AgilentHPLC1100ChemStation高级操作培训(安捷伦科技公司)
安捷伦1100培训手册
No.24
第二章 HPLC 仪器工作原理
本章内容：
•往复活塞泵的结构及工作原理 •手动进样器（六通阀）结构及工作原理 •常见检测器检测原理
No.25
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
Gold Seal Sapphire Insert Ruby Ball Spring Insert
60℃
0
5 Time in Minutes
10
No.14
柱效
Detector Response Inject
低柱效
高柱效
Time
No.15
计算柱效
tR
Inject
W 1/2
W Time
B
N = 16
t R WB L N
2 = 5.54
t R W 1/2
2
HETP =
No.16
扩散
范德姆特方程 The Van Deemter Equation
150 4.0
100 3.0 2.0
50
1.0
10
No.6
高效液相色谱 (HPLC)
进样口 混合器 泵 色谱图 色谱柱
检测器
溶剂
No.7
液相色谱类型
Types of Compounds Separated Neutrals Weak Acids Weak Bases
Mode
Stationary Phase
No.31
Necessity for More than One Detector
Selectivity
Flecainide in Serum
Agilent 1100型HPLC操作指南
Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤（通常过0.2μm滤膜）、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相，泵头清洗溶剂（10％的异丙醇）。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱（根据需要）、检测器电源，等待系统自检通过，黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑，双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站，软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶，旋松“排气阀（purge阀）”，将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min，进行清洗和排放气泡，至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时，需打开泵头清洗溶剂，使其逐滴流出，防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出，影响系统压力。
5、安装色谱柱：依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱（注意方向，箭头指向检测器）。
设置溶剂比例，1mL/min流速，平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法，依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数，保存方法。
2、运行方法，监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样：设定样品名、数据文件存储位置，点击运行方法；将手动进样器扳至“Load”上样，上样完扳至“Inject”，工作站开始记录信号。
4、测试完毕，点击桌面的“仪器脱机”打开工作站，进行数据处理，积分，定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束，冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则（以反相C18为例）：先用90％水，10％乙腈（或其它有机相）冲洗水溶性物质；30min后改为50％水，50％乙腈；再过30min 后，改为100％乙腈，再冲洗30min后结束。
2、实验结束，停止泵，关闭化学工作站，关闭电脑，关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱，清理流动相，将各个抽滤头浸泡在有机相中，整理桌面、地面杂物。
注意事项：1、挥发性有毒有机相（甲醇、乙腈、正己烷等）需尽量包严实。
Agilent 1100 LC 现场培训教材
Agilent 1100 LC现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：● 基本了解1100LC硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、 培训准备：1、仪器设备： Agilent 1100LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
● 色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备：● 色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
安捷伦1100高效液相色谱仪标准操作规程
目的：规范AgilentllOO高效液相色谱仪操作程序范围：适用于实验中心AgilentllOO高效液相色谱仪的使用责任：实验中心相关人员对此程序负责内容：1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agile ntllOO高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2 打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online 状态，约30 秒钟后, 计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt 等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器—输液泵—柱温箱—检测器—数据处理—报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现）2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“ 0K，即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“ Load Method ”，或直接单击快捷键操作的“ Load Method'图标，选定文件名，单击“0K，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，贝何同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method'下，选择“ Edit Entire Method,在每个页面中键入设定值，单击“ 0K。
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
安捷伦1100操作规程
安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程1、操作前的准备流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。
2、仪器的操作2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。
2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。
