茶叶提取物抗菌效果的研究

备 注 有抑制作用
金
黄
1
30
3+
色 葡
015
22
3+
有抑制作用
萄
012
无明显界限
3+
球 菌
对照
无
1
枯
1
28
3+
草
015
20
3+
有抑制作用
杆
012
无明显界限
3+
菌
对照
无
1
3 “: + ”表示抑制阳性 ,有抑菌效果 “; - ”无抑制作用 “, 3 + ”表示三个平行板均有抑制作用 。
菌悬液浓度 :大肠杆菌 210 ×107 个 ml ,金黄色葡萄球菌 115 ×108 个 ml ,枯草杆菌 115 ×108 个 ml 。
(下转第 76 页)
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山 东 轻 工 业 学 院 学 报 第 14 卷
表 5 酵母菌的定量测定
茶种类
花 茶
绿 茶
红 茶
茶多酚浓度 ( %) (1)
014
012
014
012
014
012
菌悬液浓度 (个/ ml) (2) 619 ×107
617 ×107
611 ×107
718 ×107
613 ×107
619 ×107
注 (1) :该浓度为液体培养基中浓度 (2) :培养前菌悬液浓度 314 ×106 ml ,对照培养后 815 ×107 个 ml 。
第1期
刘秀河等 :茶叶提取物抗菌效果的研究
61
通过实验得知 :对茶多酚提取率影响最大的因素为提取时间 ,温度次之 ,茶水比最小 。较
优提取条件为时间 20 分钟 , 温度 90 ℃, 茶水比 1 : 50 , 提取率达 21160 % , 茶多酚回收率达
87117 %。综合因素考虑 ,可采用提取温度 80 ℃,茶水比 1 :40 ,时间 20 分钟 。
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山 东 轻 工 业 学 院 学 报 第 14 卷
分别采用不同浓度的茶叶提取物对酵母菌 2399 、黑曲霉进行定性平板测试 ,其结果见表
4。
表 4 茶叶提取物对酵母菌 、霉菌的抑制作用
菌浓度 (个 ml)
茶多酚浓度 ( %)
1
015
012
本文对花茶 、绿茶 、红茶中抗菌成分提取条件进行了探讨 ,然后通过定性 、定量测定不同浓 度的茶提取液对细菌 、霉菌和酵母菌的抑制作用 。
1 实验材料与方法
111 材料 11111 主要原料
花茶 :茉莉 、市售等外级 绿茶 :西湖龙井 、市售等外级 红茶 :铁观音 、市售等外级 11112 菌种 :大肠杆菌 、枯草杆菌 、金黄色葡萄球菌 、酵母菌 2399 、黑曲霉均由山东轻工业学院 食工系微生物实验室提供 。 11113 培养基及其配制 :采用普通的细菌 、酵母菌 、霉菌培养基及配制方法 。 11114 化学药品 :略 ,均为分析纯 。 112 实验仪器 721 分光光度计
摘要 : 本文对茶叶提取工艺进行了研究 ,茶多酚提取率达 80 %以上 ;探讨了茶叶提取物对各种菌的抑
制效果 ,其中茶多酚对大肠杆菌 ,金黄色葡萄球菌 、枯草杆菌三种致病菌有明显的抑制作用 ,而对酵母菌 、霉菌 无明显抑制作用 。
关键词 : 茶叶 ;茶多酚 ;提取率 ;抗菌作用 中图法分类号 :TS201 文献标识码 :A 文章编号 :1004 - 4280 (2000) 01 - 0059 - 04
本实验采用的三种菌 ,有球菌也有杆菌 ,既有革兰氏阳性菌 ,又有革兰氏阴性菌 ,均为致病 菌 。实验结果表明 :茶多酚对三种菌都具有强烈的抑制作用 ,抑制效果为 :金黄色葡萄球菌 > 枯草杆菌 > 大肠杆菌 ;抑制强度随茶多酚浓度的增加而升高 (抑菌圈直径越大) 。 21212 不同茶叶提取物的抑菌效果
