高中生物选修3(人教版)动物细胞工程
高中生物新人教版选择性必修3动物细胞培养(38张)课件
26
2．应用 干细胞与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关，因而在医学上有 着广泛的应用。
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第2章 细胞工程
27
类型
应用
优点
造血 治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起
来源于病人自
干细胞 的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
身的体细胞，
神经 治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕
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第2章 细胞工程
14
③不能用胃蛋白酶处理：由于大多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4, 而胃蛋白酶发挥作用的最适pH为2.0左右，因此不能用胃蛋白酶使细胞 分散开。
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第2章 细胞工程
15
(3)原代培养和传代培养：区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的 对象。 ①第一次：用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细 胞后进行培养，为原代培养。 ②第二次：细胞培养过程中出现接触抑制现象，用胰蛋白酶使其从瓶壁 上脱离下来，然后，将其分散到多个培养瓶中继续培养，为传代培养。
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第2章 细胞工程
36
核心知识小结
4.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一 步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 5.类似胚胎干细胞的一种细胞为诱导多能干细胞(iPS细胞)。
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第2章 细胞工程
37
word部分：
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将它移植回病
干细胞 金森病、阿尔茨海默病等)
人体内后，理
可治疗小鼠的镰状细胞贫血，在治疗阿尔茨海
人教版高中生物选修3专题二2.2动物细胞工程(精)
人教版高中生物选修3 专题二 2.2 动物细胞工程2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体成化高级中学陆勤华1、三维目标：1.1 知识目标⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
⑶了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。
1.2 能力目标⑴由植物体细胞杂交技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思维能力。
⑵让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。
（3）分析动物细胞融合技术的意义和应用，逐步提高学生独立获取知识、分析问题和解决问题的能力。
1.3 情感目标⑴初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。
⑵通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。
⑶关注动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展和应用前景。
2、教学重难点：2.1 重点：单克隆抗体的制备2.2 难点：单克隆抗体的制备3、教学方法：讲授、自学、讨论等相结合、或生讲师评、补充4、教学手段：动物细胞融合、单克隆抗体制备过程的教学课件ppt5、教学课时：1课时6、教学过程【复习导入新课】让学生回顾有关植物体细胞杂交技术的基本知识教师设问：植物体细胞杂交技术的过程是怎样的？（ppt植物体细胞杂交）填图生：先用酶去除两种植物细胞的细胞壁，使之成为原生质体，再用物理或化学的方法，诱导两种原生质体融合成杂种细胞，最后用植物组织培养的方法把其培育成新的植物体。
师：动植物细胞在结构上有何区别？生：动物细胞无细胞壁、无明显的液泡、无质体（叶绿体）。
师：既然动物细胞与植物细胞不同，那么动物细胞是否可以融合或杂交？我们在高一时候讲过有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。
高中生物(新人教版)选修三：专题2《细胞工程》：2.2《动物细胞工程》课件(新人教版选修3)
第一节 动物细胞培养
1、动物细胞培养的概念
从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成 单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些 细胞生长和增殖.
胚胎或幼龄动物的 2、动物细胞培养过程： 组织、器官 单个细胞
胰蛋白酶或胶原蛋白 酶 加培养液
遗传物质 未改变
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞 细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
传代培养
细胞系 无限传代
多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的 内环境的知识，思考以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和动物 血清等。
2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？
适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境
比较项目
原 理 培养基类型 培养基特有成分 培养结果 培养目的
植物组织培养
细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物激素 新的个体或细胞产品
动物细胞培养
细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动物血清促生长 因子 细胞或细胞产品
快速繁殖、培育无病毒植 获得细胞
人教版高中生物选修三教学课件 2.2 动物细胞工程(1)
无限传代
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3. 过程:
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分
细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为 细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只
有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无 限制传代，这种传代细胞为细胞系。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
5、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（ A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
C．原代细胞
D．传代细胞
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
