常用的灭菌方法

常用的灭菌方法

采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称为灭菌。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求，采用不同的方法，如培养基灭菌一般采用湿热灭菌，空气则采用过滤除菌。

1、化学试剂灭菌

包括气体熏蒸法，是利用环氧乙烷或甲醛等杀灭微生物。最常用试剂灭菌方法为消毒剂喷洒法，常见的消毒剂有异丙醇（75%）、乙醇（75%）、戍二醛、新洁尔灭等。我在日常生产工作中，洁净室的墙面、天花板、门、窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等表面都定期用乙醇、新洁尔灭等消毒剂喷洒。

2、射线灭菌

主要有放射线灭菌法和紫外线灭菌法，如从放射源产生γ射线进行照射，本办法主要用于玻璃制品、磁制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品与纤维制品等耐受放射线照射的物品；还可利用照射紫外线杀灭微生物，主要用于玻璃制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品和纤维制品等，还可用于设施、设备、房间等。我们公司每一间生产间都安有紫外灯，每次生产前会辐照半个小时以上，同时会释放臭氧，效果很好。

3、干热灭菌

包含烘箱内热空气灭菌法和火焰灼烧法，可把金属器械或洗净的

玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧是一种最彻底的干热灭菌法，就像我们公司（杭州睿凯干细胞生物科技有限公司）产品质检时，虽然所用的的工具（如镊子）、玻璃器皿等都经湿热灭菌，但是无菌操作时仍将其在酒精灯上灼烧，然后再使用。

4、湿热灭菌

煮沸法：煮沸100℃，5分钟，但只能杀死一般细菌的繁殖体；

高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。

对于那些无法通过过滤方法除菌的粘稠液体，此法是不二的选择，我们公司生产的三维细胞培养水凝胶是一种固液两相可自由切换的产品，液体状态时较粘稠，所以无法用滤膜过滤，所以采用的是高压灭菌锅121℃，20min的方法进行灭菌，另外向大家推荐我们公司这种带自动烘干功能的灭菌锅，耗材、玻璃器皿等可灭菌后直接烘干，非常方便。

5、过滤除菌

有些需要灭菌的材料不能受热，例如许多维生素溶液。因此，许多液体可以用过滤法来灭菌。过滤法不是将微生物杀死，而是把它们排除出去。滤膜一般由醋酸纤维素、硝酸纤维素、多聚碳酸酯、聚偏氟乙烯等合成纤维材料制成，滤膜的孔径一般为0.22微米，主要用

于气体、水、含有可溶性、不稳定物质的培养基、试验液体和液状医药品等。我们公司在生产2D全合成细胞培养基底膜和3D细胞培养水凝胶时都是经过0.22um滤膜两次过滤后才进行灌装的。并且，洁净生产车间采用的是高效空气过滤装置对空气进行除菌过滤，确保安全的生产环境。

以上几种方法为较常用的灭菌方法，大家可根据产品的性质选择最可靠、最方便的灭菌方法。