茶叶中的成分有蛋白质 (主要清蛋白) 、维生素 、矿物质 、茶多酚 、茶嘌呤碱 、茶多糖等 。其 中茶嘌呤碱具有兴奋 、松驰平滑肌 、助消化作用 ;茶多糖具有防辐射 、抗凝血 、抗血栓 、降血糖及 增强机体免疫功能 ;茶多酚具有抗氧化 、抗癌 、抗菌 、杀菌作用 。
茶多酚又名茶单宁 、茶鞣质 、是茶叶中一类以儿茶素为主体的多酚类化合物 ,是茶叶中酚 类及衍生物的总称 ,也是茶叶水溶液提取物的主要成分 ,其含量随品种变化差异较大 ,一般在 15 %～25 %。
从表 3 可以看出 :不同茶叶相同浓度具有大体相同的抑菌效果 ,与茶叶的种类关系不大 。 21213 对霉菌 、酵母菌抑制作用的研究
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对照
酵母菌 2399
318 ×106 318 ×105 318 ×104
3-
3-
3-
3-
3-
3-
3-
3-
3-
黑曲霉
610 ×106
3-
3-
3-
3-
实验结果表明 :茶叶提取物中茶多酚浓度低于 1 % ,对酵母菌和霉菌均无明显的抑制作 用。 21214 液体培养定量测试对酵母菌的抑制作用
采用不同浓度的茶多酚 ,按照 2131312 规定步骤对酵母菌的抑制作用进行定量测试 ,其结 果见表 5 。
第 14 卷第 1 期 2000 年 3 月
山 东 轻 工 业 学 院 学 报 JOURNAL OF SHANDONG INSTITUTE OF LIGHT INDUSTRY
Vol . 14 No. 1 Mar. 2000
茶叶提取物抗菌效果的研究
刘秀河 ,赵祥忠
( 山东轻工业学院食品工程系 ,济南 250100 )
添加不同浓度茶多酚的菌悬液经 30～32 ℃恒温培养 48 小时后 ,酵母菌数与对照组在同一 数量以上 ,差别不大 ,证明无明显抑制作用 ,这与 21213 结果相等 。
3 结论
311 本文探讨了茶多酚的最佳提取条件 :茶叶经一次水 80 ℃恒温浸提 20 分钟 ,茶水比 1 :40 , 可使茶多酚提取率达 80 %以上 。 312 茶叶中茶多酚对 3 种致病菌 :大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、枯草杆菌有明显的抑制作用 , 而对酵母菌 、霉菌无明显抑制作用 。因实验条件有限 ,其抑制机理未做进一步探讨 。 313 茶多酚是各类茶叶中均含有的水溶性天然浸出物 ,对人体无毒 、无副作用及具安全性 ,是 一种良好的天然食品添加剂 。
不同茶叶提取物 ,以金黄色葡萄球菌为对象 ,其抑菌效果见表 3
表 3 不同茶叶提取物的抑菌效果
茶叶种类
茶多酚浓度 ( %)
抑菌圈直径 3 (mm)
平行实验结果
绿 茶
1
015
花 茶
1
015
红 茶
1
015
30
3+
22
3+
30
3+
20
3+
28
3+
20
3+
3 菌悬液初始浓度为 215 ×107 个 ml 。
回流抽提 1 小时 ,虽能全部提取茶多酚 ,但其他可溶性物质也随之浸提出来 ,对茶多酚的分离
较为困难 。本文采用温和条件 ,最大限度提取茶多酚 。
单因素实验得知 :茶水比 、提取温度及时间对茶多酚提取率均有影响 ,本文选用 Lq (34) 正 交试验确定最佳提取条件 (表略) 。
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参考文献 :
[1 ] 王凤芳等 1 茶叶中天然抗氧化剂提取工艺的研究[J ]1 食品工业 ,1995 ,3 :16～17. [2 ] 肖靖萍等 1 松针抑菌作用的研究[J ]1 食品科学 ,1994 ,2 :52～54. [3 ] 严鸿德等 1 茶叶深加工技术[M]1 北京 :中国轻工业出版社 ,1998. 92～101.