3、动物细胞工程技术的基础是（ A.动物细胞融合 C.胚胎移植 ） B.单克隆抗体 D.动物细胞培养
4、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼 龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ A.容易产生各种变异 C.取材十分方便 B．具有更强的全能性 D．分裂增殖的能力强 ）
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
2.2.1.1 动物细胞培养
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经
培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ A.经过免疫的B淋巴细胞 ）
B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （ A．细胞系 B．细胞株 ）
人教版生物选修三专题--动物细胞工程-课件-共张ppt
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
受精作用
正在融合的细胞
动物细胞融合技术的发展简史：
1、20世纪30年代，在肺结核、天花等病理组织中观 察到多核细胞；
2、20世纪70年代，在蛙的红细胞中观察到多核细胞； 3、1962年，发现日本血凝性病毒能引起艾氏腹水瘤
细胞融合成多核细胞； 4、1965年，证实了灭活的病毒在适当条件下可以诱
疫作用。 3、每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。
不能无限增殖 单克隆抗体
由单个B淋巴细胞经无性繁殖（克隆），形成 基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化 学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 细
胞
小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 融
合
杂交瘤细胞 技 （动物细胞培养技术大量培养）术
此外，体细胞核移植后的重组细胞直接发育成新个体 属于无性繁殖，产生的后代无更大变异性，而环境是
多变的，易造成该个体适应能力降低，易被淘汰。
P50 思考与探究
2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？
动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化 的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个 体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组 织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的 动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量 的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习 性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克 隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不 可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是
人教版高中生物选修3[知识点整理及重点题型梳理]动物细胞工程 (动物克隆技术)
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人教版高中生物选修三知识点梳理重点题型（常考知识点）巩固练习动物细胞工程（动物克隆技术） 【学习目标】1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2、比较动物细胞培养与植物组织培养区别。
3、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
【要点梳理】要点一：动物细胞培养 1、动物细胞培养概念（1）动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
（2）动物细胞培养过程中的几个重要概念：①细胞贴壁：培养液中分散的细胞很快贴附在瓶壁上生长繁殖，称为细胞贴壁或贴壁生长。
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。
③原代培养：将动物的器官或组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，然后制成细胞悬液，放入培养瓶内，放在适宜的条件下培养，这种培养叫原代培养。
④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，还要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理后，再分瓶培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。
2、动物细胞培养过程【动物细胞工程（动物克隆技术）369168 动物细胞培养过程 】 （1）取材：动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。
（2）过程：原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 （3）动物细胞培养过程：原代培养动物胚胎或幼龄 动物器官、组织单个细胞细胞悬浮液10代危机剪碎，胰蛋白酶、 胶原蛋白酶处理子代细胞可继续传代的细胞有限细胞系要点诠释①取自动物胚胎或幼龄动物器官、组织，是因为组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强。
②胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。
成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。
③用胰蛋白酶处理组织块，可使细胞分散开，这样做的目的是使细胞与组织液充分接触，这也说明了细胞间的主要物质是蛋白质，但是由于细胞膜的主要成分之一也是蛋白质，因此要控制好处理的时间，不能太长，否则会损伤细胞。
高中生物选修3(人教版)动物细胞工程课件
单克隆抗体的应用
与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高， 优越性十分明显。
应用主要有：
1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿 瘤
生物导弹：单克隆抗体作为载体分子，同抗癌药物相结合，将他们运载到肿瘤 部位，杀死癌细胞，这种抗体——药物结合物称之为生物导弹。它能定向杀灭 癌细胞，避免或减少对正常细胞的伤害，大大减轻了抗癌药物的副作用。
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养基性质 培养基特有成分
细胞的全能性
固体培养基 蔗糖
细胞增殖
液体培养基
植物激素 葡萄糖 动物血清
培养结果 培养目的
植物体 快速繁殖、培育 无病毒植株
细胞株、细胞系 获得细胞或细胞 分泌蛋白
思考：
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基 有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞 培养材料？ 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个 体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的 动物个体