2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。
2.4编辑仪器方法2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。
2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。
2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。
2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。
2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。
2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。
2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。
2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。
2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。
2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。
2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。
HPLC_1100_ChemStation
Slide 10
在线信号显示
Update: 2005-3-21
Slide 11
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从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
Update: 2005-3-21
Slide 12
方法编辑、 第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 方法的概念： 方法的概念 的所有参数。 •方法文件名：xxx.m。 方法文件名： 方法文件名 •方法的组成： 方法的组成： 方法的组成 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
Update: 2005-3-21
Slide 2
第三天
上午： 上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试 结业午餐 下午： 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修 选修) 下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动 选修 2 发结业证 3 自由练习、讨论 自由练习、
Update: 2005-3-21
Slide 15
方法信息 (Method Information)
方法信息仅仅是一些描述性的文字信息，可以按照自己的需求来输入。
Update: 2005-3-21
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泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
agilent-HPLC化学工作站操作培训
温度对分离选择性α的影响
40 Time in Minutes
No.14
Time
No.15
Inject
低柱效 高柱效
Detector Response
柱效
计算柱效
tR
Inject
W 1/2
WB Time
N = 16
tR 2 WB
HETP =
L N
= 5.54
tR 2 W 1/2
No.16
Agilent 1100 化学工作站 操作培训
2019年9月5日
No.1
Agilent 1100 化学工作站培训日程安排
第一天 第二天
上午： 1 欢迎，相互介绍 2 液相色谱基础 3 HPLC仪器工作原理
下午：1 Agilent 1100 硬件的结构及特点 （真空脱气机、泵、自动进样器、检测器）
2 Windows操作系统简介 3 化学工作站的重新安装、配置及启动 4 练习（实验一）
Stationary Phase
C-18, C-8, C-4, C-2
C-18, C-8
Silica, Amino, Cyano Diol
Anion or Cation Exchange Resin
Polystyrene Silica
Mobile Phase
Water/Organic Modifiers
0
S ys te m Pressure>0
S ys te m Pressure=0
100
O ne P iston C ycle TIM E
w /o com pensation w ith com pensation
For internal use only 11
安捷伦HPLC1100培训资源3_Runcontrol
输入(shūrù)发射波
长 输入激发波长
波长编程表
18
共二十七页
Author：Tianyou Yue
输入控制温度
柱温箱
画面(huàmiàn)6：恒
温柱箱参数设置
温度编程表
控温范围：低于室温10℃～80℃
两个(liǎnɡ ɡè)单独的加热区。
安装切换阀可以进行柱切换。
可以容纳30 cm长色谱柱。
柱子的内径（5um填料） 4.6 3.0 2.1 1.0
流速（ml/min） 1-2
0.4-0.8 0.2-0.4 0.05-0.09
设置柱子流速时，要注意观察系统压力，一般来 说在满足分析的前提下使系统维持比较低的压力 对仪器(yíqì)是非常有好处的。
10
共二十七页
Author：Tianyou Yue
2
共二十七页
Author：Tianyou Yue
面对(miàn duì)工作站，我该怎么办 ？
What should I do？
3
共二十七页
Author：Tianyou Yue
如何运行(yùnxíng)样品
4
共二十七页
Author：Tianyou Yue
调用(diàoyòng)方法
在Method中点击(diǎn jī)Load
选择所要编辑(biānjí)的内容
画面1:方法(fāngfǎ)组成
方法信息
仪器控制与数据采集
数据分析 运行时间表
共二十七页
在你想要的部分前选中,否则方法里将不 包括该部分的内容。比如本方法不包括 数据分析的内容。
7
Author：Tianyou Yue
方法(fāngfǎ)信息 (Method Information)
Agilent1100色谱工作站操作培训课件 共42页
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
手动进样器
样品定量管
前视图
后视图
流路连接
安捷伦广州培训中心 于保生
样品回路 废液
排空管 样品回路 到色谱柱 来自泵出口
20.07.2019
自动进样器
步骤1
步骤2
步骤3
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
混合器 泵
HPLC 结构框图
打开View 菜单下的Online Signal 窗口，单击Change 键，选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、 Y轴范围，观测色谱基线；
基线稳定后可以进样分析（经验上，基线波动1~2m AU（常规分析）或~0.5mAU（痕量分析）就可算 是基线稳定。）
填写Sample Information
Holographic Grating
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
单元泵工作原理
单元泵工作原理
Outlet Ball Valve
Damper Purge valve
Active Inlet Valve
Seal
Piston
Ball Screw Drive
