 Thermo 公司); Centrifuge 5418 型 离心机(德国 Eppendorf 公司); Ms 3 digital 型振荡器(德国 IKA 公司); Lactate Scout 型乳酸仪(德国 EKF 公司)。
尿素试剂盒(批号 20140926, 广州上诺生物技术有限 公司); 磷酸肌酸激酶试剂盒(批号 20141212, 广州上诺生 物技术有限公司); 肝/肝糖元试剂盒(批号 20150414, 南京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 ); 血 乳 酸 试 纸 ( 批 号 4152037 、 4152161、4161483、5032399、5025301、5022113, 上海麦 森医疗科技有限公司)。
*通讯作者: 黄远英, 主要研究方向为功能食品与药物制剂。E-mail: yuangenliang405@163.com *Corresponding author: HUANG Yuan-Ying, By-Health Co, Ltd., Guangzhou 510663, China. E-mail: yuangenliang405@163.com
(1)小鼠负重游泳试验 末次给药 30 min 后, 将尾根部负荷 5%体重铅皮的小 鼠置于游泳箱中。水深 35 cm, 水温为 25 ℃, 记录小鼠自 游泳开始至死亡的时间, 即为小鼠的负重游泳时间。 (2)小鼠血清尿素测定试验 末次给药 30 min 后, 小鼠在温度为 30 ℃的水中不负 重游泳 90 min, 休息 60 min 后, 进行拔眼球采全血, 约 1 mL(不加抗凝剂), 血凝固后 3000 r/min 离心 10 min, 取血 清, 采用全自动生化仪测定其中的尿素(blood urea nitrogen, BUN)和磷酸肌酸激酶(creative kinase, CK)水平。 (3)小鼠肝糖原测定试验 末次给药 30 min 后, 颈椎脱臼处死动物, 取肝脏经生 理盐水漂洗后用滤纸吸干, -80 ℃保存。取适量肝脏称重(样 本质量＜100 mg), 在样本中加入碱液(mg:μL=1:3), 置于 试管中, 沸水浴 20 min, 流水冷却。将糖原水解液进一步 制备成糖原检测液, 分别加样后, 混匀后置于沸水中煮 5 min, 冷却后于波长 620 nm 处测定各管的光密度(optical density, OD)值, 按以下公式计算肝糖原含量:
NIH 小鼠, SPF 级, 雄性, 体重为 17.1~25.6 g; 实验动 物使用许可证号: SYXK(粤)2013-0002。自由进食饮水。
2.3 样 品
黄精玛咖片, 每片的质量为 900 mg, 由汤臣倍健股份 有限公司提供, 推荐人体日服用量为 3.6 g。
2.4 剂量选择和受试物给予方式
Study on alleviating physical fatigue effect of Polygonatum-maca tablet
HUANG Yuan-Ying*, WANG Yu-Fang
(By-Health Co., Ltd., Guangzhou 510663, China)
ABSTRACT: Objective To study the effect of Polygonatum-maca tablets on alleviating physical fatigue of mice. Methods The experimental mice were divided into 3 dose groups treated with low, medium and high dose of Polygonatum-maca tablets and a negative control group. The doses of gastric lavage of 3 dose groups were 0.3, 0.6, 1.2 g/kg·BW, respectively. The loading swimming test, serum urea, serum lactic acid and hepatic glycogen detection of mice were conducted after the treatment with Polygonatum-maca Tablets for 30 days consecutively. Results The loading swimming time of mice in high dose group was longer than that of control group (P<0.05). The content of hepatic glycogen of mice in medium and high dose group was higher than that in control group (P<0.05). And the area under the curve of serum lactic acid of mice in high dose group was less than the control group (P<0.05). Conclusion The Polygonatum-maca tablets have the function of alleviating physical fatigue of mice under the conditions of this experiment. KEY WORDS: Polygonatum; maca; alleviation of physical fatigue; NIH mice