1、概念： “2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”
2、过程： 细胞A
物理法
化学法
细胞B
仙台病毒
灭活的病毒
疱疹病毒
新城鸡瘟病 毒
杂种细胞
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
人教版高中生物学选择性必修3生物技术与工程精品课件 第2章 细胞工程 第2节 第1课时 动物细胞培养
B
取材 培养对象
过程 细胞分裂、生长、
分化特点
动物细胞培养
新鲜的组织 分散的单个细胞 原代培养、传代培养
①贴壁生长 ②接触抑制
植物组织培养
续表
植物器官、组织或细胞等 离体的植物器官、组织或细胞等
脱分化、再分化 ①脱分化:形成愈伤组织 ②再分化:形成芽、根等
旁栏边角 想一想
1. ［教材P43从社会中来］在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健 康皮肤进行自体移植。能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 提示 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。 2. ［教材P44旁栏思考］进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间 的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
关键点拨 动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目 生物学原理 培养基性质 培养结果
动物细胞培养 细胞增殖 液体 子代细胞
应用
人造皮肤的构建、动物分泌 蛋白的规模化生产等
植物组织培养 植物细胞的全能性
固体 新的植株 ①快速繁殖 ②作物脱毒 ③培育作物新品种 ④细胞产物的工厂化生产
比较项目 培养条件
3. ［教材P45思考·讨论］幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细 胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？ 提示 细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛， 老龄动物的细胞则相反。所以，一般来说，幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞易于培 养。同样，分化程度越低的细胞，增殖能力越强，所以更容易培养。
旁栏边角 想一想
提示 该技术可能被用于治疗不孕症；获得足够量的生殖细胞来进行濒危物种的克隆研 究；获得生殖细胞进行转基因操作，再经过受精、胚胎发育等过程来获得转基因动物等。
人教版高中生物选择性必修第3册 (基因工程) 动物细胞工程单元复习
教案真实问题【问题1】如何用于生理、病理等方面的研究？【讲述】问题提出的背景：研究发现，与正常甲状腺组织相比，NDRG2基因（后面简称N基因）在甲状腺髓样癌细胞中表达水平极低或不表达。
【引导设计实验】研究者推测甲状腺髓样癌的发生与发展可能与N基因的低表达有关。
如何设计实验来验证这一推测呢？请大家用体外培养的甲状腺髓样癌细胞为实验材料，从自变量的施加、因变量的检测和排除无关变量的影响三个方面，来思考一下实验思路。
【实验设计展示】【拓展知识】平板克隆形成实验和细胞划痕实验【演示】实验结果真实问题【问题2】疾病治疗中如何发挥单抗的作用？【讲述】问题提出的背景：埃博拉出血热以及埃博拉病毒【引导分析】科学家采集了多年前感染EV并已康复的甲、乙两人的血液，检测了抗EV-GP抗体的水平，结果如图1。
1.你认为该选择哪位康复者提供的血液来分离经免疫的B细胞制备单抗？2.你能简述一下大致流程么？科学家将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，得到如下结果。
1.EV表面的糖蛋白EV-GP是引起机体免疫应答的抗原，为何同一抗原会对应多种抗体？2.根据图示结果，你认为对病毒抑制效果最好的是哪两种单抗？3.在临床应用时，你希望上述两种抗体与EV-GP结合位点相同，还是不同？【实验步骤展示】【绘图引导分析】略【资料】，中国科学家分离得到三株抗EV-GP的单克隆抗真实问题【问题3】核移植在家畜遗传改良中的作用？【讲述】问题提出的背景：乳腺炎和口蹄疫是两种分别由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的严重疾病。
研究者尝试将抗细菌的乳铁蛋白肽基因和抗病毒的人α干扰素基因转给奶牛，培育抗病的奶牛新品种。
【引导设计流程】如果你是研究者，培育思路是什么？会用到哪些生物技术？【培育流程展示】【提问】1.目的基因的受体细胞一般是什么细胞？如何将基因导入该细胞？2.研究者希望培育的转基因奶牛，能够在乳腺中特异性表达乳铁蛋白肽以抵抗乳腺炎，并且在全身细胞内表达人α干扰素以抵抗口蹄疫。
人教高中生物选修三动物细胞工程讲课文档
转入培养液中 进行传代培养
放入二氧化碳
培养箱中培养
转入培养液中 进行原代培养
贴满瓶壁的
细胞用胰蛋
白酶处理分 散成单个细
胞制成细胞
悬浊液
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
第三页，共25页。
1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞 间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
(1)无菌无毒的环境 —— 无菌处理；添加一定量的
抗生素；定期更换培养液。
(2)营养 —— 添加血浆、血清天然成分。 (3)温度和p胞
PH7.2～7.4。
(4)气体环境 —— O2：细胞代谢需要；CO2：维持培
养液的PH；95﹪空气＋5﹪CO2 。
第八页，共25页。
细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相 互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为 细胞的接触抑制。
第五页，共25页。
相关概念：
原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细
胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个 或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。
第十五页，共25页。
3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体
细胞供体动物进行了100﹪的复制吗？为什么？ 克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还
第六页，共25页。
多细胞动物和人体的细胞都生 活在内环境中，根据你所学的内环 境的知识，思考并讨论以下问题：
1.体外培养细胞时需要提供哪些物
质？ 充足的营养供给、适宜的温度、适
宜的pH和气体环境。 2.体外培养的细胞需要什么样的
高中生物第2章细胞工程第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养新人教版选择性必修3
3. ［教材P45思考·讨论］幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细
胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？
提示 细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂
___________________________________________________________________________
7.2～7.4
温度多以__________
松盖培养瓶
④适宜的气体环境：通常采用培养皿或____________，并将它们置于含有
95% 空气和
CO2 培养箱
5%CO2 的混合气体的___________中进行培养。
