酚红血浓度的测定
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酚红血浓度的测定
摘要:目的通过观察家兔经过耳缘静脉注射酚红后,经过一定时间血药浓度的变化而掌握其测定方法,并计算出其半衰期和表观分布容积。
为研究药代动力学提供理论支持。
方法家兔一侧耳缘静脉注射酚红后经过一定时间在另一侧耳缘静脉取血,测定其浓度。
由于酚红在家兔体内的代谢属于一级消除,故根据相应的一级消除动力学公式可计算出t1/2和V d的值。
结果及结论经过实验可得:酚红在家兔体内代谢时有t1/2 =25.67min ,V d=0.246L。
关键词:t1/2 V d 药代动力学
药物进入体内后都要经过这样的步骤进行代谢:吸收,分布,代谢,排泄。
对以上步骤进行定量分析,有助于我们了解药物在体内的变化并对其进行精确的研究。
本实验所用的酚红经静脉注射后,在体内不被代谢,不易扩散,故可以通过比色法来测定血药浓度。
而酚红的代谢满足一级消除动力学,从而可以对t1/2 ,V d 进行计算而得出其值。
一实验材料及方法
1.1
1)实验动物:健康家兔
2)实验药品:标准酚红溶液,稀释液。
3)实验器材:兔盒,手术刀片,注射器,试管,试管架,移液管,洗耳球,加样器,棉球,离心机,手术灯,分光光度计,称。
1.2
1)取家兔一只,称重。
放入兔盒内。
2)在一侧耳缘静脉取血1.5ml置于含有肝素的干燥试管中,震动。
然后从同侧耳缘静脉注射酚红溶液6ml/kg。
3)经过一定时间后从另一侧耳缘静脉取血1ml,置于肝素化的试管中,震荡。
并记录好取血的开始时间和结束时间。
4)如上,再进行三次取血。
5)将所取的血液进行离心,离心10min,然后取上清0.2ml,置于5只试管,加入稀释液3ml,摇匀,静置。
6)与650nm波长下进行比色,记录。
7)计算半衰期和表观分布容积。
二实验结果
根据以上实验步骤可得到如下四组数据:表1
表1 测量所得结果
组号开始时间
/min
结束时间
/min
等效时
间/min
吸光度
重量
/kg
1
5 17 10.6192 0.207
2.5
20 21 20.65 0.165
21 22 21.65 0.083
30 33 31.5236 0.054
2 5 11 7.9667 0.235
2.5 11 16 1
3.4769 0.475
20 26 23.0369 0.195
30 34 31.9852 0.193
3 5 8 6.4768 0.721
2.5 50 53 51.4768 0.930
60 69 64.3053 0.380
70 71 70.6550 0.194
4
5 6 5.6434 0.286
2.5 50 51 50.4962 0.085
60 67 63.3251 0.054
72 74 73.0347 0.034
根据以上数据计算可得如下结果:表2
表2 实验计算结果
组号t1/2(min)V d(L) 时——量曲线
a b r
1 9.1913 0.258 2.2154 -0.03274
3
-0.90806
7
2 30.7599 0.303
3 2.108985 -0.00978
4
-0.53760
2
3 43.3017 0.12
4 2.533839 -0.0069
5 -0.63894
2
4 19.3961 0.2973 2.098403 -0.01551
6
-0.98568
8
均数25.66225 0.24565
标准差14.69345729 0.083551361
备注:以上实验数据处理所用处理软件为:
由以上表格可以得到: t1/2 =25.67min ,V d=0.246L。
三实验讨论
药物的半衰期,表观分布容积等是药代动力学的基本数据,对他们的测定有助于对药物的研究,如上述实验就可测得酚红在家兔体内代谢时,其t1/2 =25.67min ,V d=0.246L。
借助以上方法,可以对其他药物进行药代动力学研究。
由上可以看出,在计算半衰期时,由于各组的操作及个体原因,导致标准差过大。
这可以通过由一个人只负责一项操作等方式来减少误差。
在实验过程中,应注意以下几点:
1)比色时不要用手触摸比色皿光面,有液体在上面时应用擦镜纸擦拭干净。
2)取血前应把毛取出干净,以免发生血凝。
3)可用手术灯照射兔耳朵,加热其温度而使血管扩张充盈。