操作规程400M液体核磁

4.基线校正指令：指令abs（此时可能会同时进行自动积分）。
5.化学位移值刻度：点击Topspin 主工具条中的按钮 将TMS的信号位移刻度为0。
6.标峰：指令pps。
7.若对所显示峰值不满意（显示太多或太少），输入指令：pp，在跳出的窗口中调整参数‘Minium Intensity MI
[rel]’，其数值设定可参考谱峰的相对强度（Y axis），所设‘MI’值应小于想要显示的所有谱峰中最小峰值的
DEPT 实验及数据处理
1. 为了方便比对，一般需完成三个谱，即常规 13C NMR、DEPT90 及 DEPT135，均为 1D NMR 实验，步
骤同前面的常规实验操作。
2. 但对于各个实验，流程 1 New Experiment 跳出窗口中，EXPNO 及 EXPERIMENT 的选择不同：
1) 实验 1，EXPNO（实验号）：1；EXPERIMENT（实验类型）下拉窗口：C13CPD
10.流程3：Lock （等同于指令lock），在跳出的窗口中选择所用溶剂名，点击“OK”， 等待进程指示‘lock finished’。
11.流程4：Temperature（一般实验跳过此步骤） 12.流程5：Probe Match/Tune（等同于指令atma），在跳出的选项中选择第三项：Automatic tuning/matching
相对强度[rel]，再重新输入指令pps。也可直接点击Topspin 主工具条中的按钮 手动标峰。
8.积分：点击Topspin 主工具条中的按钮 进入积分界面：
¾ 点击积分界面工具条中的按钮 对需要的谱峰进行手动积分；
¾ 将鼠标移至积分不合理的位置，点击右键，在跳出窗口中选择‘Delete’，消除不合理的自动积分；
2.激活谱峰所在模块，按右键在跳出的窗口中选择：
1）Edit：可对积分（是否显现积分线、积分值及它们的大小、颜色、字体等）、谱峰显示（是
否显现及其单位大小、颜色、字体等），化学位移轴等进行变换
2） 1D/2D Edit: 可对现有谱图显示的强度、范围等进行调整
3） 若以后谱图打印经常使用当前布局，可在‘File’中选择‘Save As’，存为一新的布局文件模板，
数据处理
流程11：To Processing，进入数据处理流程（不建议使用）；建议使用手动数据处理过程。
点击Topspin 主工具条中按钮
调整谱峰强弱，按钮
可对谱
图进行局部扩展（也可在谱图上按住左键拖动鼠标进行局部放大），或显示全谱，以方便对谱图数据的处理。
1.键入指令efp进行加窗函数傅立叶变换
Bruker AVANCEⅡ-400 型超导核磁共振波谱仪实验操作规程
实验步骤
1. 用户名：av400，密码：av400；进入计算机系统后点击桌面上 Topspin2.1 快捷键，打开核磁操作软件。 2.将 spinner（蓝色转子）放在样品规上，插入核磁管直至样品规底部（建议样品管中溶液高度在 4cm 左右，
在跳出窗口中直接点击start执行匀场，等待进程指示‘topshim complished’。 注意：1）指令运行前请确认已经锁场成功，注意观察Topspin界面下方的‘Lockdisplay’小窗口数字指标, 或显示器右下方的BSMS键盘上锁场指示灯“LOCK ON-OFF”为绿灯（不闪烁）。
2）匀场结束后，注意观察‘Lockdisplay’小窗口数字指标恢复，指示值超出100%或非常小（～12％）、 进程指示未显示topshim completed，或者有锁场失败的警示时，则需重新锁场（即重复流程3）。 15.流程8：Acquisition pars（等同于指令ased），若样品浓度较稀，须较长时间累加则将参数“NS”设为一较 大值；若要采集较大的谱宽则将参数“SW” 设为一较大值。 16.流程9：Prosol Pars（等同于指令getprosol），调出探头的标准脉冲参数，这一步很关键，决定了实验 完成的有效性。 17.流程10：Receiver Gain（等同于指令rga），在跳出的选项中选择第二项：Determing RG value automatically，等待进程指示‘rga finished’。 注意：若确认所测样品浓度很稀，而rga 指令运行后所设RG 值较小（如几十，或几百），可直接设RG 为 一较大值（如碳谱C13CPD，最大可设至2050）。 18.流程11：go（等同于指令zg）开始采样。 19.采样过程中若需实时监测当前采样效果，可在命令行键入以下3个指令：（1）tr, 等待进程显示“zg：stored NS＝…….”信息后，再依次输入以下指令（2） efp，（3）apk。 20.如果已得到满意的谱图，可以点击Topspin 主工具条中的按钮 或用指令 halt 提前停止实验；或者也 可等采样完成自然结束。待采样状态小窗口中出现“no acquisition running”信息，确认采样已结束，进行下 一步操作。 21.若用同一样品做下一实验，转到步骤8，过程中跳过步骤10，即流程3：Lock；步骤11，即流程4：temperature； 步骤13，流程6：Sample Rotation；步骤14，流程7：shim。 22.若更换样品进行下一个实验，转到步骤2。 23.全部实验均已结束，顺序执行以下命令取出样品：（1）键入指令 ro off，停止探头中样品的旋转；（2） 关闭 BSMS 键盘上锁场指示灯“LOCK ON-OFF”；（3）键入指令 ej，将压缩空气送上来的样品取出；（4） 键入指令 ij，关闭压缩空气闸门；（5）将 spinner 取出放回操作台上，样品带走。