O2 是细胞代谢所必需的, CO2 的主要作
维持培养液的 pH
用是________________。
D.无论是原代培养还是传代培养，都需将培养瓶放在 CO2 培养箱中培养
[解析] 取样的细胞还可采用机械的方法将组织分散成单个细胞，A项错误；培养取样
细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的外部环境如适宜的温度和
等，B项正确；若取样细胞被 感染成为癌细胞，则不会出现接触抑制现象，若出
01
基础落实·必备知识全过关
02
重难探究·能力素养全提升
01
基础落实·必备知识全过关
知识点一 动物细胞工程的概念和动物细胞培养的条件
1. 动物细胞工程
动物细胞核移植
（1） 常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和________________等。
动物细胞培养
（2） 基础：______________。
比较项目
取材
培养对象
过程
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程一动物细胞培养pptx课件新人教版选择性必修3
及应用(生命观念、科学思维、社会责任)
知识导图
课前·新知导学
动物细胞培养的条件
1．动物细胞培养的概念 从动物体中取出相关的组织，将它分散成___单__个__细__胞___，然后在适 宜的培养条件下，让这些细胞___生__长___和___增__殖___的技术。
2．动物细胞培养的条件 (1) 营 养 ： 动 物 细 胞 培 养 所 需 的 营 养 有 ___糖__类____ 、 氨 基 酸 、 无 机 盐、维生素等，将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的 培养基，称为__合__成__培__养__基__。通常需要在培养基中加入__血__清____等一些 天然成分。 (2)无菌、无毒的环境：对_培__养__液___和所有_培__养__用__具___进行无菌处理 以及在_无__菌__环__境___下进行操作。培养液需要__定__期__更__换__，以便清除代谢 物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
5．应用 (1)将正常的__造__血__干__细__胞____移植到病人体内，恢复病人的_造__血___和 免疫功能，用来治疗白血病等疾病。 (2)__神__经__干__细__胞____在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病方面 (如帕金森病、阿尔茨海默病等)有重要的应用价值。 (3)用___i_P_S_细__胞____治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也 取得了新进展。
(3)温度、pH和渗透压 ①适宜的温度条件：_3_6_._5_℃___±0.5 ℃。 ②适宜的pH条件：__7_.2_～__7_._4__。 ③CO2的主要作用是维持__培__养__液__的__p_H___。
动物细胞培养液中为什么要加动物血清？ _____________________________________。 【答案】血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质，而且 还含有多种未知的促生长因子，能促进细胞的生长、增殖
人教版教学课件人教新选修3细胞工程—第二节动物细胞工程
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理 融合前处理 诱 导方法
细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、 果胶酶去壁
用胰蛋白酶 使细胞分散
物理、化学方法
物理、化学、 生物方法
用
途
获得部分 或完整植株
编辑课件
主要用于制备 单克隆抗体
3
提 问
？
1.抗体由何种细胞产生？ 2.抗体主要分布在哪里？ 3.如何得到抗体？
编辑课件
7
单克隆抗体的应用：
⑴在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性 强、纯度高、灵敏度高、产量大、容易标准化 生产等优点。
⑵单克隆抗体可以作为载体，运载抗癌药物， 形成“生物导弹”，治疗恶性肿瘤。
编辑课件
8
1.动物细胞融合的目的中最重要的是----------------（ B ）
A.克服远缘杂交不亲和
B. 制备单克隆抗体
C.培育新品种
D.生产杂种细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是 （）
A. 诱导D融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
B. C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
编辑课件
9
3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是------（ D ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
1 方法：
物理法
诱导方式
化学法 生物法： 灭活的病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性（不感染细胞） 保编辑留课件融合活性（诱导细胞融合1）
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B淋巴细胞与抗体
１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产 生抗体。
２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百 万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原 具有特异性免疫作用。
３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗 体。
精品课件
单克隆抗体
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖 （克隆），形成基因型相同的细胞群， 这一细胞群所产生的化学性质单一、特 异性强的抗体称为单克隆抗体。
杂交瘤细胞
细胞培养
筛选，继续培养
足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群
体外培养 注射到小鼠腹腔
精品课单件 克隆抗体
思考：
1、本过程利用了哪些原理？
免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理
2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传 物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无 限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体
比较项目 原理
培养基性质 培养基特有成分
植物组织培养 细胞的全能性
固体培养基 蔗糖 植物激素
动物细胞培养 细胞增殖
液体培养基 葡萄糖 动物血清
培养结果 培养目的
植物体
细胞株、细胞系
快速繁殖、培育 获得细胞或细胞
无病毒植株
分泌蛋白
精品课件
思考：
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基 有何独特之处？
比较：植物的组织培养的条件
精品课件
4. 动物细胞培养的应用
(１)大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品。
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
(２)解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。 （利用贴壁生长和接触抑制原理）
(３)检测有关物质毒性。