Authoring Division Name File Name Security Notice (if required)
7.6
7.8
8.0
8.2
8.4
Time (min)
Purity Match 999
Purity Match 764
200
Wavelength (nm)
400
200
Wavelength (nm)
安捷伦液相高级操作培训课件
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
2005-3-212020/3/28
Slide 5
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
2005-3-212020/3/28
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
第一章 化学工作站各个工作界面介绍
2005-3-212020/3/28
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
2005-3-212020/3/28
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
2005-3-212020/3/28
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2005-3-212020/3/28
安捷伦高效液相1100中文教程
安捷伦1100中文教程★huyuchem(金币+1):鼓励一、培训目的：● 基本了解1100LC硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1100LC● G1310A 单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
● 色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备：● 色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。
● 二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
安捷伦液相1100操作
•参比峰谱带宽度要大于或等于样品谱带宽度。
注意：增加样品谱带宽度，会降低样品的吸收强度，但会降低噪音。
选择合适的参比吸收波长可以减小梯度洗脱过程中的基线漂移。
Peak Supression（峰抑制）:
DAD检测器一个非常有趣的功能是进行峰抑制。例如有两个样品没有分开，共同洗 脱出来，可以设置某一个样品的等吸收波长为参比波长，则被设为参比峰的样品被 抑制，而另一个样品峰被分离。不过，此样品峰的吸收强度要损失10％～30％。
2005-3-212021/12/17
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VWD检测器参数设置
2005-3-212021/12/17
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运行时间表(Run Time Checklist)
选择在方法中要执行的项目 可以选择保存GLP数据 可以将方法和数据保存在一起
2005-3-212021/12/17
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方法信息 (Method Information)
2005-3-212021/12/17
Slide 16
泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
2005-3-212021/12/17
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DAD检测器参数设置
可以选择存储 5 个信号 信号波长范围 191 - 949 nm 可变狭缝： 1, 2, 4, 8, 16 nm 可以时间编程
可以保存数张或所有光谱
2005-3-212021/12/17
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪操作规程1. 仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100 高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器一输液泵一柱温箱一检测器一数据处理一报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2. 色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“0K，即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“LoadMethod ”或直接单击快捷键操作的“LoadMethod ”图标，选定文件名，单击“0K,此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method T，选择“Edit Entire Method ”，在每个页面中键入设定值，单击“OK。
即完成。
2.3编辑新文件先在命令栏“ Method下，选择“ NewMethod”之后再在命令栏“ Method下，选择“Edit Entire Method，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method ”先在命令栏“Method下选择“Save Metho*给新文件命名，单击“OK。
Agilent1100色谱工作站操作培训课件 PPT资料共42页
安捷伦广州培训中心 于保生
14.11.2019
一、标样 1
C标 A标
RF
二、样品
1′
A样
外标法
∵ CRF A ∴ ES样 T R D FA 样
ES样 TRD F A 样 k
安捷伦广州培训中心 于保生
14.11.2019
一、标样
1 ISTD
二、样品
C标 C标内 A标 A标内 RF标 RF标内
平均/取代 平均/取代
平均/取代 平均/取代
平均/取代 平均/取代
安捷伦广州培训中心 于保生
14.11.2019
5、校正设置（Calibration Setting）
样品单位 Amount units
校正曲线 Calibration Curve
类型Type 原点Origin 权重Weight
6、设定报告格式
工作站 系统初始化：（主要目的：排除系统中的气泡）；
打开Purge 阀； 加大泵流量并开启泵，快速冲洗实验所用的各个通道，至无气泡从废液管排出，（eg. 设A通道100%，5mL/min，冲洗A通道至无气泡
排出；再分别依次冲洗所需其余通道B、C、D等）； 降低流量及溶剂比例成实验初始条件，并单击OK确认执行；（eg. 实验二的条件Flow: 1.0mL/min，A：20% (H2O), B: 80% (MeOH)； 关闭Purge阀，完成系统初始化。
后运行 时间表
压力限
Posttime Timetable PressureLimits
大于溶剂的截止波长20nm以上 ≥Slit 尽量靠近样品的最大吸收
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14.11.2019
agilent-HPLC化学工作站操作培训 PPT资料共368页
No.10
影响R值的因素
R=
ห้องสมุดไป่ตู้
Δt = 1/4
N
x
α- 1
x
k'
W
α
1 + k'
柱效
选择性
容量因子
No.11
容量因子
各组份的容量因子（K’）随溶剂洗脱强度的 变化增大或缩小
溶剂洗脱强度弱
1100 700
60% Acetonitrile 40% Water
mA
U
300
100
2
4
6
8
10
Time (min.)