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山 东 轻 工 业 学 院 学 报 第 14 卷
蒸汽消毒器 : YXQG01 型 显微镜 :XSP —16A 型 电热恒温水浴锅 : HHS11 —4 型 113 实验方法 11311 茶叶中茶多酚的提取 称取一定量茶叶 ,加入到一定体积水中 ,恒温水浴加热 ,隔 5 分钟搅动一次 ,提取一定时间 后 ,过 200 目筛 ,测定体积及吸光度 ,计算结果 。 11312 茶多酚含量的测定 按 GB8313 —87 规定的方法进行 。 11313 抑菌效果测试 1131311 固体平皿定性测试 取 1 ml 配制好的菌悬液均匀涂布在制备好的平板培养基上 ;将提取液按一定浓度定量 (10μl) 滴加培养皿培养基表面 ,每种菌 、每个浓度做三个平行板 ,并做一对照板 (不加茶提取 物) 。大肠杆菌 、枯草杆菌 、金黄色葡萄球菌在 35～37 ℃的恒温条件下培养 24 小时 ,霉菌 、酵母 菌培养 48 小时 ,取出后与对照板比较 ,定性测试抑菌作用 。 1131312 液体培养定量测试 调整活化菌浓度 106～107 个 ml 范围内 ,取菌悬液 011 ml 加入到 2 ml 已配制好液体培养 基中摇匀 ,再加入不同浓度茶多酚溶液 1 ml ;做三个平行试样 ,并做一对照样 (往其中加 1 ml 无菌生理盐水) ,恒温培养 48 小时 ,取出计数 ,并与对照样做比较 ,定量测试抑菌效果 。
收稿日期 :1999 - 07 - 02 作者简介 :刘秀河 (1965 - ) ,男 ,山东省蓬莱人 ,山东轻工业学院副教授 ,大学本科 ,从事食品加工 、饮料研究 。
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2 结果与讨论
211 提高茶多酚提取率的研究 21111 不同茶叶中茶多酚含量的测定
按 GB8313 —87 规定的方法对花茶 、绿茶 、红茶三种样品进行了茶多酚含量的测定 ,其结果 见表 1 。
表 1 不同茶叶中茶多酚含量
种 类 花茶 绿茶 红茶
试样重 (g) 310191 219859 219745
A method to judge the existence of implicit function
ZONG Cheng - jiang
( Education College of Liaocheng ,Shandong Liaocheng 252000 )
Abstract This paper illustrates a method to judge the existence of implicit function X = Q ( y) when dual equation F ( x , y) = 0 , Fy ( xo , yo) ≠0 but Fx ( xo , yo) = 0 are given.
Key Words implicit function ;equation in two unknowns ;discriminance
(上接第 62 页)
On the effectiveness of bacteria resistance of extractives from tea
L IU Xiu2he , ZHAO Xiang2zhong
wenku.baidu.com
212 抑菌效果的研究
21211 对细菌抑制作用测试
按 1131311 规定步骤进行操作 ,实验结果见表 2 。
表 2 茶多酚对细菌抑制作用
供试菌株
大 肠 杆 菌
茶多酚浓度 ( %) 1 015 012 对照
抑菌圈大小 (mm) 25 16
无明显界限 无
平行实验结果 3
3+ 3+ 2+ 1-
1
干物质含量 ( %) 93110 92113 92171
吸光度 A 01314 01348 01228
茶多酚含量 ( %) 21186 24178 16118
从表 1 可以看出 :茶多酚含量随品种的不同差异较大 ,其中绿茶含量最高 、花茶次之 、红茶
最低 。
21112 最佳提取条件选择 根据 GB8305 —87 ,茶水浸出物测定中采用沸水浸提 45 分钟 ,国际标准 ISO IS74 —80 加水