(４)培养正常或病变细胞，用于科研。
精品课件
植物组织培养和动物细胞培养的比较
精品课件
（1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细 胞融合?
（小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量 增殖，B淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性 越近，融合形成的杂种细胞越易成活。） （2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗?
（有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触 抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力 的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不 能等于癌细胞。）
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
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2、有关概念
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。
和器官。
原代培养
10代细胞 细胞株
传代培养
50代细胞 细胞系
无限传代
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1、动物细胞的培养过程
(1)请据图简述动物细胞的培养过程 取动物器官
和组织 (2)思考:动物细胞培养有哪些方面 的应用?
幼龄动物
剪碎组织
胰蛋白酶处理
单个细胞
细胞培养
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
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2、有关概念
病毒颗粒 细胞核
思考讨论： 为什么细胞融合过程 中使用的病毒需要 灭活？
细胞核
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二、单克隆抗体
1、什么是抗体？其本质是什么？
抗体是机体受抗原刺激后产生的、 并能与该抗原发生特异性结合的 具有免疫功能的球蛋白。 2、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ 抗体是从何来的？
B淋巴细胞产生抗体。 3、B淋巴细胞有什么特点？
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动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养 核移植 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植技术
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一、动物细胞培养
动物组织细胞间隙中含 动物胚胎或幼龄动
有细一 胞讨定网论量络:细的 起胞蛋 来株白 形与细质 成胞，具系将有的物特点的组织（胰、分蛋器解白官弹酶性纤维）
一定有弹何性不同和?韧性的组织 细胞悬浮液
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（3）整个制备过程为何要经过两次筛选?
（第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有 一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后 再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由 于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的 ，所以产生的抗体必然是化学性质单一的 ，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆 确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的 不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞 培养材料？ 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强
3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？
成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养
特点： 特异性强、灵敏度高
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如何大量生产单克隆抗体？
• 利用淋巴细胞产生抗体的功能 • 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 • 利用细胞融合的技术将两种细胞融
合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特 性的杂交瘤细胞 • 利用动物细胞培养技术大量培养杂 交瘤细胞
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单克隆抗体制备过程
注射抗原
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选
细胞质
细胞核
细胞核移植
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎 胚胎移植
C母绵羊子宫
妊娠 分娩
精品课件 多莉羊
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ品课件
一、动物细胞融合
1、概念： “2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”
2、过程： 细胞A
细胞B
物理法 化学法
仙台病毒
灭活的病毒
疱疹病毒
杂种细胞
新城鸡瘟病 毒
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用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
细胞系：细胞株传代至50代后又出现 细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物 质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代， 这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗 传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑 制，容易传代培养。
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3、动物细胞培养 的条件 (1)无菌无毒的环境 (2)营养 (3)温度和pH (4)气体环境
4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个 体？
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的
动物个体
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Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
多 莉 羊 的 培 育 过 程
问
3 、 是 否 符 合 孟 德 尔 遗 传 ？
题、“多莉羊”是雄还是雌？2 、谁是“多莉”的母亲？1
卵细 胞
细胞拆合技术 乳腺细胞