¾ 标定积分值：在选定积分段处点击鼠标右键选择“Carblication”，在跳出窗口中输入欲设的积分值；
¾ 点击按钮 对上面的操作结果存储并退出；点击按钮 放弃上面的操作结果存储并退出。
谱图打印
点击Topspin 主工具条中的按钮
，在跳出的窗口中有三种选择：
¾ 第一项“Print active window”（等同于指令 prnt）：打印当前激活窗口所显示谱图（所见即所得）
“Temperature”、“Probe Match/Tune”、 “Sample Rotation”和“Shim”这 5 个流程）； 一般 DEPT 实验 时间均为常规 13C NMR 的 1/3-1/4 即可。
数据可用 LeapFTP 软件（打开桌面上 LeapFTP 快捷图标，点击 FTP 服务器－MyServers－av400）传 输到核磁共振实验室服务器上；数据下载地址：IP：210.34.14.142；Account： av400；Password：av400. 注意：正常情况下管理人员一周清理一次数据，请各位用户及时传走数据，需要保留在本服务器上的少量数 据请汇集到一特定目录下并告知管理人员。另外，因 Bruker 谱仪操作软件在 window 操作系统下运行，且使 用公共户头进行测试，用户不得对他人的数据进行任何操作，也请各个用户注意自己的数据安全。
2.键入指令apk自动相位校正
3.若相位仍不佳，可点击Topspin 主工具条中的按钮 进入手动相位校正界面：
1） 用鼠标左键点击“0”按钮并按住拖动鼠标，校正红色光标线所在位置的谱峰相位；
2） 用鼠标左键点击“1”按钮并按住拖动鼠标，校正其余谱峰的相位；
3） 点击按钮 对上面的操作结果存储并退出；点击按钮 放弃上面的操作结果存储并退出。
约 0.55ml）；若溶液高度过低则使液柱沿样品管外黑色标记对称分布（即液柱中心与黑色标记横线重合）。 注意：1）核磁管底部不得超过样品规底部，否则核磁管进入探头后会碰到线圈，核磁管破裂会污染探头， 造成严重事故。
2）溶液太少不利于自动匀场，易影响最后谱图质量； 3）另外每次所配样品溶液高度一致，有利于实验快速、高质量完成。 3.观察界面下方的采样状态小窗口，确认没有实验正在进行。 4.键入指令ro off，停止探头中原有样品的旋转。 5.键入指令ej 弹出磁体中的原来样品（弹出速度较慢，须稍等片刻），然后将装好在spinner 中的样品放入 探头中；若原来磁体内并无样品，应在压缩空气量最强时再放入该待测样。 6.键入指令ij，压缩空气自动将样品送入探头。 注意：观测命令输入行下的进程指示，当显示所输指令执行进程结束后方可输入下一指令。 7.以一维实验为例，以下步骤可在主工具条中选择“Spectrometer- Data Acquisition Flowchart”打开数据采集 流程图。初期可按流程图一步一步进行操作，熟习后可在命令输入行（topspin界面下方）输入指令操作。 8.流程1： New Experiment（等同于指令new），在跳出的窗口中依此填入： ¾ NAME：实验名（如样品名，编号等） ¾ EXPNO：实验号（只能是正整数，且在同一实验名下不存在，否则将冲掉原来数据） ¾ PROCNO：处理号（只能是正整数，且在同一实验名下不存在，否则将冲掉原来数据，同一数据可以以 不同方式处理） ¾ DIR：存盘目录（D 盘，不用改动） ¾ USER：用户名（管理人员已建立，一般为课题组长姓名） ¾ SOLVENT：下拉窗口中选择所用溶剂（注意选择正确的溶剂名称，以免后续实验出错） ¾ EXPERIMENT：下拉窗口中选择实验类型： 氢谱选 PROTON256；碳谱选 C13CPD；磷谱：不去耦选 P31，去耦选 P31CPD ¾ TITLE：实验说明文档（最终在谱图上显示的说明性文字） ¾ 点击 OK，生成新的实验文件夹。 注意：若需调用与以前实验相同的参数设置，则先调出以前的数据（在左边的目录窗口中找到d:/data 下 user/name/expno/procno，双击鼠标左键），输入指令“new”，EXPERIMENT 项选择：use current params， 但上述NAME，EXPNO 等其他参数仍须手动填入。 9.流程2：Frequency Routing（等同于指令edasp），在跳出窗口中依次选择 default、 save，在命令键入 行键入指令ii 初始化，等待进程指示‘ii finished’。 注意：若调用以前的实验参数进行同类实验，此步可跳过。