分别称取受试物 0.15、0.3、0.6 g 置于研磨器中, 加 入少量去离子水研磨均匀, 用去离子水定容至 10 mL, 充 分混匀, 配制成低、中、高 3 个剂量组的供试液。
阴性对照组灌胃去离子水。
2.5 试验方法[10]
将实验小鼠分成４批, 每批 40 只, 每批设阴性对照 组和低、中、高剂量组, 每组 10 只。各剂量组小鼠经口给 予黄精玛咖片 30 d 后, 分别进行如下测定:
第 7 卷 第 12 期 2016 年 12 月
食品安全质量检测学报 Journal of Food Safety and Quality
Vol. 7 No. 12 Dec. , 2016
黄精玛咖片缓解体力疲劳的研究
黄远英*, 汪玉芳
(汤臣倍健股份有限公司, 广州 510663)
摘 要: 目的 研究黄精玛咖片对于缓解小鼠体力疲劳的作用。方法 将试验小鼠分为黄精玛咖片低、中、 高 3 个剂量组和阴性对照组, 其中低、中、高剂量组的灌胃剂量分别为 0.3、0.6、1.2 g/kg·BW。小鼠连续给予 受试物 30 d 后分别进行负重游泳试验、血清尿素测定、血乳酸测定和肝糖原测定。结果 黄精玛咖片高剂量 组小鼠的负重游泳时间长于对照组(P<0.05), 黄精玛咖片中、高剂量组小鼠的肝糖原含量高于对照组(P<0.05), 黄精玛咖片高剂量组小鼠运动时的血乳酸曲线下面积小于对照组(P<0.05)。结论 黄精玛咖片在本试验条件下 具有缓解小鼠体力疲劳的作用。 关键词: 黄精; 玛咖; 缓解体力疲劳; NIH 小鼠
称“大黄精”、“鸡头黄精”或“姜形黄精”。黄精具有补气养 阴、健脾润肺、益肾之功效, 可用于治疗脾胃气虚、体倦 乏力、胃阴不足、口干食少、肺虚燥咳、精血不足、腰膝 酸软、须发早白和内热消渴等[1,2]。
黄精的主要活性成分有糖类、甾体皂苷、黄酮、蒽醌 类化合物、氨基酸和微量元素。现代药理研究表明, 黄精 具有补脾润肺、养阴生津、补中益气等功效和抑菌、抗病 毒、抗肿瘤、抗衰老以及降糖降脂等作用[3,4]。在功能食品
2.6 统计分析及结果判定
2.6.1 统计方法 对小鼠的体重、负重游泳时间、尿素含量、磷酸肌酸
第 12 期
黄远英, 等: 黄精玛咖片缓解体力疲劳的研究
4993
激酶含量、肝糖原含量、血乳酸曲线下面积进行统计处理; 将原始数据以平均值±标准差表示( x s ), 采用 SPSS 21.0 软件进行方差分析, LSD 统计方法进行空白对照组与给药 组间的差异显著性检验。若肝糖原含量方差检验不齐, 采 用秩和检验。
1引言
黄精为百合科黄精属多年生草本植物, 是药食两用 中药, 在我国使用历史悠久, 分布广泛。《中国药典》(2015 年 版 ) [1] 中 黄 精 的 定 义 为 百 合 科 植 物 滇 黄 精 (Polygonatumkingianum Coll.et Hemsl.) 、 黄 精 (Polygonatumsibiricum Red.) 或 多 花 黄 精 (Polygonatumcyrtonema Hua.)的干燥根茎。按形状不同, 习
(4)小鼠血乳酸测定试验 末次给药 30 min 后, 进行第一次尾巴采血, 用乳酸仪 测定小鼠的血乳酸含量; 在温度为 30 ℃的水中不负重游 泳 10 min 后停止, 然后进行第 2 次尾巴采血, 用乳酸仪测 定小鼠的血乳酸含量; 休息 20 min 后进行第 3 次尾巴采血, 用乳酸仪测定小鼠的血乳酸含量。计算 3 个时间点的血乳 酸曲线下面积: 血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值 +3×游泳后 0 min 的血乳酸值+2×游泳后休息 20 min 的血乳 酸值)。
2.4.1 剂量选择 将实验小鼠随机分组, 按照给药剂量分组: 人体推荐
剂量的 5、10、20 倍为低、中、高 3 个剂量组, 即给药剂
量分别为 0.3、0.6、1.2 g/kg·BW, 同时设阴性对照组。 2.4.2 受试物给予方式
灌胃给药, 剂量为 0.2 mL/10 g 体重。 2.4.3 受试物配制
4992
食品安全质量检测学报
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第7卷
