水果中VC含量测定实验

水果中VC含量的测定

一实验仪器与试剂

紫外-可见分光光度计,电子天平，高速离心机，

抗坏血酸标准液（Vc标准液）1mg/ml（现用现配）

棕色容量瓶

提取剂1%HCL

二原理：

根据Vc对紫外线产生吸收和在碱性环境中不稳定容易被氧化的特性，于波长243nm处测样品溶液与碱处理样品（参照）的吸光度之差，通过查校准曲线，计算样品中Vc的含量。

三步骤

1波长的选择

分别对不同浓度的Vc与试剂空白溶液在200——400nm范围内扫描，测其最大吸收峰处的波长λ。

2.校准曲线的绘制

准确称取抗坏血酸（维生素C）10mg，用提取剂1%的HCL溶解，并定容到100ml，此时浓度为100μg/ml。分别吸取0.00 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20ml标准液，用1%的HCL稀释10倍，浓度分别为0.00 1.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00μg/ml。以1%HCL为参照，在波长λ处，测其吸光度A，以各浓度Vc液与空白参照吸光度之差△A对抗坏血酸浓度C绘制校准曲线。

3.样品测定

样液制备：将水果样品洗净去皮，称取果肉100g，加入100ml提取剂，迅速搞成匀浆，称取10g浆状物，用提取剂将样品移入并定容到00ml容量瓶中，摇匀。若透明则可直接取样测定，若浑浊，可通过离心来消除。

样液的测定：准确移取澄清透明的0.5ml提取液于试管中，加9.5ml 1%HCL，以HCL 为对照，在波长λ处测定其吸光度。

待测碱处理样液的测定：取0.5ml透明提取液，加6滴0.5mol/l的NAOH溶液（约0.3ml），室温下放置40min后，加9.2mlHCL后摇匀，以6滴NAOH跟1%HCL的混合液为对照，测其λ波长下的吸光度。

4.结果计算

由待测样品与待测碱处理样的吸光度之差查校准曲线，即可计算出样品中Vc的含量，也可直接以待测碱处理液位对照，测得待测也的吸光值，查校准曲线，计算Vc含量。

Vc的含量：mg/100g=（200*C）/（m*V）

其中：m-——样品重量g; 200——稀释倍数；C——从校准曲线上查的的Vc含量μg/ml V——测试时吸取提取液体积ml

三结果与讨论

1.溶剂对吸光度的影响，

单独测1%HCL在波长λ出的吸光度，可通过扣除其作为对照的吸光值。

2.待测碱处理样的静置时间

每隔5分钟，取少量测其吸光度。

3.吸光度检测范围

对打吸光度值最好不要超过0.8,浓度过高容易造成校准曲线的弯曲

4.方法的精密度

同等条件下平行试验5次，比较其结果。

5.因为Vc溶液容易被氧化，所以操作过程尽可能快。