C=O - COOR - CHO - COOH - NO 2
-
max
= wavelength of absorption maximum
max(nm)
195 190 195 205 210 200-210 310 202, 255 220, 275
No.35
Instrumentation - Absorbance Detectors
柱塞B后退
No.27
溶剂传输系统
消除流量脉冲－串联柱塞泵
单向阀
P
脉冲阻尼器
减少了单向阀用量 需要阻尼器 压缩因子补偿
Agilent 1100 Series Pum ps: Solvent Com pressibility Com pensation
P is to n D isplacem ent (祃)
Water/Organic Ion-Pair Reagent Organics
Aqueous/Buffer Counter Ion
Gel FiltrationAqueous Gel PermeationOrganic
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2020年9月25日
授课教师 纪学海
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HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 第二天
上午： 1 课程简介及相互介绍 2 化学工作站各个工作界面介绍 3 完整方法的编辑、修改、存储及运行 4 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
进样和运行位置
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标准自动进样器的程序进样
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Wellplate自动进样器参数
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柱温箱参数设置
控温范围：低于室温10℃～80℃ 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次 数
从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
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第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 的所有参数。
•方法文件名：xxx.m。
•方法的组成： 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
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化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
下午：1 数据分析参数设置 2 色谱图的优化处理 3 积分事件及手动积分的选择和应用 4 高级校正表的编辑和设置
上午：1 报告格式的选择及设定 2 光谱的提取、光谱库的建立及检索 3 色谱峰纯度检测 4 色谱条件的优化及色谱图的提取
下午：1 序列参数的设置以及统计功能的使用 2 批处理功能的设置及应用
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
口中选择要监控的信号。
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在线信号显示
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查看Logbook
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标准自动进样器参数
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标准进样过程原理示意图
Metering device
Sampling unit
6-port valve To waste
From pump To column
准备位置
抓取样品瓶 吸取样品
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方法信息 (Method Information)
方法信息仅仅是一些描述性的文字信息，可以按照自己的需求来输入。
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泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
Instrument 1 Offline：进入离线工作站，不可控制仪器；
Readme.txt：提供关于化学工作站的参考信息；
Scheduler：化学工作站的任务、日程安排表。
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
Agilent化学工作站有5个功能界面，可以从View菜单中切换工作界 面，也可以从快捷图标栏中切换。 Method and Run Control——进行仪器控制、方法编辑、运行以及 序列的编辑、运行； Data Analysis——进行数据分析：包括谱图优化，积分优化，校正 表建立，报告格式选择等； Report Layout——进行用户个性化报告的编辑、设定； Verification (OQ/PV)——进行仪器性能认证； Diagnosis——进行仪器硬件性能的诊断、测试。
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
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第一章 化学工作站各个工作界面介绍
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化学工作站Scheduler的使用
使用时要注意保存，否则工作 站不予以执行。
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化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
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编辑一个完整的方法
使用 Edit Entire Method 编辑一个完整的方法
单击图标，也可以开始 编辑一个完整的方法。
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选择所要编辑的内容
首先选择所要编辑的方法内容。注意，不选择并不意味着方法中不含有该部分内容， 而是意味着对该部分内容不进行编辑，使用原方法中设置的参数。
Add License：添加或查看工作站软件的License号码；
Agilent 1100 Series CDROM：查看随机的维itor：配置仪器；
Installation Qualification：进行软件的安装认证；
Instrument 1 Online：进入在线工作站，可以控制仪器；
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