和医疗保健方面具有良好的发展和应用前景[5]。 玛咖(Lepidiummeyenii, maca)为十字花科(Brassicaceae)
独 行 菜 属 (Lepidium) 一 年 生 草 本 植 物 , 原 产 于 秘 鲁 海 拔 3500~4500 m 的安第斯山区[6,7]。传统上作为食物和草药食 用, 无任何毒副作用[7]。在当地民间有“秘鲁人参”和“南美 人参”的美誉。玛咖含有丰富的蛋白质、氨基酸、还原糖、 矿物质、不饱和脂肪酸尤其是牛磺酸、矿物质锌、支链氨 基酸(亮氨酸, 缬氨酸, 异亮氨酸)等抗疲劳营养物质, 它们 在消除运动中枢疲劳和机体疲劳中有重要作用[6,8]。玛咖还 含有玛咖生物碱、芥子油苷、异硫氰酸酯、玛咖酰胺和甾 醇等, 具有提高生育力、促进性欲、促进荷尔蒙代谢合成 及影响荷尔蒙平衡的功效[7,9]。以玛咖为主要原料生产的各 类保健品近年来在欧美、日本等市场上已经受到越来越多 消费者的青睐[7]。
(1)小鼠负重游泳试验 若给药组小鼠的负重游泳时间明显长于空白对照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (2)小鼠血清尿素测定试验 若给药组小鼠的尿素含量明显低于空白对照组, 且 差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (3)小鼠肝糖原测定试验 若给药组小鼠的肝糖原含量明显高于空白对照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 (4)小鼠血乳酸测定试验 若任一给药组小鼠的血乳酸曲线下面积小于空白对 照组, 且差异有显著性, 可判定该实验结果为阳性。 2.6.2 综合判定 负重游泳实验结果为阳性, 且血乳酸、血清尿素、肝 糖原 3 项生化指标中任 2 项指标为阳性, 可判定受试样品 具有缓解体力疲劳的作用。
黄精玛咖片由黄精和玛咖制成, 本研究旨在通过小 鼠负重游泳实验, 测定黄精玛咖片对小鼠相应生化指标的 影响, 包括血清尿素、血乳酸和肝糖原等含量的变化, 从而 研究黄精玛咖片对缓解体力疲劳的作用。
2 材料与方法
2.1 主要仪器与试剂
JEA3001 电子天平(精度 0.1 g, 上海浦春计量仪器有 限公司); BS223S 型电子天平(精度 0.0001 g, 赛多利斯科学 仪器(北京)有限公司); 自制游泳箱(约 50 cm×35 cm×36 cm); 7020 型全自动生化仪(日本 HITACHI 公司); Multiskan Go 型全波长酶标仪(美国 Thermo 公司); Centrifuge 5418 型 离心机(德国 Eppendorf 公司); Ms 3 digital 型振荡器(德国 IKA 公司); Lactate Scout 型乳酸仪(德国 EKF 公司)。
尿素试剂盒(批号 20140926, 广州上诺生物技术有限 公司); 磷酸肌酸激酶试剂盒(批号 20141212, 广州上诺生 物技术有限公司); 肝/肝糖元试剂盒(批号 20150414, 南京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 ); 血 乳 酸 试 纸 ( 批 号 4152037 、 4152161、4161483、5032399、5025301、5022113, 上海麦 森医疗科技有限公司)。
*通讯作者: 黄远英, 主要研究方向为功能食品与药物制剂。E-mail: yuangenliang405@163.com *Corresponding author: HUANG Yuan-Ying, By-Health Co, Ltd., Guangzhou 510663, China. E-mail: yuangenliang405@163.com
(1)小鼠负重游泳试验 末次给药 30 min 后, 将尾根部负荷 5%体重铅皮的小 鼠置于游泳箱中。水深 35 cm, 水温为 25 ℃, 记录小鼠自 游泳开始至死亡的时间, 即为小鼠的负重游泳时间。 (2)小鼠血清尿素测定试验 末次给药 30 min 后, 小鼠在温度为 30 ℃的水中不负 重游泳 90 min, 休息 60 min 后, 进行拔眼球采全血, 约 1 mL(不加抗凝剂), 血凝固后 3000 r/min 离心 10 min, 取血 清, 采用全自动生化仪测定其中的尿素(blood urea nitrogen, BUN)和磷酸肌酸激酶(creative kinase, CK)水平。 (3)小鼠肝糖原测定试验 末次给药 30 min 后, 颈椎脱臼处死动物, 取肝脏经生 理盐水漂洗后用滤纸吸干, -80 ℃保存。取适量肝脏称重(样 本质量＜100 mg), 在样本中加入碱液(mg:μL=1:3), 置于 试管中, 沸水浴 20 min, 流水冷却。将糖原水解液进一步 制备成糖原检测液, 分别加样后, 混匀后置于沸水中煮 5 min, 冷却后于波长 620 nm 处测定各管的光密度(optical density, OD)值, 按以下公式计算肝糖原含量: