血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析

血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的
结果分析
目的调查本院住院患者梅毒血清学试验TRUST生物学假阳性率并进行临床分析。

方法通过2016年10月～12月在本院搜集的10161例住院患者临床病例，结合实验室的梅毒血清学试验，分析TRUST生物学假阳性的发生是否与性别、年龄、疾病等因素相关，并进行统计学分析。

结果10161例住院患者TRUST 生物学假阳性率为38（0.37%）；男女患者（0.27% vs0.44%）以及各年龄段患者（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）之间假阳性率均无统计学差异（P ＜0.05）；TRUST假阳性多见于皮肤和皮下组织疾病（2.78%）、血液和造血器官疾病（2.17%）以及肿瘤（0.33%）等患者中，其抗体滴度均较低，不超过1：8。

结论TRUST试验生物学假阳性存在一定的发生率，对于容易出现假阳性的患者，建议与TPPA等梅毒螺旋体抗原血清学试验联合检测。

Abstract：Objective To investigate the clinical significance of TRUST biological false positive rate in the hospitalized patients with syphilis serological test.Methods A total of 10161 hospitalized patients were collected from 2016 October to December in the hospital.With syphilis serological laboratory tests，analysis of the occurrence of TRUST biological false positive age and gender，disease，and other relevant factors，and analyzed statistically.Results 10161 cases of hospitalized patients with TRUST biological false positive rate was 38（0.37%）；male and female patients（0.27% vs0.44%）and the patients of all ages（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）there was no significant difference between the false positive rate（P＜0.05）；TRUST false positive in the skin and subcutaneous tissue diseases（2.78%），disease of blood and hematopoietic tumors（2.17%）and（0.33%）patients，the antibody titers were low，not exceeding 1：8.Conclusion TRUST test biological false positive rate for a certain existence，prone to false positive patients，the suggestion and TPPA such as treponema pallidum antigen serologic test combined detection.
Key words：Syphilis；TRUST；Biological false-positive
梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋體感染人体而发生的常见性传播疾病，已经问世数百年了，目前在世界范围均有分布，是严重的性传播疾病之一；可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等[1-3]。

梅毒血清学试验为确诊梅毒病例所必需的实验室检查项目，目前常用的梅毒血清学试验包括非梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗原血清学试验.中山大学孙逸仙纪念医院对于梅毒的血清学检测采用了甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）结合分析的办法，而相对于耗时的TPPA，TRUST具有操作简单、快速和成本低等特点，更适于大批量血样本的筛选，是目前临床实验最为快速简便的检测手段。

TRUST试验是用于筛选梅毒病人的非特异性试验，并非确证试验，它的原理是用正常牛心肌的心磷脂作为抗原，测定患者血中的抗心磷脂抗体，是一种凝集反应。

除在梅毒的继发期，灵敏度可高达95%～100%外，在梅毒早期、晚期及
隐性期灵敏度仅有80%，据相关文献报道患者感染或患有某些自身免疫性疾病时，容易使TRUST实验结果假阳性，且假阳性率可达1%～2%[4]。

本研究通过对本院2016年10月～12月住院患者10161例临床资料的搜集，结合本实验室的梅毒血清学试验，分析出现TRUST假阳性结果的生物学影响因素，并进行统计学分析，以此帮助临床医生合理选用梅毒的实验室检查以及正确分析检测结果。

1资料与方法
1.1一般资料
2016年10月～12月在中山大学孙逸仙纪念同时做过梅毒血清学试验TRUST和TTPA的住院患者10161例，其中男性4006例，年龄6～82岁，中位年龄45岁；女性6155例，年龄12～78岁，中位年龄48岁。

本研究经中山大学孙逸仙纪念医院伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法
非梅毒螺旋体抗原血清学试验采用梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂（TRUST），梅毒螺旋体特异性抗原血清学试验采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。

所有患者血清标本常规检测TRUST和TPPA，初筛阳性者即稀释血清复查，并得到相应抗体滴度。

TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司生产，TPPA试剂为日本富士株式会社产品。

上述检测试剂均在有效期内使用。

1.3 TRUST生物学假阳性的诊断标准
由梅毒螺旋体以外的其他生物性致病因子或其他疾病因素引起的梅毒血清反应素试验阳性，称为生物学假阳性（biological false positive，BFP）反应。

在本研究中，TPPA检测梅毒特异性抗体滴度>1∶80即判断为阳性结果，故TRUST 生物学假阳性的诊断标准为：排除技术性假阳性，TPPA结果≤1∶80，但TRUST 为阳性。

TRUST假阳性率为所有未感染者（以TPPA阴性为准）中TRUST阳性的比例。

1.4 统计学方法
运用SPSS17.0软件包进行统计学分析处理，行χ2检验，P＜0.05即为有统计学差异。

2结果
2.1 医院实验室信息管理系统（Laboratory Information Management System，LIS）
通过LIS筛选出同时检测过梅毒血清学试验TRUST和TPPA的住院患者10161例，其中TRUST生物学假阳性病例数为38例，即假阳性率为0.37%，见
图1。

2.2 TRUST假阳性的发生与性别的相关性
在TRUST生物学假阳性病例中，男性为11例，假阳性率为0.27%，女性27例，假阳性率为0.44%。

经χ2检验，男女之间TRUST生物学假阳性率无统计学差异，见表1。

2.3 TRUST假阳性的发生与年龄的相关性
在各年龄段患者中，TRUST生物学假阳性的发生率较高的年龄段为19～35岁和≥60岁区间，假阳性率分别为0.60%、0.43%，但χ2检验分析，各年龄段之间假阳性率并无统计学差异（P>0.05），见表2。

2.4 国际疾病分类标准10
将10161例患者的临床诊断按照国际疾病分类标准10（International Classification of Diseases 10，ICD10）进行分类，见表3。

从表3中可以看出，TRUST生物学假阳性可见于以下几种疾病：皮肤和皮下组织疾病（2.78%）、血液和造血器官疾病以及某些免疫机能的异常疾病（2.17%）、眼和附器疾病（0.73%）、循环系统疾病（0.65%）、消化系统疾病（0.36%）、肿瘤（0.33%）、泌尿生殖系统疾病（0.24%）、肌肉骨骼系统和结缔组织疾病（0.19%）以及妊娠、分娩和产褥期（0.14%）。

经χ2检验分析，各组之间假阳性率存在统计学差异（P＜0.001）。

2.5 TRUST生物学假阳性病例的抗体滴度分布
在38例TRUST生物学假阳性病例中，有50%患者梅毒非特异性抗体滴度为原液阳性，其余均未超过1∶8，见表4。

3讨论
梅毒血清学试验分两类，一类是非特异性试验，包括RPR、VDRL、USR 和TRUST。

由于采用的是非密螺旋体抗原（即正常牛心脂质）测定患者血清中的反应素，而某些肿瘤或自身免疫病等常见疾病也可以令患者血清出现一定数量的反应素，故该类非特异性实验中可出现一定比例的生物学假阳性[5]。

另一类是特异性试验，包括TP-ELISA，TPHA，TPPA，FTA-ABS及TP-WB，其采用Nichols株螺旋体或纯化的、基因重组的梅毒螺旋体抗原测定血清中的特异性抗体[6]。

特异性实验检测准确率可达99%，而TPPA作为特异性螺旋体试验，极少发生生物学假阳性反应，因此可作为诊断梅毒螺旋体感染的“金标准”。

在本研究中，我們依据本实验室开展的TPPA检测结果并结合患者病史和症状作为判断TRUST是否为生物学假阳性的标准。

本组结果中，男女患者以及各年龄段的患者之间TRUST生物学假阳性率均无统计学差异，与部分文献中提到女性、老年人假阳性率稍高的结论不符[4-5，7]，这可能是由于中山大学孙逸仙纪念医院的妇产科在本地区有一定知名度，就诊患者以中青年女性相对较多。

对假阳性病例的TRUST滴度分析，可以发现其非特异性抗体滴度以原液阳性为主（50%），最高滴度为1：8，这与既往文献报道的结果有一致性[8]，再次验证了TRUST生物学假阳性病例其抗体滴度一般不超过1：8。

将本组10161例数据按照国际疾病分类标准10分类后，发现本组38例假阳性病例，主要分布于八大类疾病中：皮肤和皮下组织疾病（2.78%）、血液和造血器官疾病以及某些免疫机能的异常疾病（2.17%）、眼和附器疾病（0.73%）、循环系统疾病（0.65%）、消化系统疾病（0.36%）、肿瘤（0.33%）、泌尿生殖系统疾病（0.24%）、肌肉骨骼系统和结缔组织疾病（0.19%）以及妊娠、分娩和产褥期（0.14%），各组之间假阳性率有统计学差异。

Fan Liu等研究同样指出，梅毒非特异性抗体试验假阳性可见于妊娠、分娩和产褥期（5.37%）、血液和造血器官疾病以及某些免疫机能的异常疾病（4.81%）、肌肉骨骼系统和结缔组织疾病（1.82%）、眼和附器疾病（1.00%）和皮肤和皮下组织疾病（0.56%）等[4]。

在本研究中皮肤和皮下组织疾病均为系统性红斑狼疮患者，有9例，这可能是由于自身免疫性疾病患者体内的自身抗体容易与心磷脂结合，引起假阳性结果。

冯文莉等通过Logistic多因素统计分析也提示风湿免疫系统疾病是引起梅毒生物学假阳性的重要因素之一[9]。

在我们的探索性试验中，并未发现红斑狼疮患者血清中抗核小体抗体、抗核抗体、抗双链DNA的水平与TRUST抗体滴度的高低有明显的相关性，这也可能与本研究中SLE假阳性病例数本身过少有关，我们将在今后的试验中不断改进和验证。

此外，在假阳性病例中，肿瘤患者为13例（0.33%），类似结果在以往文献报道中已屡见不鲜，如在冯文莉等研究中发现恶性肿瘤血清标本出现假阳性反应者55例，假阳性率为0.4%（55/13000）[9]，与本研究的结果基本一致。

怀疑患者血清中存在肿瘤相关抗原，可与心磷脂或者卵磷脂非特异性结合。

其余疾病，如老年性白内障以及循环系统疾病（出血、原发性高血压、冠心病）由于多为老年人，可能是由于患者生理状态的改变，而非由于疾病本身引起的假阳性。

同样由生理状态改变引起的假阳性也可见于妊娠妇女中，这在本研究中也得到了体现。

此外，张津萍等检测10546份血清标本中，发现15例RPR假阳性标本，其中也有2例为孕妇[10]。

本次回顾性研究结果表明，TRUST试验生物学假阳性存在一定的发生率，可见于多种疾病，故临床医生在选用梅毒血清学试验时，应考虑其优缺点，对于容易出现假阳性的病例，需多选用其他实验室方法加以确证和跟踪疾病的发展。

此外，TRUST常在梅毒螺旋体感染后4w才出现阳性。

因此初次TRUST检测为阴性的就诊者应根据其暴露时间进行必要的随访和复查。

TRUST假阳性有一定的发生率，虽然其发生率较低，但由于梅毒诊断需十分慎重，临床医生在进行梅毒的诊断时，需结合TPPA等确证试验，以及患者的病史和临床表现，以避免TRUST假阳性引起的误诊误治，给患者及其家属带来精神和社会压力。

参考文献：
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[10] 张津萍，王千秋，龚匡隆，等.血清标本10546份非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性结果分析[J].中国皮肤性病学杂志，2010，24（7）：638-639.。